江西省主要养鸡地区鸡传染性贫血病的血清学调查

为了研究江西省鸡传染性贫血的流行情况,对江西省11个地市主要养鸡地区的24个鸡群中鸡传染性贫血(CIA)的流行情况进行了调查。结果表明:在检测的460份血清样品中,鸡传染性贫血病毒(CIAV)ELISA抗体总阳性率为80.65%,蛋鸡群、肉鸡群和地方鸡群CIAV ELISA检测抗体阳性率分别为77.45%、84.03%和82.14%。说明目前江西省各地饲养的鸡群中CIAV感染相当普遍;各鸡场的感染率有较大差别,最低的抗体阳性率只有5%,最高的阳性率达100%,肉鸡、蛋鸡、地方鸡CIAV抗体的阳性率无明显差别。     

应用PCR从AA肉种鸡鸡胚和1日龄雏鸡体内检测出CIAV和ALV-J

为了了解鸡传染性贫血病病毒（CIAV）和J亚群禽白血病病毒（ALV-J）对AA肉种鸡鸡胚和1日龄雏鸡的感染情况,试验直接从山东省3个不同AA肉种鸡场的鸡胚和1日龄雏鸡的肝、脾、肾、胸腺、骨髓、法氏囊等组织（器官）提取DNA,进行了PCR扩增及PCR产物的克隆和序列测定。结果显示,被检的3个肉种鸡场的鸡胚和1日龄雏鸡体内均有这2种病毒核酸的检出,其中CIAV的阳性率是20.42%,ALV-J的阳性率是15.83%,二者共感染的阳性率是6.25%;在阳性检出率中弱雏〉死胚〉健康雏〉正常胚。病毒核酸在各感染组织（器官）的含量也有所差异,CIAV以脾的含量最多,ALV-J以肾的含量最多。对肝进行细菌分离鉴定时发现,3个鸡场还存在大肠杆菌、沙门氏菌和霉形体的混合感染。结果提示,在AA肉种鸡鸡胚和雏鸡体内存在CIAV、ALV-J的感染和二者的共感染以及继发性大肠杆菌、沙门氏菌和霉形体的混合感染。     

江苏省某鸡场CAstV、CIAV和REV感染情况的调查及分析

为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡的脏器,应用PCR和RT-PCR检测CAst V、CIAV和REV的单独感染以及混合感染情况。结果显示:1日龄雏鸡CAst V、CIAV、REV单独检出率分别为45%、37.5%和0%,其中CAst V和CIAV双重感染率为25%。表明该鸡场CAst V阳性率较高,提示养禽企业需增强对该病毒的关注。     

应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究

用鸡传染性贫血病病毒(CIAV)MSBI-TK5803毒株感染的MDCC-MSB_1细胞涂片为抗原,建立了检测CIAV抗体的间接免疫荧光法(HlF)。应用该HFA方法对人工感染的SPF鸡进行了检测15只1日龄SPF鸡在接种后第7、14天时均呈阴性反应,21天时2只鸡呈弱阳性反应,28天时均呈弱阳性反应,35天时呈明显阳性反应;14只40日龄SPF鸡在感染CIAV后第4天均呈阳性反应,6个月时检测仍呈阳性反应。对我国大连、沈阳和哈尔滨三地区部分鸡场鸡群进性CIAV抗体检测,结果表明我国鸡群中存在CIAV抗体。     

广西鸡传染性贫血流行病学的研究

应用PCR检测技术 ,对采自广西五个主要养鸡地区 5 0多个鸡群 3 2 1羽病鸡的组织样品 ,进行了鸡传染性贫血病毒核酸的检测。结果检测的病例平均阳性率为 2 8 3 4%;三黄鸡的阳性检出率最高 ( 3 9 2 8%) ;各种日龄的鸡均可检出 ,其中最小的为 7日龄、最大的为 3 5 0日龄 ;对 5个免疫器官的检测结果显示 ,骨髓的检出率最高( 84 3 8%) ;CIAV阳性病例中与MDV、REV和ALV的混合感染率共计 48 40 %。     

云南省禽流感、新城疫与3种免疫抑制性病原共感染的检测

为调查云南省禽流感病毒、新城疫病毒与免疫抑制性病毒混合感染的情况,对云南省2007年1月～2009年10月期间145份禽流感阳性及30份新城疫阳性样品进行禽网状内皮增生病病毒(REV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及鸡传染性贫血病毒(CIAV)的检测。禽流感阳性样品中ALV-J的感染阳性率为15.9%,REV的感染阳性率为22.8%,CIAV的感染阳性率为26.9%;新城疫阳性样品中ALV-J的感染阳性率为13.3%,REV的感染阳性率为23.3%,CIAV的感染阳性率为26.7%;共有30份样品发生多重感染,多重感染率为17.1%。对不同区域的4份禽白血病病毒阳性样品、10份禽网状内皮增生病病毒阳性样品、10份禽传染性贫血病毒阳性样品进行了序列比对和系统发育分析。结果表明,云南ALV-J毒株gp85基因与国内外毒株核苷酸及氨基酸同源性分别介于80.4%～96.7%、85.2%～94.5%;REV毒株env基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为98.8%～99.8%、97.7%～99.5%;CIAV毒株vp2基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为92.4%～100.0%、93.7%～100.0%。     

我国商业鸡群多种免疫抑制性病毒共感染的研究

在2000～2006年间通过对来自我国4个主要养鸡省区的193个商业鸡群共808只病/死鸡分别进行5种免疫抑制性病毒CIAV、IBDV、MDV、REV和ALV感染情况的调查,结果显示:CIAV、IBDV、MDV、ALV和REV的群阳性率和个体阳性率分别为65.56%和30.94%、49.14%和23.98%、35.63%和12.5%、12.22%和4.29%、12.22%和4.16%,其中被检鸡二重及多重混合感染的总阳性率为31.73%,最常见的共感染形式是MDV CIAV(阳性率为10.02%)和MDV ALV(阳性率为8.50%);7个不同品种鸡被各种病毒的感染率也不尽相同。结果证实,免疫抑制性病毒的感染在4个省区的商业鸡群中普遍存在。     

河北省蛋种鸡场鸡白痢流行情况调查

为了了解河北省蛋种鸡场鸡白痢沙门杆菌的感染情况,2013年8—11月份对河北省唐山、秦皇岛、保定、邢台、邯郸、石家庄6个地区共21个蛋种鸡场鸡白痢的感染状况进行了调查。结果表明:在21个蛋种鸡场中,有2个鸡场不进行鸡白痢的检测,所占比例为9.5%(2/21);100%检测的仅占23.8%(5/21);而66.7%(14/21)的种鸡场进行抽检(母鸡抽检5%~20%)。在进行检测的19个鸡场中,检测日龄不尽相同,首次检测日龄在70~140日龄之间,其中在130~140日龄进行首次检测的比例最高,占47.4%(9/19);19个种鸡场均有鸡白痢感染,其阳性率为0.01%~4.00%。     

我国部分地区蛋鸡群鸭源鸡杆菌血清流行病学调查

为了解鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)在我国部分地区鸡群中的感染状况,本实验采用G.anatis微量凝集试验对我国河南、山东和山西等不同地区的1 314份鸡血清样品进行了G.anatis感染的血清流行病学调查,对G.anatis的感染率、感染品种、日龄等进行分析。结果表明:我国河南、山东和山西等地鸡群均存在G.anatis感染,其中G.anatis血清Ⅰ型抗体阳性率为11.95%,G.anatis血清Ⅱ型抗体阳性率为23.29%,G.anatis血清Ⅳ型抗体阳性率为9.82%。不同省份的鸡群感染G.anatis的血清阳性率存在一定差异,河南、山东和山西的血清阳性率分别为23.12%、25.27%和52.94%。对河南地区不同品种和日龄鸡的调查表明,均存在不同程度的感染,但血清阳性率有显著差异,表现为罗曼鸡的血清阳性率比海兰鸡高,开产前蛋鸡的血清阳性率低于开产后的血清阳性率。     

我国部分地区祖代鸡群鸡传染性贫血的血清学调查与分析

为了解祖代鸡群中鸡传染性贫血病毒（CIAV）的感染情况，研究采集18个省（市）未免疫CIAV疫苗的44个祖代种鸡场4 847份血清样品，采用ELISA方法对CIAV抗体进行检测，通过比较群间、空间、阳性场的抗体滴度，解析祖代鸡群CIAV感染状况。结果显示：祖代鸡群中CIAV感染较普遍，场阳性率为97.7%，个体阳性率为66.0%；不同生产用途、来源的种鸡群均有感染，且分布范围广泛；43个抗体阳性场中，有1个种鸡场抗体滴度高且变异系数小，42个种鸡场抗体滴度低或抗体滴度较高但离散程度大，有发生垂直传播的风险。结果表明，我国祖代鸡群中CIAV抗体阳性率较高，存在向父母代场垂直传播CIAV的风险。     

Serologic evidence of chicken infectious anemia in commercial chicken flocks in southwest Nigeria

Sera samples from seven poultry farms in southwest Nigeria consisting of 7 broiler, 10 pullet, 1 layer, 1 cockerel, and 1 broiler breeder flocks were tested for the presence of chicken infectious anemia virus (CIAV) antibodies using a commercial enzyme-linked immunosorbent assay kit. Eleven of the 20 flocks (55%) and six out of seven (86%) farms were positive for CIAV antibodies. The seroprevalence largely depended on the age of the flocks. Seroprevalence was higher within the older pullet and layer flocks (83%-100%) than in the younger broiler flocks (0%-83%). In essence, all flocks older than 6 to 8 wk became infected. This is the first report of serologic evidence of CIAV in Subsaharan Africa. Since Southwest Nigeria is the main port of entry of imported chicken and the hub of major poultry breeders, the disease can probably be found throughout the country and beyond. Further studies are necessary to assess economic losses due to CIAV and the cost benefit of countermeasures.     

AA肉鸡群中免疫抑制性病毒分子流行病学调查及对疫苗免疫效果影响分析

为了解AA肉种鸡群中免疫抑制性病毒的存在状况及其对NDV疫苗免疫效果和对商品鸡生长的影响,采用多重PCR、RT-PCR和血清学方法对山东某规模化大型AA父母代肉种鸡场的28日龄、180日龄左右种鸡及其所生产的1日龄、30日龄左右商品鸡进行IBDV、MDV、ALV、REV、CIAV及REOV感染状况的调查,并同时对鸡群NDV免疫后抗体水平进行跟踪监测.结果表明种鸡和商品鸡均存在CIAV的感染,并不同程度地存在CIAV与MDV、IBDV等的共感染;发病鸡群NDV抗体水平明显偏低的原因是由于鸡群感染免疫抑制性病毒所致;种鸡群感染CIAV并垂直传播给商品鸡,间接引起商品鸡发生免疫抑制性病毒的共感染,导致商品鸡群30日龄左右生长受阻、免疫能力降低、疾病爆发.     

安徽省禽白血病感染的血清学调查及gp85基因的扩增

随机抽取安徽省3个肉种鸡场种鸡及3个地市农贸市场商品鸡的血清样本和泄殖腔拭子,采用ELISA进行鸡白血病检测,并对J亚群鸡白血病病毒抗体阳性鸡群中病鸡的肝组织、全血及上毒细胞提取DNA进行PCR扩增和基因测序。检测结果表明,3个肉种鸡场中J亚群鸡白血病抗体阳性检出率分别为：0、73.50%和15.22%;3个农贸市场商品鸡抗体阳性检出率分别为：12.00%、2.22%和9.10%。3个肉种鸡场A、B亚群鸡白血病的抗体阳性率分别为0、17.93%和1.08%,ALV抗原阳性率分别为2.17%、17.93%和15.22%。PCR检测结果表明,从可疑发病鸡的肝组织和全血中均能扩增出ALV-J gp85特异性片段。结果证实安徽省鸡群中有ALV-J感染,并呈不同程度的流行,应引起高度重视。     

Detection of chicken anemia virus DNA in embryonal tissues and eggshell membranes

Chicken infectious anemia virus (CIAV) is a ubiquitous and highly resistant virus of chickens that causes anemia and death in chicks less than 3 wk of age and immunosuppression in chickens older than 3 wk of age. The production of specific-pathogen-free eggs free of CIAV is essential for research and vaccine production. Currently, flocks are screened for CIAV by antibody tests to ensure freedom from CIAV infection. Recent evidence, however, indicates that chickens may carry and vertically transmit CIAV DNA independently of their antibody status. In this study, we tested embryos and eggshell membrane residues by nested polymerase chain reaction (PCR) as a sensitive method of detecting CIAV DNA. CIAV DNA could be detected in the blastodisks and semen obtained from antibody-positive and -negative chickens. Examination of different tissues between 18 and 20 days of incubation indicated that many but not all organs of individual embryos were positive. The lymphoid organs and gonads had the highest incidence of CIAV DNA, which was significantly different (P < 0.05) from the incidence in the liver. Eggshell membrane samples from embryos or newly hatched chicks were an excellent noninvasive source for the detection of CIAV DNA, identifying significantly more positive embryos than did pooled lymphoid organs. The use of dexamethasone injections as a method to improve the detection of carrier birds did not result in an increase of vertical transmission or cause seroconversion in the treated hens. A combination of testing eggshell membrane residues at hatch and periodic testing of blood DNA by nested PCR can be used to identify chickens carrying CIAV DNA and may be used to eradicate carrier birds.     

3株鸡传染性贫血病毒的全基因组序列分析

通过对3株鸡传染性贫血病毒(CIAV)的全基因组序列比较分析,部分表明广西南宁鸡群CIAV毒株的遗传变异特征。将阳性CIAV的组织样品进行DNA抽提后,运用PCR方法分段扩增CIAV的全基因组,将获得的PCR产物进行基因克隆并进行阳性克隆菌鉴定后送测序。将所获得的基因序列进行拼接成CIAV基因组全长后,应用LaserGene7.1和MEGA4.1软件对CIAV全基因、Viral protein 3(VP3)、Viral protein 1(VP1)和Viral protein 2(VP2)基因序列进行核苷酸、氨基酸同源性分析和遗传进化分析;并对VP1、VP2和VP3蛋白上与毒力、蛋白磷酸酶活性和细胞凋亡相关的氨基酸位点进行分析。结果获得3株CIAV的全基因序列,分别命名为GX1801、GX1804和GX1810;CIAV全基因遗传进化分析表明GX1801、GX1804和GX1810均同属于Group A群,与国内强毒株GD-103和GD-104毒株的亲缘关系较近;基于VP1基因构建的遗传进化树与全基因构建的进化树最相似;GX1801、GX1804和GX1810 VP1蛋白上与毒力相关位点的第75、89、125、141、144、394位氨基酸位点与日本强毒株C368株、国内强毒株GD-103和GD-104株在同一位点保持一致;GX1801、GX1804和GX1810 VP2蛋白上与磷酸酶活性相关的基序(I^94CNCGQFRKH^103)均未发生变异;GX1801、GX1804和GX1810 VP3蛋白与诱导细胞凋亡相关的重要区域(VP3蛋白N端结构域的第1~69位氨基酸)均高度保守。本研究对3株CIAV全基因组进行测定并进行基因分析,获得了其基因组特征,为进一步研究广西CIAV的分子流行和致病性提供参考。     

鸡传染性贫血病毒与禽网状内皮增生症病毒二重PCR检测方法的建立

当前养鸡业中鸡传染性贫血病毒、禽网状内皮增生症病毒混合感染的发生率日益增高,为提高CIAV、REV检测效率,根据GenBank上登录的CIAV全基因序列和REV的LTR序列分别设计了2对引物,建立了REV、CIAV二重PCR检测方法,另外还比较了2种不同的DNA提取方法。结果显示,该方法扩增目的条带清晰、敏感性高、特异性好。应用建立的方法对临床7份病料样品检测,检出5份CIAV、REV阳性,表明建立的二重PCR方法能有效用于CIAV、REV混合感染的临床诊断。     

鸡传染性贫血病毒与其他禽免疫抑制性疾病病毒的混合感染

应用多重PCR方法对广西主要养鸡地区的514只可疑鸡传染性贫血与其他禽免疫抑制性疾病临床病／死鸡进行了检测。结果显示，鸡传染性贫血病毒（CIAV）与其他禽免疫抑制性疾病病毒的二重或多重感染率达48．05％；CIAV阳性鸡群中，马立克氏病病毒（MDV）、网状内皮增生症病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）的群阳性率和个体阳性率均明显高于CIAV阴性鸡群，表明CIAV的感染与3种肿瘤病病毒的感染具有明显相关性，其中CIAV与MDV的感染具有明显相互促进作用；被调查鸡群中，传染性法氏囊病病毒（IBDV）和禽呼肠孤病毒（ARV）也有一定的感染率。结果表明,商业鸡群中各种免疫抑制性病毒的混合感染很普遍．与鸡群临床上所表现的生长阻滞、疫苗免疫效果不佳、总的发病率和死淘率增加等密切相关。     

用ELISA对种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体调查

为了调查种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体 ,从北京、山东、内蒙古地区共 4个种鸡场购买种蛋抽取蛋清共 55份 ,其中肉鸡种蛋清3 8份 ,蛋鸡种蛋清 1 7份 ,在 AL V-Jgp85抗原包被的 96孔板中进行微量滴定 ,两个肉鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 .3 3 % (1 /3 0 ) ,2 5% (2 / 8) ,两个蛋鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 3 .3 % (3 / 9) ,3 7.5% (3 / 8)。