云南2008～2009年H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因序列分析

禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是病毒粒子表面抗原,是亚型划分的重要依据。从云南分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经RT-PCR分别扩增云南毒株10个HA和9个NA基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:云南H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为95.0%～99.7%;NA基因核苷酸序列同源性为86.2%～99.6%。在进化分枝中HA基因均属于欧亚分枝的类CBJ194亚分枝,与CBJ194的核苷酸序列同源性为92.0%～99.1%,NA基因属于CK/BJ/1/94和QaHKG1/97两个分枝。云南毒株HA裂解位点结构具有低致病性病毒分子特征;HA受体结合位点143、145、198和234位氨基酸存在变异,尤其234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性。NA糖基化位点61～63、86～88部分毒株存在缺失,部分毒株在143～145位出现新的糖基化位点。     

云南高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因变异分析

采用RT-PCR技术对云南2007年采集的48份猪组织样品中病毒Nsp2基因进行检测,获得阳性样品14份,选择5份代表性样品将其PCR产物纯化后,克隆至pMD18-T载体测序,并与已知代表性毒株进行比较及系统发育分析。结果发现云南病毒样品Nsp2基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为95．8％～99．0％和92．3％～98．6％。5份样品病毒Nsp2蛋白482位、534位～562位氨基酸均存在缺失,其中1份样品（YNMG）486位～489位氨基酸也发生了缺失。云南病毒样品在系统发育树上可划分为4个亚组群,分别与广东、广西、贵州、浙江、江苏、山东毒株遗传关系密切。     

苯甲酸对断奶仔猪生长性能的影响

选择90头PIC21日龄的断奶仔猪,按体重相近原则随机分为1个对照组(基础日粮)和2个试验组。试验组Ⅰ在基础日粮中添加5kg/t的苯甲酸;试验组Ⅱ在基础日粮中添加10kg/t的苯甲酸,每个处理2个重复(♀和♂各一栏),每个重复15头,试验期为14d。研究结果表明,试验组和对照组的平均日采食量分别为0.299kg、0.328kg和0.297kg;平均日增重分别为0.201kg、0.221kg和0.197kg;平均料肉比分别为1.46、1.48和1.51。2个试验组的平均日增重和平均采食量均比对照组高,平均料肉比均略低于对照组,但各组之间差异均不显著(P>0.05)。     

新城疫病毒云南分离株F基因变异特性分析

采用RT-PCR技术对云南2007年-2009年采集的948份喉气管拭子或组织样品中新城疫病毒F基因进行检测,获得阳性样品65份,选择30份代表性阳性样品采用特异性引物经RT-PCR扩增F基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明,新城疫病毒云南分离株F基因核苷酸与疫苗LaSota株之间的同源性为70.5%～99.8%,与F48E9株之间的同源性为70.7%～90.8%。系统发育分析表明,30株病毒中21株属于基因型Ⅶ,裂解位点氨基酸为R-R-Q-K-R-F,与传统认为强毒裂解位点氨基酸序列相同;7株属于基因型Ⅱ,5株裂解位点氨基酸为G-R-Q-G-R-L,属于弱毒株裂解位点氨基酸排列特征,2株裂解位点氨基酸为R-R-Q-K-R-F属于强毒裂解位点氨基酸序列;2株病毒与9个基因型的同源性差异较远。     

云南地区马流感病毒检测及其HA基因序列分析

马流感能引起马属动物的高度接触性呼吸道传染病。该病毒已知仅存在H7N7(马流感病毒1型)、H3N8(马流感病毒2型)两个亚型,目前仅H3N8亚型毒株在全球范围内引起马流感流行和暴发。采用A型及H3亚型特异性RT-PCR技术,检测云南疑似马流感病例鼻腔棉拭子样品;HA基因PCR扩增产物经纯化后,克隆至pMD18-T载体进行测序,并与已知代表性毒株对应序列进行比对及系统发育分析。研究发现云南马流感病毒与已知代表毒株血凝素基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别介于91.2%~99.2%和89.5%~98.4%,属于美洲谱系(American lineage)佛罗里达亚谱系(Florida sub-lineage)毒株。     

乳化脂肪粉对断奶仔猪生长性能的影响

试验旨在研究乳化脂肪粉对断奶仔猪生长性能的影响。选择21日龄的断奶仔猪,按体重相近原则随机分栏成为两个对照组(基础日粮)和一个试验组:试验组在基础日粮中添加20 kg/t的乳化脂肪粉,每个处理2个重复(♀和♂各一栏),每个重复15头,试验期为10 d。研究结果表明:试验组和对照组的平均日采食量分别为0.239 kg、0.257 kg和0.240 kg;平均日增重分别为0.144 kg、0.129 kg和0.131 kg;平均料肉比分别为1.66、1.99和1.80。试验组的平均日采食量和平均料肉比均比两个对照组的低,而试验组的平均日增重比两个对照组高。研究结果表明:在本次试验中,乳化脂肪粉可以增加断奶仔猪的日增重、降低料肉比、提高饲料利用率,乳化脂肪粉对断奶仔猪的生长性能可以产生正面影响。     

微卫星DNA的研究进展及其在寄生虫学的应用

微卫星DNA是广泛存在于原核生物和真核生物基因组中的短串联重复序列,具有快速突变性、多态性信息丰富、易于检测等特点.在动植物遗传育种、遗传图谱的构建、群体遗传学研究、肿瘤学、亲子鉴定、濒危野生动物保护及法医鉴定等方面的研究中被广泛应用.论文综述了微卫星DNA技术的研究进展及其在寄生虫学中的应用.     

免疫学与分子生物学技术在弓形虫病诊断中的研究进展

弓形虫病是一种呈世界性分布、危害严重的人兽共患寄生原虫病。弓形虫病给养殖业、公共卫生及经济发展带来严重危害。目前在国内还尚未有弓形虫相关疫苗。弓形虫感染的常用诊断方法包括临床诊断、病原学检查和血清学诊断等方法。但由于传统检测方法在特异性、敏感性和早期诊断方面存在一定的缺陷。因此,建立简便、快捷、敏感、特异的弓形虫病的检测方法对于检测弓形虫的感染显得尤为重要。论文主要从免疫学和分子生物学方面对该病的诊断和应用做一简要介绍。     

云南省禽流感、新城疫与3种免疫抑制性病原共感染的检测

为调查云南省禽流感病毒、新城疫病毒与免疫抑制性病毒混合感染的情况,对云南省2007年1月～2009年10月期间145份禽流感阳性及30份新城疫阳性样品进行禽网状内皮增生病病毒(REV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及鸡传染性贫血病毒(CIAV)的检测。禽流感阳性样品中ALV-J的感染阳性率为15.9%,REV的感染阳性率为22.8%,CIAV的感染阳性率为26.9%;新城疫阳性样品中ALV-J的感染阳性率为13.3%,REV的感染阳性率为23.3%,CIAV的感染阳性率为26.7%;共有30份样品发生多重感染,多重感染率为17.1%。对不同区域的4份禽白血病病毒阳性样品、10份禽网状内皮增生病病毒阳性样品、10份禽传染性贫血病毒阳性样品进行了序列比对和系统发育分析。结果表明,云南ALV-J毒株gp85基因与国内外毒株核苷酸及氨基酸同源性分别介于80.4%～96.7%、85.2%～94.5%;REV毒株env基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为98.8%～99.8%、97.7%～99.5%;CIAV毒株vp2基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为92.4%～100.0%、93.7%～100.0%。     

机械式圆榫棒装榫机研制

介绍了机械式装榫机的设计,阐述了装榫机刷胶装置、圆榫棒排序、码放装置和装榫定位、顶推装置的构造和功能。利用装榫机代替人工装配圆榫棒,可大大提高生产效率。