关于兽医传染病学中重要人兽共患病实验教学改革的思考与实践

对于一些重要人兽共患传染病,因其可能存在的公共卫生安全隐患,在以往《兽医传染病学》实验教学的开设上通常受到限制,影响了教学效果。从强化生物安全措施、优化实验教学方法、开放科研实验室等多个角度入手,对传统的实验教学方式进行改革,以改善兽医传染病学中重要人兽共患病的教学质量,培养具有实践创新能力的高素质兽医人才。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.     

Class Ⅰ新城疫病毒NP因分子特征的研究

为分析2002～2007年Class Ⅰ新城疫病毒分离株NP基因的分子特征,以及其在新城疫病毒演化过程中所起的作用,采用RT-PCR方法扩增分离株的核衣壳蛋白(NP)基因,并进行了测序,应用生物信息学软件分析NDV NP基因的分子特征.根据NP基因序列的遗传发生分析表明,Class Ⅰ NDV 2型毒株与DE/R49-99和美国株亲缘关系较近,而3型毒株与其他Class Ⅰ毒株遗传关系较远,具有地区特色,形成一个独立的分支.生物信息学软件分析表明,NP蛋白N端1～400氨基酸比较保守,而C端序列(特别是氨基酸残基400～480)高度变异.ClaSs Ⅰ病毒2型毒株与国外分离株亲缘关系较近,可能有共同的起源;而3型毒株独立于其他Class Ⅰ毒株,具有独特性,这两种毒株的来源不同;不同基因型NP蛋白之间比较保守,但是P蛋白的C端发生了多个氨基酸的变异,对其功能的影响还需进一步探讨.     

一株猪丹毒杆菌的分离及鉴定

猪丹毒为我国三大猪传染病之一,给养猪业造成严重的经济损失。为了诊断某猪场猪只发病情况,试验从送检病料中分离到一株分离菌,对分离菌株进行镜检、生化鉴定和16S rDNA基因序列分析,结果判定分离菌株为猪丹毒杆菌,从而将此病例确诊为猪丹毒,为养殖场防治该病提供理论依据。     

鸡马立克氏病二价活疫苗免疫协同作用研究

鸡马立克氏病二价活疫苗免疫协同作用研究@吴长新@刘秀梵@吴艳涛@张如宽@甘军纪@刘慧谋@彭大新@李胜$江苏农学院动物医学系@李胜$杭州市近江种鸡场鸡；马立克氏病；二价＋疫苗；免疫协同作用农业部“七·五”重大攻关项目；江苏省“八·五”重大攻关项目...     

新城疫单抗ELISA试剂盒检测鸽新城疫病毒

用新城疫（ND）单抗酶联免疫（ELISA）试剂盒检测23例疑似ND的鸽泄殖腔棉拭样品，7份阳性样品用SPF鸡胚均会离到病毒，该病毒凝集鸡红细胞，并就抗新城疫病毒（NDV）阳性血清所抑制，其中4株病毒的MDT在48－68.6h之间，ICPI为1.55-1.85。试验结果表明所分离的病毒为NDV，亦表明ND单抗ELISA试剂盒能够检出鸽NDV，并可作为鸽群中NDV流行病学调查的有效手段。     

新城疫病毒ClassⅠ与ClassⅡ毒株交叉血凝抑制试验快速分类

ClassⅠ新城疫病毒(NDV)分离自健康家禽泄殖腔棉拭子,其基因序列与ClassⅡNDV存在很大差异,为了建立简单快速的NDV分类方法,用SPF鸡制备ClassⅠ和ClassⅡ毒株多价抗血清分别与选取的ClassⅠ和ClassⅡ代表毒株进行交叉血凝抑制反应。结果表明所有ClassⅠ毒株比同ClassⅡ毒株的交叉血凝抑制值高8～64(3～6log2)倍;而ClassⅡ毒株与ClassⅡ抗血清的HI效价比同ClassⅠ毒株的交叉血凝抑制值高2～8(1～3log2)倍,结果与基因分型高度一致,说明可以用交叉血凝抑制试验进行初步分类。本研究结果显示,NDVClassⅠ弱毒株血凝性与广泛应用的NDV弱毒疫苗株不同,基因序列分析可以部分解释这种差异,另外可能HN蛋白的空间结构也会影响其与血凝素结合的特性。     

活禽市场中4株鹅源新城疫病毒的分离与鉴定

过去,一般认为水禽对新城疫病毒( Newcastle disease virus,NDV)有较强的抵抗力,感染后不容易发病和造成流行或暴发.然而,自上世纪90年代后期以来,我国大面积出现了鹅群感染NDV并严重发病、死亡的事件[1,2],给养禽业造成了严重的威胁和损失,引起了众多研究者和从业者的高度关注.近年来鹅新城疫疫苗得到了广泛使用,为了评估使用疫苗后鹅群的NDV携带状况,本研究于2010年10月至2011年3月对江苏省扬州市活禽市场内鹅群中的NDV开展了调查,共分离到4株NDVs,并对其部分生物学特性以及F基因的遗传变异情况进行了分析.1 材料与方法1.1 材料1.1.1 鸡胚与标准阳性血清抗NDV单因子阳性血清由本实验室制备并提供;SPF种蛋购自山东省家禽研究所SPF种鸡场,在本实验室孵化至10日龄使用.     

沙门氏菌高分子量核DNA的提取

沙门氏菌高分子量核ＤＮＡ的提取蔡学忠，焦新安，刘慧谋，张如宽，刘秀梵（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）提取细菌核ＤＮＡ常用的方法有：一种是裂解细菌、用等密度线性梯度超速离心的方法，另一种是以ＣＴＡＢ去除细菌多糖和蛋白质，用酚、氯仿进行抽提。但...     

产蛋鸡非典型性新城疫并发鸡白痢沙门氏菌病的诊治

1发病情况及流行病学 山东某鸡场蛋鸡4000只于5月龄开始产蛋，7月龄产蛋率达65％，从25周龄开始发病，到32周龄达发病高峰，这期间产蛋率在50％徘徊很久，且软皮蛋和破蛋比例居高不下。