鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗病毒滴度为１０＾７．３－１０＾８．３ＴＣＩＤ５０／０．０５ｍｌ。疫苗经皮下，肌肉，点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８，１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６，６／６和５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒，其保护数分别为６／６和５／６。疫苗的最小免疫剂量为１０＾５ＴＣＩＤ５０／只，用１     

鸡病毒性关节炎弱毒疫苗的研制

将鸡病毒性关节炎病毒鸡胚毒Ｊ－１株适应于鸡胚细胞和Ｖｅｒｏ细胞，经连续传代，通过４０．５℃、３７℃的交替升降培养温度培养，筛选出１株毒力较弱的克隆株，该克隆株蚀斑大小为２．７－３．１ｍｍ，以１０＾５．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以１０４．７２５－１０＾６．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄 敏感雏鸡胸部肌肉内，对雏鸡无致病性，该克隆株在敏感雏鸡内连传３代，无毒力返强现象。这一结果     

猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验

采用在病毒培养液中加５～１０μｇ／ｍｌ胰酶的培养方法，将猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）ＣＶ＿（７７７）适应于Ｖｅｒｏ细胞，并传４５代．细胞病变规律．经免疫荧光检查阳性，电镜观察可见典型冠状病毒粒子，猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）免疾荧光检查阴性，猪流行性腹泻（ＰＥＤ）血清可抑制细胞病变（ＣＰＥ）．ＰＥＤＶＣＶ＿（７７７）毒株１１、２５、２８、４０及４４代传代毒的毒价分别为１０￣（３．５）、１０￣（５．５）、１０￣（６．５）、１０￣（７．０）和１０￣（７．０）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．３ｍｌ。以１１、２１及２２代的毒１０ｍｌ头口服接种未吃初乳仔猪，可使之典型发病，免疫荧光及电镜观察均呈阳性．分别以２５、２８及３１代毒０．５ｍｌ／头、１ｍｌ／头、２ｍｌ／头口服接种３日龄仔猪１８头．除０．５ｍｌ组有１头反应外，均未发病，攻毒试验的总保护率为８７．５％，对照组１００％发病．以２８代毒制备氢氧化铝灭活苗，后海穴位接种，主动免疫组８５．１９％保护，被动免疫组８５％保护，对照组１００％及９２．３％发病．     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理Ⅱ.T,B细胞功能变化

１日龄健康雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫和免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８天和攻毒后１０天取材检测。结果，感染ＣＩＡＶ雏鸡ＮＤ免疫后，胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于７天和７－１４天比未感染免疫对照鸡明显减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应均于７－１４天明显减弱（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。ｖＮＤＶ攻击后，脾脏和胸腺Ｔ细胞增殖反应均比未感染ＣＩＡＶ     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

对新城疫CS2株与4株疫苗毒株有关性能的比较

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）中等毒力毒株ＣＳ２株、ＮＤⅠ系、Ｒｏｋｉｎ、Ｋｏｍｅｒｏｖ和低毒力ＬａＳｏｔａ株病毒的脑内致病指数（ＩＣＰＩ）、鸡胚的半数感染量（ＥＩＤ５０）等指标进行了测定,结果是ＩＣＰＩ分别为１．２７～１．５２、１．６６～１．７０、１．４６、１．４３和０．２９～０．５;ＥＩＤ５０分别为１０＾７．５、１０＾７．５≥１０＾８．５、１０＾＾７．９和≥１０＾８．５／０．１ｍｌ。用１０倍剂量的ＣＳ２株病毒注射１月龄和１．５月龄ＳＰＥ雏鸡,均安全无不良反应,测定ＣＳ２株病毒保存期,结果在－２０℃保存６年的鸡胚２代（Ｅ２）、鸡胚６代（Ｅ６）、鸡胚１０代（Ｅ１０）毒的ＥＩＤ５０均≥１０＾７．５／０．１ｍｌ。ＮＤＣＳ２株病毒的各项指标均在中等毒力范围内,对鸡胚的半数感染量仍保持原毒（Ⅰ系）的特性,ＩＣＰＩ比原毒有所下     

鸡病毒性关节炎弱毒疫苗的研制Ⅰ．弱毒株的筛选及其对雏鸡的安全性

将鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）鸡胚毒Ｊ─１株适应于鸡胚细胞和Ｖｅｒｏ细胞，经连续传代，通过４０．５℃、３７℃、３２℃的交替升降培养温度培养，筛选出１株毒力较弱的克隆株，该克隆株蚀斑大小为２．７～３．１ｍｍ。以１０５．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以１０４．７２５～１０６．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄敏感雏鸡胸部肌肉内，对雏鸡无致病性。该克隆株在敏感雏鸡内连传３代，无毒力返强现象。这一结果表明，本试验筛选出的ＡＶＡＶ弱毒株对雏鸡具有良好的安全性和遗传稳定性。     

犬瘟热疫苗弱毒的复壮与免疫试验

将一株犬瘟热疫苗株病毒通过Ｖｅｒｏ细胞２０代（ＣＤＶ／Ｒ－２０）后又通过敏感犬的腹腔巨噬细胞，获得一株免疫原性更高的弱毒株（ＣＤＶ／Ｒ－２０／８）。接种同样剂量１０４ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８和ＣＤＶ／Ｒ－２０的犬，产生出血清中和（ＳＮ）抗体价的几何平均数分别为１：５４和１：２６。前者为后者的２倍多。接种１０５ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８能完全保护犬（１０／１０）抵抗ＣＤＶ强毒的攻击，接种１０４ＴＣＩＤ５０的保护９／１０犬，而对照犬５只全部发病，其中４只死亡。犬体内ＳＮ价可持续一年之久。冻干培养物在４和－３０℃中可分别保存９个月和１２个月而效力不减。     

口服鸡新城疫V4株病毒免疫效果研究

经嗉囊接种１０＾８．５ＥＩＤ５０鸡新城疫Ｖ４株病毒，后第４￣８天，能从粪便中分离出病毒。５周龄鸡拌料一次口服１０＾８．５ＥＩＤ５０鸡新城疫Ｖ４株病毒，半年内ＨＩ抗体平均效价为２＾５左右，用１００ＥＩＤ５０鸡新城疫Ｆ系标准强毒攻击，保护率１００％，健康鸡与免疫鸡混养，１４天后可获得免疫鸡同样高的抗体反应。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅱ．T、B细胞功能变化

１日龄健康雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫和免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８天和攻毒后１０天取材检测。结果，感染ＣＩＡＶ雏鸡ＮＤ免疫后，胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于７天和７～１４天比未感染免疫对照鸡明显减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应均于７～１４天明显减弱（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。ｖＮＤＶ攻击后，脾脏和胸腺Ｔ细胞增殖反应均比未感染ＣＩＡＶ的免疫对照鸡显著降低（Ｐ＜０．０１．Ｐ＜０．０５）。上述结果表明，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡中枢和外周免疫器官的细胞免疫应答和体液免疫应答功能均明显降低，并与其分子免疫调节功能降低密切相关。     

鸡新城疫病毒V4株的生物学特性研究

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫，半年内，ＨＩ抗体平均效价为２＾５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０＾８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２，该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。     

对几种血清I型鸡鸡马立克氏病疫苗的比较性评估

本文比较了４种血清Ｉ型马立克氏病（ＭＤ）单价弱毒疫苗其及其与血清ＩＩ型和ＩＩＩ型病毒混合多价疫苗在安全性及效力方面的差异,以０．２ｍｌ的剂量皮下接种１日龄母源抗体阳性的雏鸡。接种后５天,所有的疫苗接种鸡及时对照鸡都用ＭＤ强毒株－Ｍｄ－５或ＲＢ１／Ｂ株攻毒。血清Ｉ型单价疫苗的保护指数由５６至８０以上不等。Ｉ型毒＋ＨＶＴ（ＩＩＩ型）疫苗的保护指数亦有很大的提高。用ＨＶＴ＋ＳＢ－１或ＨＶＴ＋３０１Ｂ／１     

鸡新城疫病毒V_4株的生物学特性研究

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫．半年内，ＨＩ抗体平均效价为２５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２．该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。     

表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护性研究

以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２基因的重组鸡痘病毒ＦＰＶ－ＶＰ２，该病毒在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒，经翅皮下５×１０５ＰＦＵ／羽免疫１日龄ＳＰＦ鸡，免疫后４周以１００ＬＤ５０／羽ＩＢＤＶ超强毒株Ｇ株攻毒，获得了５／６的保护，但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩。实验结果证明了ＶＰ２是ＩＢＤＶ的宿主保护性抗原，提示Ｔ细胞介导的免疫可能在ＩＢＤＶ的免疫中起着较为重要的作用。本研究为ＩＢＤＶ重组病毒疫苗研制进行了有益探索。     

鸡传染性法氏囊病毒血清Ⅰ型和亚型混合弱毒疫苗研究初报

由美国ＩＢＤ血清Ⅰ型商品弱毒疫苗Ｂｕｒｓａ－Ｖａｃ，Ｕｎｉｖａｘ ＢＤ和中国广东的亚型弱毒疫苗ＣＮ９０３，ＣＳ９０４混合组成的弱毒疫苗，免疫剂量为１０００ＴＣＩＤ５０，对１２日龄无ＩＢＤ血清中和抗体或≤１：８的试验鸡，免疫试验结果表明，免疫后７天，能够产生９０－１００％的保护作用。ＩＢＤ混和弱毒疫苗保存在３４－３７℃１周，４－１０℃４周和－２５℃１２个月，疫苗的免疫保护率仍达１００％。对５个品种的     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免？…

以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２基因的重组鸡痘病毒ＦＰＶ－ＶＰ２,该病毒性在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒,经翅皮下５×１０＾５ＰＦＵ／羽免疫１日龄ＳＰＦ鸡,免疫后４周以１００ＬＤ５０／羽ＩＢＤＶ超强毒株Ｇ株攻毒,获得了５／６的保护,但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩,实验结果证明了ＶＰ２是ＩＢＤＶ的宿主保护性抗原,提示Ｔ细胞介导的免疫可能在ＩＢＤＶ     

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒的冻干试验

鸭病毒性肝炎Ａ６６鸡胚弱毒冻干疫苗的毒价为１０７．２４ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ，冻干前同批鸡胚毒毒价为１０７．４０ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ。冻干过程中损失的毒价在０．５个滴度之内。本冻干苗的免疫期与鸡胚混合毒相同，对雏鸡至少为４５天。冻干苗的有效保存期为：－２０℃，２年；０～４℃，８个月，２０～３０℃，１０天     

BWEL-SPF鸡群对鸡传染性法氏囊病强毒的敏感性试验

用三种不同鸡传染性法氏囊病强毒株,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群１－１０个家系３周龄鸡进行敏感性试验,观察比较鸡群各家系对不同敏感性,测定不同毒株的毒价。广西强毒株（ＩＢＤＶ－ＧＸ株）〈ＬＤ５０为１０＾５．０／０．２ｍｌ;湖南强毒株,ＬＤ５０为１０＾５．２／０．２ｍｌ;吉林强毒株（ＩＢＤＶ－ＪＬ株）,ＬＤ５０为１０＾５．５／０．２ｍｍｌ,以１００ＬＤ５０攻毒剂量,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡１￣１０家系的致死率为     

新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究

新城疫病毒长春株（ＮＤＶ ＣＣ株）经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株,以ＮＤＶ ＣＣ毒株制成弱毒疫苗,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式,分别免疫７日龄雏鸡,免疫鸡未出现不良反应。免疫后７ｄＨＩ效价为２＾５以上,６０ｄ后均能维持较高的ＨＩ值,免疫后１４ｄ用ＮＤＶ强毒攻击,其保护率可达到１００％（１０／１０）。