高效液相色谱法检测乳制品中7种添加剂

建立乳制品中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、甲基香兰素和乙基香兰素同时检测的高效液相色谱分析方法.样品经沉淀剂沉淀蛋白过滤后使用C18反相色谱柱分离,以甲醇-乙酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,紫外检测器检测,检测波长230 nm下7种物质在35 min之内完全分离,在选定的条件下相关系数均大于0.999 0,线性范围1～100 mg/kg,回收率为80.0％～105.7％.     

高效液相色谱法同时测定乌骨鸡肌肉中的黑色素与肌苷酸

研究建立了同时测定乌骨鸡肌肉中黑色素与肌苷酸含量的高效液相色谱分析方法.鸡肉样品经酶解后,分离肌苷酸待测溶液与纯化黑色素粗品;黑色素粗品再在碱性条件下经过氧化氢氧化为2,3,5-三-羧酸吡咯(PTCA).肌苷酸待测溶液溶解PTCA成供试样品,在高效液相色谱仪中通过C18柱分离,紫外检测器检测波长270 nm,甲醇-磷酸/三乙胺缓冲液作为流动相等度洗脱.PTCA定量后以乌贼黑色素为对照品换算黑色素含量,外标法定量.结果表明:PTCA回收率为68.22％～75.21％,RSD值为6.83％～6.92％(n=6);肌苷酸回收率为79.26％ ～88.26％,RSD值为1.92％～2.35％(n=6).黑色素、肌苷酸的检测限分别为10μg/g、100 μg/g.该方法灵敏、可靠,少量乌骨鸡样本即可实现同时、快速检测黑色素与肌苷酸含量.     

高效液相色谱检测肉鸡肌肉磷腺苷方法研究

建立了高效液相色谱测定AA肉鸡肌肉组织中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)含量的方法.样品经前处理后,用Ecosil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离;流动相为甲醇:50 mmol/L KH2PO4缓冲液(pH6.5) =9∶91,在流速0.7 mL/min,柱温30℃,进样量为10 μL的条件下,于紫外检测波长254 nm处检测.结果表明∶ATP、ADP和AMP质量浓度与峰面积呈良好线性关系,线性相关系数R2分别为0.999 8、0.999 6和0.999 4;ATP、ADP和AMP在高、低质量浓度组的平均加标回收率在93.3％～101.9％范围内.     

冷蒿内源激素测定最佳方案初探

探索了采用高效液相色谱法(HPLC)测定冷蒿内源激素——赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、生长素(IAA)的方法,结果表明,以C18柱为分离柱,以甲醇∶1.8％冰乙酸∶水=30∶50∶20为流动相,在柱温35℃,波长254nm,流速1.0ml/min的检测条件下能快速、准确的测定冷蒿内源激素.     

薄层色谱与高效液相色谱结合测定苜蓿皂苷技术的研究

应用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)技术相结合,建立苜蓿皂苷的分离检测方法以甲醇为溶剂,超声波辅助萃取苜蓿皂苷;萃取液首先经TLC分离(薄层板规格5 cm×20 cm),以氯仿-甲醇-水(65:35:10,下层)做展开荆,于254 nm处观察并收集不同比移值的分离组分;分离后的组分再次用HPLC进行检测,色谱柱为Venusil Mp C18(2)(4.6 mm×250 mm),在室温下以甲醇-水(15:85)为流动相,流速为0.15 mL/min、0.2 mL/min,以及甲醇-水(20:80)做流动相,流速为0.3 mL/min,检测波长为200 nm。结果表明:经薄层层析后分离得5种皂苷化合物,比移值分别为Ⅰ(0.08)、Ⅱ(0.18)、Ⅲ(0.49)、Ⅳ(0.63)、Ⅴ(0.80);分别将5种皂苷化合物经高效液相色谱进一步分离,共获得单体苜蓿皂苷13种。薄层层析与高效液相色谱技术相结合可用于苜蓿皂苷单体的分离检测,在本实验条件下检测到苜蓿提取物中的13种皂苷类化合物:     

预混料中越霉素A的反相液相色谱分析

用0.1mol/LpH7.8磷酸盐缓冲液提取样品中的越霉素A,过CG-50弱酸性阳离子交换树脂浓缩和纯化,邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,以下简称OPA)衍生、在32℃条件下衍生30min,进样。色谱柱采用HypersilBDS系列C18,250mm×4.6mmi.d,粒径10μm,柱温30℃,流速1.0ml/min,以甲醇∶磷酸盐缓冲液0.033mol/LpH7.0=53∶47为流动相,波长333nm条件下,用紫外检测器检测。在该条件下,各组分得到良好的分离,越霉素A保留时间为16.0min左右,依次进样,30min完成色谱分离。该方法的线性范围为9.355～748.52mg/L,回收率为86.34%～94.48%,批内变异系数小于4.84%,批间变异系数小于6.07%。     

高效液相色谱法测定酸奶和液体奶中对羟基苯甲酸酯类的研究

本文建立了酸奶和液体奶中对羟基苯甲酸酯类防腐剂中的对羟基苯甲酸乙酯（EP）和对羟基苯甲酸丙酯（PP）的高效液相色谱（HPLC）分析方法。样品用甲醇溶解后用超声波进行提取,采用紫外检测器检测,检测波长256nm,2种防腐剂在10min之内完全分离。各组分的回收率为96．9％～102％,检出限为1mg／kg,线性范围为1．0—40ug／mL。     

高效液相色谱-荧光检测器法测定乳和乳粉中尿素含量

建立了高效液相色谱-荧光检测器法测定乳及乳粉中尿素的方法.样品经乙醇水溶液提取后,在酸性条件下与9-羟基呫吨衍生反应,以乙腈和乙酸钠溶液做流动相,C18反相色谱柱分离,荧光检测器λex为213 nm和λem为308 nm测定,外标法定量.结果表明:在0.1～10.0 μg/mL范围内线性良好,R2＞ 0.999,配方奶粉和液态奶中加标回收率分别为104％～106％和83.4％～101％,RSD分别为2.1％～5.7％和3.2％～4.9％.在乳粉和液态奶中方法检出限分别为30 mg/kg和12 mg/kg.该方法简便、快速,灵敏度高,结果准确可靠,检验数据重现性好.     

HPLC-PDA法同时测定硫酸新霉素可溶性粉中非法添加4种化学药物

建立同时测定硫酸新霉素可溶性粉中非法添加甲硝唑、水杨酸、乙酰甲喹、甲氧苄啶的HPLC-PDA方法。样品用甲醇提取,经C18柱分离,以磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相洗脱,流速为1.0 mL/min,采用二极管阵列检测器进行全波长(200～400 nm)扫描,提取波长为230 nm。检查保留时间、峰纯度和光谱相似度,对非法添加化学药物进行确证。结果表明,4种化学药物在0.01～0.12 mg/mL的范围内线性关系良好(r≥0.9998);回收率在98.0％～99.9%之间,RSD≤1.0％,检出限为1～5 g/kg。该检测方法专属性强、操作简便,可用于硫酸新霉素可溶性粉中非法添加4种化学药物的测定。     

氟苯尼考粉中非法添加四种喹诺酮类药物的HPLC检测方法研究

建立了高效液相色谱法检测氟苯尼考粉中非法添加氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星的方法.用十八烷基键合硅胶色谱柱,以A(磷酸3.0 mL加水至1000 mL,三乙胺调pH值至3.0±0.1,加乙腈50 mL)-甲醇(88:12)为流动相,采用二极管阵列检测器,采集波长为200 ～400nm,分辨率1.2 am,记录光谱图和283 nm波长处的色谱图,流速1.0 mL/min,柱温30℃.结果显示,4种喹诺酮类药物的浓度在0.5 ～ 200 μg/mL范围内呈良好的线性关系,添加回收率在98.5％ ～100.9％之间,相对标准偏差在0.14％ ～ 0.74％之间,检测限0.5 mg/g.本方法快速、准确,可用于氟苯尼考粉中非法添加喹诺酮类药物的定性和定量检测.     

林可霉素-大观霉素复方混悬注射液中有效成分含量的HPLC法测定

建立了测定林可霉素-大观霉素复方油混悬注射液中盐酸林可霉素与盐酸大观霉素含量的高效液相色谱(HPLC)方法.采用C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),检测林可霉素的流动相为0.05mol/L硼砂溶液(用850 mL/L磷酸调节pH至5.0)-甲醇-乙腈(60∶36∶4),检测波长为214 nm;检测大现霉...     

勿忘我花中总黄酮含量测定

目的：建立勿忘我花中总黄酮含量的测定方法。方法：以芦丁为标准品,用比色法在512 nm波长处测定勿忘我花中总黄酮含量。结果：芦丁在4-24μg/mL范围内呈现良好的线性关系,回归方程为A=0.0121C-0.0011,R=0.9999,总黄酮含量为1.3%,平均回收率为99.65%,RSD为2.4%。结论：本方法稳定可靠,重复性良好,灵敏度高。     

高效液相色谱法测定鱼粉中7种生物胺含量

试验以0.4 mol/L高氯酸溶液为样品提取溶剂,以丹磺酰氯为衍生剂,以乙腈和0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相,采用梯度洗脱,于波长254 nm处紫外检测,同时建立检测鱼粉中7种生物胺的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）。结果表明,在45 min内各种生物胺得到很好分离,经方法学验证线性关系良好,回收率在85%~105%之间,精密度相对标准偏差（RSD）均小于4%。所建立方法灵敏度高,重现性好,是测定鱼粉中生物胺含量的有效方法。     

乙酰丙酮分光光度法测定甘油缩甲醛中游离甲醛含量

乙酰丙酮与甲醛在乙酸-乙酸铵介质中形成黄色化合物,该化合物在411 nm波长处有最大吸收。甲醛在比色液中含量小于4μg/mL时,符合比尔定律,线性相关系数R2=0.999 9。对样品平行6次测定相对标准偏差为0.68%~1.62%,回收率为91.2%~93.8%。该方法测定甘油缩甲醛中游离甲醛含量简便、快捷,准确可靠。     

A Rapid Solid-Phase Extraction Fluorometric Method for Thiamine and Riboflavin in Salmonid Eggs

Abstract

A new method has been developed and successfully applied to the selective measurement of thiamine (nonphosphorylated), total thiamine (sum of thiamine, thiamine monophosphate (TMP), thiamine diphosphate (TDP), and thiamine triphosphate (TTP)), and potentially interfering riboflavin in acidic (2% trichloroacetic acid) extracts of selected salmonid and walleye egg samples. Acidic extracts of eggs were applied directly to end-capped C₁₈, reversed-phase solid-phase extraction (SPE) columns and separated into three fractions by elution with mixtures of PO₄ buffer (pH 2), methanol (10%), and acetonitrile (20%). All thiamine compounds recovered in the first two fractions were oxidized to their corresponding thiochromes with alkaline potassium hexacyanoferrate, and we measured the thiochrome fluorescence (excitation at 360 nm, emission at 460 nm) in a 96-well microplate reader. Riboflavin, recovered in third fraction (eluted with pH 2, 20% acetonitrile), was analyzed directly by measuring the fluorescence of this fraction (excitation at 450 nm, emission at 530 nm). Significant portions of the phosphate esters of thiamine (TMP, TDP, and presumably TTP), when present at low concentrations (<10 nmol of total ?thiamine per gram of egg), were not retained by the 100-mg SPE column, and were collected directly during sample loading and in a subsequent phosphoric acid rinse as fraction 1. Free thiamine (nonphosphorylated) and remaining portions of the TDP and TMP were then eluted in the second fraction with 10% methanol/PO₄ buffer, whereas the un-ionized, relatively nonpolar riboflavin was eluted in the third fraction with 20% acetonitrile. This new method uses a traditional sample homogenization of egg tissue to extract thiamine compounds into 2% trichlororacetic acid solution; an inexpensive, commercially available SPE column; small amounts of sample (0.5–1 g); microliter volumes of solvents per sample; a traditional, relatively nonhazardous, oxidation of thiamine compounds to fluorescent thiochromes; and an ultraviolet–visible-wavelength-filter fluorometer for the measurements.     

高效液相色谱法同时测定液态乳中的2种紫外吸收剂和2种抗氧化剂

建立液态乳中2种紫外吸收剂(UV-326和UV-1577)和2种抗氧化剂(AO-1010、AO-2246)的高效液相色谱测定方法.前处理采用乙腈提取液态乳中目标化合物,样品用正己烷提取;检测经Agilent HC-C8反相色谱柱,以乙腈-水作为流动相,梯度洗脱程序进行分离,280 nm波长下检测.结果表明:分析物在0.05～50 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数＞0.999 5,方法检出限为0.02～0.5 mg/kg.方法在3个水平的加标回收率为69.08％～115.87％,相对标准偏差为0.43％～9.94％.该方法操作简单、灵敏度高、重现性好,适用于液态乳中紫外吸收剂和抗氧化剂的同时测定.     

HPLC法测定不同产地和种属麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱的含量

目的：建立麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的HPLC含量测定方法,并将其应用于不同产地和种属麻黄的测定。方法：采用Luna C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸溶液（含0.05%三乙胺,4∶96,v/v）为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm。结果：麻黄碱和伪麻黄碱分别在0.04-0.51μg、0.07-0.97μg范围内线性关系良好;平均回收率分别为98.7%和99.2%,RSD分别为2.1%和1.65%。结论：本方法结果准确,操作简单,数据可靠,可用于麻黄药材中麻黄碱与伪麻黄碱的含量测定,同时也为麻黄药材的鉴别和质量评价提供了依据。     

微波辅助提取-紫外分光光度法测定柚皮中总黄酮含量

通过均匀设计试验考察及优化了微波辅助提取-紫外分光光度法提取柚皮黄酮的最适提取条件:微波辐射功率638W,辐射时间6min,乙醇浓度70%,固液比1:4。研究了紫外分光光度法测定柚皮中总黄酮含量的方法,以芦丁为参照品,测定波长为258nm,吸光度与芦丁浓度的线性范围在1.0～30цg/ml,相关系数R=0.9995,平均回收率为99.60%,相对标准偏差为1.0%。该方法简单、快速、准确,样品提取后不经分离可直接测定黄酮含量,是一种较理想的测定方法。     

禽流感HA基因疫苗脂质体的制备及其理化性质

用改良的逆相蒸发法制备了Ｈ７亚型禽流感保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７脂质体。电镜观察表明,该脂质体多呈球形的单层或多层结构,脂质体粒径分布均匀,粒径范围２０～７００ｎｍ,平均粒径１６３ｎｍ,主要粒径分布位于５０～２００ｎｍ（８４．８０％）。重组质粒ＤＮＡ在脂质体的制备过程中保持了稳定性,并能抵抗ＤＮＡ酶的水解破坏作用。吸收光谱表明,在２４８ｎｍ及２６８ｎｍ处脂质体有２个特征吸收峰,ＤＮＡ的存在不改变吸收峰的位置,但能增加吸收峰的强度。     

露水草提取物质量标准的研究

建立了露水草提取物的质量标准。用薄层色谱法对其主要成分β-蜕皮激素进行鉴别;以高效液相色谱法对露水草提取物中β-蜕皮激素进行定量分析,流动相为乙腈-甲醇-水（1：2：4）,流速为1mL／min,检测波长为243nm。结果薄层色谱无干扰,专属性强;β-蜕皮激素质量浓度在0．6～4．2mg／mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0．99997（n=7）,加样回收率为99．7％,RSD为0．6％（n=6）。所用方法简便、准确、重现性好,可用于露水草提取物的质量控制。