副猪嗜血杆菌培养条件的筛选及对豚鼠的致病性试验

为筛选副猪嗜血杆菌最适培养基,将副猪嗜血杆菌血清5型标准株（Nagasaki菌株）接种固体培养基TSA、PPLO琼脂、巧克力琼脂、胰月示蛋白胨琼脂和液体培养基TSB、PPLO液体、胰月示蛋白胨和马丁肉汤,通过观察菌落大小和平板计数,筛选出副猪嗜血杆菌生长最适培养基。将Nagasaki菌株接种TSB培养基,取10h～16h不同培养阶段的培养物,腹腔接种豚鼠,确定副猪嗜血杆菌感染实验动物的最佳培养阶段。结果表明,TSA和TSB是副猪嗜血杆菌的最适培养基,副猪嗜血杆菌血清5型接种于TSB中,在37℃、200r／min培养10h～13h,菌数可达到10^9cfu／mL。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与培养基筛选

从陕西省关中地区患多发性浆膜炎和关节炎猪场的32个样品中分离到6株细菌,并对其进行了形态观察、菌落纯培养、生化特性鉴定、PCR检测等,最终确定分离菌株均为副猪嗜血杆菌.该结果表明,关中地区存在副猪嗜血杆菌病流行;对副猪嗜血杆菌分离株最适培养基进行了筛选,将分离菌株分别接种于LB、TSA、巧克力琼脂等固体培养基上,接种12 h后通过观察菌落大小,筛选出最适合副猪嗜血杆菌生长的固体培养基TSA(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清)和固体培养基巧克力琼脂(加0.8 g/L NAD).同时,将副猪嗜血杆菌分离菌株接种于LB、TSB等液体培养基中,培养至16h后,每隔4h分别取样,通过与麦氏比浊管对比确定菌液中的菌数,筛选出最佳液体培养基为TSB(加0.1 g/L NAD和50 mL/L的犊牛血清).     

副猪嗜血杆菌培养条件优化

本试验对副猪嗜血杆菌的基础培养基成分、血清浓度、培养基pH值、保存条件进行优化筛选,旨在得出副猪嗜血杆菌的适宜培养保存条件,为副猪嗜血杆菌的发酵生产提供可靠的依据。通过试验得出,副猪嗜血杆菌的最佳培养保存条件：培养基起始pH值为7.3～7.5,成分为胰蛋白胨1.5%、大豆蛋白胨0.5%、NaCl 0.5%、酸水解酪蛋白0.5%、葡萄糖0.2%、5%新生牛血清和NAD 0.01%,用10%脱脂奶粉冻干保存在-20℃。     

甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌的体内外抑制作用

探讨甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌体内外生长的影响。将副猪嗜血杆菌于分别含10、20、50、100、200μg/mL甘草查尔酮A的TSA液体培养基中培养,采用分光光度法分析副猪嗜血杆菌生长和生物被膜形成的变化;以1、10、100mg/kg甘草查尔酮A经口灌胃小鼠,分别在3d、5d和7d称重,并计算脏器指数,Hiseq高通量测序技术分析肠道菌群等生长性能,Bliss法测定副猪嗜血杆菌对小鼠半数致死量(LD50);检测甘草查尔酮A对小鼠清除0.01×LD50副猪嗜血杆菌感染和抵抗100×LD50副猪嗜血杆菌感染的影响。结果表明,各浓度甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌的生长速率和生物被膜形成的影响差异均无显著差异。所有剂量组小鼠给予甘草查尔酮A处理后,一般临床症状、体重和脏器指数无统计学意义。灌喂甘草查尔酮A有增加小鼠肠道菌群丰富度的趋势,但降低拟杆菌门丰度而增加厚壁菌门丰度。小鼠清除0.01×LD50副猪嗜血杆菌感染的能力呈剂量依赖性,而100×LD50的副猪嗜血杆菌感染小鼠后随着甘草查尔酮A浓度增加可呈剂量依赖延迟小鼠死亡时间。表明甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌体外生长无显著的抑制作用,同时对小鼠生长性能亦无明显影响,但可增加肠道菌群丰富度而提高小鼠抵抗副猪嗜血杆菌感染的能力。     

副猪嗜血杆菌病诊治

<正>副猪嗜血杆菌病又称猪格拉瑟氏病,是对由副猪嗜血杆菌(HPS)引起的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等的统称。1病原副猪嗜血杆菌最早在1910年被报道,但到1922年才首次分离得到。1969年研究报道HPS在只存在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(V因子),而无正铁血红素(X因子)的条件下也可以生长,因此副猪嗜血杆菌的名字才得以使用。副猪嗜血杆菌的血清型复杂多样,采用KRG琼脂扩散试验可     

一起规模化猪场副猪嗜血杆菌病的诊断与防治

从发病情况、临床症状、病理变化等3个方面对龙岩市某猪场送检的副猪嗜血杆菌疑似病例进行分析,通过细菌分离、培养、生化鉴定等试验,表明该分离菌在含5%胎牛血清和0.0005%NAD的TSA培养基生长最好,具有NAD生长依赖试验阳性、尿素酶试验阴性的特征,确诊为感染了副猪嗜血杆菌。药敏试验结果：副猪嗜血杆菌对强力霉素、环丙沙星、头孢噻呋钠、氟苯尼考、泰乐菌素比较敏感。通过药敏结果指导临床用药,采用综合防控措施,疫情得到有效控制。     

猪传染性胸膜肺炎(一)

猪传染性胸膜肺炎即放线杆菌胸膜肺炎（ＡｃｔｉｎｏｂａｃｃｉｌｌｕｓＰｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ,ＡＰＰ）,是一种发现较晚但危害严重的猪传染病。１　病原ＡＰＰ病原被称为溶血性感冒杆菌、副感冒嗜血杆菌、副溶血性嗜血杆菌、胸膜肺炎嗜血杆菌等,至１９８３年被正式定名为胸膜肺炎放线杆菌。胸膜肺炎放线杆菌是革兰氏阴性菌,呈球杆状、杆状或丝状,单个排列。该菌表现多形性和两极染色,无芽胞,无运动性,属兼性厌氧菌。该菌常在ＣＯ２存在的大气中生长,其发育还需Ｘ因子及Ｖ因子,在巧克力琼脂或血琼脂培养基上生长良好。…     

甘草多糖影响副猪嗜血杆菌生长的体内外实验研究

为研究甘草多糖对副猪嗜血杆菌在体内外生长的影响,本研究首先利用平板计数法和分光光度法分别分析甘草多糖在体外对副猪嗜血杆菌生长速度和生物被膜形成的影响。然后将100 LD_50副猪嗜血杆菌感染小鼠,观察甘草多糖对小鼠的保护力。最后将0.01 LD_50副猪嗜血杆菌感染小鼠,迫杀小鼠后检测副猪嗜血杆菌在脾脏、肝脏、肺脏和心血的分布情况。结果显示,在低浓度时(10μg/m L、20μg/m L和50μg/m L),甘草多糖随着浓度的增加对副猪嗜血杆菌血清型12(HS1075)的生长速度和生物被膜形成呈逐渐促进趋势,但高浓度时(100μg/m L和200μg/m L),生长速度与50μg/m L相比并无明显区别,但仍显著高于空白对照组,而对副猪嗜血杆菌生物被膜的形成量与空白对照组相比差异无统计学意义。副猪嗜血杆菌口服感染小鼠的LD_50为2.00×10~7 cfu。高剂量(100 mg/kg)甘草多糖对于100 LD_50副猪嗜血杆菌感染可提供60%的保护力。0.01 LD_50副猪嗜血杆菌攻毒小鼠,随着甘草多糖浓度增加小鼠脾脏、肝脏、肺脏和心血的细菌量逐渐减少。结果表明,在体内甘草多糖可以提高小鼠抵抗副猪嗜血杆菌的感染,对甘草多糖的临床应用提供一定的参考。     

副猪嗜血杆菌病的诊断与综合防治

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPS）是一种革兰氏阴性、NAD依赖性细菌,自1910年以来就被认为是猪Glasser病的病原体。目前,国内外均有副猪嗜血杆菌危害猪群的报道〔1～3〕。2008年10月5日和2009年5月15日,     

副猪嗜血杆菌病病原菌的分离鉴定

更有效地控制和防治副猪嗜血杆菌病,本试验从山西省晋中市疑似猪嗜血杆菌病感染的一个大型规模化猪场采集病料,选择改良巧克力琼脂培养基,从9头有关节炎、胸膜炎、腹膜炎等症状的疑似副猪嗜血杆菌病的临床病例中分离到5株疑似副猪嗜血杆菌菌株。生长特性观察发现分离株为多形性、革兰氏阴性小杆菌,生长缓慢(24～48h)。菌落呈光滑露珠样,不溶血。葡萄糖、树胶醛糖、乳糖、甘露醇、蜜三糖发酵和脲酶实验呈阴性,过氧化氢酶实验阳性,该结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌。     

基于神经网络和遗传算法的鸭疫里默杆菌培养基优化

实验室培养鸭疫里默杆菌常常使用巧克力琼脂、血清酵母肉汤、胰蛋白胨大豆肉汤(TSA)等培养基.比起前两者,TSA平板不使用鲜血、血清等成分.为了优化胰蛋白胨大豆肉汤各组分比例以提高菌体产量,经正交试验设计获得不同比例成分培养基的培养数据,采用神经网络建立模型、遗传算法对其作出评估和优化.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌（HPS）引起猪的以纤维素性浆膜炎、多发性关节炎和脑膜炎为特征的传染病。随着养殖规模的不断扩大和引进国外种猪，副猪嗜血杆菌病在我国猪场的病发率逐年上升。HPS血清型复杂，目前已知15个血清型，但各国各地流行的血清型不尽相同，且各型之问缺乏交叉保护，因此分离HPS地方菌株，了解其流行血清型，对地区预防和控制HPS有着重大的临床意义。由于HPS对培养条件较为苛刻，临床病料分离培养HPS有一定的难度，目前国内分离HPS报道不多，本文对广东地区疑似副猪嗜血杆菌病病料分离并鉴定了3株副猪嗜血杆菌，报道如下。     

副猪嗜血杆菌病的预防与控制

副猪嗜血杆菌病由副猪嗜血杆菌(HPS)引起,是猪饲养过程中常发病之一。该病的发生常常是HPS与其它细菌或病毒协同作用而致,多以咳嗽、呼吸困难、消瘦、关节炎造成跛行和高热为主要特征。副猪嗜血杆菌病常以继发或并发感染形式出现,使     

仔猪副猪嗜血杆菌病的诊断和防治

<正>副猪嗜血杆菌病又称格拉泽氏病(Glasser's disease),是由副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)引起的猪多发性浆膜炎、关节炎的细菌传染性疾病。副猪嗜血杆菌是一种内源性继发感染的     

副猪嗜血杆菌（HPs）病的病原分离、鉴定

为了对副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis）病的病原进行分离和鉴定,本试验从山西省晋中市疑似HPs感染的一个大型规模化猪场采集病料,进行HPs分离,获得1株疑似分离株。通过以下方法对病原菌进行了研究：①HPs培养和保存技术。选择改良巧克力琼脂培养基,从100头有关节炎、胸膜炎、腹膜炎等症状的疑似副猪嗜血杆菌病的临床病例中分离到1个疑似HPs株。②HPs生物学特性。生长特性观察发现分离株JZ为多形性、革兰氏阴性小杆菌,生长缓慢（24～48h）。菌落呈光滑露珠样,不溶血。卫星现象及纸片法证明其具有严格的V因子依赖性,对X因子没有依赖性。葡萄糖、树胶醛糖、乳糖、甘露醇、蜜三糖发酵和脲酶实验呈阴性,过氧化氢酶实验阳性。该结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性。     

副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

为了解副猪嗜血杆菌病在贵州对猪群的危害和流行规律、进一步开展副猪嗜血杆菌病的防治研究提供参考依据,特进行副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用研究。根据副猪嗜血杆菌（HPS）16S rRNA基因序列设计1对引物,通过优化组合试验,对贵州省分离的HPS进行PCR扩增,扩增出长为650bp的目的基因片段,而大肠埃希氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、葡萄球菌等扩增结果为阴性。采用该方法对贵州发病猪群中350头疑似病例进行PCR检测,检出率为8％～49％。该方法检测副猪嗜血杆菌敏感性高、特异性好,可用于副猪嗜血杆菌的快速诊断。     

猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠的免疫效力分析

本研究旨在开发一种用于防制猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的新型二联基因工程疫苗,并对其免疫效应进行评价.选择猪链球菌2型蛋白溶血素SLY、HP0197和副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15和HPS06257 4种蛋白,重组表达并纯化,添加一定比例的佐剂制成含有不同组分的亚单位疫苗.研究表明该二联亚单位疫苗及各单苗能够引起小鼠良好的体液免疫,并能保护机体分别抵抗致死剂量猪链球菌2型(SS2)和副猪嗜血杆菌(HPS)强毒株的攻击.此外,调理吞噬试验表明疫苗高免血清能够有效杀死细菌,并赋予机体被动抵抗SS2和HPS感染的能力.研究证实制备的猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠具备良好的免疫保护效力.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒与副猪嗜血杆菌混合感染的诊治

通过对某猪场出现的疫情进行流行病学调查、临床症状、病理剖检、细菌分离培养鉴定及荧光定量PCR诊断,确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与副猪嗜血杆菌(HPS)混合感染。现场采集疑似副猪嗜血杆菌病的典型病料,用TSA培养基分离细菌,经菌落形态观察、镜检、卫星现象及PCR检测,确定分离菌为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明该分离株对先锋Ⅵ、阿莫西林、壮观霉素、庆大霉素均敏感。采用PRRSV核酸检测试剂盒对病料进行检测结果为阳性。综合判定该场为PRRSV和HPS混合感染。     

副猪嗜血杆菌病的血清学调查

副猪嗜血杆菌（HPS）是副猪嗜血杆菌病的病原体,引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等。随着我国集约化猪场的发展,副猪嗜血杆菌病的发生逐渐呈现上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。国外对HPS流行病学调查表明,临床病猪的分离率高达20%左右,毒力比较强的血清型,如血清5型、4型和13型等流行为主。     

几种鸡传染性鼻炎培养基的比较

培养基是人工制备的营养物质,是细菌维持与繁殖的基础。培养副鸡嗜血杆菌不仅需要蛋白胨、糖类、无机盐等基础的氮源和碳源外,还需要健康动物血清、酵母浸汁及辅酶等特殊营养物质。这是因为健康动物血清中含有生长繁殖所必须的各种蛋白质和多种游离氨基酸及适于细菌生长繁殖的Ｖ因子和Ｘ因子,是促进细菌代谢的重要物质。另外,培养基中加入酵母可补充某些维生素和生长因子,这些都是副鸡嗜血杆菌生长繁殖所必须的营养物质。鸡传染性鼻炎（ＩＣ）可引起鸡的上呼吸道感染。该病的病原菌为副鸡嗜血杆菌（ＨＰＧ）,是一种在宿主体外极易失活的脆弱…