MTS法检测番鸭呼肠孤病毒对鸭胚成纤维细胞活力的影响

采用MTS法检测接种不同致病力番鸭呼肠孤病毒12h、24h、36h、48h、72h、96h后对番鸭鸭胚成纤维细胞(MDEF)活力的影响。根据细胞病变情况和活力状态确定细胞发生变化的拐点,初步探讨番鸭呼肠孤病毒感染诱导细胞凋亡的发生和细胞活力的特征变化,进一步了解番鸭呼肠孤病毒与宿主之间的相互关系,为研究番鸭呼肠孤病毒感染和致病机理提供时间科学依据。结果表明,接毒后36h,细胞活力达到最高,高致病力YB毒株作用于MDEF,细胞活力在48h大幅下降并出现明显细胞凋亡;低致病力YJL毒株作用于MDEF,则在72h可出现明显细胞凋亡。     

一株鸭源基因IX型新城疫病毒广西分离株的生物学特性及全基因序列分析

为全面了解广西分离株GX19／2011的生物学和遗传特性,对分离株的鸡胚平均致死时间（MDT）、1日龄鸡脑内接种致病指数（ICPI）、6周龄鸡胚静脉接种致病指数（IVPI）和对鸭的致病力进行测定,并对其全基因遗传特性进行研究研究。结果显示：该分离株的ELD50为10-9.48/0．1mL、MDT为51．4h、ICPI为1．80、IVPI为2．82。使用该毒株分别感染35日龄和50日龄的鸭,发病率均为100％,死亡率分别为100％,70％。该毒株全长为15192bp,与F48E8和GD09-2等参考毒株的亲缘关系较近,均属于基因IX型。该分离株F蛋白裂解位点的氨基酸序列为11R-R-Q-R-R-F117,具有强毒株的典型特征。生物学特性和遗传进化分析结果都表明该毒株为速发型强毒株,同时对鸭具有较强的致病力。     

不同H9N2亚型禽流感病毒株致病力的比较试验

参照NDV评价毒力的方法对1998—2008年间收集的25株H9N2AIV的致病性进行了比较研究。结果显示,25株H9N2AIV不同毒株间致病性有较大差异,大致分为3类：致病性偏强、致病性中等和致病性较弱。从中选出致病力有差异的8个毒株进行了1日龄雏鸡脑内接种指数（ICPI）、6周龄鸡静脉接种指数（IVPI）以及8周龄SPF鸡人工感染排毒试验,结果证明大部分毒株ICPI和IVPI基本上为0,排毒散毒的高峰期在攻毒后第5天到第6天。在25个毒株中,3#和12#表现出了比较高的致病性,不仅其EID50值最高（分别为10-8.8/0.2mL和10-8.8/0.2mL）、ELD50值最高（分别为10-7.9/0.2mL和10-8.7/0.2mL）,而且鸡胚平均死亡时间也最短（分别为66.5,69h）。3#、12#还出现了1日龄雏鸡脑内接种指数（分别为0.238,0.437）和6周鸡静脉内接种指数（分别为0.34,0.51）。在8周龄SPF鸡人工感染排毒试验中3#和12#毒株的排毒量大,排毒时间也明显长于其他毒株（第2～9天）。以上试验结果表明我国H9N2AIV不同毒株致病性有明显差异,呈多态性,致病性偏强的毒株造成鸡群较高的死亡率。     

鸽Ⅰ型副粘病毒的分离与鉴定

从病死鸽脾脏分离到 1毒株 ,经电镜观察和HI试验、抗体检测 ,确定为鸽的Ⅰ型副粘病毒 ,生物学试验表明 ,该病毒属于强毒株 ,其致病指数分别为 :MDT =90h,ICPI=1 2 7,IVPI=1 30。将分离株经滴鼻接种于 1 5日龄非免疫肉乳鸽和 4周龄非免疫雏鸡 ,肉乳鸽发病后出现与自然发病鸽相同的症状和病变 ,但不引起鸡发病     

杂交鲟类志贺邻单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在对鲟体内分离菌进行鉴定、致病力探究和耐药性分析。本研究从濒死鲟体内分离到1株细菌（NZ-2017）,通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA基因分析及系统进化树构建等方法对分离菌种属进行确定,并采用纸片扩散法进行药敏试验,PCR方法检测耐药基因,人工感染小鼠试验确定分离菌的致病力。结果显示,NZ-2017为革兰氏阴性杆菌,其16S rRNA基因经测序及BLAST比对,显示其与类志贺邻单胞菌的同源性达99.70%,结合生理生化鉴定结果确定分离菌为类志贺邻单胞菌。药敏试验结果显示,分离菌对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、多西环素4种药物敏感,对卡那霉素、阿莫西林、泰乐菌素、复方新诺明4种药物耐药;5种耐药基因检测结果显示,该菌携带3种耐药基因：Sul1、Sul2和Intl1,与药敏表型相符。人工感染试验结果显示,该菌对小鼠有致病力。本研究对贵州地区鲟发病流行的病因作出了准确诊断,为该地区细菌性鱼病预防和合理用药提供依据。     

鸡新城疫强毒株的分离及其人工感染试验

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鸡群中分离到一株病毒，经HA、HI试验及知清中和接种鸡胚试验，确定为新城疫病毒。参照国际上规定的新城疫病毒力判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚是小致死量平均死亡时间（MDT）、1日龄鸡脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为44h、1．74和2．39。表明该分离株具有与新城疫病毒发型相类似的毒力，属强毒力毒株。用该分离株对16日龄的鸡、鹅、鸭分别进行了人工试验感染，其发病率均为100％，而死亡率为分别为40％－80％、40％－60％和0。     

杂交鲟类志贺邻单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在对鲟体内分离菌进行鉴定、致病力探究和耐药性分析。本研究从濒死鲟体内分离到1株细菌(NZ-2017),通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16SrRNA基因分析及系统进化树构建等方法对分离菌种属进行确定,并采用纸片扩散法进行药敏试验,PCR方法检测耐药基因,人工感染小鼠试验确定分离菌的致病力。结果显示,NZ-2017为革兰氏阴性杆菌,其16SrRNA基因经测序及BLAST比对,显示其与类志贺邻单胞菌的同源性达99.70%,结合生理生化鉴定结果确定分离菌为类志贺邻单胞菌。药敏试验结果显示,分离菌对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、多西环素4种药物敏感,对卡那霉素、阿莫西林、泰乐菌素、复方新诺明4种药物耐药;5种耐药基因检测结果显示,该菌携带3种耐药基因:Sul1、Sul2和Intl1,与药敏表型相符。人工感染试验结果显示,该菌对小鼠有致病力。本研究对贵州地区鲟发病流行的病因作出了准确诊断,为该地区细菌性鱼病预防和合理用药提供依据。     

蛇代谢综合征继发感染细菌的分离鉴定及致病性试验

近年来,广西人工饲养的蛇发生代谢障碍综合征后,病死率较高,为查清原因,对临床接诊的18例蛇代谢障碍综合征病例的心、肝、脾等脏器病料进行细菌分离鉴定,并测定分离菌对小鼠和蛇的致病力。结果从18例病蛇的不同组织器官中分离到10株细菌,PCR结合生化试验方法,鉴定出4种细菌,分别为粪肠球菌、克氏葡萄球菌、缓慢葡萄球菌和弗格森氏大肠埃希菌,并对其进行种系发育关系分析。所鉴定的4种细菌对昆明小鼠和蛇的致病力差异较大,克氏葡萄球菌和弗格森氏大肠埃希菌对昆明小鼠有较强致病性,粪肠球菌和缓慢葡萄球菌对昆明小鼠致病力较弱;克氏葡萄球菌对眼镜蛇有致病性,其余菌对王锦蛇、眼镜蛇、滑鼠蛇均无致病性。     

鸡大肠杆菌病研究Ⅰ．鸡E．Coli人工感染模型的建立及致病力评价

本文对分离自典型大肠杆菌病变和粪便的４５株Ｅ．Ｃｏｌｉ通过４日龄雏鸡人工感染试验建立了大肠杆菌病的人工感染模型，并对菌株的致病性进行评价。结果表明：４日龄雏鸡颈部皮下接种０．２ｍｌ菌液，接种后，前６５ｈ内雏鸡死亡率≥６０％的菌株为强致病力菌株；死亡率＜６０％，或出现典型大肠杆菌病变为中等致病力菌株；试验期不引起雏鸡死亡也无病变者为无致病力大肠杆菌。试验的１３株分离自粪便的苗株，２株为中等致病力，１１株为无致病力；３２株分离自典型病变的菌，９株为强致病力菌，１５株为中等致病力，８株为无致病力。     

雏鸭感染鸭病毒性肝炎后神经系统的动态病理学观察

鸭病毒性肝炎是由 型鸭肝炎病毒所致雏鸭的一种急性传染病。本病发病急、传播快、死亡率高 [1]。1 95 8— 1 962年 ,我国局部地区初次暴发鸭病毒性肝炎 ;1 980年至今 ,鸭病毒性肝炎在我国再次暴发 ,且发病严重 ,流行区域广 ,造成巨大损失 [2 ]。近年来 ,广东省很多地区流行该病 ,给养鸭业带来巨大经济损失 [3 ,4] 。病鸭发病初期食欲不振 ,甚至消失 ,嗜眠。剖检的特征变化主要在肝脏。人工发病在接种后 1 2h,不论强毒株或弱毒株都出现肝瘀血、肿大 ,有些肝表面呈黄褐色 ;接种后 2 4 h肝脏体积增大 ,肝表面有时会有肋骨印状瘀血块 ,有时还会…     

鸡源大肠埃希氏菌部分生物学特性研究

对从天津地区分离到的71株鸡大肠杆菌的部分生物学特性包括致病性、血清型、耐药特性和免疫原性等进行了研究。结果表明其中60株为致病性菌株,占分离菌株的84.5%;60个致病性菌株共定型出45个菌株,分属O1、O2、O5、O6、O20、O45、O53、O74、O75、O78、O88、O89、O92、O107、O111、O145等16个血清型,其中O78、O88、O2、O45、O53和O145为优势血清型,占定型菌株的73.4%;试验菌株具有广泛的耐药性,60个致病性菌株均为多重耐药。免疫原性测定试验结果表明,O2、O78、O88血清型菌株均可对相同血清型菌株提供很好的保护,但3个血清型菌株之间缺乏有效的保护。     

鸡舍空气致病菌分离鉴定及其对消毒剂的敏感性观察

本试验研究金黄色葡萄球菌与大肠杆菌对河北省某地区规模化鸡舍空气的污染情况及其对消毒剂的敏感性。根据细菌分离培养特性、形态学、生化试验、动物试验和玻板凝集试验分离出7株金黄色葡萄球菌、6株致病性大肠杆菌（血清型为O15、O26、O93、O78）。经统计,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌在规模化鸡舍空气中的检出率分别为63.6%、27.27%。应用滤纸片法测定其对消毒剂的敏感性,2种致病菌对消毒剂的敏感性差异较大,这表明规模化鸡舍空气受致病菌的污染程度不同,并且致病菌对消毒剂的敏感性有差异。     

SPF鸡人工感染禽源大肠杆菌、H9亚型禽流感病毒后的体液免疫应答和死亡率分析

SPF鸡经不同顺序、不同时间间隔人工感染MPAIV和E．coli 173株（04）后，对试验鸡的病死率和针对大肠杆菌不同抗原体液免疫应答水平等进行研究。结果表明：各混合感染组试验鸡病死率明显高于单独接种组，且以先接种MPAIV再接种E．coli组死亡率最高；各混合感染组试验鸡针对E．coli OMPs和LPS的抗体水平低于单独感染E．coli组，其中又以先接种MPAIV再接种E．coli组为最低，提示MPAIV和E．coli间存在协同致病作用，这种协同机理可能与因MPAIV的感染导致一定程度的免疫抑制并进而促进了E．coli在体内的定居与繁殖有关。     

实验性鸡大肠杆菌病病理学动态变化

用致病性大肠杆菌O18分离株和／或低致病性禽流感病毒（Mildly pathogenic avian influenza virus ,MPAIV)接种10－12日龄SPF鸡。在接种后1－96h进行临床症状与大体病理变化、组织学观察发现：大肠杆菌接种组、MPAIV接种组和健康接种组除扑杀鸡外未见鸡死亡，MPAIV与大肠杆菌混合接种组除扑杀鸡外死亡率为24％。混合接种组的病变比大肠杆菌接种组出现的时间早，恢复也慢，各脏器的病理变化更严重。MPAIV主要引起各实质器官的坏死，结果表明，大肠杆菌经气管内接种后试验鸡主要表现为呼吸道的炎症反应；MPAVI可使鸡大肠杆菌病严重化。     

实验性鸡大肠杆菌病的超微动态病理变化

10～ 12日龄 SPF鸡 180只 ,随机分为 4组 ,分别气管内注射致病性大肠杆菌 O18分离株 (大肠杆菌接种组 )、低致病性禽流感病毒 (mildly pathogenic avian influenza virus,MPAIV) H9N2株 (MPAIV接种组 )、先接种 MPAIV再接种大肠杆菌 (混合接种组 ) ,并设健康对照组 ,分别于接种后不同时间 ,取气管、肺、气囊、胸腺、法氏囊、脾、肝和肾组织 ,制作超薄切片 ,电镜观察。结果表明 ,MPAIV与大肠杆菌混合接种组比大肠杆菌接种组出现病变的时间早、恢复慢 ;在大肠杆菌接种组 ,接种后 3h气囊上皮和间质细胞中都可见典型的大肠杆菌 ;在混合接种组 ,接种后 3h,气囊间质细胞的吞噬泡中可见多个 MPAIV粒子。由此认为 ,MPAIV可使鸡大肠杆菌病严重化 ,大肠杆菌对 MPAIV的入侵和在鸡体内的复制可能有促进作用。     

肉仔鸡病原大肠杆菌地方分离株的血清型鉴定

从河北的三河、滦南、乐亭、卢龙及昌黎等地 2 9个养鸡场 (户 )分离鉴定了 82株病原大肠杆菌 ,用 54种常见动物病原大肠杆菌单价 O抗血清进行了血清型鉴定。结果 82株分离菌有65株被鉴定出了相应 O血清群 (占鉴定菌株的79.2 6%) ,分属 6种不同血清型 ,其中以 O78和O45两种为优势血清型 (占定型菌株的64.61 %) ,其余 4种 O血清群占定型菌株的 3 5.3 9%,尚有 1 7株未能定型 (占鉴定菌株的 2 0 .74%)     

Interaction with pig ileal explants of Escherichia coli O45 isolates from swine with postweaning diarrhea.

We have previously observed that Escherichia coli O45 isolates from swine postweaning diarrhea (PWD) induced attaching-effacing (A/E) lesions in experimentally inoculated gnotobiotic piglets. In the present work, ileal explant culture has been used as an in vitro model for the study of the development of A/E lesions due to these isolates. The characteristic intimate bacterial attachment and microvilli effacement with cupping and pedestal formation, identical to that observed in gnotobiotic piglets, was demonstrated in pig ileal explants inoculated with O45 E. coli isolates. The initial attachment of bacteria to the enterocytes was observed from 2 to 4 h postinoculation (PI) and full development of A/E lesions was observed within 8 h PI. In this model, we observed that 22 of 25 eaeA-positive O45 isolates induced A/E lesions. However, A/E lesions were not observed for any of 7 eaeA-negative O45 isolates. Thus, we describe a useful in vitro model for the study of A/E capacity of porcine E. coli. Use of this model has enabled us to demonstrate the relatedness of the eaeA gene to A/E capability among porcine O45 E. coli from PWD.     

宁夏部分地区鸡大肠埃希菌的分离与血清型鉴定

为调查宁夏地区鸡大肠杆菌病的流行情况,采集宁夏4个地区的103个规模化鸡场疑似病料151份,通过病原菌分离鉴定及生化试验,鉴定出鸡大肠埃希菌109株,平均分离率为72.19%(109/151);动物试验证实,59株分离菌有致病性,占分离菌54.13%(59/109);对致病性菌株进行血清型鉴定,确定血清型种类13种38株,占致病性菌株64.41%(38/59);优势血清型分别为O15、O18、O78、O88,占定型菌株63.16%(24/38)。     

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验.结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6％.     

陕西省鸡胚源性大肠杆菌的分离鉴定

从陕西关中六个种鸡场的１９８只死胚及出壳弱雏中分离出９８株大肠杆菌,平均分离率为４９．５％。通过小鸡致病力试验,筛选出６３株具有致病力的菌株,占分离菌的６４．３％。生化鉴定表明,这些致病菌均符合大肠埃希氏菌的生化特性。血清型鉴定可确定６种,其中以Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８为主,分别占鉴定菌的４４．４％（２８／６３）、３３．３％（２１／６３）和９．５％（６／６３）,另三种为Ｏ２２、Ｏ７５、Ｏ８９共占８．０％（５／６３）。有３株未定型,占４．８％（３／６３）。用１６种抗生素进行药敏试验,对先锋霉素Ｖ和恩诺沙星高度敏感,对羧苄青霉素、氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、磺胺嘧啶、新霉素、链霉素中度敏感。