培养副鸡嗜血杆菌用干粉培养基的优化研究

优化副鸡嗜血杆菌干粉培养基配方。通过单因素平行对比配方中碳源、血清、辅酶等营养物质,确定各个因素对副鸡嗜血杆菌生长的影响。研究筛选出了适宜副鸡嗜血杆菌生长的干粉培养基配方：鸡肉蛋白胨、酪胨、多价胨、酵母粉、葡萄糖等,再添加7.5%鸡血清和10 mg/L辅酶Ⅰ,于37℃、5%CO₂恒温培养箱中160 r/min振荡培养14～16 h。优化后的配方更适于培养副鸡嗜血杆菌,为副鸡嗜血杆菌疫苗大规模生产提供了参考依据。     

副猪嗜血杆菌培养条件的筛选及对豚鼠的致病性试验

为筛选副猪嗜血杆菌最适培养基,将副猪嗜血杆菌血清5型标准株（Nagasaki菌株）接种固体培养基TSA、PPLO琼脂、巧克力琼脂、胰月示蛋白胨琼脂和液体培养基TSB、PPLO液体、胰月示蛋白胨和马丁肉汤,通过观察菌落大小和平板计数,筛选出副猪嗜血杆菌生长最适培养基。将Nagasaki菌株接种TSB培养基,取10h～16h不同培养阶段的培养物,腹腔接种豚鼠,确定副猪嗜血杆菌感染实验动物的最佳培养阶段。结果表明,TSA和TSB是副猪嗜血杆菌的最适培养基,副猪嗜血杆菌血清5型接种于TSB中,在37℃、200r／min培养10h～13h,菌数可达到10^9cfu／mL。     

鸡传染性鼻炎及其防制

鸡传染性鼻炎（infectiouscoryza，简称IC）是由副鸡嗜血杆菌引起的一种急性或亚急性呼吸道传染病，感染鸡主要以鼻粘膜发炎，流鼻涕，眼睑水肿和打喷为特征。本病首次报道于1920年，但直到1931年才分离到病原。近10多年，随着集约化养鸡业的蓬勃发展，本病已成为鸡的主要传染病之一，并越来越受到人们的关注。病原特性及血清型本病的病原为革兰氏阴性、两极浓染的副鸡嗜血杆菌，该菌的生长要求较为严格，需要V因子（烟酌胺腺瞟吟Th核音酸，NAD），故分离培养基需用新鲜血琼脂，或巧克力琼脂或鸡血清培养基。副鸡嗜血杆菌对环境的抵抗力…     

猪副嗜血杆菌病——革拉泽氏病

革拉泽氏病（Glasser’s disease）由猪副嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPs）所引起,是一种危害全球养猪业的重要疾病。其在实验室条件下很容易培养,48小时内便可在培养基中长出1mm大小的透明菌落,只须在培养基中添加V因子（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,辅酶1）,无须添加X因子（血红素及其它卟啉类物质）,因此将该菌被称为猪“副”嗜血杆菌（猪嗜血杆菌却要添加V因子和X因子）。     

混合感染中鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从冀南地区某养鸡场患呼吸道疾病的病鸡群采集5份样品（气管和眶下窦分泌物）中，同时分离到鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌两种病原体。通过病原的分离培养、细菌L型检验、生化试验、血清学试验等鉴定，证明分离的鸡毒支原体与国际标准株S6的血清型一致，副鸡嗜血杆菌的血清型为A型，动物试验表明，分离的鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌均具有明显的致病性，说明该病鸡群同时混合感染了鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌。     

用单克隆抗体进行副鸡嗜血杆菌定型

抗副鸡嗜血杆菌血清A和C型株所制备的两个血清型单克隆抗体（MAbs），分别对副鸡嗜血杆菌血清型A、B、C中的各型参考株作HI和dot－blotting试验。一种MAb（E5C12D10）为抗血清型A代表株221，另一种MAb（F2E6）为抗血清型C代表株S1。在两种试验中，不同血清型的MAbs可与对应的血清型中的副鸡嗜血杆菌株血凝（HA）抗原反应，而与血清型B代表株91、147均无反应。故这些MAbs可用于dot－blotting或HI试验进行副鸡嗜血杆菌定型。     

副猪嗜血杆菌血清13型分离鉴定及其培养特性研究

上海市某猪场中分离出1株13型副猪嗜血杆菌,动物试验鉴定其为强毒株。为探索血清13型副猪嗜血杆菌的培养特性,以期提高其分离率并优化后续发酵条件,本研究对13型副猪嗜血杆菌生长所需要的血清和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的浓度进行了筛选,测定了在最适培养条件下的生长曲线。结果表明,副猪嗜血杆菌在TSB培养基中的最适培养条件为5%新生牛血清,10μg/mL NAD;在最适培养条件下生长曲线显示,OD600值为0.2～0.6时为13型副猪嗜血杆菌的对数生长期,在培养14 h时活菌数达到最大值,而OD600值在22 h时达到最大,且在增值过程中产生大量的酸。     

鸡传染性鼻炎(IC)的诊断与防治

<正> 鸡传染性鼻炎(IC)是由副鸡嗜血杆菌(HP)引起鸡的一种急性呼吸道疾病。该菌为革兰氏阴性的多型性小杆菌。上世纪30年代研究认为,IC 病原体的生长需要 X因子(血红素晶)和 V 因子(烟酰胺腺嘌啉二核苷酸),所以被划为嗜血杆菌,直到1962年研究发现所有 IC 病原体的生长都只需要 V 因子,并命名为副鸡嗜血杆菌。众所周知,IC 病原体含有 A、B、C 三个血清型,各型之间无交叉反应。近年来在北美、南美和非洲相继发现副鸡嗜血杆菌的 B 型变异株,此变异株与传统的血清型之间少有交叉反应。鸡传染性鼻炎(IC)可感染各种年龄的鸡,自然条件下多见于育成鸡和成年鸡,尤以产蛋鸡居多。本病一年四季均可发生,但以秋冬及早春季节多发。传播方式以呼吸     

副猪嗜血杆菌培养基筛选与小鼠半数致死量测定

试验通过对适合副猪嗜血杆菌生长的4种固体培养基（巧克力琼脂、1%NAD巧克力琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂和1%NAD胰蛋白胨大豆琼脂）筛选,采用分光光度计即时测定细菌数量,并以Bliss-LD50软件计算副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）对昆明小鼠的半数致死量。结果HPS在0.1%NAD的巧克力琼脂培养基生长最佳,以16～18h对数生长期细菌OD600值计算活菌量较准,HPS对昆明小鼠LD50为3.4291×109。     

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针

副鸡嗜血杆菌种特异性的核酸探针陈小玲Ｊ．Ｋ，Ｍｉｆｌｉｎ张培君Ｐ．Ｊ．Ｂｌｅｃｋａｌｌ（北京市农业科学院畜牧兽医研究所北京，１０００８１）鸡传染性鼻炎（ＩＣ）是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的呼吸道传染病。其危害主要在于影响鸡的生长和使鸡产蛋率下降。诊...     

鸡新城疫(ND)疫病防控浅析

引发鸡产蛋下降的传染性因子主要有三大类：一是病毒（NDV、AIV、IBV、疱疹病毒、腺病毒、类传支冠状病毒）;二是细菌（大肠杆菌、支原体、沙门氏菌、巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌）;三是寄生虫（蛔虫、绦虫）.现就鸡新城疫的发生特点,发展趋势与防控作一浅析.     

副猪嗜血杆菌生长曲线的测定

正副猪嗜血杆菌是多发性浆膜炎、关节炎的病原菌,在过去很长一段时间内把它称为猪嗜血杆菌。副猪嗜血杆菌为杆状菌,具有多形性,从杆状到纤细丝状不等,革兰氏染色阴性。副猪嗜血杆菌对营养要求严格,生长时需要血液中存在生长因子,人工培养时必须供给含有V因子的新鲜血液才能生长。本试验主要对副猪嗜血杆菌安阳分离株进行了生长曲线的     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与培养基筛选

从陕西省关中地区患多发性浆膜炎和关节炎猪场的32个样品中分离到6株细菌,并对其进行了形态观察、菌落纯培养、生化特性鉴定、PCR检测等,最终确定分离菌株均为副猪嗜血杆菌.该结果表明,关中地区存在副猪嗜血杆菌病流行;对副猪嗜血杆菌分离株最适培养基进行了筛选,将分离菌株分别接种于LB、TSA、巧克力琼脂等固体培养基上,接种12 h后通过观察菌落大小,筛选出最适合副猪嗜血杆菌生长的固体培养基TSA(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清)和固体培养基巧克力琼脂(加0.8 g/L NAD).同时,将副猪嗜血杆菌分离菌株接种于LB、TSB等液体培养基中,培养至16h后,每隔4h分别取样,通过与麦氏比浊管对比确定菌液中的菌数,筛选出最佳液体培养基为TSB(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清).     

鸡传染性鼻炎的诊治报告

鸡传染性鼻炎的诊治报告杨世广孙树喜（青岛肉类食品集团蛋鸡场２６６１１３）王玉东朱士盛（农业部动物检疫所２６６０３２）鸡传染性鼻炎（ＩＣ）是由副鸡嗜血杆菌引起的一种鸡的急性呼吸道病。本病可在育成鸡群和产蛋鸡群中发生，具有传染性并主要侵害鸡的上呼吸道。本...     

副猪嗜血杆菌高密度发酵工艺研究

旨在建立副猪嗜血杆菌高密度发酵工艺。通过对TSB、BH1、LB培养基进行比较，选择TSB培养基进行优化，利用优化后的培养基对副猪嗜血杆菌在10L发酵罐中进行高密度发酵培养。结果表明，血清4型JS株的活菌数达到2．5×10^10CFU／mL，血清5型ZJ株的活菌数达到2．5×10^10CFU／mL，且通过批次补料与流加相结合的工艺使关键成本血清的使用量降低了1／2。在1000L发酵规模上进行连续3批的发酵试验．经验证该工艺可用于副猪嗜血杆菌灭活疫苗抗原的规模化生产。对3批发酵抗原利用替代动物豚鼠进行动物实验，结果显示抗原均合格。研究结果为国内副猪嗜血杆菌流行菌株血清4型和5型二价灭活疫苗的规模化生产提供了理论依据。     

利用阻断ELISA对山东省鸡传染性鼻炎的血清学调查

鸡传染性鼻炎（InfectionCoryza）是由副鸡嗜血杆菌引起的鸡的上呼吸道传染病,该病自八十年代开始在我国出现,近几年来,该病的发生日趋严重,经常反复发生或与其它细菌病、病毒病混合感染,引起发病鸡产蛋量下降、生长受阻甚至死亡,给养禽业造成了很大的经济损失。副鸡嗜血杆菌通常分为A、B、C二个血清型「”,在我国能引起传染性鼻炎的为血清A型和C型,而主要为A型。B型菌株在我国还没有发现,但在国外已证实了B型菌株的存在并有发病的报道”’。鉴于不同血清型之间的交叉保护很弱．为了更好地防治鸡传染性鼻炎,我们在山东省内进…     

猪传染性胸膜肺炎(一)

猪传染性胸膜肺炎即放线杆菌胸膜肺炎（ＡｃｔｉｎｏｂａｃｃｉｌｌｕｓＰｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ,ＡＰＰ）,是一种发现较晚但危害严重的猪传染病。１　病原ＡＰＰ病原被称为溶血性感冒杆菌、副感冒嗜血杆菌、副溶血性嗜血杆菌、胸膜肺炎嗜血杆菌等,至１９８３年被正式定名为胸膜肺炎放线杆菌。胸膜肺炎放线杆菌是革兰氏阴性菌,呈球杆状、杆状或丝状,单个排列。该菌表现多形性和两极染色,无芽胞,无运动性,属兼性厌氧菌。该菌常在ＣＯ２存在的大气中生长,其发育还需Ｘ因子及Ｖ因子,在巧克力琼脂或血琼脂培养基上生长良好。…     

副猪嗜血杆菌病的诊治

正副猪嗜血杆菌病又称多发性纤维素性浆膜炎和关节炎。临床上以体温升高、关节肿胀、呼吸困难、多发性浆膜炎、关节炎和高死亡率为特征,严重危害仔猪和青年猪的健康。1病原副猪嗜血杆菌属革兰氏阴性短小杆菌,形态多变,有15个以上血清型,其中血清型5、4、13最为常见(占70%以上)。该菌生长时严格需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD或V因子),不需要X因子(血红素或其他卟啉类物质),在血液培养基和巧克力培养基上     

副鸡嗜血杆菌PCR检测方法的建立

参照GenBank中已发表的副鸡嗜血杆菌血凝素（HA）基因设计合成了一对引物,预计扩增片段大小约为412bp。利用这对引物,通过对PCR反应体系和反应条件的优化,建立了针对副鸡嗜血杆菌的PCR检测方法。结果表明,该方法敏感性较高,最低可检出1．7×10^4CFU／mL的副鸡嗜血杆菌,对副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌在相同反应条件下未扩增出任何片段,说明该方法具有较好的特异性。     

锦州地区鸡传染性鼻炎的流行病学调查

对发生过鸡传染性鼻炎的8个鸡场,从病史调查、现场调查、临床检查、病理剖检、细菌分离鉴定、血清定型、动物致病性试验、药物敏感试验以及防治等方面进行了较为详细的研究。结果表明,锦州地区鸡传染性鼻炎的发病率为5.2%～40.7%,死亡率约为1%～3%。分离获得8株副鸡嗜血杆菌,血清型主要为A型,个别为C型,未发现B型。不同时间分离的副鸡嗜血杆菌对抗菌药物的敏感性不同。