非洲猪瘟病原学检测技术研究进展

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪和野猪而引起的一种急性烈性、高度接触性传染病,到目前为止仍未研制出有效疫苗,因此病原的早发现对ASF防控尤为重要。ASFV的病原学检测主要包括活病毒检测、核酸检测和抗原检测。活病毒检测中,病毒分离和红细胞吸附试验均耗时较长,且对实验室要求较高,通常只有被参考实验室采用。病毒核酸检测中,普通PCR和实时荧光定量PCR(qPCR)是OIE推荐的首选诊断方法,其特异性和灵敏度均较高,但操作复杂、成本高;等温扩增技术操作简单、成本低,不需要特殊仪器,检测时间短、携带方便、灵敏度高,适用于屠宰场、养殖场现场检测,但因特异性不高,需要不断更新和改进;微流控芯片法具有样品消耗少、检测速度快、操作简便、便于携带等优点,但检测成本高,需要特定的设备,尚未被广泛使用。抗原检测技术中,荧光抗体检测(FAT)对实验室要求较高,不适合现场检测;夹心ELISA和胶体金免疫试纸条检测快速,操作简单,检测成本低,但敏感性和特异性还需改进。ASF病原学检测技术虽很成熟,但各有不足,所以应根据实际情况结合使用。     

鸭副黏病毒和鸭圆环病毒二重荧光定量PCR检测方法的建立

根据鸭副黏病毒(DPMV)和鸭圆环病毒(DuCV)保守基因序列,设计了2对针对鸭副黏病毒和鸭圆环病毒的特异性引物和2条不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了鸭副黏病毒和鸭圆环病毒的二重荧光定量PCR检测方法。该方法敏感性好,对鸭副黏病毒和鸭圆环病毒的检测敏感性分别达到160和140个拷贝数;该方法特异性强,对鸭肝炎病毒、番鸭细小病毒、鸭瘟病毒和H9型禽流感病毒等病原体的检测全为阴性;应用该方法对118份临床病料进行检测,结果检出鸭副黏病毒和鸭圆环病毒阳性感染率分别为0.85%和8.47%,无混合感染。本试验建立的二重荧光定量PCR具有快速、特异、敏感和重复性好等优点,适用于鸭副黏病毒和鸭圆环病毒的快速诊断和监测。     

柳州市2019与2020两年动物主要疫病免疫抗体检测结果的对比分析

为了柳州市动物养殖的健康发展,比较精准的掌握动物疫病防控情况,较好的制订动物防控实施方案,每年我市都会按照上级农业农村主管部门的要求,由市动物疫控中心实验室对全市县(区)乡覆盖的主要家畜家禽养殖场(企业)和一些农村散养户监测几种主要动物疫病的免疫抗体情况。     

鸭新城疫病毒和鸭圆环病毒二重PCR检测方法的建立

本研究根据GenBank中鸭新城疫病毒(NDV)的F基因和鸭圆环病毒(DuCV)的V1/rep基因的保守序列,各设计一对特异性引物,并对二重PCR的扩增条件进行优化,建立了鸭NDV和DuCV的二重PCR检测方法。对混合样品进行扩增,得到2条大小为493bp(鸭NDV)和218bp(DuCV)的特异性条带,与预扩增片段相符。而对番鸭细小病毒、鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、鸭源小鹅瘟病毒、鸭H9亚型流感病毒、鸭疫里氏杆菌、大肠杆菌、禽多杀性巴氏杆菌等病原检测,结果为阴性。该方法的敏感性试验表明,鸭NDV的核酸最小量为40fg,DuCV为20fg。     

广西柳州市县区及辖区乡镇动物防疫物资管理调查报告

为防止动物防疫物资在使用过程中出现过度浪费和违法违规行为,广西柳州市动物疫病预防控制中心对柳州市5县7城区及其中的23个乡镇水产畜牧兽医站的防疫物资管理情况进行了现场调查和问卷调查。结果表明:畜禽标识、动物疫苗、消毒药等防疫物资均有指定的人员管理,出入库台账、年终盘点制度、防疫物资储存保管等都按照相关文件要求有序开展。但存在会计账只有40%的县区建立,多数乡镇管理人员对防疫物资网上信息管理系统和畜禽标识系统操作不熟悉,少数乡镇兽医站的防疫物资存在入库无双人验收签字和未盖单位公章,季度盘点和年终盘点及台账信息记录不完善,动物疫苗、畜禽标识回收销毁不到位等问题。原因是部分县区由于没有独立的财务部门,而未建立会计账;乡镇人员因轮流值岗、动物防疫物资管理系统复杂等使得防疫物资管理不规范、管理人员对信息管理系统和畜禽标识系统不熟悉、畜禽标识回收销毁不到位。建议统筹和规范化管理动物防疫物资,加强物资系统和畜禽标识系统的培训,完善动物防疫物资报废处置程序和切实加强畜禽标识的回收销毁。     

鸭源新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭圆环病毒三重PCR检测方法的建立

为了建立能同时检测鸭源新城疫病毒(DuNDV)、鸭瘟病毒(DPV)和鸭圆环病毒(DuCV)的方法,根据DuNDV、DPV和DuCV基因的保守序列设计了3对特异性引物,预特异扩增DuNDV片段大小为823 bp,DPV为576 bp和DuCV为338 bp.经过反应条件的优化,建立了DuNDV、DPV和DuCV的三重PCR检测方法.该方法特异性好,对鸭的其他病原检测结果为阴性;敏感性高,DuNDV、DPV和DuCV的核酸最低检出限分别为2.59×103、1.12×103、4.67×102拷贝/μL.对180份病料进行检测,结果DuCV阳性10份,阳性率为5.6％;DuNDV阳性1份,阳性率为0.56％.结果表明,建立的多重PCR方法可以应用于DuNDV、DPV和DuCV的临床检测和流行病学调查.     

奶牛植入电子标识的探索与思考

为保障人们的身体健康,对奶牛进行严格且科学的管理势在必行。利用植入式的电子标识(俗称电子芯片),进行科学的信息化管理,严控奶牛布鲁氏菌病的发生。在奶牛植入电子标识的过程中,应注意:植入部位要统一,保定要做好,正确使用注射器,植入后要护理。     

2021年广西柳州市规模肉鸭养殖场高致病性禽流感监测

为科学评估柳州市规模化养殖环境下肉鸭的高致病性禽流感（H5和H7亚型）免疫抗体水平和疫情发生风险,采用血凝抑制试验（HI）和荧光PCR方法,对2021年全市各县区肉鸭规模养殖场采集血清样品、喉头/泄殖腔棉拭子分别进行抗体和病原检测,并对检测结果进行不同血清型、不同县区、不同季度的统计对比分析。结果显示：H5亚型免疫抗体总合格率为76.48%（3 472/4 540）,平均滴度为5.52log2,H7亚型免疫抗体总合格率为68.00%（3 087/4 540）,平均滴度为4.20log2;经卡方检验,H5亚型免疫抗体总合格率显著高于H7亚型（P＜0.01）。所有病原样品中均未检测到H5和H7亚型高致病性禽流感病毒。禽流感免疫抗体合格率在不同区域间存在一定差异,其中县级地区的免疫抗体总合格率显著高于城区（P＜0.01）。不同季度的禽流感抗体总体合格率依次为第四季度＞第二季度＞第一季度＞第三季度。结果表明：柳州市规模肉鸭养殖场的H5、H7亚型禽流感免疫效果整体良好,发生高致病性禽流感的风险较低;但仍需全年持续加强禽流感免疫监测和风险评估,部分城区应着重做好补免和加强免疫工作,从而构筑有效的免疫屏障,防止禽流感疫情发生,保障养禽业健康发展。     

浅谈兽医实验室生物安全管理的做法和体会

兽医实验室生物安全指在兽医实验室中保护工作人员和相关工作人员不受病原微生物的危害,避免工作过程中造成病原微生物污染或泄露而导致动物疾病流行。如何加强兽医实验室的生物安全管理,是实验室管理者和使用者共同关注的问题。本文结合笔者对本兽医实验室的生物安全管理方法,谈谈多年来对实验室生物安全管理和运行的心得体会及存在的问题。