辽宁省禽大肠杆菌敏感药物的筛选及治疗实验报告

通过对106株分离菌，20种药物的敏感试验，证明大肠杆菌耐药性强，对利福平99％菌株耐药，青霉素、多西环素98％菌株耐药、诺氟沙星、氧氟沙星、链霉素76％菌株耐药，敏感药物首选磷霉素和杆绝杀。0109菌株和01菌株人工致病鸡治疗试验结果和药敏结果一致。     

湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因分析

从湛江地区3个水产养殖场分别采集各场的水、池塘底泥和土壤样品，分离鉴定大肠杆菌，调查水产养殖环境中大肠杆菌的耐药情况。采用PCR法鉴定分离菌株，通过纸片扩散法检测分离菌株对22种抗生素的耐药性，PCR法检测耐药基因的携带情况。结果显示，从水体、池塘底泥和土壤样品中共分离鉴定出90株大肠杆菌，分离菌株对青霉素、林可霉素和克林霉素的耐药率为100%;对磺胺异(口恶)唑、利福平、新诺明、阿莫西林和氟苯尼考的耐药率分别为90.0%、88.9%、80.0%、57.8%和48.9%;对头孢唑啉、头孢噻肟、阿奇霉素和多肽类、喹诺酮类、四环素类、硝基呋喃类抗生素的耐药率较低(1.1%～8.9%);对丁胺卡那霉素和庆大霉素的耐药率为0。分离的90株菌均至少对4种药物耐受，最多耐受14种药物，耐受9种药物的菌株数最多，且90株均为多重耐药菌株。该养殖场分离的90株菌中bla_CTX-M、aphA1、sul2、floR等6种耐药基因检出率较高(≥50%);aac(3)-Ⅱ、ereA、oqxB、tetM、sul1等5种耐药基因检出率较低(≤20%)。单株菌株至少检出1种耐药基因，最多检出1...     

奶牛乳房炎凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析

本研究对江苏部分奶牛场致隐性乳房炎病原进行流行病学调查,采样并进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定,共分离到35株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）。用常规药敏纸片法对CNS分离菌株的抗生素耐药情况进行分析,结果显示分离培养到的35株CNS对临床常用抗生素万古霉素、左氟沙星、克拉霉素、苯唑西林、诺氟沙星、氯霉素、环丙沙星、头孢噻肟、磷霉素和呋喃妥因等高度敏感,高敏率在60%～80%之间;而对青霉素G、复方新诺明和多黏菌素B有一定的耐药性,耐药率为70%～100%。分离菌株表现了较强的多重耐药性,耐20种药物的细菌有3株,耐15种药物的细菌有1株,耐14种药物的细菌有1株,62.9%的CNS分离菌株能耐5种以上抗生素,表明导致奶牛隐性乳房炎CNS菌株耐药情况不容小视。     

贵州地区紫云花猪腹泻病原菌的分离鉴定及耐药性分析

为了鉴定贵州地区紫云花猪腹泻病原菌,分析其耐药性,试验采用细菌学常规鉴定、16SrRNA基因测序、K-B药敏纸片法对从贵州地区不同养猪场采集的患腹泻紫云花猪肝脏、肛拭子、粪便等样品196份进行细菌分离鉴定,并分析其耐药性。结果显示,从采集的196份样品中分离得到了60株大肠杆菌、35株沙门菌、20株志贺菌,分离的60株大肠杆菌对庆大霉素、阿莫西林、强力霉素等5种药物的耐药率在70.0%以上,对其他药物耐药率在15.0%~40.0%之间,耐11、10种药物的菌株最多,分别占分离菌株31.7%、23.3%;分离的35株沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、氟苯尼考等5种药物的耐药率在58.3%以上,对其他药物耐药率在48.6%~17.1%之间,耐10、9种药物的菌株最多,分别占分离菌株25.7%、22.9%;分离的20株志贺菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等9种药物的耐药率在65.0%以上,对其他药物的药物耐药率在25%~35%之间,耐9、8种药物的菌株最多,分别占分离菌株30.0%、20.0%。本研究为该地区紫云花猪细菌性腹泻的防控提供研究基础。     

鸡源大肠杆菌的血清型分布与耐药性监测

对180株鸡源大肠杆菌分离菌株进行O血清型鉴定，鉴定出171个分离菌株的O血清型40种，占分离菌株的95％，其中O36血清型的菌株最多，有40株，占定型菌株的23．9％，为优势血清型菌株。采用微量稀释法药敏试验监测了180株鸡源大肠杆菌分离菌株对20种抗菌药物的耐药性，结果表明，除头孢曲松、头孢氨噻肟、头孢噻呋、阿米卡星、氟苯尼考外，分离菌株对其余15种抗生素均呈现出不同程度的耐药性，其中，172株大肠杆菌分离菌株对两种或多种抗生素有耐药性，对萘啶酸的耐药率最高(93．3％)，其次是四环素(88．9％)、氨苄青霉素(72．8％)、阿莫西林(7l、7％)、罗比沙星(64.4％)、沙拉沙星(62．8％)。大多数分离株对氟喹诺酮类药物有很高的耐药率(52．9％～93．3％)，并表现出多重耐药性，124株分离株表现为对2种以上氟喹诺酮类药物的耐药性。     

食品动物源沙门菌的分离鉴定及耐药性检测

为了解食品动物源沙门菌血清型分布及耐药状况.采用生化鉴定、血清学及沙门菌invA基因PCR方法对分离自不同食品动物源菌株进行沙门菌鉴定;采用微量肉汤稀释法进行菌株对20种药物的敏感性试验.结果显示,本次研究共鉴定出316株沙门菌,14个血清型,以鸡白痢、菲利斯河沙门菌和吉韦沙门菌为主;316株菌株对20种药物呈不同水平的耐药性,对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、链霉素、四环素、多西环素、奈啶酸、磺胺异噁唑等药物耐药率超过40％;95.5％的菌株呈多重耐药性;猪源、牛源菌株耐药性较禽源严重.以上情况说明,本次分离的食品动物源沙门菌血清型分布广,菌株耐药性较为严重.临床上应把生长周期长的动物体内细菌作为耐药性检测重点,在食品动物生产上应谨慎使用抗菌药物.     

牛支原体体外药物敏感性分析

为了解牛支原体的体外药物敏感性,指导临床合理使用抗生素,对2008年以来收集的34株牛支原体临床分离株进行了药物敏感性测定,选取11类22种可能敏感的药物,采用微量稀释法测定药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,牛支原体分离株只对5种药物呈现不同程度的敏感性,其中:94.12%(32/34)的菌株对达氟沙星敏感;70.59%(24/34)的菌株对林可霉素敏感;50.00%(17/34)的菌株对阿奇霉素敏感;20%左右的菌株对多西环素和甲砜霉素敏感;所有分离株对其他7种药物全部耐药。因此,建议目前临床上进行牛支原病治疗首选药物为达氟沙星、林可霉素和阿奇霉素。     

泰安周边地区鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

为了解泰安及周边地区鸡大肠杆菌病流行情况及耐药性检测,共采集了20份病料,经分离培养及生化鉴定,分离到7株致病性大肠杆菌,并用7种抗生素进行药物药敏试验,结果显示:丁胺卡那、对头胞塞肟、壮观霉素、新霉素、庆大霉素对所有菌株的抑菌作用普遍较高,高敏菌株达71%～100%之间,对诺氟沙星和青霉素均不敏感.     

新疆塔额垦区羊源大肠杆菌抗菌药物敏感性调查

对塔额垦区6个团场的15个羊养殖场(户)采样并分离大肠杆菌,用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性检测。结果共分离76株大肠杆菌,临床药敏试验显示,67.1%的菌株对5～10种的抗菌药耐药,32.9%的菌株对10种以上的抗菌药物耐药,无完全耐药菌株,其中,164团分离株的耐药情况较严重,61.5%的菌株对10种以上的抗菌药物耐药,161、165、168与170的情况稍好。塔额垦区规模化养殖场中的羊源大肠杆菌对当前临床上允许使用的多种类型抗菌药物呈现一定程度的耐药,尤其是对临床中使用较多的青霉素、阿莫西林等耐药,这种耐药性的产生将对大肠杆菌病的抗菌药物治疗形成严重挑战,应选择性地使用抗菌药物,避免乱用、滥用抗菌药物,建议以流行菌株的耐药性为依据开展临床治疗。     

水貂绿脓杆菌分离鉴定及药物敏感性分析

本试验旨在通过对山东某水貂养殖场送检的5只具有典型出血性肺炎症状的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药情况分析,为临床用药和治疗提供依据和参考。通过细菌分离纯化、生化鉴定和PCR方法对分离菌株进行鉴定,采用K-B药敏法检测分离菌株对常用药物的敏感性,并通过PCR方法检测分离菌株耐药基因的携带情况。经鉴定共分离得到5株绿脓杆菌,药物敏感性试验结果显示,5株绿脓杆菌对氟喹诺酮类药物、第3代和第4代头孢类药物较敏感,对氨基糖苷类、四环素、氯霉素、青霉素类、第1代和第2代头孢类药物耐药。耐药基因检测结果显示,5株绿脓杆菌共检测出6种耐药基因aadA1、aac(3')-Ⅱc、aac(6')-Ⅰb、tetA、tetK、cat2。且每株分离菌均检测出3种以上耐药基因。结果表明,分离的5株菌株均为绿脓杆菌,主要引起水貂出血性肺炎。分离菌株耐药性较严重,主要表现为多重耐药现象。菌株携带的耐药基因呈多样性,可引起菌株对相应药物产生耐药现象。     

救必应不同提取物与西药联合对产ESBLs细菌作用研究

试验旨在探讨4种救必应提取物与抗菌药物联合诱导细菌传代的体外抑菌活性。本试验制备了4种救必应提取物,采用96孔反应板二倍微量稀释法体外检测提取物与抗菌药物联合诱导耐药大肠杆菌传代的抑菌作用。结果显示,4种救必应提取物与抗菌药物联合诱导细菌传代对耐药大肠杆菌有不同程度的抑菌活性,其中提取物Ⅰ、Ⅲ与抗菌药物联合效果最好。提示,救必应提取物Ⅰ、Ⅲ与抗菌药物联合诱导细菌传代具有体外抗耐药菌作用。     

新疆石河子地区奶牛乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析简

本试验旨在调查新疆石河子地区奶牛乳房炎源大肠杆菌的某些生物学特性及其耐药状况,以提高药物疗效,减少牛奶中药物的残留。试验从新疆石河子地区患乳房炎奶牛的乳样中分离纯化并鉴定出21株大肠杆菌,并对大肠杆菌分离株进行抗菌药物敏感性分析。结果表明,21株大肠杆菌对21种抗菌药物中的6种药物耐药率超过50%,其中最多的耐药15种,最少的耐药5种,耐药6及6种以上的菌株共占到76.19%。提示,该地区奶牛乳房炎源大肠杆菌对多种药物已产生了不同程度的耐药性,且存在严重的多重耐药情况。     

一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究

为确定导致罗非鱼患病的原因，本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖，从心脏部位分离得到1株细菌，通过形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA分析，确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）。药敏试验结果显示，该菌株具有很强的多重耐药性，测试的20种药物中，该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性，仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示，该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因，同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。     

对兽药违法案件中货值金额计算的思考

选取货值金额计算有争议的兽药违法典型案例,对货值金额计算的价格及数量确定依据条例条款分析审议,提出货值金额按标价计算等价格确定方法、已售数量争议的界定方法等数值确定方案的建议,以期为兽药规范执法提供参考。     

超高压液相色谱-四级杆飞行时间质谱法筛查牛奶中55种药物

应用超高压液相色谱-四级杆飞行时间质谱法（UPLC-QTOF）建立了筛查牛奶中55种药物的方法。以乙腈提取样品中的药物,提取液经过HLB固相萃取柱净化浓缩后检测。在不同添加浓度下获得了精确分子离子质量,质量偏差的绝对值低于9.9×10-6。55种药物的检出限为2～10μg/kg,在5～200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r≥0.98。在牛奶中添加20～100μg/kg的药物,回收率在22.9%～114.3%之间。本方法操作简单、高效、杂质干扰少,适用于牛奶中55种药物的检测需要。     

致病性大肠杆菌耐药性与其质粒相关性研究

对本地临床分离的20株致病性大肠杆菌进行耐药性检测和质粒检测。耐药性检测结果显示,受检20株致病性大肠杆菌对临床常用5种抗菌药物均表现为耐药,大肠杆菌耐药程度及多重耐药现象较为严重。质粒图谱分析结果表明,在大肠杆菌耐药性菌株中,尤其是耐药程度较高且呈多重耐药的菌株中,耐药质粒的检出率较高。实验结果提示:致病性大肠杆菌耐药性与其耐药质粒存在密切相关。     

超高压液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱法同时筛查猪肉中54种兽药

应用超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱建立了筛查猪肉中54种兽药的新方法。样品经过乙腈∶水＝5∶1（ V ∶ V）和5％三氯乙酸两次提取,旋蒸后经Waters Oasis HLB柱净化后上机测定,样品在正负离子模式下进行检测,在50～1500 Da质量范围内进行一级全扫描,以保留时间、化合物精确分子离子质量和特征碎片离子质量对药物进行定性分析。结果表明,在低中高三个添加浓度下测定了各种药物的回收率,54种兽药在4～1．5×104μg／L范围内线性关系良好,相关系数r2≥0．98。54种药物的质量数误差绝对值小于7．71×10-6,不同兽药在猪肉中回收率为10％～128％。猪肉中检出限为2～10μg／kg。该方法适用于猪肉中54种兽药的检测需要,该方法操作简单,准确,杂质干扰少。     

不同体况绵羊同期发情处理试验研究

通过两年三批次不同体况绵羊不同药物同期发情处理试验,分别对CIDR栓＋PG、CIDR栓＋PMSG、PG三种处理的发情率和发情时间进行比较分析,试验表明绵羊营养状况对不同药物同期发情处理均有较大影响,在营养较好条件下三种处理均可取得较好的同期发情效果,营养不良三种处理同期发情效果均变差,在相同条件下以CIDR栓为主的处理较PG处理发情率较高,且发情快而集中。综合考虑发情率和处理成本,在处理羊营养状况中等以上PG处理具有成本低操作简单的明显优势。     

肉鸽大肠杆菌的分离鉴定与耐药性的研究

以南京市郊某肉鸽场病鸽为样本进行细菌分离鉴定,研究肉鸽大肠杆菌的耐药性。从病死鸽体内分离到14株大肠杆菌,鉴定出4种血清型,分别是O2、O18、O78、O101,其中O2型8株,为主要血清型,占血清型总数的66.67%。将分离到的菌株接种20～25日龄雏鸽进行动物回归试验,死亡率达85.17%,说明该分离菌株对雏鸽具有较强的致病性。对分离菌株进行药敏试验,结果表明,14株大肠杆菌对庆大霉素、卡那霉素、头孢拉定3种药物敏感率达100%,对环丙沙星、阿米卡星等13种药物均产生不同程度的耐药,对强力霉素和新霉素2种药物完全耐药。     

HPLC-PDA法测定兽药中非法添加四种解热镇痛抗炎类药物

建立了7种兽药中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、地塞米松和地塞米松磷酸钠药物的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠3．0 g加水至1000 mL,加三乙胺1 mL,用氢氧化钠调pH值至7．0±0．2）-甲醇（80∶20）为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器进行全扫描和240 nm波长测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对四种目标分析物进行确证。结果显示,4种解热镇痛抗炎药物与其他物质峰分离良好,在测定范围内线性关系良好,平均回收率为73．5％～119．2％,RSD为0．1％～5．8％。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中非法添加四种解热镇痛抗炎药物的定性和定量检测。