堆形艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性研究

为了选育堆形艾美耳球虫（Eimeria acervulina）早熟株及观测其生物学特性,运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法,对实验室保存的堆形艾美耳球虫进行连续传代早熟选育,并对获得的早熟株与母株孢子化卵囊大小、繁殖能力、致病性以及免疫保护力等指标进行了测定,比较堆形艾美耳球虫早熟株与母株之间的基本生物学特性差异。经过18代早熟选育后,堆形艾美耳球虫的潜在期由母株的99h缩短至84h。与母株相比,早熟株的孢子化卵囊大小明显减小（P〈0．05）,卵囊繁殖能力降低了17％～42%。致病性试验中,早熟株感染组的平均增重均高于母株,而病变记分相当。免疫保护试验中,早熟株与母株的免疫保护力相当,其卵囊抑制率略低于母株,差异不明显（P〉0．05）。结果表明,本研究成功选育出堆形艾关耳球虫早熟株,对母株攻击具有保护力,为鸡球虫疫苗的研制奠定了基础。     

上海地区奶牛球虫种类的初步调查

牛球虫病是由艾美耳属和等孢属球虫寄生于肠道引起的以出血性肠炎为特征的一种原虫病,主要发生于犊牛,该病呈世界性分布。该病对养牛业的危害较大．牛球虫不仅感染乳牛和黄牛,而且还感染水牛、瘤牛及牦牛,既危害放牧牛群,也危害舍饲牛群。集约化饲养为球虫的大量聚集、传播提供了更多机会,使球虫更容易在不同个体间进行传播,如果缺乏有效控制可能会导致牛球虫病的暴发。目前,上海地区奶牛主要以集约化方式饲养,虽然奶牛的疾病控制总体水平较好,     

伪狂犬病毒TK基因缺失通用转移载体的构建及初步应用

以伪狂犬病毒为载体表达其他病原体抗原蛋白是伪狂犬病疫苗研究的一个重要方向。根据已发表的伪狂犬病毒（PRV）Ra株TK基因序列设计2对引物,用PCR方法得到同源左右臂,克隆入PUC19载体中。利用平末端连接的方法将绿色荧光蛋白（EGFP）的基因表达盒插入到缺失位点,并在下游引入1个多克隆位点,构建缺失通用转移载体PUC19TK-EGFP。用脂质体转染试剂盒将PUC19TK-EGFP和PRV-Ra株的基因组共转染BHK细胞,以EGFP为标记基因,用噬斑法得到纯化的重组病毒,命名为TK/EGFP,为研制以伪狂犬病毒为载体的二价或多价基因工程疫苗奠定了物质基础。     

上海地区奶牛场球虫感染现状调查

为了解上海地区规模化奶牛场奶牛感染球虫的情况,我们对上海地区17个牧场的奶牛球虫感染状况进行了随机抽样调查,分别于2005年10月和2006年4月按不同年龄阶段共采集粪样316份。调查结果显示:17个牧场都有球虫感染,1个牧场的感染率最高达70%,其中10月份调查的感染率为36.45%,4月份调查的感染率为40.05%,两者没有明显的差异;从不同年龄阶段奶牛的感染情况来看,发现感染率最高的2个阶段为0~2月龄和4~6月龄,感染率高达为45%,感染率最低的年龄阶段为12月龄以上的奶牛,感染率为25%;从感染强度来看,上海地区牧场奶牛的球虫感染强度大部分平均OPG低于1000,占58.82%,只有一个牧场的平均OPG比较高,为14250;从本次调查结果发现有6种艾美耳球虫(Eimeria),分别是牛艾美耳球虫(E.bovis)、椭圆艾美耳球虫(E.ellipsoidallis)、邱氏艾美耳球虫(E.zurnii)、怀俄艾美耳球虫(E.wyomingensis)、柱状艾美耳球虫(E.cylindrica)、亚球形艾美耳球虫(E.subspherica),优势虫种为牛艾美耳球虫、邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫,其他3种球虫所占比例较少。     

三种药物防治奶牛球虫病试验

目的为考察现有抗球虫药物对奶牛球虫病的防治效果。方法选用应用较广的3种抗球虫药物(地克珠利、拉沙里菌素、莫能菌素)对1~6月龄球虫感染阳性奶牛进行防治试验。将34头球虫感染阳性奶牛分为4组,地克珠利组9头,按体重0.5 mg/kg.BW每天口服1次;拉沙里菌素组9头,按360 mg/头每天口服1次;莫能菌素组8头,按1 mg/kg.BW每天口服1次;不用药物对照组8头。连续用药10d,停药后再观测10 d,每3 d直肠采集粪便检测球虫1次,以每克粪便球虫卵囊数(OGP)为试验指标。结果用药9 d后的OPG与用药前相比,地克珠利组下降了78.9%,拉沙里菌素组下降了80.92%,莫能菌素组下降了98.81%。停药3~6 d后,地克珠利和拉沙里菌素组的OPG上升较快,而莫能菌素组的OPG保持较低水平。结论3种抗球虫药对奶牛球虫病均有防治效果,其中莫能菌素最好,拉沙里菌素和地克珠利次之。     

奶·牛·球·虫·卵·囊·检·测·方·法

牛球虫病是由牛球虫寄生在牛小肠下端和整个大肠的上皮细胞内引起的以出血性肠炎为特征的寄生性原虫病,在多雨季节,长期在低洼、多沼泽的草甸上放牧,或牛舍潮湿,均易引起此类疾病的发生,主要发于犊牛。该病对养牛业的危害较大,据报道美国养牛业每年因球虫病导致的经济损失达几亿美元。我国牛球虫病发病率可高达87．5％,危害十分严重。该病的诊断还主要是根据临床症状和剖检变化以及粪检卵囊来确诊。     

鸡球虫早熟株的生物学特性及其在疫苗中的应用

按照Jeffers建立的艾美耳球虫早熟株选育方法选育出的球虫早熟株，其潜在期明显缩短，繁殖力和致病性显著降低，但保持良好的免疫原性.并且，早熟株的弱毒性和早熟性具有遗传稳定性，通过放松选择压力反复传代后无恢复现象。国内外学者根据早熟株的这些生物学特性，并在深入了解鸡球虫病的保护性免疫机制的基础之上研制了抗鸡球虫病的早熟株弱毒活苗。本文综述了球虫早熟株的生物学特性，并介绍了目前国内外研制出的球虫早熟苗在鸡球虫病防治方面的应用。     

2005年上海地区乳牛球虫感染的季节动态

为了解上海地区乳牛球虫感染的季节变化情况，对上海地区3个牧场乳牛抽样直肠采集粪便，检查了718头乳牛粪样。结果，查出球虫阳性牛269头，平均感染率为37．46％，其中1月龄以内牛的感染率为33．89％，1～12月龄牛的感染率为42．33％，12月龄以上牛的感染率为25．95％。平均感染率最高的4月份为44．44％，最低的8月份为28．57％。3个牧场球虫阳性牛的感染强度（OPG值）为0～169000个，平均OPG值为9477个，其中1月龄以内牛的OPG值为8270个，1～12月龄牛的OPG值为4318个，12月龄以上牛的OPG值为145个。调查发现了6种球虫，分别是牛艾美球虫（Eimeria boris）、椭圆艾美球虫（E．ellipsoidalis）、邱氏艾美球虫（E．zurnii）、怀俄明艾美球虫（E．wyomingensis）、柱状艾美球虫（E．cylindrica）、亚球形艾美球虫（E．subspherica）。结果表明，2005年上海地区乳牛球虫感染率无明显季节差异，12月龄内乳牛的球虫感染率与感染强度均明显高于12月龄以上乳牛，乳牛球虫的优势虫种为牛艾美球虫、椭圆艾美球虫、邱氏艾美球虫。     

分子标记技术在寄生虫分类鉴定上的应用

分子标记与形态标记、细胞学标记和生化标记3类遗传标记技术相比,具有直接以DNA的形式表现,在动物的任何生长阶段都可检测,遍布整个基因组,多态性高,检测手段简单迅速,无基因多效性,能够明确辨别等位基因,试验重复性好等优点.目前,在寄生虫分类鉴定上常用的分子标记技术有RFLP,PCR-RFLP,RAPD和AFLP.文章综述了4种分子标记技术的基本原理、主要优缺点以及在寄生虫分类鉴定中的应用情况.     

集约化猪场不同毒株猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗免疫后血液中持续带毒及抗体消长规律研究

某地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与中国高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(hp-PRRSV)同源性极高,为了筛选适合该地区病情的疫苗,指导养殖户生产,试验选择hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)作为疫苗候选株,选取30日龄、健康状况良好、群体差异性小的断奶仔猪30头,随机分成A、B和C组,每组10头,A组注射hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株),B组注射PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株),C组注射相同剂量生理盐水作对照,免疫前和免疫后14、28、42、56、70、84 d采集血清,通过淋巴细胞计数、血清病毒核酸检测、血清抗体检测等分析猪体内hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)免疫应答情况.试验结果显示,淋巴细胞数量方面,仔猪免疫后,淋巴细胞数量均上升,42 d时A、B组均达到最大值,A组为19.3×10⁹/L,B组为16.7×10⁹/L,C组则一直处于原始水平;抗体阳性方面,14 d时A组为80%,B组为60%,C组为0,42 d时A组为100%,B组为80%,C组为0;病毒核酸阳性率方面,14 d时A组为90%,B组为100%,C组为0,42 d时,A组为40%,B组为70%,C组为0,70 d时,A组为0,B组为20%,C组为0.由此可知,hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)能快速诱导猪发生免疫应答、产生免疫抗体,抗体持续时间长、效价高、稳定性良好,且疫苗毒在体内存在时间短、减毒时间快、安全性高,对所研究地区猪群免疫具有优越效果.