苷肽注射液诱导犬产生γ-干扰素试验的研究

为了探讨新型免疫增强剂———苷肽注射液对犬免疫功能的影响,以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗(狂犬病、犬瘟热、副流感、传染性肝炎与细小病毒性肠炎)、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射后0、2、7、15、21 d采血,检测不同组间IFN-γ含量的变化。结果表明:苷肽注射液单独应用及其与疫苗联合应用,在注射后2 d就可以显著提高IFN-γ水平,并且可以维持15 d;注射苷肽注射液联合犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组IFN-γ含量显著高于单独注射犬五联疫苗组(P<0.05),说明苷肽注射液可以诱导γ-干扰素的产生,从而发挥其免疫增强的作用。     

苷肽注射液对犬外周血CD 4、CD 8比值的影响

以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射的第0、2、7、15天采血,检测不同组之间的CD 4＋和CD 8＋比值变化规律。结果表明：苷肽注射液单独应用和与疫苗同时应用,在注射的第2天就可以显著提高CD4＋、CD8＋比值,到第7天时达到最高值。并且发现,注射苷肽注射液同时注射犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组CD4＋、CD8＋比值显著高于单独注射犬五联疫苗组（P〈0.05）,这说明苷肽注射液具有增强免疫的作用。     

苷肽注射液对犬淋巴细胞转化试验

以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,研究苷肽注射液及其与疫苗配合进行的对犬淋巴细胞转化试验。各组犬于注射的第1、2、7、14、21天采血,进行淋巴细胞转化试验。结果表明:苷肽注射液单独应用和与疫苗同时应用,在注射的第2天就可以显著提高淋巴细胞转化率(P0.05),且能维持14～21天;疫苗组在注射的第7天达到了最高值,但明显低于前两组。这说明了苷肽注射液具有增强免疫的作用,并且可延长疫苗维持较高免疫功能的时间。     

白细胞介素-2对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

为研究白细胞介素-2(IL-2)对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响,选择40只幼犬,随机分成试验组和对照组,试验组按0.5 ml/头份加入犬用IL-2与犬细小病毒疫苗一起皮下注射,对照组单独使用犬细小病毒疫苗,注射后分别在接种前、接种后7 d和14 d使用金标试纸条检测其抗体效价,并进行组间抗体效价差异的t检验。试验结果表明,接种疫苗前试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价之间差异不显著;接种疫苗后7 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01);接种疫苗后14 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01)。试验表明:IL-2可明显提高幼犬对犬细小病毒疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬细小病毒疫苗候选佐剂。     

白细胞介素 2对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

为研究白细胞介素 2（IL-2）对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响,选择40只幼犬,随机分成试验组和对照组,试验组按0.5 ml/头份加入犬用IL-2与犬细小病毒疫苗一起皮下注射,对照组单独使用犬细小病毒疫苗,注射后分别在接种前、接种后7 d和14 d使用金标试纸条检测其抗体效价,并进行组间抗体效价差异的t检验。试验结果表明,接种疫苗前试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价之间差异不显著;接种疫苗后7 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01);接种疫苗后14 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01)。试验表明：IL 2可明显提高幼犬对犬细小病毒疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬细小病毒疫苗候选佐剂。     

益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡免疫器官T细胞增殖能力和IL-2mRNA表达影响

为探索益生菌对新城疫(ND)疫苗免疫雏鸡的免疫效果影响。将100只1日龄AA肉鸡随机分为益生菌组、ND疫苗单独免疫组、益生菌联合ND疫苗应用组和空白对照组。采用MTT法和实时荧光定量PCR法检测各试验雏鸡于ND疫苗两次应用后0、7、14、28、42 d胸腺、脾脏中细胞免疫功能及IL-2 mRNA的表达。结果发现,益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡后,其胸腺和脾脏中T细胞增殖能力和IL-2 mRNA表达,分别于ND疫苗免疫后7~28 d明显(P0.05或P0.01)高于ND疫苗或益生菌单独应用雏鸡。表明益生菌可通过提高雏鸡免疫器官中T细胞增殖功能和IL-2 mRNA表达,发挥增强ND疫苗免疫效应作用。     

后海穴注射黄芪多糖对脾虚泄泻犬的治疗效果

32只健康本地犬饲养1周后按体质量灌胃番泻叶水煎剂6 m L/kg人工复制脾虚泄泻证病理模型,造模成功后随机分为4组:黄芪多糖治疗组后海穴注射黄芪多糖注射液0.25 m L/kg,2次/d;硫酸庆大霉素治疗组后海穴注射硫酸庆大霉素注射液0.2 m L/kg,2次/d;后海穴针刺组后海穴注射生理盐水0.25 m L/kg,2次/d;病理对照组不作任何处理;同时设立4头健康犬作为空白对照,造模期间灌胃生理盐水。用药后治疗期间测定试验犬只的体质量、三大临床指标、部分血液指标和脾脏指数,并统计分析。结果表明,黄芪多糖治疗组血红蛋白、红细胞水平在较短时间内恢复正常,脾脏指数显著(P0.05)高于硫酸庆大霉素治疗组;硫酸庆大霉素治疗组白细胞降低速度极显著(P0.01)快于黄芪多糖治疗组。这表明后海穴注射黄芪多糖注射液可以用于治疗犬脾虚泄泻证。     

牛蒡苷元对疫苗免疫猪抗体和T细胞亚群的影响

为了研究牛蒡苷元对猪外周血T细胞亚群和对不同疫苗免疫抗体的影响,将16只25~30日龄的健康仔猪,随机分成4组,将牛蒡苷元溶液分别以高、中、低3个剂量和生理盐水同时注射,给药前后不同时间点采血,流式细胞术检测猪外周血中T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,中剂量的牛蒡苷元可显著促进猪外周血CD3~+、CD4~+细胞的增殖。另外25~30日龄断奶仔猪16头随机分为4组,将牛蒡苷元分别以高、中、低3个剂量和猪瘟疫苗同时注射,于免疫后7、14、21、28、35 d采血,ELISA方法检测猪瘟抗体水平。研究表明,与仅用疫苗免疫对比,牛蒡苷元疫苗联合使用,在免疫的初期和中期能够有效的快速提高猪体抗体水平,并且低、中剂量组比高剂量组更能够提高抗体水平,合适剂量的牛蒡苷元可以作为免疫增强剂单独或与疫苗联合使用。     

蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果影响的试验观察

为观察蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的调节作用,选择高、中、低剂量(0.2mL/kg、0.1mL/kg、0.05mL/kg)的蟾酥注射液与猪瘟兔化弱毒疫苗联合使用作试验组,猪瘟兔化弱毒疫苗组、猪瘟兔化弱毒疫苗与盐酸左旋咪唑+黄芪多糖组、空白组作为对照。试验猪在用药前及首次用药后的7d、14d、21d、28d,通过静脉采集血液,用试剂盒检测血清中猪瘟免疫抗体效价和IL-2水平。结果显示,蟾酥注射液高、中剂量组能够显著提高接种猪瘟兔化弱毒疫苗猪的血清中抗体水平(p0.05);不同剂量蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫猪血清IL-2的产生具有不同程度的促进作用,其中蟾酥注射液高剂量组作用快,持续时间较长。本试验的结果说明蟾酥注射液是猪瘟兔化弱毒疫苗有效的免疫佐剂。综合考虑,推荐蟾酥注射液的临床应用剂量为肌内注射0.1mL/kg体重,1日2次,连用3日。     

丹参联合奥曲肽对犬急性胰腺炎的临床疗效观察

为探讨丹参注射液联合奥曲肽对犬急性胰腺炎的临床疗效,选取浙江大学附属动物医院2014年7月至2016年7月门诊诊断为犬急性胰腺炎的70例病例,将其分为治疗组和对照组,每组35例。对照组采用奥曲肽进行治疗;治疗组采用奥曲肽联合丹参注射液进行治疗,分析2组治疗后犬特异性胰脂肪酶水平、腹痛缓解时间、治疗时间以及临床综合效果。结果显示,治疗组和对照组的治疗有效率分别为80%和65.7%,两组之间具有显著性差异(P0.05),即治疗组能显著缓解腹痛时间和缩短治疗时间。因此,丹参联合奥曲肽治疗犬急性胰腺炎的临床效果显著优于单独使用奥曲肽,为犬急性胰腺炎的治疗提供一种新的临床方案。     

猪后海穴接种猪传性胃肠炎疫苗对母乳及仔猪血清中IL—2含量的影响

应用放射免疫分析方法，测定比较了猪后海穴穴位免疫与常规口服、肌肉途径免疫猪传染性胃肠炎疫苗后，母猪初乳、常乳免疫仔猪血清中IL-2的含量。结果表明，初服中IL-2的含量以穴位免疫最高；常乳中IL-2含量各种免疫途径基本一致，处于较低水平。仔猪免疫后3d，血清中IL-2含量，穴位免疫与口服免疫基本一致，但均高于肌肉免疫及对照；免疫后7d，血清中IL-2含量，穴位免疫高于口服、肌肉免疫。从免疫调节因子方面看出，后海穴对动物机体免疫功能具有正向促进作用。     

GnIH与INH表位多肽疫苗主动免疫对甘肃高山细毛羊生殖激素的影响

本试验通过合成促性腺激素类的抑制激素——抑制素(inhibit hormone,INH)与促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibiting hormone,GnIH)的INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗,主动免疫甘肃高山细毛羊并对促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体素(luteinizing hormone,LH)激素水平进行比较分析。试验选用15只处在非发情季节的3.5岁的甘肃高山细毛羊,注射INH表位多肽疫苗与GnIH表位多肽疫苗分别为表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组,对照组注射等量生理盐水。采血后进行免疫,每隔7 d免疫和采血,同时在发情后每隔15 min采集一次血液,分离血清,用ELISA试剂盒检测抗体水平及FSH和LH激素变化。结果表明,表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组在初次免疫后都产生了相应的抗体,且表位多肽疫苗B组较表位多肽疫苗A组产生的抗体浓度高,75 、90、105 min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了FSH的分泌水平(P<0.05)。在45~105 min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了LH的分泌水平(P<0.05),且在90到105 min时表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组血清中FSH和LH的水平均显著高于对照组(P<0.05)。本试验结果表明,INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗主动免疫促进了甘肃高山细毛羊的FSH、LH的分泌,GnIH表位多肽疫苗在甘肃高山细毛羊上具有更好的免疫作用,本研究为该表位多肽疫苗在绵羊上的运用奠定了基础。     

Effects of Active Immunization with GnIH and INH Epitope Peptide Vaccine on Reproductive Hormones of Gansu Alpine Fine-wool Sheep

This study aimed to detect the reproductive hormones levels of follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) in Gansu Alpine Fine-wool sheep by active immunization of two synthesized epitope peptide vaccines A and B which were combined inhibit hormone (INH) and gonadotropin inhibit hormone (GnIH).15 Gansu Alpine Fine-wool sheep were selected which were 3.5 year old and lived in anoestrus season, 3 groups each had 5 sheep, GnIH epitope peptide vaccine and INH epitope peptide vaccine were named epitope peptide vaccine A and B groups, while blank group was injected with saline.The blood was collected before immunization and immuned, and bloods were collected once every 7 days, meanwhile collected blood every 15 min after estrus.The serum was used to detect antibody, FSH and LH levels by ELISA Kits.The results showed that the epitope peptide vaccine A and B groups produced the corresponding antibodies after the initial immunization, and epitope peptide vaccine B group produced more antibodies than epitope peptide vaccine A group.Epitope peptide vaccine B group promoted the FSH secretion levels was significantly higher than epitope peptide vaccine A group in 75, 90 and 105 min (P<0.05);In 45 to 105 minutes, the LH secretion levels of epitope peptide vaccine B group was significantly higher than epitope peptide vaccine A group (P<0.05), while the LH and FSH levels in epitope peptide vaccine A and B groups were significantly higher than control group (P<0.05).This study indicated that the epitope peptide vaccine A and B groups could promote the FSH and LH secretion levels through active immunity in Gansu Alpine Fine-wool sheep and had a good immune function.This study laid a foundation for the application of epitope peptide vaccine on sheep.     

猪胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备与免疫试验

通过鲎素抗菌肽和超高静水压联合作用,制备出一种胸膜肺炎放线杆菌菌影。利用胸膜肺炎放线杆菌血清5型（CVCC263）制备菌影并检测其灭活率。CVCC263菌影疫苗接种免疫仔猪,二免14d后攻毒,每天测量体温,并观察精神状态,呼吸,食欲等。攻毒第8天对存活猪进行剖杀,测量肺部病变面积,进行病理检测。结果显示,免疫组抗体效价及血清中的IgG、IgM、IgA、IL-2、IL-4含量均较对照组显著增加。免疫组临床症状和肺部病变面积均小于对照组。CVCC263菌影疫苗免疫仔猪抗APP感染的保护效果是明显的,并且APP5型的菌影疫苗可对APP7型感染有交叉保护。     

MTT法评价猪口蹄疫合成肽疫苗的细胞免疫应答

为评价猪口蹄疫合成肽疫苗免疫猪后的细胞免疫应答,用含有E、F两种多肽抗原的猪口蹄疫合成肽疫苗免疫猪,二免后两周采血分离猪外周血淋巴细胞,再用E、F两种合成肽及二者混合物对淋巴细胞刺激培养48 h,用MTT法检测特异性T淋巴细胞增殖反应。结果显示,在抗原E、F混合物浓度为50μg/mL时,抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增殖作用显著高于未免疫对照组（P〈0.01）。表明,该猪口蹄疫合成肽疫苗免疫猪能有效引起特异性T淋巴细胞免疫应答。     

猪口蹄疫○型合成肽疫苗诱导的免疫抗体的监测

设3组猪群,首免和二免分别注射生理盐水1 mL、猪口蹄疫0型合成肽疫苗1 mL(说明书推荐免疫剂量)及猪口蹄疫0型合成肽疫苗3 mL(说明书推荐免疫剂量3倍量),二免28天后检测猪群的口蹄疫抗体,结果显示3组猪群的抗体合格率分别为33%、78%和100%,疫苗诱导的抗体水平达到农业部规定的动物强制免疫标准。     

苷肽注射液对猪免疫器官及血液指标的影响研究

通过对猪注射不同剂量的苷肽注射液,研究了苷肽注射液对猪的免疫器官和血液指标的影响。结果表明,苷肽注射液在一定程度上可促进猪体重增长,对猪免疫器官的影响不显著,对血液指标未见不良影响。合适剂量的苷肽注射液能够促进仔猪外周血淋巴细胞PHA的增殖。