中华绒螯蟹血淋巴钙离子和17_雌二醇浓度与性早熟的关系

中华绒螯蟹的性腺发育与血淋巴钙离子浓度相关.性早熟雌性扣蟹(一秋龄)血淋巴钙离子浓度为21.25±11.89mmol@L-1,明显高于正常发育的13.70±1.17mmol@L-1;雄性扣蟹(一秋龄)则相反,性早熟扣蟹血淋巴钙离子浓度为16.33±1.38mmol@L-1,低于正常发育的20.13±2.37mmol@L-1.二秋龄雄性成蟹的血淋巴钙离子指标与性早熟雄性扣蟹相当,无显著差异.随着个体的生长发育,雌性中华绒螯蟹血淋巴17β-E2浓度逐步提高,正常发育扣蟹为0.15±0.05pg@mL-1,性早熟扣蟹为0.59±0.15ng@mL-1,二秋龄成蟹为2.31±1.08pg@mL-1.     

长江口中华绒螯蟹雌性亲蟹放流群体与自然群体能量代谢比较

对长江口不同性腺发育时期中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)雌性亲蟹的性腺与肝胰腺进行取样,对比研究放流群体和自然群体之间能量代谢的差异。结果表明,在亲蟹性腺发育的不同时期,放流群体和自然群体的性腺指数均在V期显著升高,而肝胰腺指数无显著变化;性腺总脂含量放流群体在第VI1期显著下降,自然群体在第VI2期显著升高,其它时期变化均不显著;放流群体和自然群体的肝胰腺总脂含量随着性腺的发育逐渐减小,第VI2期显著低于第IV期。在亲蟹性腺发育的同一时期,放流群体性腺和肝胰腺的蛋白水平显著小于自然群体,两个群体的性腺指数、肝胰腺指数、水分含量、总脂含量等指标无显著性差异。因此,可以在放流前对亲蟹进行营养强化,提高其机体蛋白含量,这有助于提升增殖放流效果。     

越冬期间投喂不同饵料对中华绒螯蟹扣蟹存活、营养组成、消化及免疫力的影响

为研究越冬期间投喂不同饵料对中华绒螯蟹扣蟹存活、营养组成、消化及免疫力的影响,本实验比较了越冬期间不投喂(NF组)、投喂配合饲料(CF组)以及投喂冰鲜鱼(CTF组)对扣蟹存活率、营养组成、消化酶、抗氧化酶和免疫酶活性的影响。每个处理3个重复,实验周期为70d。结果表明：（1）越冬过后,CF组和CTF组扣蟹的增重率和肝胰腺指数显著高于NF组(P＜0.05),而三组间存活率无显著差异(P＞0.05);（2）越冬过后,CF组和CTF组扣蟹躯体和肝胰腺中脂肪和碳水化合物含量显著高于NF组(P＜0.05),CF组扣蟹躯体和肝胰腺碳水化合含量显著高于CTF组(P＜0.05 ),而NF组扣蟹肝胰腺水分显著高于CF组和CTF组(P＜0.05)。无论投喂与否,越冬过后躯体蛋白质含量显著下降,而肝胰腺中蛋白质显著增加(P＜0.05);（3）脂肪酸组成,CF组扣蟹躯体和肝胰腺中C18:2n6(LA)含量显著高于NF组和CTF组,而CTF组C20:5n3(EPA)和C22:6n3(DHA)含量显著高于NF组和CF组(P＜0.05);（4）越冬过后,扣蟹肝胰腺消化酶CF组胃蛋白酶(pepsin)和α-淀粉酶(α-AMS)活性显著高于NF组和CTF组(P＜0.05);（5）扣蟹抗氧化能力,肝胰腺和血淋巴中NF组超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于CF组和CTF组(P＜0.05),CF组总抗氧化能力(T-AOC)活性显著高于NF组和CTF组(P＜0.05),CTF组扣蟹血淋巴和雌性扣蟹肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著高于NF组和CF组(P＜0.05);（6）扣蟹免疫能力,CF组酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于NF组(P＜0.05)。综上所述,中华绒螯蟹扣蟹越冬期间应该适量投喂饵料,投喂配合饲料组扣蟹的存活率、肝胰腺指数、增重率以及营养物质积累优于投喂冰鲜鱼组,而且投喂配合饲料有利于扣蟹消化,增强扣蟹抗氧化和免疫能力。本研究为中华绒螯蟹扣蟹越冬饵料的合理投喂提供科学参考和理论基础。     

长江口中华绒螯蟹雌性亲蟹自然群体与放流群体血淋巴生化指标的比较

在长江口中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)亲蟹生殖洄游期间,对比研究了不同性腺发育时期的长江口中华绒螯蟹雌性亲蟹自然群体和放流群体9项血淋巴生化指标的差异。结果表明,洄游亲蟹在性腺发育的不同时期,放流群体与自然群体血淋巴总蛋白、血蓝蛋白、甘油三酯、肌酐、Ca2+及Mg2+含量水平上均无显著差异(P>0.05)。放流群体亲蟹在性腺发育到Ⅳ、Ⅴ期时的血淋巴白蛋白含量和性腺发育到Ⅳ期时尿素含量均显著高于自然群体(P<0.05),总胆固醇含量在性腺发育到Ⅵ期时显著高于自然群体(P<0.05)。在性腺发育过程中放流群体的大部分血淋巴生化指标与自然群体都无显著差异,仅在性腺发育到Ⅳ期后少数指标存在一定差异,表明放流群体通过自身调节能够很好地适应长江口环境并完成性腺发育过程。     

早熟期间中华绒螯蟹肝胰腺指数、肝脂含量及脂肪酸组成的变化

实验采用称量法和气相色谱法分别测定了性早熟前后中华绒螯蟹的肝胰腺指数(HI)、肝脂含量(LC)和肝胰腺脂肪酸组成。雌雄蟹的HI和LC在早熟前后的变化趋势一致,都是早熟个体低于未成熟个体。在性早熟前,雌雄蟹的肝胰腺脂肪酸组成基本一致,只是雌蟹中C20∶5n-3较高(P<0.05)。然而,对早熟前后的个体作比较时,发现雌雄蟹变化情况有很大差异:(1)早熟雌蟹中C16∶1n-7、C16∶0和C18∶0高于未成熟雌蟹(P<0.01),而C20∶5n-3、C20∶4n-6和C22∶6n-3则低于后者(P<0.01);(2)早熟雄蟹中C18∶1高于未成熟雄蟹(P<0.05),而C14∶0(P<0.05)、C16∶1n-7(P<0.05)和C20∶5n-3(P<0.01)皆低于后者。以上结果表明:雌雄蟹在性早熟前后存在肝胰腺脂肪酸组成变化的差异,且C20∶5n-3可能主要参与成熟蜕壳和膜的构建,而C22∶6n-3可能主要参与卵巢发育和卵黄的发生。     

不同规格长江野生中华绒螯蟹扣蟹生化组成的比较研究

为探究不同规格野生蟹种的营养状况,以3种规格体质量(A组:2～4 g,B组:4～6 g,C组:8～12g)的长江野生扣蟹为研究对象,采用生化分析的方法,研究其肝胰腺指数(HSI)、组织常规生化组成及组织脂肪酸组成。结果显示:(1)随着野生蟹种规格的增大,其HSI也明显增大,其中雌性个体差异显著(P0.05)。(2)就常规生化组成而言,雌、雄个体肝胰腺中粗脂肪含量及躯体中蛋白质含量均随着体质量的增加而显著增加,但肝胰腺中水分含量的差异与之相反,表现为随着规格的增大而显著降低(P0.05)。(3)肝胰腺脂肪酸中总饱和脂肪酸(ΣSFA)和总单不饱和脂肪酸(ΣMUFA)的含量均随着规格的增大呈上升趋势,其中雄性个体ΣMUFA差异显著(P0.05);与此相反,肝胰腺中总多不饱和脂肪酸(ΣPUFA)含量随着蟹种体质量增加而明显下降,且同样为雄性个体差异显著(P0.05)。(4)不同规格蟹种躯体的脂肪酸含量无明显规律可循,仅总长链多不饱和脂肪酸(ΣLC-PUFA)含量随着体质量的增加而增加(P0.05)。综合分析结果,不同规格野生蟹种的HSI、常规生化和脂肪酸组成差异明显,其中大规格蟹种营养状况较好,更适合于进行池塘养殖。     

中华绒螯蟹幼体及仔蟹阶段肝胰腺发育的组织学研究

通过对中华绒螯蟹幼体及仔蟹进行连续采样和组织切片,系统地研究了该阶段中华绒螯蟹肝胰腺的发育情况。结果表明,中华绒螯蟹的肝胰腺前体出现于心跳期胚胎,由卵黄囊特化而来,为1对囊状结构,此阶段首次出现肝胰腺细胞(柱状上皮细胞)。胚胎孵化后,随着幼体的发育,肝胰腺由最初的1对囊状结构逐渐分叶生长。从Ⅰ期溞状幼体至Ⅴ期溞状幼体,肝胰腺分叶数量分别为4-6-8-12-12,肝胰腺细胞高度由(12.63±4.91)μm增至(44.16±13.57)μm。肝胰腺中的细胞组成也随着幼体的发育逐渐完善,Ⅱ期溞状幼体的肝胰腺中首次出现E细胞和B细胞,Ⅲ期溞状幼体肝胰腺中首次出现F细胞,而R细胞直到Ⅱ期仔蟹才首次出现。从大眼幼体到Ⅲ期仔蟹,肝胰腺细胞高度由(44.93±18.27)μm增至(56.38±5.69)μm。     

长江、黄河、辽河水系中华绒螯蟹野生扣蟹的形态学及生化组成

探讨长江、黄河和辽河水系中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis,以下称河蟹)野生扣蟹的异同,对于河蟹种质资源评价和养殖生产具有重要的现实意义。本研究采用形态学测量和生化分析方法,测定和比较了长江、黄河和辽河三水系野生扣蟹(以下简称长江蟹、黄河蟹和辽河蟹)的形态学、肝胰腺指数(HSI)、常规生化成分、脂类和脂肪酸组成差异。结果表明,(1)三水系野生扣蟹的形态学特征差异较大,三水系雌雄扣蟹分别有12和18个形态学指标差异显著,但其差异系数均未达到亚种间的差异阈值,聚类分析将三水系野生扣蟹分为两组,长江和黄河水系为一组,辽河水系为另一组。(2)筛选判别贡献率较大的7~10个指标,对三水系雌雄扣蟹分别建立判别方程,综合判别准确率达87.5%。(3)长江雌蟹HSI最高,辽河雄蟹HSI最低;辽河雌蟹肝胰腺的水分和蛋白含量较高,长江雌蟹水分、粗蛋白和总糖含量最低;辽河蟹躯体肌肉水分含量最高,而长江蟹躯体蛋白和脂肪含量最高,但总糖含量最低。(4)就脂类组成而言,除了雄体肝胰腺外,长江蟹组织中的甘油三酯含量均显著高于其他两个水系,黄河蟹游离脂肪酸和胆固醇百分含量相对较低,但磷脂含量最高。(5)黄河蟹肝胰腺和躯体肌肉中18:1n9和18:2n6含量最低,但其20:5n3和22:6n3含量最高,三水系肝胰腺中的脂肪酸差异大于肌肉间的差异。因此,三水系河蟹野生扣蟹的形态学和生化组成均存在较大差异,可以据此进行综合鉴别。     

长江野生和池塘养殖河蟹(Eriocheir sinensis)蟹种早期养殖性能、抗病力和非特异性免疫性能的比较

本研究采用养殖性能评价、攻毒实验和非特异性免疫指标分析方法,比较了2个种群河蟹(Eriocheir sinensis)扣蟹在成蟹阶段的早期养殖性能[第1次蜕壳间隔时间、成活率(SR)和增重率(WGR)、特定生长率(SGR)]、攻毒后的死亡率和免疫性能.结果显示,(1)池塘养殖扣蟹第1次蜕壳间隔时间和SGR显著短于野生扣蟹(P＜0.05),而2种来源扣蟹的SR和WGR均无显著差异(P＞0.05);(2)野生扣蟹攻毒后的累计死亡率一直低于池塘养殖扣蟹,攻毒96h后,野生扣蟹累计死亡率(28.3％)明显低于养殖扣蟹(50.0％);(3)比较肝胰腺组织非特异性免疫指标发现,无论雌蟹还是雄蟹,野生扣蟹碱性磷酸酶(ALP)活性显著低于养殖扣蟹,野生雄蟹的总抗氧化能力(T-AOC)活性和NO含量显著高于养殖雄蟹,而野生雌蟹的丙二醛(MDA)含量显著低于养殖雌蟹;(4)比较血清中非特异性免疫指标发现,野生扣蟹NO含量显著高于养殖扣蟹,而养殖扣蟹酸性磷酸酶(ACP)活性显著高于野生扣蟹.此外,野生雌蟹血清中的血蓝蛋白(Hc)含量、T-AOC及谷胱甘肽还原酶(GR)等活性显著高于养殖雌蟹,而ALP、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等活性显著低于养殖雌蟹.综上所述,2种来源蟹种各有优势,池塘养殖扣蟹具有较好的早期养殖性能,野生蟹种具有较强的免疫性能,有关其质量差异形成原因有待进一步深入研究.     

性早熟中华绒螯蟹肝胰腺与性腺的酸性和碱性磷酸酶活性

采用磷酸苯二钠法在520nm波长测定了未成熟、早熟和正常成熟中华绒螯蟹肝胰腺与性腺中的酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（ALP）。结果表明：（1）各组蟹肝胰腺ACP和ALP活性都显著高于性腺；（2）早熟蟹肝胰腺中ACP活性都显著高于未成熟蟹而低于正常成熟蟹，在各发育阶段没有性别差异，但是，早熟雌蟹和正常成熟雌蟹卵巢中ACP活性都较早熟雄蟹和正常雄蟹精巢低，早熟与正常成熟个体没有差异；（3）早熟雌蟹肝胰腺ALP活性显著高于未成熟和正常成熟雌蟹，而与三组雄蟹处于同一水平，但是，早熟和正常成熟雌雄蟹的性腺中ALP活性没有显著差异。由此得出结论：（1）性腺发育所需营养物质的动员或合成主要与肝胰腺ACP有关；（2）性早熟的发生与肝胰腺中ACP和ALP活性的显著升高有关。     

中华绒螯蟹血淋巴内盐酸环丙沙星的反相高效液相色谱法的建立

应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)建立了盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹血淋巴内含量的测定方法.本法采用肌肉注射的给药方法,给药剂量为8.17±0.56mg·kg-1和6.25±0.85mg·kg-1.血淋巴从心区抽取.经各种抗凝方法的比较,认为等量的ACD与等量的血淋巴混合,可得到持久的抗凝效果.血淋巴样经甲醇去蛋白,3000r/min离心10min后,取上清液上HPLC.色谱柱,RP-ODS-5μl50×4.6mm;流动相,甲醇-磷酸缓冲液-四丁基溴化铵=25075020(v/v/v);流速,l mL·min-1;进样量,2μL;检测波长,280nm.研究表明,本法线性关系与重复性良好;雌、雄蟹平均回收率分别为100.08±3.43%和99.11±8.20%;日间精密度、平均提取精密度分别为1.19±0.92%、1.55±0.01%.用该方法对肌肉注射给药后48h内中华绒螫蟹雄蟹血淋巴中的盐酸环丙沙垡的血药浓度进行检测,揭示出由37.13±0.08μg·mL-1降至5.96±0.18μg·mL-1的代谢规律.     

土霉素在锯缘青蟹体内的药物代谢和消除规律

采用高效液相色谱法检测土霉素,研究土霉素口灌给药途径下在锯缘青蟹体内的药代动力学。锯缘青蟹口灌给药土霉素50 mg/kg后,其血浆、肌肉和肝胰脏中的药峰浓度分别为16.78±1.98 mg/L、9.39±2.12μg/g和32.12±6.12μg/g,达峰时间分别为4 h、8 h和4 h。血浆中土霉素浓度-时间关系曲线符合一级吸收的二室开放动力学模型。土霉素在锯缘青蟹体内分布广泛,其表观分布容积(Vd)为2.129 L/kg;分布半衰期(t1/2α)和消除半衰期(t1/2β)分别为3.200 h和47.856 h,总体清除率(CLs)为0.063 mL/(kg.h)。肌肉和肝胰脏中土霉素浓度与时间关系的药动学参数采用统计矩原理分析,其消除半衰期(t1/2 z)分别为60.145 h和71.009 h,总体清除率(CLz)分别为0.054 g/(kg.h)和0.037 g/(kg.h)。土霉素在精巢和卵巢中达峰时间分别为8 h和12 h,峰浓度分别为9.83μg/g和10.26μg/g。给药后24 d时,血浆、肌肉、肝胰脏、精巢和卵巢中土霉素含量都已低于0.10μg/g。土霉素在锯缘青蟹体内消除比较缓慢。     

中华绒螯蟹大颚器激素生物合成与性早熟的关系

运用放射化学方法跟踪测定中华绒螯蟹早熟个体和正常发育个体的大颚器合成和分泌的激素-甲基法尼酯(methyl farnesoate，MF)，发现早熟雌、雄蟹当年9月的MF合成速率约为正常蟹的2倍，早熟蟹的MF在当年秋季(10月或11月)均达到峰值，之后：MF合成速率显著降低，而成熟系数继续升高。正常发育的雌、雄幼蟹，当年至翌年4月的MF合成速率始终维持较低水平，翌年6月开始，MF合成速率迅速增大，至翌年10月的MF合成速率已超过早熟蟹的峰值，11月的MF合成速率明显降低，性腺发育至Ⅳ期末。研究结果表明：早熟蟹大颚器的提早发育，大量合成和分泌促性腺激素-MF，刺激卵巢或精巢发育成熟是导致性早熟的内分泌因素。     

磷脂和HUFA对中华绒螯蟹幼蟹存活、生长、蜕壳及生化组成的影响

实验用中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹初始体质量为1.8 g左右。饲料A添加6%鳕鱼肝油和4%大豆卵鳞脂(饲料含4.53%磷脂和1.08%HUFA), 饲料B添加10%的猪油(饲料含0.39%磷脂和0.18%HUFA); 实验蟹单个体饲养(可防止蜕壳期间蟹相互残杀而获得饲料外的营养源), 雌蟹(F)、雄蟹(M)各60个, 实验周期120 d。结果表明: 两组饲料条件下, 幼蟹的存活率、增重率、特定生长率、平均蜕壳次数、蜕壳间隔时间及肝胰腺指数均无显著差异(P>0.05)。但无论是雌蟹还是雄蟹, A组幼蟹肝胰腺和肌肉的总脂含量显著低于B组(P<0.05), 并且A组蟹肝胰腺和肌肉中磷脂、多不饱和脂肪酸和高度不饱和脂肪酸的含量显著高于B组(P<0.05)。这表明, 在中华绒螯蟹幼蟹饲料中添加4.53%磷脂和1.08%HUFA对其存活、生长、蜕壳无显著影响, 但可使其肝胰腺和肌肉中的总脂含量降低, 而磷脂、多不饱和脂肪酸和高度不饱和脂肪酸的含量升高。本研究结果旨在为中华绒螯蟹幼蟹的营养学研究提供理论依据, 同时也为生产上幼蟹饲料的开发提供参考。     

Effect of hypoxia on immunological,physiological response,and hepatopancreatic metabolism of juvenile Chinese mitten crab <Emphasis Type="Italic">Eriocheir sinensis</Emphasis>

The juvenile Chinese mitten crabs Eriocheir sinensis (1.40 ± 0.43 g) were cultured in water of 5.34 ± 0.43 (hypoxia, treatment group) and 21.02 ± 0.06 kPa (high dissolved oxygen (DO), control group) DO for 24 h, respectively. The total hemocyte counts (THC), the hyaline hemocyte counts were measured at 0 and 24 h in the treatment group, and superoxide dismutase (SOD) activity, concentrations of lactic acid and hemocyanin (Hc) in hemolymph and the metabolism of hepatopancreas (concentrations of glucose, total cholesterol, uric acid, total protein, urea, triglyceride in hepatopancreas) were assayed at 0, 2, 8, and 24 h in both treatment and control groups. The hyaline hemocyte counts and THC decreased significantly by 66 and 49% after exposure to hypoxic water for 24 h, respectively. SOD activity, Hc and lactic acid content were significantly affected in treatment group, and there were significant differences between treatment and control groups. In the treatment group, the concentration of glucose, cholesterol and uric acid in hepatopancreas had a significant variation for 24 h. The concentration of total protein, urea and triglyceride between treatment and control groups was not significantly different after 0, 2, 8, 24 h. However, there were significant differences between treatment and control groups in terms of total protein, glucose, and uric acid concentration. Taken together, the effect of hypoxia is comprehensive in juvenile Chinese mitten crab Eriocheir sinensis.     

Nutritional qualities of normal and precocious adult male Chinese mitten crabs (Eriocheir sinensis)

The nutritional values of edible gonad, hepatopancreas and muscle tissues from normal and precocious adult male Chinese mitten crabs (Eriocheir sinensis) were investigated herein. The results showed that the average weight and meat yield (MY) of normal crabs were significantly higher than those of precocious crabs, while the hepatopancreas indexes (HSI) and gonadosomatic indexes (GSI) had no significant differences. Precocious and normal crabs had greater protein and lipid contents, respectively, and the differences were mainly reflected in gonads and hepatopancreas. While assessing the amino acid profiles, both precocious and normal crabs could be high‐quality protein sources, particularly the precocious crabs which showed higher levels of essential amino acids. In fatty acid profiling experiments, precocious crabs revealed higher EPA, ∑n‐3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) and ∑n‐3/∑n‐6 ratios than normal crabs; however, DHA and ∑n‐6 PUFA contents were considerably lower. Additionally, contents of nutritious minerals K and Ca in precocious crabs were significantly higher than those in normal crabs, while Zn and Fe were significantly lower. In short, our data indicated that precocious Chinese mitten crabs are also a nutritious food, and even in some respects their nutritional value is higher than normal crabs.     

眼柄切除及注射黄体酮对中华绒螯蟹幼蟹卵巢发育的影响

采用切除单侧、双侧眼柄及注射黄体酮药物的方法研究对幼蟹卵巢发育的影响。结果表明，切除双侧眼柄可明显增加幼蟹体重、蜕壳频率，极显著提高卵巢指数、肝胰腺指数和卵巢／肝胰腺质量比，极显著增大卵母细胞直径；切除单侧眼柄可极显著增加卵巢指数和卵巢／肝胰腺质量比，极显著增大卵母细胞直径；注射黄体酮药物可极显著增大卵母细胞直径，卵巢指数、卵巢／肝胰腺质量比增加未达统计学上的显著水平。