新城疫分离株疫苗免疫保护试验

用经过鉴定的新城疫病毒分离株按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗，与标准的La Sota疫苗分别免疫带有新城疫母源抗体的白来航鸡，免疫后每7d采血监测新城疫抗体，并于免疫后21，28，35d用鸡新城疫分离毒和F48E9分别进行人工感染试验。结果显示，分离株灭活苗对鸡新城疫分离株的免疫保护效力优于La Sota灭活苗。     

鸡新城疫病毒的分离鉴定与交叉免疫保护试验

为了评价疫苗免疫保护效果,进而筛选出最佳的免疫方案,将分离到的鸡新城疫病毒(Newcas-tle disease virus,NDV)流行毒株制备成灭活疫苗进行交叉免疫保护试验研究。把采集到的疑似发生新城疫的病鸡肺、气管环等组织经处理后接种10日龄SPF鸡胚进行病毒的分离和增殖,并用血清学和分子生物学方法进行毒株的鉴定;用分离到的NDV/Chicken/TC/1/2011毒株制成油乳剂灭活苗,与La Sota疫苗以不同的疫苗组合免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果显示,共分离到9株新城疫病毒,其F蛋白裂解位点的氨基酸均为112 R-R-Q-K-R-F117,表现为强毒株的分子特征,与致病指数结果一致。分离株灭活苗组和分离株灭活苗+La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最高,其次是La Sota灭活苗+La Sota弱毒苗和LaSota灭活苗,La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最低。NDV分离株与疫苗株La Sota存在明显抗原性差异,这将对新城疫疫苗的发展和疾病控制策略制定至关重要。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.     

鸡新城疫的流行与免疫

门诊病例统计表明，我国鸡群中ND的发病率仍非常普遍。近些年来，世界各地对NDV分离株的研究结果发现，其HN基因和F基因序列的某些位点发生的变化，致使毒株间的毒力差异较大，抗原性亦有差异，但其主要抗原表位未发生变化。山东家禽研究所禽病室对1998－1999年的6个NDV分离株做了比较研究，各毒株的毒力不同且都比经典的F48E9强，其中二个属基因Ⅶ型。但交叉免疫保护试验表明，用La Sota株弱毒苗及其灭活油乳苗免疫的鸡，在用这6个分离毒分别攻毒后，均有1005保护率。同样，用这6个分离毒制成的灭活油乳苗免疫鸡后，对经典毒E48F9亦产生100％保护率。这表明，从目前发病鸡群中分离的NDV毒株与La Sota弱毒株、标准F48E9强毒株间有很好的交叉免疫保护作用。     

鸡新城疫La Sota株、传染性支气管炎W93株二联活疫苗研究 Ⅲ．疫苗免疫期试验

分别用3批鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(La Sota W93)，ND La Sota单苗和IB W93单苗免疫SPF鸡，并于免疫后第3、7、14、30、90、150天分别用NDV和NIBV强毒攻击。结果表明，二联活疫苗(La Sota W93)于免疫后7-150d可获得与相应单苗同样的保护力。     

鹅源新城疫病毒云南流行株免疫交叉保护试验

用分离的鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液制成油乳剂灭活苗,和NDV油乳剂灭活苗分别接种10日龄未免疫雏鸡和未免疫雏鹅,并设非免疫对照组。免疫后21 d,试验组和对照组每只鸡和鹅分别注射0.1 mL鹅新城疫病毒KM2007株尿囊液10-1稀释液,结果对照组鹅和鸡分别出现典型的鹅新城疫和鸡新城疫的症状和病理变化,而试验组鹅和鸡全部健活。结果表明,鹅新城疫病毒KM2007株油乳剂灭活苗及NDV油乳剂灭活苗均可保护鹅和鸡免受鹅新城疫病毒野毒的攻击。     

一株鸡新城疫病毒的分离鉴定及其油乳剂灭活苗免疫效果评价

从河南某种鸡场发病鸡群中分离出1株毒株,经HA、HI和动物回归试验,确定分离的病毒为NDV,命名为HNYD株。经过测定,HNYD株鸡胚半数致死量（ELD50）为10^90/0．1mL;鸡胚最小致死量的平均致死时间（MDT）为53．8h;对1日龄SPF雏鸡脑内致病指数（ICPI）为1．86,提示HNYD株为强毒力株。血清交叉反应试验显示HNYD株和La Sota株存在一定的抗原性差异。用HNYD株油乳剂灭活苗对HNYD株和La Sota株的保护率分别为90％和100％,明显优于La Sota株油乳剂灭活苗,提示HNYD株制备的疫苗对流行毒株和经典毒株的攻击均能很好的保护。     

基因Ⅶ型新城疫病毒分离鉴定及免疫原性研究

旨在分离筛选免疫原性好的新城疫病毒(NDV)流行毒株。从发病鸡组织中分离到4株病毒,经血凝和血凝抑制试验鉴定为NDV,进而完成致病指数测定、F基因高变区测序和遗传进化分析,并通过鸡胚交叉中和试验和攻毒试验研究PLK-N-06株对比La Sota疫苗株的抗原差异和免疫保护效力。结果显示,4个分离株的致病指数均属速发型NDV范围,且PLK-N-06株毒力最强;F蛋白裂解位点均为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株特征。遗传进化分析表明,分离株均为Ⅶd亚型。交叉中和试验结果显示,PLK-N-06株和La Sota株存在显著的抗原性差异。用PLK-N-06株油乳剂灭活苗免疫接种SPF鸡后产生的HI抗体效价几何平均值为1∶338,显著高于La Sota疫苗(1∶69),且其对PLK-N-06株感染的排毒率为0/10,明显低于La Sota株油乳剂灭活苗的4/10,结果表明PLK-N-06株具有良好的免疫原性,为新城疫基因Ⅶ型新型疫苗的研发奠定了基础。     

新城疫病毒SXFP株的分离鉴定及油乳剂灭活苗免疫效果评价

从陕西富平某种鸡场发病鸡群中分离出了1株流行毒株,经HA-HI试验和动物回归试验,确定分离到的为NDV,命名为SXFP株.经过测定,SXFP株鸡胚半数致死量(ELD50)为109.0/0.1 mL;鸡胚最小致死量的平均致死时间(MDT)为52.3h;对1日龄SPF雏鸡脑内致病指数(ICPI)为1.92,提示SXFP株为强毒力株.血清交叉反应试验显示,SXFP株和La Sota株存在小的抗原性差异.用SXFP株油乳剂灭活苗对SXFP株和La Sota株的保护率分别为90%和100%,明显优于La Sota株油乳剂灭活苗的60%和70%.提示SXFP株制备的疫苗对流行毒株和经典毒株均能很好地保护.     

鸡群加强免疫新城疫活疫苗(CS2株)与灭活苗(La Sota株)的效果对比

为了比较新城疫活疫苗(CS₂株)与灭活苗(La Sota株)对鸡群的加强免疫效果,本试验对首次已饮水免疫过新城疫弱毒苗的鸡群,再次用新城疫活疫苗(CS₂株)与灭活苗(La Sota株)分别进行加强免疫,采用血凝抑制试验方法检测新城疫免疫抗体,并作对比分析。结果显示：加强免疫使用灭活苗(La Sota株)比用活疫苗(CS₂株)的免疫合格率更高,免疫效果更理想。     

低毒力新城疫抗原抗体复合物疫苗研究

用低毒力新城疫病毒LaSota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制了不同比例的8种复合物疫苗,用1日龄SPF雏鸡进行免疫效果试验。试验l组～8组分别免疫复合物疫苗1～8,试验9组免疫常规新城疫活疫苗,试验10组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验l组～10组HI抗体效价分别为2^3.6、2^3.1、2^2.3、2^4.85、2^4.85、2^5.0、2^5.0、2^4.5、2^5.1、2^2.14。攻毒后1组～10组鸡的死亡率分别为30％、50％、90％、10％、0％、0％、0％、0％、09,6、100％。结果表明,低毒力新城疫病毒LaSota株与特异性抗体制备的复合物疫苗,可以减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

新城疫复合物疫苗对1日龄雏鸡免疫效果的研究

用新城疫病毒La Sota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制成4种不同比例的复合物疫苗,用1日龄普通雏鸡进行免疫效果对比试验。试验1~4组分别为免疫复合物疫苗1~4,试验5组免疫常规新城疫活苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验结果显示,试验1~6组HI抗体效价分别为3.2log2、3.1log2、3.3log2、3.2log2、3.1log2、2.9log2;攻毒后,试验1~6组鸡的死亡率分别为15%、20%、0%、35%、30%、50%。因此,新城疫病毒La Sota株与新城疫特异性抗体制备成复合物疫苗,能保持疫苗中抗原的免疫原性,并可减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

Protective efficacy of commercial Newcastle disease vaccines against challenge of goose origin virulent Newcastle disease virus in geese

Since 1997, severe outbreaks of Newcastle disease (ND) in geese in many regions throughout China have resulted in high morbidity and mortality, and great economic loss to farmers; however, no licensed, specific vaccine is yet available for this disease in China. In this study, goslings were immunized with different combinations and dosages of several commercial ND vaccines including La Sota vaccine, Mukteswar vaccine, recombinant live vaccine against avian influenza (AI) and ND (rL-H5 strain), and inactivated ND oil-emulsion vaccine (La Sota strain). The protective effects were evaluated based upon the level of antibody response and the degree of protection against the goose-origin virulent NDV strain. The result showed that two doses (i.e., one more than that for chicken) of La Sota vaccine priming, followed by 2-5 doses of Mukteswar vaccine boosting 2-3 weeks later, not only induced higher HI antibody levels, but also conferred longer-lasting protection. This immunization procedure can be recommended for prevention of ND in geese.     

Effect of the Immunity Efficacy of IBD Immune Complex Vaccine on ND La Sota Vaccine

1-day-old SPF chickens and commercial Jingfen chickens were vaccinated with IBD immune complex(IC) vaccine, NDV La Sota vaccine were inoculated simultaneously every one week and every two weeks.NDV La Sota immunization alone was as the control group.At the 2nd, 3rd, 4th and 5th week post inoculation, blood samples were taken and the ND HI antibody were tested.Experimental chickens were challenged with high virulent NDV at the 5th week post inoculation, the protective rate of each group was calculated.The results showed the ND HI antibody were not significant different in the combined immunization of IBD IC vaccine priming and NDV La Sota vaccine boost and NDV La Sota vaccine alone immunization (P>0.05).The results indicated that IBD IC vaccine has no immunosuppression on NDV La Sota vaccine in SPF chickens and commercial Jingfen chickens.     

新城疫La Sota疫苗对山东分离株的免疫保护试验

用标准疫苗株La Sota活疫苗在隔离器中接种SPF鸡,进行免疫保护试验.免疫后,每7 d采血监测NDV抗体,免疫后2周,利用经过鉴定的新城疫病毒(NDV)潍坊毒SGM01、昌乐毒SCL03、东营毒HY、日照毒SRZ03、莘县毒SSX03和标准强度F48E9分别进行攻毒试验,同时设SPF鸡对照.每天观察,及时剖检发病鸡,检查鸡群病变,确定疫苗的保护性.结果表明,La Sota疫苗能对除SGM01和HY以外的病毒攻击的SPF鸡提供较好的保护.     

新城疫分离株免疫保护试验

对经过鉴定的新城疫病毒穴NDV雪分离株,按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗,在隔离器中接种SPF鸡,设标准LaSota疫苗株作对照,进行免疫保护实验。免疫后,每7d采血监测NDV抗体。免疫后3周,利用ND强毒分离毒和F48E9分别进行交叉攻毒实验,同时设SPF鸡对照。每天观察,及时剖检发病鸡,检察鸡群病变,以确定疫苗的保护性,以便对常规生产中的免疫失败进行原因分析。     

Determination of the distribution of lentogenic vaccine and virulent Newcastle disease virus antigen in the oviduct of SPF and commercial hen using immunohistochemistry

The control of Newcastle disease (ND) in South Africa has proved difficult since 2002 following the introduction of lineage 5d/VIId Newcastle disease virus (NDV) strain ("goose paramyxovirus" - GPMV) to which commercially available ND vaccines appeared less effective. Most of the ND infections, even in fully vaccinated hens were characterized consistently by a drop in egg production. In this study, commercial and SPF hens-in-lay were vaccinated with La Sota vaccine and challenged with a GPMV isolate. Immunohistochemical labeling was used to determine the distribution of viral antigen in the oviduct of the hens. Following reports that cloacal vaccination offered better protection against egg production losses than the oro-nasal route, the efficacy of cloacal and ocular routes of vaccination against challenge were compared. Results showed that La Sota vaccine offered birds 100% protection against the virulent ND (GPMV) virus challenge from clinical disease and death, but not against infection and replication of the GPMV, as birds showed varying degrees of macropathology. Histopathology of the oviduct of infected birds revealed multifocal lymphocytic inflammation in the interstitium as well as mild glandular ectasia and mild edema. Finely granular NDV-specific immunolabeling was demonstrated in the cytoplasm of epithelial cells and mononuclear (lymphohistiocytic) cells in the interstitium of the oviduct. Both vaccine and virulent GPMV showed greatest tropism for the uterus (versus the magnum and isthmus). There was no clear difference in the protection of the oviduct and in the distribution of oviductal GPMV antigens between the two routes of vaccination.     

几种法氏囊活疫苗对鸡法氏囊损伤及免疫抑制作用的比较

探讨了鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）活疫苗对鸡新城疫活苗免疫的影响。将四种ＩＢＤ活苗分别接种３０日龄ＳＰＦ公雏,４天后再免疫鸡新城疫ＬａＳｏｔａ系活疫苗,同时法氏囊损伤情况。试验结果表明,所选ＩＢＤ活疫苗对雏鸡法氏囊均有不同程度地损伤,并且诱导产生ＮＤ－ＨＩ抗体的时间被推迟。     

鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及生物学特性研究

从黑龙江省某地发病鸡群中分离出一株病毒APMV1/chicken/China/HLJ-2/02,分离毒为速发型NDV强毒株,对经典NDV La Sota株免疫的雏鸡及高抗体母鸡仍有很强的致病力.本研究对分离株进行了生物学特性研究,并对部分基因进行了序列测定,序列已经发送Gene Bank,序列号为AY208695.采用NDV分离毒株制备成多价油乳剂灭活苗,免疫鸡群有良好的保护力.