兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测

2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。     

鸡奇异变形杆菌的分离、鉴定及流行病学调查

从山东省某一地区发病肉鸡中分离到一株细菌,根据培养特性、形态学特性、生化特性及药物敏感性等鉴定所分离的菌株为奇异变形杆菌。采用自行研制的奇异变形杆菌诊断抗原,通过平板凝集试验对河南、山东、广西等省(自治区)共26个鸡场的739份血清样品进行了奇异变形杆菌病的血清学调查。结果表明70日龄以下商品代和父母代肉鸡抗体阳性率较低(6.85%),70日龄以上父母代肉种鸡阳性率较高(20.10%)。回归分析表明,鸡奇异变形杆菌抗体阳性率与日龄呈显著正相关(r=0.954)。     

鸡奇异变形杆菌的分离、鉴定及流行病学调查

从山东省某一地区发病肉鸡中分离到一株细菌，根据培养特性、形态学特性、生化特性及药物敏感性等鉴定所分离的菌株为奇异变形杆菌。采用自行研制的奇异变形杆菌诊断抗原，通过平板凝集试验对河南、山东、广西等省（自治区）共26个鸡场的739份血清样品进行了奇异变形杆菌病的血清学调查。结果表明70日龄以下商品代和父母代肉鸡抗体阳性率较低（6．85％），70日龄以上父母代肉种鸡阳性率较高（20．10％）。回归分析表明，鸡奇异变形杆菌抗体阳性率与日龄呈显著正相关（r=0．954）。     

兔肠道组织提取物与抗生素抗菌活性的比较研究

将新鲜兔小肠组织匀浆机匀浆,经高温处理,乙酸浸提后,检测抗菌活性,收集具有抗菌活性的兔肠道组织提取物,采用琼脂糖弥散试验,使用兔肠道组织提取物和常见抗生素(青霉素、红霉素、环丙沙星、庆大霉素、丁胺卡那霉素、磺胺甲噁唑)分别对大肠杆菌8099株、金黄色葡萄球菌ATCC6538株、绿脓杆菌ATCC9027株、白色葡萄球菌8032株作抑菌对比试验。试验结果表明:兔肠道组织提取物的抗菌活性普遍介于浓度为5万U/mL与10万U/mL青霉素之间、25 mg/mL与50 mg/mL的红霉素之间、3.12与6.25 mg/mL环丙沙星之间、1.25与2.5 mg/mL丁胺卡那霉素之间、1875 U/mL与3750 U/mL的庆大霉素之间;兔肠道组织提取物的抗菌活性强于或等效于50 mg/mL复方磺胺甲噁唑。结果表明,使用兔肠道组织提取物替代抗生素治疗某些细菌性疾病是可能的,初步显示了它在抗菌药物方面的应用前景。     

犬重症急性胰腺炎的诊疗

急性胰腺炎（AP）是指胰酶在胰腺内被提前激活后引起胰腺组织自身消化的化学性炎症，根据病变程度及对机体的损伤程度又分为急性间质性胰腺炎（轻症急性胰腺炎MAP）和急性坏死性胰腺炎（重症急性胰腺炎SAP）。MAP因其病变范围局限，临床症状不明显，     

犬重症急性胰腺炎的诊疗

急性胰腺炎(AP)是指胰酶在胰腺内被提前激活后引起胰腺组织自身消化的化学性炎症,根据病变程度及对机体的损伤程度又分为急性间质性胰腺炎(轻症急性胰腺炎MAP)和急性坏死性胰腺炎(重症急性胰腺炎SAP)。MAP因其病变范围局限,临床症状不明显,有些甚至仅仅通过饮食调整就可以达到自愈的目的;SAP因其病变波及范围广,并发症多,容易发展为全身炎     

禽波氏杆菌分离株的16S rRNA基因序列分析

采用PCR方法对本实验室分离保存的10株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株,扩增其16SrRNA基因的5′端片段（783bp）,并测定所得片段的DNA序列。用DNAStar分析软件将所获得的序列与GenBank中的禽波氏杆菌序列进行比较,由此构建禽波氏杆菌菌株的系统发育树。结果显示,10株禽波氏杆菌核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列的同源性为82.0%～82.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌核苷酸序列的同源性均为99.2%～99.9%,其中P9（山鸡波氏杆菌）、P11（兔支气管败血波氏杆菌）与P14（猪支气管败血波氏杆菌）分别发生1个核苷酸的缺失。本试验结果表明,16SrRNA序列分析是鉴定禽波氏杆菌的一种快速而准确的方法。     

AA肉鸡群中免疫抑制性病毒分子流行病学调查及对疫苗免疫效果影响分析

为了解AA肉种鸡群中免疫抑制性病毒的存在状况及其对NDV疫苗免疫效果和对商品鸡生长的影响,采用多重PCR、RT-PCR和血清学方法对山东某规模化大型AA父母代肉种鸡场的28日龄、180日龄左右种鸡及其所生产的1日龄、30日龄左右商品鸡进行IBDV、MDV、ALV、REV、CIAV及REOV感染状况的调查,并同时对鸡群NDV免疫后抗体水平进行跟踪监测.结果表明种鸡和商品鸡均存在CIAV的感染,并不同程度地存在CIAV与MDV、IBDV等的共感染;发病鸡群NDV抗体水平明显偏低的原因是由于鸡群感染免疫抑制性病毒所致;种鸡群感染CIAV并垂直传播给商品鸡,间接引起商品鸡发生免疫抑制性病毒的共感染,导致商品鸡群30日龄左右生长受阻、免疫能力降低、疾病爆发.     

AA肉种鸡胚胎性疾病的病原学研究及主要病原的PCR 检测

2004年6月份以来，山东某一大型AA父母代肉种鸡场孵化场出现胚胎死亡、弱雏增多、孵出的雏鸡30日龄左右免疫应答不良、生长缓慢等症状。为了探明其病因，作者通过流行病学调查和病原学检查，结果表明造成该病的主要原因是由禽波氏杆菌(Bordetella avium)、沙门氏菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)、支原体(滑液囊和鸡败血支原体)及鸡传染性贫血病病毒（CIAV）和病毒性关节炎病毒（VAV）共感染种鸡后，由种蛋垂直传播到鸡胚、雏鸡造成的。同时对其主要病原禽波氏杆菌进行了16S rRNA基因的扩增，结果扩增出783 bp的目的条带; 通过PCR对CIAV VP3基因及VAV S1基因进行扩增，结果分别扩增出582和532 bp的目的条带，其PCR产物均分别能与相应的探针杂交，呈现阳性反应。