鸡奇异变形杆菌的分离、鉴定及流行病学调查

从山东省某一地区发病肉鸡中分离到一株细菌，根据培养特性、形态学特性、生化特性及药物敏感性等鉴定所分离的菌株为奇异变形杆菌。采用自行研制的奇异变形杆菌诊断抗原，通过平板凝集试验对河南、山东、广西等省（自治区）共26个鸡场的739份血清样品进行了奇异变形杆菌病的血清学调查。结果表明70日龄以下商品代和父母代肉鸡抗体阳性率较低（6．85％），70日龄以上父母代肉种鸡阳性率较高（20．10％）。回归分析表明，鸡奇异变形杆菌抗体阳性率与日龄呈显著正相关（r=0．954）。     

蛋鸡父母代群开展禽白血病净化检测的效果评估

通过对徐州市某蛋鸡父母代群禽白血病(AL)感染情况调查,参考国际通用及国内学者提出的AL净化方案,结合该场实际,开展AL净化检测效果评估。对照试验结果:经AL净化鸡群的p27抗原阳性率(2.4%)、ALV-A/B抗体阳性率(1.9%)、ALV-J抗体阳性率(2.1%),远低于未经AL净化鸡群的p27抗原阳性率(16.4%)、ALV-A/B抗体阳性率(11.4%)、ALV-J抗体阳性率(13.8%);同时,对父母代鸡群所产商品代雏鸡带毒情况检测,经净化的父母代鸡群所产商品代鸡1、40日龄p27抗原阳性率分别为1.3%、3.1%,也远低于未经净化的父母代鸡群所产商品代鸡1、40日龄p27抗原阳性率的13.7%、18.2%。以上结果表明,该场禽白血病净化取得了一定成效。     

我国部分地区禽波氏杆菌病的血清学调查

对广西、河南、山东3省份17个鸡场的746份血清样品进行了禽波氏杆菌(Bordetella avium)病的血清学调查。结果表明，该病在我国部分地区普遍存在，70日龄以下商品代和父母代肉鸡血清样品的禽波氏杆菌抗体阳性率较低(平均5．96％)；70日龄以上肉种鸡血清样品的阳性检出率较高(平均50．00％)，其中广西鸡场的阳性检出率为26．32％(65／247)，河南鸡场的阳性检出率为76．76％(109／142)，山东鸡场的阳性检出率为87．27％(48／55)。回归分析表明，禽波氏杆菌抗体阳性率与日龄呈显著正相关(r=0．928)。     

牛病毒性腹泻病毒、大肠杆菌和奇异变形杆菌混合感染致犊牛腹泻的研究

为确定甘肃省临夏州某奶牛场犊牛腹泻的病因,并提供合适的治疗方案和防控措施,试验采集该牛场13头腹泻犊牛的粪便和血清,通过胶体金技术、ELISA方法、细菌分离鉴定、Kirby-Bauer法分别进行病毒病原学检测、病毒血清学抗体检测、病原菌鉴定和药物敏感性试验。病毒学检测结果显示,13份粪样中未检测出牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCV)的抗原,牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原阳性率为23.08%(3/13);未检出BRV和BCV的抗体,BVDV血清学抗体阳性率为38.46%(5/13)。病原菌检测结果显示,13份粪便样品中,分离出13株大肠杆菌和7株奇异变形杆菌。药敏试验表明,分离的大肠杆菌和奇异变形杆菌对20种常规药物均产生了不同程度的耐药,且无对两种细菌均有效的药物。此次犊牛腹泻是由BVDV、大肠杆菌、奇异变形杆菌混合感染引起的,且大肠杆菌和奇异变形杆菌的耐药现象严重,本试验结果为该牛场进一步治疗此次的犊牛腹泻病提供了合理有效的依据。     

肉鸡H5、H7亚型禽流感病毒母源抗体消长规律及其对禽流感疫苗接种的影响

为了规范罗斯308肉鸡H5亚型和H7亚型禽流感疫苗免疫程序的制定,研究对不同免疫程序的商品肉鸡进行了血清学调查。结果表明:非免疫肉鸡的H5亚型(Re-8)和H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率均随日龄增长而逐渐下降,两种母源抗体的保护时间均较短。接种H5+H7二价禽流感灭活疫苗前肉鸡的这两种母源抗体阳性率均在70%以上,平均滴度均≥4 log2;接种后各监测时间的两种禽流感抗体阳性率均在70%以下,抗体平均滴度均4 log2,但接种疫苗肉鸡抗体保护时间比不接种肉鸡保护时间长。提示部分商品肉鸡饲养后期存在被H5亚型和H7亚型禽流感病毒感染的风险。     

断奶腹泻仔猪肠道沙门菌与奇异变形杆菌的分离鉴定

本试验收集了全国范围内23个猪场125份21~70日龄临床腹泻仔猪肠内容物样品,用以分离和鉴定沙门菌和奇异变形杆菌。结果显示:共分离得到23株沙门菌分离株及31株奇异变形杆菌分离株,其中较为流行的沙门菌为鼠伤寒沙门菌。同时,对SS琼脂和XLD琼脂上的沙门菌和奇异变形杆菌进行对比鉴定,提高了沙门菌和奇异变形杆菌分离鉴定的准确率。     

病猪中奇异变形杆菌的分离鉴定

国外学者陆续发现了变形杆菌能感染多种动物,在国内,叶树株(1991)首次报道了变形杆菌可引起猪发病。我们从5月龄病死猪的脏器中分离出两株奇异变形杆菌,并对其形态特征、培养特性、生化特性及致病性等方面进行了较详细的观察。现将试验结果报告如下。     

福建省规模化鸡场禽偏肺病毒感染情况的血清学调查

禽偏肺病毒(aMPV)是一种危害火鸡和鸡的新病原,为调查福建省规模化鸡场aMPV的感染情况,从福州市、莆田市、泉州市、漳州市、龙岩市和南平市18个规模化鸡场采集1 020份血样,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行aMPV抗体检测。结果表明,所调查地区的鸡群均已感染aMPV,抗体平均阳性率为62.2%(634/1 020),最高100%,最低为32.0%;蛋鸡和肉鸡均可感染aMPV,蛋鸡的抗体阳性率略低于肉鸡;商品代鸡群的抗体阳性率高于父母代;京红、海兰蛋鸡和本地鸡均可感染aMPV,其中本地鸡1的抗体滴度最高;aMPV抗体的log10滴度和抗体阳性率随着鸡群周龄的增长而逐渐升高。研究表明,所调查的福建规模化鸡场鸡群已经普遍感染aMPV,且感染较严重。     

鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性研究

为了考察奇异变形杆菌的耐药情况,试验定点采集养殖场肉鸡泄殖腔棉拭子1 829份,经分离、纯化、鉴定获得奇异变形杆菌67株,分离率为3.66%;并用11种抗生素对67株奇异变形杆菌进行药敏试验。结果表明:该地区鸡源奇异变形杆菌对11种抗生素的耐药性普遍偏高,平均耐药率达到80.00%以上的药物有黏杆菌素E、氟苯尼考、磺胺异唑、恩诺沙星、复方新诺明、氨苄西林、多西环素、大观霉素和四环素9种药物,对庆大霉素的耐药率为62.69%,对头孢噻呋耐药率为0。说明奇异变形杆菌在肉鸡养殖场具有较高的分离率,是兽医临床需要重点监控的致病菌之一。     

四川部分猪场猪弓形体病的血清学调查

为了解四川部分猪场猪弓形体的感染情况,随机采集365份不同日龄猪血样,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗体水平检测。结果表明,受检的365份血清样本,检出猪弓形体抗体165份,阳性率为45.21%,其中37日龄猪、60～70日龄猪、产仔母猪的阳性率分别为26.08%、26.67%、95.00%。表明猪场不同日龄的猪都有一定程度的弓形体感染,而母猪的感染率最高。     

1株番鸭源奇异变形杆菌的分离鉴定及其毒力基因分析

为查清引起滁州地区某养殖场雏番鸭死亡原因,本研究通过对分离细菌的鉴定和动物致病性试验,确定奇异变形杆菌是引起此次雏番鸭发病的病原体,并将分离的奇异变形杆菌命名为AHcz-1株.根据其16S rRNA基因序列,建立其遗传进化树;根据已报道的8个毒力基因ureC、zapA、mrpA、ucaA、rsbA、pmfA、atfA、atfC序列,设计引物进行PCR扩增,并对毒力基因进行序列分析.结果显示:AHcz-1株与日本株(AB932526.1)亲缘关系最近,同源性高达100%;毒力基因pmfA、atfA、ureC均未发生变异;AHcz-1株具有较强的致病性;致病菌对丁胺卡那高度敏感,对庆大霉素、恩诺沙星中度敏感,对其它17种抗生素不敏感,表明AHcz-1株具有多重耐药性.本研究为番鸭源奇异变形杆菌临床诊断、临床用药及遗传变异研究奠定了基础.     

一株猪源奇异变形杆菌的分离鉴定

试验通过对阿克苏某生猪养殖场腹泻仔猪肛拭子进行病原分离,并成功分离到一株细菌。细菌纯化后通过革兰氏染色观察其形态结构,并提取其DNA测序。分离菌株得到的基因序列标记为W1,通过DNA star生物软件将菌株W1与国内外菌株进行基因序列对比,并做同源性和进化树分析。结果表明:W1与国内外15株奇异变形杆菌的同源性为96.4%~99.4%,其中与W1同源性最低的是KT216564,与W1同源性最高的是AB272366。遗传进化树分析表明,分离株W1与南京株JF775415处于同一分支,属于奇异变形杆菌,该菌株的成功分离为阿克苏地区对奇异变形杆菌的研究提供参考。     

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及集群运动分析

本试验从发病猪肝脏中分离到1株细菌,经革兰氏染色镜检、生化试验、药敏分析、16S rDNA测序,确认该菌为1株多重耐药奇异变形杆菌。该菌与GenBank中其他9株不同来源的奇异变形杆菌进行16S rDNA比对分析,从遗传进化规律方面证明不同来源的的奇异变形杆菌亲缘性极其相近。周期性群集运动分析结果表明在含0.5%和1.0%琼脂平板上,该菌不以圆环样周期运动;在含1.5%和2.0%琼脂平板上,该菌以圆环样周期运动。     

一株能拮抗3种土传病害病原真菌的长枝木霉

为了丰富生防木霉菌(Trichodermaspp.)种资源,在园林植物八宝景天(Sedum spectabile)根际土壤中分离得到一株优势木霉。根据该菌株菌落的形态特征、形态学显微观察、菌株rDNA-ITS序列分析以及邻接法同源性比对等结果判定木霉菌株种类。采用平板对峙法将该菌株与3种土传病害病原菌[(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和细链格孢菌(Alternaria alternata)]进行对峙培养。并用该木霉诱导山新杨(Populus davidiana×P.albavar.Pyramidalis)组培苗,观察离体叶片抵抗细链格孢菌侵染的能力。结果表明,此木霉为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum),命名为Tl-70。该菌株对3种土传病害病原真菌均有较明显的拮抗作用。对核盘菌的抑菌率最高为77.71%,显著高于对细链格孢菌和立枯丝核菌的抑制率(P0.05);对立枯丝核菌的抑菌率为58.56%,显著高于对细链格孢菌的抑制率(P0.05);对细链格孢菌的抑菌率最低,为53.32%。并且,该木霉能提高山新杨组培苗叶片拮抗细链格孢菌侵染的能力。说明此菌株是具有潜力的生防菌株。     

兔奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解拉萨市一种兔场种兔腹泻死亡的病因,本试验从一只种兔的肠道内容物中分离出一株细菌,通过革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA PCR扩增和序列比对、动物回归试验及药敏试验进行了分析。结果显示,分离菌株为单个或成对的短杆状的革兰氏阴性菌;分离菌与GenBank中奇异变形杆菌的同源性为73.5%～99.8%,采用Mega 7.0软件将分离菌株与11株参考菌株的16S rRNA序列进行同源性比对分析,并构建系统进化树,综合分析后确定分离菌株为奇异变形杆菌,命名为T2018。在动物回归试验中有3只试验兔出现了腹泻,但均未死亡,剖检结果显示,空肠、回肠肠壁薄而透明,内有半透明胶冻样物;结肠和盲肠黏膜充血,浆膜上有出血斑点。药敏试验显示,分离菌株仅对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素和喹诺酮类的氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星5种抗菌药表现出高度敏感,对哌拉西林表现为中介,对其他24种抗生素均表现为耐药。上述结果表明该种兔场种兔腹泻死亡的病原为奇异变形杆菌。     

山东规模化养殖场毛皮动物多重感染病原学分析

2012—2013年间,山东10个地市多家毛皮动物养殖场养殖的毛皮动物（狐狸、貉子、水貂）出现腹泻,皮肤湿疹,神经症状,空怀、流产、出血性肺炎等症状和病变类似的疫情,为探明其病因,本研究对发病规模化毛皮动物养殖场发病情况进行调查,并对送检的病料进行病原学检查,结果发现,犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒感染率分别为54.21%、47.30%、31.35%;肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌、大肠杆菌、沙门杆菌、绿脓杆菌、加德纳菌的感染率分别为37.58%、25.05%、21.81%、14.04%、12.53%、10.37%、8.21%;犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌6种病原的单独感染、二重感染、三重感染、四重感染分别为22.03%、39.52%、36.07%、2.38%,未见五重以上的感染。结果表明,近两年造成山东规模化场毛皮动物发病主要原因是由犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒与肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、肺炎双球菌多重感染所致,这为规模化毛皮动物养殖场有效地控制疫病提供了理论依据。     

Evaluation of a method using Proteus mirabilis and Pseudomonas aeruginosa to experimentally induce dual infection of the urinary bladder in dogs

OBJECTIVE: To evaluate a method using Proteus mirabilis and Pseudomonas aeruginosa to experimentally induce dual infection of the urinary bladder in dogs. ANIMALS: 6 healthy mixed-breed dogs. PROCEDURE: Dogs were anesthetized, and cystitis was induced by infusing a solution of salicylic acid in ethanol into the bladder, followed by an inoculum containing field isolates of P. mirabilis and P. aeruginosa. Dogs were examined daily for 21 days after induction of cystitis. On day 21, dogs were euthanatized, and urinary bladder, renal pelvis, and prostate specimens were submitted for bacterial culture. RESULTS: After induction of cystitis, all dogs had evidence of thickening of the bladder wall, dysuria, tenesmus, and hematuria. Urinalysis revealed proteinuria, hematuria, and pyuria. All urine samples obtained on day 21 yielded growth of P. mirabilis, but P. aeruginosa was not cultured from any of these samples. Proteus mirabilis was isolated from bladder, renal pelvis, or prostate specimens from 4 dogs; P. aeruginosa was not isolated from any of the tissue specimens. CONCLUSION: Results suggest that the method used in the present study fails to induce dual infection of the urinary bladder with P. mirabilis and P. aeruginosa. The inability to establish a persistent dual infection with this method may have been a result of insufficient pathogenicity of the Pseudomonas isolate or an inadequacy of the experimental design.     

堆形艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性研究

为了选育堆形艾美耳球虫（Eimeria acervulina）早熟株及观测其生物学特性,运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法,对实验室保存的堆形艾美耳球虫进行连续传代早熟选育,并对获得的早熟株与母株孢子化卵囊大小、繁殖能力、致病性以及免疫保护力等指标进行了测定,比较堆形艾美耳球虫早熟株与母株之间的基本生物学特性差异。经过18代早熟选育后,堆形艾美耳球虫的潜在期由母株的99h缩短至84h。与母株相比,早熟株的孢子化卵囊大小明显减小（P〈0．05）,卵囊繁殖能力降低了17％～42%。致病性试验中,早熟株感染组的平均增重均高于母株,而病变记分相当。免疫保护试验中,早熟株与母株的免疫保护力相当,其卵囊抑制率略低于母株,差异不明显（P〉0．05）。结果表明,本研究成功选育出堆形艾关耳球虫早熟株,对母株攻击具有保护力,为鸡球虫疫苗的研制奠定了基础。     

上海市畜禽粪便综合治理的实践与启示

十几年来,上海市畜禽粪便综合治理走过了“还田－工业达标－综合利用（生态还田）”的道路。通过分析上海市畜禽粪便综合治理技术路线的革新与实践,剖析了技术工艺方案的变化原因,明确提出今后应采用现代生态科学的研究成果,把畜禽粪便综合治理与畜牧业可持续发展结合起来。     

家蚕种质资源品种的人工饲料摄食性研究

采用山东省蚕业研究所现有低成本人工饲料饲养本所家蚕资源品种,研究其摄食性,结果杂交种优于日系与中系,在收蚁与1龄期间是日系明显优于中系,至3龄起蚕日系的存活率也是明显高于中系,而在2龄期间存活下来的中系家蚕对人工饲料的摄食性优于日系。