白细胞介素-2对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

为研究白细胞介素-2(IL-2)对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响,选择40只幼犬,随机分成试验组和对照组,试验组按0.5 ml/头份加入犬用IL-2与犬细小病毒疫苗一起皮下注射,对照组单独使用犬细小病毒疫苗,注射后分别在接种前、接种后7 d和14 d使用金标试纸条检测其抗体效价,并进行组间抗体效价差异的t检验。试验结果表明,接种疫苗前试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价之间差异不显著;接种疫苗后7 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01);接种疫苗后14 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01)。试验表明:IL-2可明显提高幼犬对犬细小病毒疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬细小病毒疫苗候选佐剂。     

三种免疫增强剂对猪细小病毒抗体水平的影响

选择30日龄健康荣昌仔猪12头,每组3头分为4组。选择盐酸左旋咪唑、猪基因工程干扰素及蜂胶液作为免疫接种猪细小病毒疫苗的免疫增强剂,按相同的免疫程序免疫接种试验猪1个月,于免疫接种前采集血液后,以后每隔7d采集一次血液制备血清,检测猪细小病毒抗体效价。比较各组猪细小病毒抗体水平消长曲线情况,分析3种免疫增强剂的免疫增强效果。结果表明,蜂胶作为猪细小病毒疫苗的免疫增强剂效果最好,平均滴度达1∶256;左旋咪唑次之,平均滴度为1∶128;干扰素较差,滴度介于1∶64～1∶128。统计分析表明,试验组及单一细小病毒疫苗对照组免疫接种前后猪细小病毒抗体效价差异极显著(P<0.01),3种免疫增强剂与单一细小病毒疫苗对照组差异显著(P<0.05),其中,蜂胶与单一细小病毒疫苗对照组及与干扰素组差异极显著(P<0.01),盐酸左旋咪唑与干扰素组及与蜂胶组间的抗体效价差异均不显著(P>0.05),干扰素与蜂胶组的猪细小病毒抗体效价差异显著(P<0.05)。     

口服PHA复合物对犬瘟热疫苗免疫效果的影响

试验通过选择12只健康幼犬,随机分成对照组和试验组,每组6只。试验当天进行免疫接种,试验组每只皮下注射1头份犬瘟热-犬细小二联苗,同时口服PHA复合物0.1mg/kg,对照组每只皮下注射1头份二联苗。各组在接种前及接种后7、14d,分别采血用CDV-Ab金标试纸条测定其抗体滴度,计算阳转率并进行T检验:接种后7d,对照组阳转率为33.3%,试验组阳转率为66.7%,试验组与对照组相比,阳转率提高约2倍;接种后14d,对照组抗体滴度平均水平为1:22.5,试验组抗体滴度的平均水平为1:45。对照组阳转率为66.7%,试验组阳转率为83.3%,试验组比对照组相提高了16.6%。T检验结果显示,试验组与对照组相比差异极显著(P<0.01)。试验组抗体离散度缩小,在1:64～1:128之间波动。试验表明:PHA复合物可明显提高幼犬对犬瘟热疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬瘟热疫苗免疫增效剂。     

麻疹疫苗对幼犬犬瘟热病毒母源抗体水平的影响

采用固定病毒稀释血清法,测定了不同日龄幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源中和抗体效价。2、9、16和23 d幼犬平均抗体效价为1∶12、1∶24、1∶40和1∶22。幼犬23日龄时,分别接种CDV疫苗株、麻疹病毒(MV)疫苗株和正常Vero细胞培养物。结果发现,CDV疫苗株接种犬母源抗体于接种后14 d时仅为1∶6,而接种MV疫苗株和Vero细胞冻融物组CDV母源抗体未发生显著降低,接近1∶20的保护水平。本试验结果表明,当幼犬母源抗体效价为1∶20左右时,母源抗体可被CDV疫苗封闭,而MV疫苗株不受CDV母源抗体干扰。本文为临床应用MV疫苗接种幼犬,获得对CD交叉保护提供理论依据。     

重组鸡白细胞介素2对H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫增效作用研究

为研究重组鸡白细胞介素2对体液免疫的影响,将600只7日龄海兰褐蛋鸡随机分为2组,试验组在H9亚型禽流感灭活疫苗免疫同时使用重组鸡白细胞介素2注射液,对照组只进行H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫。试验组与对照组鸡群分别于免疫后0、7、14、21、28、35 d进行鸡H9亚型禽流感病毒HI抗体的检测,并统计分析各组抗体效价的差异性。结果表明:试验组HI抗体效价均高于对照组,且在免疫后7 d试验组与对照组HI抗体效价差异极显著(P0.01),免疫后14 d、21 d试验组与对照组HI抗体效价差异显著(P0.05),试验组保护性抗体提前一周产生且抗体高峰提前一周到达。     

猪脾转移因子增强几种重要禽疫苗免疫效果的测试研究

为研究猪脾转移因子(TF)对禽疫苗的免疫增强作用,采用血凝抑制(HI)试验和琼脂凝胶扩散沉淀(AGP)试验方法测试了TF分别与鸡新城疫(ND)病毒活疫苗、禽流感(AI)病毒灭活疫苗、鸡传染性支气管炎(IB)病毒灭活疫苗、鸡传染性法氏囊病(IBD)病毒活疫苗联合接种SPF鸡后抗体效价(log2x)动态变化(共4个试验组),同时运用ELISA法评估了所采用免疫程序(上述前3种疫苗与TF同时接种后第7天,进行上述第4种疫苗与TF的联合接种)对SPF鸡外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的影响(试验组5),于接种上述第4种疫苗后的7,14,21,28,35,42d检测细胞因子,均设立对照组(上述禽疫苗单独接种)和空白组(非疫苗接种)。结果显示,接种后7,14,21,28,35,42d,试验组的ND血凝抑制(HI)、AI HI、IB HI和IBD琼脂扩散沉淀(AGP)抗体效价均显著高于对照组(P<0.05),分别提高了1.1~1.4,1.0~1.3,0.7~1.4,0.9~1.6;试验组的IL-2、IFN-γ和IL-4浓度分别于接种后7,14,21d显著高于对照组和空白组(P<0.05),各组的IL-10浓度差异不显著。研究结果表明,TF可增强NDV活疫苗、AIV灭活疫苗、IBV灭活疫苗和IBDV活疫苗的免疫效果。     

黄芪注射液对兔病毒性出血症疫苗免疫效果的影响

将不同剂量的黄芪注射液与兔病毒性出血症(RHD)疫苗混合注射或分开同时注射,从接种到第180天,每隔15d采血1次,检测血凝抑制(HI)抗体;在180,240,300d时,试验组与对照组兔做攻毒保护试验。结果表明:试验组兔HI抗体明显高于对照组,差异极显著(P<0.01);不同剂量黄芪注射液和不同给药方法对免疫后的HI效价影响较小,差异不显著(P>0.05)。试验组疫苗保护期可延长60d,说明黄芪注射液可增强家兔接种RHD疫苗后的特异性免疫功能,增强RHD疫苗的免疫效果。     

复方中药偶蹄康对奶牛口蹄疫疫苗抗体水平、血清细胞因子及生化指标的影响

为研究复方中药偶蹄康对奶牛口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型3个血清型疫苗抗体水平、10种血清细胞因子含量及生化指标的影响,本试验将健康成年奶牛分为药物组和空白对照组,每组100头,连续拌料给药7 d后注射口蹄疫三联苗,注射疫苗后0、14、28、56 d分别采血,检测血清疫苗效价、血清细胞因子含量及生化指标。结果显示,注射疫苗后0、28和56 d药物组与空白对照组抗体效价无显著差异（P>0.05）;注射疫苗后14 d药物对口蹄疫3种血清型抗体效价的提升作用均极显著（P<0.01）。药物组血清总胆红素（T-Bil）降低,0、28 d差异显著（P<0.05）,56 d差异极显著（P<0.01）;28、56 d药物组与空白对照组葡萄糖含量差异显著（P<0.05）;0 d血磷含量差异极显著（P<0.01）,但未超出正常生理值范围,且后续检测无显著差异（P>0.05）。注射疫苗后14 d药物组血清CD4含量显著高于空白对照组（P<0.05）;注射疫苗后28 d药物组血清CD4、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IL-18、IFN-γ含量极显著高于空白对照组（P<0.01）;注射疫苗后56 d药物组血清IL-6、IL-12含量极显著高于空白对照组（P<0.01）,CD4、IL-2、IL-4、、IL-18含量显著高于空白对照组（P<0.05）。综上可知,偶蹄康对奶牛口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型3个血清型疫苗效价有显著提升,对奶牛肝脏和肾脏功能无明显的损伤,且有一定的利胆作用,对奶牛细胞免疫和体液免疫机能有明显的提升作用。     

GC02鸡球虫病疫苗免疫对雏鸡血清自由基代谢的影响

将100只雏鸡随机分为试验组和对照组(150只/组),试验组于7、14日龄时各免疫接种8 000个GC02鸡球虫病疫苗卵囊.第2次接种后7、14、21、28 d时.随机选取试验组和对照组鸡各10只,颈静脉采血分离血清,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量.结果显示:(1)试验组接种7、28 d时,血清SOD水平与对照组比较差异不显著(P>0.05);14 d时显著升高(P<0.05);21 d时极显著升高(P<0.01).(2)7、14、21、28 d时,试验组与对照组比较,血清CAT水平差异均不显著(P>0.05);(3)试验组与对照组比较,7 d和21 d时,血清GSH-Px水平差异不显著(P>0.05);14 d和28 d极显著升高(P<0.01);(4)7、14、21、28 d时,试验组与对照组比较,血清MDA含量差异均不显著(P>0.05).结果表明:接种GC02鸡球虫病疫苗能够提高鸡抗氧化功能.     

番鸭呼肠孤病毒感染对禽流感疫苗免疫抗体应答的影响

1日龄番鸭感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)后,应用MTT法测定番鸭血液、脾脏和胸腺的B淋巴细胞增殖功能,应用血凝抑制方法检测禽流感疫苗免疫后抗体变化规律,探讨MDRV对B淋巴细胞功能的影响。结果显示:免疫组番鸭禽流感疫苗二免后H5和H9 AIV-HI抗体效价上升,二免后14 d HI效价最高,随后抗体效价维持在7.5 log2以上。MDRV组番鸭二免后抗体缓慢上升,二免后21 d HI效价最高,随后抗体效价维持在6.0 log2以下,HI效价与对照组差异极显著(P0.05)。1日龄番鸭人工感染MDRV后,免疫后7 d外周血T淋巴细胞增殖指数与对照组相比明显下降(P0.05)。免疫后14~28 d与对照组相比显著下降,差异极显著(P0.01),表明MDRV感染抑制了B淋巴细胞增殖功能。以上结果表明MDRV感染能抑制抗体应答和番鸭外周血和免疫器官中B细胞的增殖功能作用,造成B细胞功能抑制。     

口服PHA复合物对犬细小病毒免疫效果的影响

为了更好指导犬细小病毒病的防治,减少犬患细小病毒病的几率,通过试验验证PHA复合物对犬细小病毒疫苗是否有增强其免疫效果的作用,并拟定出试验观察的具体实施方案。试验选择年龄2至3岁、体重4 kg左右的未经免疫或者免疫已过期的健康犬12只,随机分成对照组A和试验组B,每组6只。试验组每只犬皮下注射一头份英特威二联苗并每千克体重口服PHA复合物0.1 mg,对照组每只犬皮下注射一头份英特威二联苗。各组在免疫接种前及接种后第7天和第14天,分别颈前静脉采血,分离血清用CPV-Ab金标试纸条测定其抗体滴度,计算阳转率并进行t检验。接种后第7天,A组阳转率为33.33%,B组阳转率为50%,试验组与对照组相比,阳转率有所提高,但是t检验时差异不显著;接种后第14天,A组和B组的阳转率均为83.33%,但A组抗体滴度≥1∶64的有50%,B组抗体滴度≥1∶64的有66.66%,A组抗体滴度在较低的水平1∶32～1∶64之间波动,而B组抗体滴度在较高的抗体水平1∶64～1∶128之间波动;说明PHA复合物与英特威二联苗联用可提高犬对英特威二联苗的抗体应答能力,对防治犬细小病毒病有重要作用。     

不同免疫增效剂对鸡新城疫免疫效果的影响

为研究鸡转移因子、黄芪、左旋咪唑、灵芝4种免疫增效剂的功效,以鸡新城疫（Newcastle disease,ND）血凝抑制抗体效价作为指标,比较其免疫效果。试验鸡先采血测定ND抗体效价,接种注射ND-IB-EDS灭活油乳剂疫苗,再将试验鸡随机分成5组,1～4组为试验组,给予不同的免疫增效剂,5组为空白对照组。在给药后第4、6、8、10、12、14、16、18、20、22和24天分别采血,采用微量血凝抑制试验检测ND抗体效价,统计后比较其抗体效价的变化。结果表明：灵芝组抗体效价在12 d开始显著高于对照组和其他试验组（P＜0.05）,且保持较高的水平;转移因子组和黄芪组抗体效价从14 d开始均显著高于对照组和左旋咪唑组（P＜0.05）,并分别从第22和20天开始持续在较高水平;左旋咪唑组的抗体效价高于对照组,但未出现显著性差异。由此可见,不同的免疫增效剂对鸡ND疫苗的免疫增强作用各异。综合考虑,临床应用时首选鸡转移因子,其次黄芪,灵芝和左旋咪唑需酌情使用。     

犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验

以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空载体质粒及生理盐水,8周接种1次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制抗体效价,第2次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第3次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7天及第14天时采血,测定血清的血凝抑制抗体效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空载体质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。证明所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。     

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗不同免疫程序对细胞因子分泌的影响

为分析仔猪首次免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)弱毒疫苗对血清细胞因子分泌水平的影响,本试验筛选PRRSV抗原与抗体均为阴性的7日龄仔猪40头,平均分为4组,其中试验A、B、C组均为14日龄首次免疫经典弱毒疫苗,试验A组35日龄二免用高致病性灭活疫苗,试验B组35日龄二免用经典弱毒疫苗,试验C组35日龄注射生理盐水,对照组均注射生理盐水。分别于首免后1,2,3周和二免后1,2,3,4,5,6周前腔静脉采血分离血清,采用细胞因子ELISA方法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12细胞免疫水平。结果显示,仔猪14日龄首次免疫弱毒疫苗后能迅速分泌细胞因子,首免3周以内,试验组IFN-γ分泌量均高于对照组,差异极显著(P0.01);试验组TNF-α分泌量高于对照组,差异极显著(P0.01),且试验A组试验B组试验C组,其差异不显著(P0.05);试验组IL-2分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显著(P0.05);试验组IL-10分泌量高于对照组,试验C组最高,其差异显著(P0.05);试验组IL-12分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显著(P0.05)。35日龄二免弱毒疫苗或灭活疫苗3周后,除IFN-γ外,试验A组的TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12分泌水平均高于试验B组和试验C组。结果表明,14日龄首免PRRSV弱毒疫苗和35日龄二免PRRSV灭活疫苗的免疫效果优于仅单独2次免疫PRRSV弱毒疫苗或1次免疫PRRSV弱毒疫苗。     

饲料中添加黄精多糖对犬狂犬病疫苗抗体及血常规指标的影响

黄精多糖是药食同源的一种中药材,其具有抗氧化,抗炎,提高免疫力等多种功能。本实验旨在探究黄精多糖对动物免疫力的影响,试验选择14周龄、体重相近的比熊犬9只,随机分为A、B、C三组,每组3只比熊犬。A组实验动物接种犬狂犬疫苗并在日粮中添加10g黄精多糖。B组接种犬狂犬疫苗但日粮中不添加黄精多糖。C组不接种犬狂犬疫苗但在日粮中添加10g黄精多糖,试验一周,试验前后分别检测犬狂犬病疫苗抗体水平及血常规。结果表明：与添加黄精多糖之前相比,试验A组添加黄精多糖之后淋巴细胞极显著（P<0.01）提高,单核细胞极显著（P<0.01）提高;试验B组7天前与7天后对比差异不显著（P>0.05）;试验C组添加黄精多糖之前与添加黄精多糖之后相比,添加黄精多糖之后淋巴细胞极显著（P<0.01）提高,单核细胞极显著（P<0.01）提高;添加黄精多糖之后的A、B、C组相比,淋巴细胞极显著（P<0.01）提高、单核细胞极显著（P<0.01）提高,但对犬免疫狂犬病疫苗后抗体浓度变化没有显著影响。     

犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗的研究

选用从犬科动物貉中分得的貉细小病毒CR86106株为种毒,用猫肾传代细胞F81系培养增殖,制成犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗(M-CPV)。该苗对猪红细胞的HA效价平均156,对F81细胞系的TCID_(50)平均为4.02。对离乳幼犬的最低免疫剂量为5×10~(3·8)TCID_(50)。苗注后2周即可获得免疫,血清HI抗体达32即可抵抗CPV强毒感染。疫苗的免疫期为1年。于-15℃以下冰盒保存,疫苗的有效期为9个月。CR80106株遗传性稳定,经CPV易感幼犬和F81细胞系连续传5代和22代,对犬的安全性和免疫原性不变。病毒蛋白经SDS—PAGE和HPLC分析,均未发现与原始毒株有不同。M-CPV对母源抗体干扰有较强的抵抗力,母源抗体达32的幼犬,100％可对该亩产生免疫应答。HI抗体<2的CPV易感幼犬接种该苗后除粪便轻度阳转外,无其他异常,同居CPV易感幼犬也不会感染发病。两次免疫后作同居感染攻毒,可获得完全保护,不会由粪便排出强毒。于产前20d给怀孕母犬接种,也未见有流产、早产、死胎和弱胎现象发生,所产仔犬全部生长发育正常。全国16个军、警犬场队用本疫苗累计免疫各类犬3320只,全部安全,没有一只因注苗而发病,经1～2年临床观察,3296头获得保护,保护率为99.28％。     

黄曲霉毒素对雏鸡免疫机能的影响

为了研究黄曲霉素对雏鸡免疫机能的影响,试验选用40只14日龄的海兰褐雏鸡,随机分为两组,每组20只。试验组饲喂被黄曲霉菌毒素污染的饲料,对照组饲喂未污染饲料,并于试验后14 d和21 d,从试验组和对照组分别随机抽取5只鸡进行免疫器官指数测定和血清NDV抗体检测。结果表明,试验后14 d试验组与对照组各项指标无显著差异;试验后21 d试验组胸腺指数显著低于对照组,法氏囊指数极显著低于对照组,而脾脏指数无显著差异;试验组抗体效价降低,差异极显著(P0.01),说明黄曲霉毒素会抑制雏鸡的免疫机能。     

口服PHA复合物对犬细小病毒免疫效果的影响

为了更好地指导犬细小病毒病的防治,减少犬患细小病毒病的几率,通过实验验证PHA复合物对犬细小病毒疫苗是否有增强其免疫效果的作用,并拟定出实验观察的具体实施方案。实验选用年龄2～3岁、体重4kg左右的未经免疫或者免疫已过期的健康犬12条,随机分成对照组A和实验组B,每组6条。实验组每条犬皮下注射1头份英特威二联苗并口服PHA复合物0.1mg/kg体重,对照组每条犬皮下注射一头份英特威二联苗。各组在免疫接种前及接种后7、14d,分别颈前静脉采血,分离血清用CPV-Ab金标试纸条测定其抗体滴度,计算阳转率并进行t检验:接种后7d,A组阳转率为33.33%,B组阳转率为50%,实验组与对照组相比,阳转率有所提高,但是t检验时差异不显著;接种后14d,A组和B组的阳转率均为83.33%,但A组抗体滴度≥1∶64的有50%,B组抗体滴度≥1∶64的有66.66%,A组抗体滴度在较低的水平1∶32～1∶64之间波动,而B组抗体滴度在较高的抗体水平1∶64～1∶128之间波动。说明PHA复合物与英特威二联苗联用,可提高犬对英特威二联苗的抗体应答能力,对防治犬细小病毒病有重要作用。     

不同鸡新城疫疫苗免疫鸡血清HI抗体的测定

将试验鸡分成3个试验组和1个对照组。A组鸡接种鸡新城疫系疫苗,B组鸡接种油乳剂灭活苗,C组鸡接种鸡新城疫系疫苗,并在接种疫苗后第3、4、5、6、7、9、11、13、15、20、25d采取各组鸡血并分离血清,检测HI抗体。结果表明,接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到10log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续6d保持高滴度抗体水平。接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到7log2,接种后第4d开始上升,接种后第9d达到峰值。接种油乳剂灭活苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到9.33log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续16d保持高滴度抗体水平。系疫苗HI抗体效价上升快,效价高,较适合于紧急接种,油乳剂灭活苗HI抗体效价可在高水平维持较长时间,较适合于预防接种。     

幼犬细小病毒病免疫抗体监测报告

为了了解昌平区犬只在免疫犬细小病毒疫苗后的保护效果,笔者选取昌平区某规模养犬场,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别对免疫1次和免疫3次的幼犬进行抗体检测。结果表明,免疫1次,幼犬细小病毒免疫抗体平均阳性率为20%;免疫3次,抗体平均阳性率为83.33%。说明目前在昌平区执行的犬细小病毒病免疫程序是有效的,对全区犬群起到了一定的保护作用。