中华绒螯蟹线粒体DNA 12S rRNA基因片段的序列研究

首次进行了中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）线粒体ＤＮＡ１２ＳｒＲＮＡ的序列分析。参考果蝇、蚤状序列对中华绒螯蟹线粒体ＤＮＡ１２ＳｒＲＮＡ基因片段做了引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定，结果得到４５７ｂｐ的碱基序列，其Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为１５９ｂｐ（３４．７９％）、１７７ｂｐ（３８．７３％）、５１ｂｐ（１１．１６％）、７０ｂｐ（１５．３２％）、与果蝇、蚤状的相同基因片段的序列含量基     

中华绒螯蟹线粒体DNA l2S rRNA基因片段的序列研究

首次进行了中华绒螯蟹（ Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）线粒体 ＤＮＡ １２ＳｒＲＮＡ的序列分析。参考果蝇、蚤状溞序列对中华绒螯蟹线粒体ＤＮＡ １２ＳｒＲＮＡ基因片段做了引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定，结果得到 ４５７ ｂｐ的碱基序列，其Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为 １５９ｂｐ（３４．７９％）、１７７ｂｐ（３８．７３％）、５１ｂｐ（１１．１６％）、７０ｂｐ（ １５． ３２％），与果蝇、蚤状溞的相同基因片段的序列含量基本相似。     

中国大陆沿海六水系绒螯蟹（中华绒螯蟹和日本绒螯蟹）群体亲缘关系：R …

用４８个具有丰富多态性的１０碱基随机引物对辽河、黄河、长江、瓯江、珠江和南流江的中华绒螯蟹和日本绒螯蟹的６个群体进行ＲＡＰＤ分析。结果发现：（１）两个引物具有群体特异性带,其中Ｚ２扩增的８８０ｂｐ片段为珠江蟹和南流江蟹群体中所特有,而７００ｂｐ片段为长江蟹、辽河蟹、黄河蟹和瓯江蟹所特有,可作为区别日本绒螯蟹和中华绒螯蟹的分子遗传标记;（２）Ｏｐｐ１７扩增的９４７ｂｐ片段的出现频率,在长江、黄河和辽     

中国大陆沿海六水系绒螯蟹（中华绒螯蟹和日本绒螯蟹）群体亲缘关系：？…

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析比较了分布于我国大陆沿海６个主要水系的两种绒螯蟹（中华绒螯蟹、日本绒螯蟹）群体间的生化遗传差异。结果发现：（１）辽河、黄河、长江和瓯江中华绒螯蟹群体间的生化遗传差异不显著,国个群体间的遗传距离Ｄ＝０．０００６～０．００５３,属种内群体间差异。（２）珠江和南流江日本绒螯蟹群体间的生化遗传差异也不显著,两个群体间遗传距离Ｄ＝０．０００７,尚未达到亚种分化水平。（３）辽河、黄河     

关于绒螯蟹属的分类

绒螯蟹属包括日本绒螯蟹、中华绒螯蟹、狭额绒螯蟹以及台湾绒螯蟹四个种 ,后两个种被极少数学者从绒螯蟹属中割离出来 ,先后建立新绒螯蟹属和扁绒螯蟹属 ,但一般学者认为这是不妥当的     

中华绒螯蟹DNA指纹图谱的初步研究

本文运用ＤＩＧ标记的人源小卫星探针３３．６与ＨａｅⅢ消化的中华绒螯基因组ＤＮＡ杂交，建立了中华绒螯非放射性ＤＮＡ指纹图谱，证明上前在缺乏来自中华绒螯蟹基因组ＤＮＡ本身的同源小卫星ＤＮＡ的情况下，运用异源小卫星探针进行中华绒螯蟹ＤＮＡ指纹图谱的研究是可行的；实验表明运用人源小卫星探针３３．６进行中华绒螯蟹ＤＮＡ指纹图谱研究时，该探针可检测到１０个以上位点的遗传变异，每个位点呈现丰富的多态性。     

中华绒螯蟹性早熟的早期判别

结合对生殖腺的组织学研究，对发生性早熟发育与未发生性早熟发育的中华绒螯蟹的２２个形态特征参数进行了比较，确定了判别雌、雄中华绒螯蟹性早熟的三个形态特征参数，建立了雌、雄蟹性早熟判别公式；对雌蟹的判别准确率达９０．９％，对雄蟹的判别准确率达９６．９％。     

日本绒螯蟹的生殖生态研究

日本绒螯蟹的生殖生态研究小林哲，松浦修平（日本九州大学农学部水产学科）日本绒螯蟹ＥｒｉｏｃｈｅｉｒｊａｐｏｎｉｃｕｓｄｅＨａａｎ在日本各大河流及浅海中几乎都有分布，最大个体的背甲宽可达８０ｍｍ，步足伸直后的全宽有３００ｍｍ。活体的背甲为青绿色，螫足密...     

绒螯蟹三个种群形态判别比较

对长江水系中华绒螯蟹、莱茵河野生中华绒螯蟹和日本绒螯蟹三个种群的形态特征进行了判别研究。可数性状分析的结果表明，长江水系中华绒螯蟹、莱茵河野生中华绒螯蟹和日本绒螯蟹三个种群，两两之间差异极显著。聚类分析的结果，把长江水系中华绒螯蟹和莱茵河野生中华绒螯蟹划为一组，日本绒螯蟹为另一组。判别分析建立起三者的判别函数，雌雄蟹判别的正确率分别为83．1％、91．9％。     

中华绒螯蟹大面积半精养高产试验

使用１口面积为３．６ｈｍ＾２的池塘（５４亩）,进行中华绒螯蟹半精养试验。放养蟹种（扣蟹）密度为９１０８只／ｈｍ＾２（６０７只／亩）,个体均重１１ｇ／只,经１８０ｄ饲养,获得总产２７２７ｋｇ,平均７５７．５ｋｇ／ｈｍ＾２。增重９．３４倍;出塘率８１％,饵料系数１．０４。总产值１４９９８５元,总利润为５７７６３．１元。投资回报率１６２．６％。     

日本绒螯蟹ND2基因全序列测定与分析

动物线粒体DNA（mtDNA）具有比核DNA的进化速率快等特点，而被广泛地应用于生物的起源、演化和种群遗传学研究。完整的线粒体基因组包括37个基因：13个编码疏水性蛋白质亚基基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因。各基因排列紧密，不含内含子，且有些基因区域出现重叠。     

长江、辽河、瓯江三水系中华绒螯蟹mt12SrDNA片断序列的比较

本实验根据马蹄铁鲎mtDNA 12SrRNA基因序列进行了中华绒螯蟹mtDNA 12SrRNA基因的引物设计，并对长江、辽河、瓯江三水系各5个个体共15个个体进行了PCR扩增及其序列测定。结果表明，12SrRNA基因序列在长江种群、辽河种群、瓯江种群间几乎没有差异，仅在3号瓯江蟹415bp处发现有一碱基颠换，去掉两端引物共测定得到415bp的碱基序列，其中A、T、G、C含量分别为145bp(34．9％)，165bp(39．8％)，45bp(10．8％)和60bp(14．5％)。     

欧、美中华绒螯蟹源于中国长江水系中华绒螯蟹的遗传证据

用包括Z2和Opp17两个10碱基随机引物在内的10个引物,对来自荷兰斯科克莱（Skodely)、美国加州圣何塞（San Jose)的中华绒螯蟹群体与中国长江水系中华绒螯蟹群体进行RAPD遗传比较分析。结果发现：（1）中华绒螯蟹群体特有的Z2引物扩增的700bp标记带（Z2^700bp）,在荷兰与美国2个中华绒螯蟹群体中同时出现,而不出现日本绒螯蟹南流江种群中特有的880bp标记带（Z2^880bp）,表明欧洲、美国中华绒螯蟹与中国中华绒螯蟹为同种Eriocheir sinensis,而非日本绒螯蟹Eriocheir japonicus;（2）Opp17引物扩增的947bp片段在中国长江、荷兰及美国3个中华绒螯蟹群体内的出现频率均达100%。结合Z2引物扩增结果,欧洲与美国中华绒螯蟹群体极可能是从中国长江水系中华绒螯蟹引入繁衍的。     

中国太湖和荷兰的中华绒螯蟹随机扩增多态性DNA分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对中华绒螯蟹两个群体(荷兰盐城湖和中国太湖)进行了检测,从40个随机引物中筛选出14个对两群体进行扩增分析。结果为:14个引物共检测到100条清晰且重复性好的条带,分子量在200~2000bp之间,太湖和盐城湖两群体的多态位点比例、Shannon多样性指数、Ne i基因多样性指数分别为:46%和44%、0.2195和0.1976、0.1446和0.1270,两群体的遗传距离为0.013。据此结果推断,中华绒螯蟹群体遗传多样性不高,种内群体间的遗传变异较低,其遗传资源亟待保护,同时验证了荷兰的中华绒螯蟹是从中国引进繁衍的推论。     

套式PCR在中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体检测中的应用

提取人工分离、培养的中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体的基因组DNA,并进行梯度稀释作为PCR模板,根据GenBank已有螺原体16S rRNA基因序列设计出套式PCR外部引物,将螺原体特异性引物作为内部引物,利用套式PCR对梯度稀释的模板进行扩增,得到271 bp产物,对照已有的一步PCR检测法,检测灵敏度提高100倍,最小检测达15.5 fg数量级螺原体DNA,从而建立更为灵敏的中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体的检测方法。     

中华绒螯蟹核糖体DNA全序列分析

核糖体DNA通常被选作系统发育研究的分子标记,核糖体DNA中IGS部分序列的变异在一定程度上影响着生物的生长。报道了中华绒螯蟹核糖体DNA全序列的分离和序列特征。中华绒螯蟹核糖体DNA全长11660bp,包括18S(1873bp),ITS1(317bp),5.8S(163bp),ITS2(614bp),28S(4461bp)和IGS(4240bp);不同部分AT含量在40.1%～48.6%之间,低于果蝇(55.8%～80.0%),高于鲤(22.0%～43.7%)。平均100个核苷酸含简单重复序列(SSR)数由高到低依次为ITS2(0.98%),IGS(0.49%),28S(0.38%),ITS1(0.32%),18S(0.21%),5.8S(0%)。个体内差异分析结果表明,中华绒螯蟹个体内存在两类ITS2序列,其中一类在405nt处有一12bp(CGCAGGACCACC)插入序列。中华绒螯蟹rDNA的IGS部分长4240bp,AT含量为42.6%。IGS部分包含一个有约7个连续136～139bp单元组成的重复序列区,重复序列单元中存在XhoⅠ内切酶位点,为河蟹特有的重复序列;重复序列区后有一个由182个碱基对...     

河蟹精子膜蛋白的生化特性

利用含1% TritonX-100和0.1%SDS的提取缓冲液提取河蟹(Eriocheir sinensis)精子膜蛋白。对所得的精子膜蛋白溶液进行SDS-PAGE电泳分析。结果显示,河蟹的精子含有12种不同的膜蛋白组分。对这些精子膜蛋白组分的生化特性进行分析,结果表明,河蟹精子膜蛋白是1组呈酸性的低分子量糖蛋白,分子量为21.6～75.5kD,等电点在4.8左右。     

枯草芽孢杆菌基因组DNA对中华绒螯蟹非特异性免疫因子的影响

将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtzlis)基因组DNA按5、20和80μg/kg剂量体腔注射中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)(约0.1 mL/只),设注射等体积TE缓冲液为对照组,分别在第1、3、5、7天采样,测定该细菌DNA对中华绒螯蟹的免疫刺激作用。结果显示:注射上述3种剂量的枯草芽孢杆菌基因组DNA均能不同程度地提高中华绒螯蟹的THC、血细胞呼吸爆发活性和血清PO、ACP活性,试验组蟹的上述免疫指标的活性显著高于对照组(P<0.05),并以20μg/kg体重剂量的刺激效果最好;但试验剂量的细菌DNA对血清ALP活性无显著影响(P>0.05)。