Surveillance on the immune antibodies against synthetic peptide vaccine for 0 type FMDV

设3组猪群，首免和二免分别注射生理盐水1mL、猪口蹄疫0型合成肽疫苗1mL（说明书推荐免疫剂量）及猪口蹄疫0型合成肽疫苗3mL（说明书推荐免疫剂量3倍量），二免28天后检测猪群的13＇蹄疫抗体，结果显示3组猪群的抗体合格率分别为33％、78％和100％，疫苗诱导的抗体水平达到农业部规定的动物强制免疫标准。     

规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验

为比较猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果,选择健康仔猪134头,选用猪口蹄疫O型合成肽疫苗及由政府招投标的3家公司生产的猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗进行免疫效果试验。经试验,134头健康仔猪在60日龄、90日龄、120日龄分别注射不同种类的疫苗,于免疫后30 d抽取血样进行抗体检测。结果表明,经二免后的抗体合格率均能达到农业部规定的抗体合格率≥70%要求,表明采用O型合成肽疫苗及不同厂家生产的O型Ⅱ灭活疫苗经二免后猪群都能产生良好的抗体保护率。     

不同猪口蹄疫O型疫苗免疫效果的对比试验

为研究猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果,试验选择40~45日龄保育猪160头,随机分为两组,分别注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗,免疫后25 d采集血清、检测抗体效价。结果表明,合成肽疫苗组抗体合格率为90%,出现应激反应的比例为0;灭活疫苗组抗体合格率为75%,出现应激反应的比例为3.75%。结论:注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗比灭活疫苗的效果好、出现应激反应的仔猪少。     

猪O型口蹄疫合成肽疫苗免疫效力的研究

为了解猪O型口蹄疫合成肽疫苗免疫28 d后是否能够增强对易感仔猪的免疫效力,本研究将猪O型口蹄疫合成肽抗原乳化后按1头份、1/3头份和1/9头份三组剂量分别免疫易感仔猪。在免疫第28 d检测仔猪血清中的中和抗体滴度及攻毒保护试验检测PD_(50)。结果显示:1头份剂量组VP1抗体滴度最高达1:45,且显著高于其他剂量组VP1抗体滴度(P0.05);1/3头份剂量组VP1抗体滴度最高达1:22,1/9头份剂量组VP1抗体滴度均为1:16,该两组间无显著差异(P0.05)。猪O型口蹄疫合成肽疫苗能够有效抵抗O/GX/09-7毒株和JMS毒株的侵袭,增强了易感仔猪对该两种病毒的免疫保护力。     

猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫合成肽疫苗与猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫30-40日龄商品猪,免疫采用正向间接血凝试验、液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14d、28d、35d、42d、56d及二次免疫后7d、14d、28d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%-100%。与注射高效灭活苗组比较表明:合成肽疫苗临床使用的安全性较高,免疫抗体合格率明显优于猪O型口蹄疫高效灭活苗。     

不同口蹄疫疫苗免疫效果及检测方法评估

为更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果与合理的检测方法,广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场在某肥育场进行了此次试验。试验猪分3组,分别注射不同厂家生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗,并采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验（HI）分别对使用上述口蹄疫疫苗免疫效果进行检测。结果表明,猪注射口蹄疫O型合成肽疫苗后,用猪0型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率达到100％;用正向间接血凝试验方法检测不到注射合成肽疫苗后产生的抗体效价。免疫猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗后,用VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率只有30％;用HI方法进行检测,抗体阳性率为60％。     

口蹄疫灭活疫苗与合成肽疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫高效灭活疫苗与猪O型口蹄疫合成肽疫苗免疫28~35日龄商品猪,采用正向间接血凝试验和VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14 d、28 d、35 d、42 d、56 d及二次免疫后7 d、14 d、28 d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射两种疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7 d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%~94.12%。O型口蹄疫灭活免疫抗体不适宜用此检测方法。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果试验

为了更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与灭活疫苗免疫后抗体水平之间的差异．在梅小市选择2个规模化养猪场,每个猪场分2组,对试验猪分别免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗．对接种疫苗的试验猪进行免疫应激观察,结果显示：注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应．说明用合成肽疫苗临床使用的安全性较高;采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验分别对使用上述两种口蹄疫疫苗免疫21d后的猪血清进行检测,结果表明：免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测．抗体阳性合格率达到92．50％,免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗用正向间接血凝试验检测,免疫合格率为35．83％,说明猪口蹄疫O型合成肽疫苗接种后的免疫效果明显优于传统灭活疫苗。     

猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估

为了进一步了解猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700+2800+MM13)免疫效果,在吉林省选取2个规模化猪场共40头仔猪,观察注苗反应(包括过敏反应、精神状态、采食量等),并采用两种试剂盒进行抗体水平检测分析评估,掌握首免及二免后产生抗体的整体水平及合格率。结果显示,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后表现出良好的安全性,无免疫副反应;首免后30d O型及A型抗体合格率分别为100%、95%,二免后15d、45d抗体合格率均可达到100%,二免后90d、120d抗体合格率仍在95%以上。结果表明,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后能快速诱导产生高水平抗体,并且抗体持续时间长;同时也说明两种试剂盒可用于评价O型免疫抗体,而A型抗体有1种试剂盒不能用于评价,这可能与试剂盒包被的抗原类型有关。     

猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体水平检测

为了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,选用了两个厂家生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗,对80头试验仔猪进行了免疫注射,并在6、7、8、9、11、13、20周龄采血,通过ELISA检测抗体水平的变化。结果显示,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体;疫苗的免疫副作用小;使用VP1ELISA和LPB-ELISA检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫抗体试验相关性较好。     

猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病疫苗最佳免疫方法研究

为探索生猪重大疫病的科学免疫方法,确定最佳免疫程序,笔者设计并开展了口蹄疫（FMD）合成肽苗（或灭活苗）、猪瘟（HC）脾淋苗、高致病性蓝耳病弱毒疫苗（或灭活苗）的不同组合注射、单独注射、不同疫苗类型注射的试验研究.结果表明：3种疫苗不同组合注射或单独注射,以及使用不同类型疫苗注射,其免疫副反应均无明显差异;平均免疫抗体效价及群体合格率各组间存有差异;采用猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病3种疫苗同时分点注射,以及仔猪首免口蹄疫、猪蓝耳苗,再免疫口蹄疫、猪瘟苗的免疫效果最佳.     

Maturation of functional antibody affinity in animals immunised with synthetic foot-and-mouth disease virus.

A good correlation exists between specific neutralising antibody titre and protection against challenge with foot-and-mouth disease virus (FMDV) in infected or virus-vaccinated cattle, but not in the case of animals immunised with synthetic FMDV peptides. Therefore, mechanisms other than simple neutralisation are likely to be important in vivo. Antibody affinity may influence the protective capacity of sera from immunised animals and experiments were carried out to measure the functional affinity for synthetic FMDV peptide of sera from guinea pigs and cattle given various synthetic vaccines. In guinea pigs given a single dose of synthetic vaccine, antibody affinity increased with time after immunisation. In cattle, however, administration of a second dose of peptide 21 days after the first markedly retarded the process of affinity maturation. For guinea pig sera of equivalent neutralising activity, those of higher functional affinity had higher protective indices than those of lower functional affinity. Knowledge of the importance of antibody affinity in protection against FMD is important for an improved understanding of the mechanisms of protection and for the design of novel vaccines.     

三种试剂盒检测猪口蹄疫O型抗体的对比试验

使用三种猪口蹄疫O型抗体检测试剂盒分别检测接种猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫抗体,以探讨三种抗体检测试剂盒的相关性。结果发现,猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒和猪口蹄疫O型液相阻断ELISA试剂盒都可检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗,两种试剂盒的相关性达90.8%,而间接血凝试剂盒不能用来检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗;猪口蹄疫O型液相阻断ELISA试剂盒和间接血凝试剂盒可用来检测猪口蹄疫O型灭活疫苗,两种试剂盒的相关性达93.7%,而猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒不能用来检测猪口蹄疫O型灭活疫苗。     

2011-2015年安顺市家畜口蹄疫免疫效果调查分析

为了解安顺市近5年家畜口蹄疫免疫效果,采用VP1结构蛋白抗体ELISA及液相阻断 ELISA方法对全市家畜口蹄疫免疫血清进行免疫抗体监测。结果表明：2012、2013年猪O型口蹄疫合成肽疫苗抗体检测合格率极显著下降( P<0.01),2012年猪O型口蹄疫佐剂灭活疫苗及牛O型口蹄疫－亚洲Ⅰ型双价苗抗体检测合格率极显著下降( P<0.01);羊O型口蹄疫－亚洲Ⅰ型双价苗抗体检测合格率总体呈逐年上升趋势( P<0.01),猪O型口蹄疫合成肽疫苗比猪O型口蹄疫佐剂灭活疫苗保护率高。     

不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫效果评价及疫苗存留试验

用1 200 RID、6 000 RID和24 000 RID 3种不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫9头30日龄的断奶仔猪,检测试验猪的抗体消长和疫苗毒核酸在猪体内的存留时间,并用6头猪进行攻毒保护试验.结果表明:不同免疫剂量的试验猪其抗体水平的动态变化没有显著差异,免疫后21 d试验猪的猪瘟抗体均成阳性,63 d后至578 d猪瘟抗体阻断率仍然高于85％,应用荧光定量RT-PCR技术检测,猪瘟疫苗毒核酸在猪血液和扁桃体中的检出时间分别达28 d和42 d;免疫后370 d进行猪瘟强毒攻击后,免疫猪没有出现明显的临床症状,存活且不带毒.本研究证实,没有其他疫病和母源抗体的仔猪单次接种合理剂量的猪瘟活疫苗就能产生坚强的保护力,提出加强种猪场各种病原监测,淘汰病原阳性种猪,净化种猪群对提高猪瘟疫苗免疫效果,最终控制猪瘟具有重要意义.     

Maternally-derived antibodies to porcine parvovirus and their effect on active antibody production after vaccination with an inactivated oil-emulsion vaccine

Two sows which had been vaccinated with an oil-emulsion porcine parvovirus vaccine, and had developed high haemagglutination-inhibiting antibody levels to the virus, farrowed three successive litters each, a total of 74 piglets. Serum samples from these piglets were tested for haemagglutination-inhibiting antibody at birth, three and 17 days after birth, and at monthly intervals thereafter to study the decline of maternally-derived antibody. Regression curves were constructed from the data to show the projected pathway (mean and 95 per cent tolerance limits) of the decline of maternally-derived antibody. Approximately half the pigs still had positive titres of up to 1/160 at six months old, and traces of antibody were detected in a few pigs at nine months. Thus, even at the onset of breeding some gilts can have maternally-derived antibody which may interfere with their ability to develop active immunity to porcine parvovirus. From the same litters three groups of 12 pigs were selected randomly and were vaccinated with a single dose of the oil-emulsion vaccine at 70 days, 130 days or 190 days respectively. Despite the presence of moderate to high titres of maternally-derived antibody, especially in the younger pigs, all of those vaccinated showed strong and long lasting antibody responses to the vaccine. High serum antibody titres at the time of vaccination seemed to depress the response to the vaccine slightly but the effect was not statistically significant. These results have important implications for prevention of reproductive failure induced by porcine parvovirus.     

肉鹅H5亚型禽流感疫苗免疫效果的研究

选用H 5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗(H 5N 1,R e1株)对马岗鹅作首免日龄、免疫次数与免疫剂量的免疫试验。结果表明,雏鹅在7、14或21日龄作1次免疫均产生免疫应答,其中14与21日龄免疫组免疫后第5周抗体水平均达4 log2以上,抗体动态变化均值与峰值均高于7日龄免疫组2~3个滴度。用0.5、1和2 m l/只3个剂量对14日龄雏鹅的免疫试验中,0.5m l组抗体水平上升过程缓慢,免疫后4周抗体水平才达4 log2以上,1与2 m l组在免疫1周后上升速度较快,免疫后2周即达4 log2以上,抗体水平相近,但2 m l免疫组免疫后5~7周抗体水平均低于1 m l免疫组。说明接种剂量为1或2 m lH 5N 1油苗比接种0.5 m l的免疫效果好,尤以1 m l免疫剂量效果最好。雏鹅在7、14日龄或14、21日龄作2次免疫和7、14、21日龄作3次免疫,首免后抗体上升速度快,各检测点抗体水平均值相近,均在首免后3周达到4 log2以上,4~5周达6 log2以上,4~7周的抗体水平均高于14日龄1次免疫组,且提前2周达到4 log2以上,说明2次、3次免疫组的抗体水平高于1次免疫组,而2次与3次免疫组的抗体水平无明显差异。以上结果说明,在肉鹅生产的禽流感免疫中,选择以14日龄首免0.5 m l/只,21日龄2免接种1 m l/只可取得较为理想的免疫效果。     

猪胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备与免疫试验

通过鲎素抗菌肽和超高静水压联合作用,制备出一种胸膜肺炎放线杆菌菌影。利用胸膜肺炎放线杆菌血清5型（CVCC263）制备菌影并检测其灭活率。CVCC263菌影疫苗接种免疫仔猪,二免14d后攻毒,每天测量体温,并观察精神状态,呼吸,食欲等。攻毒第8天对存活猪进行剖杀,测量肺部病变面积,进行病理检测。结果显示,免疫组抗体效价及血清中的IgG、IgM、IgA、IL-2、IL-4含量均较对照组显著增加。免疫组临床症状和肺部病变面积均小于对照组。CVCC263菌影疫苗免疫仔猪抗APP感染的保护效果是明显的,并且APP5型的菌影疫苗可对APP7型感染有交叉保护。     

CpG-oligodeoxynucleotides enhance porcine immunity to Toxoplasma gondii

Protection against a challenge infection with Toxoplasma gondii VEG strain oocysts was examined in pigs after vaccination with T. gondii RH strain tachyzoites with or without a porcine specific synthetic oligodeoxynucleotides (ODN) containing immunostimulatory CpG motifs. Six groups of pigs were immunized with incomplete Freund's adjuvant (IFA) and either vehicle, tachyzoites alone or in combination with three different doses of CpG ODN or with CpG ODN alone. Protection from challenge was significantly (P < 0.05) improved in pigs vaccinated using CpG ODN as an adjuvant with tachyzoites compared to all other groups. The CpG ODN tachyzoite-immunized pigs also had higher serum parasite specific IgG antibody, no clinical signs of disease, and 52% had no demonstrable tissue cysts after the challenge infection. These data indicate that CpG ODN is a potential safe and effective adjuvant for the T. gondii RH strain vaccine in pigs.