曼氏无针乌贼幼体耗氧率和排氨率及其影响因素

采用室内实验生态学方法研究曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)幼体耗氧率和排氨率的昼夜变化规律及其受温度变化的影响.结果表明,在正常海水(温度20 ℃,盐度25)条件下,曼氏无针乌贼幼体的耗氧率昼夜变化范围为0.52～0.67 mg/(g·h),排氨率的昼夜变化范围为0.062～0.071 mg/(g·h).曼氏无针乌贼幼体的耗氧率与排氨率受昼夜变化的影响比较明显,其代谢高峰出现在早8∶ 00.温度对曼氏无针乌贼幼体的耗氧率与排氨率的影响显著(P<0.05),在16～28 ℃,耗氧率和排氨率均随海水温度的升高而增加,在28℃时达到最高值,但在32 ℃时耗氧率和排氨率均明显降低.     

曼氏无针乌贼荧光染色标志方法研究

建立一种高效的标志方法,为更加准确地评价曼氏无针乌贼增殖放流的效果提供技术保障.以曼氏无针乌贼为试验对象,利用茜素络合物(ALC)浸泡曼氏无针乌贼幼体,对其内壳进行标志.设置5个浓度梯度组和2个时间段,测量并观察曼氏无针乌贼胴背长、体质量及存活率.将试验组与对照组各50尾饲养于直径2.5m的圆形水泥池内,分别在染色后5、12、19、26 d进行随机取样并对标志曼氏无针乌贼进行高温处理5 min,解剖出内壳观察标志色保留状况.最佳染色剂浓度和浸染时间分别为90 mg/L和24 h;曼氏无针乌贼胴背长和体质量呈极显著正相关(P＜0.01),试验组与对照组曼氏无针乌贼的生长发育差异不显著(P＞0.05);26 d后内壳标志色依然清晰保留初染时的椭圆形粉红色,高温处理前、后着色部位的范围和颜色均未发生变化.ALC荧光染色标志法兼具体内标志和外部可见的双重效果,标志曼氏无针乌贼的存活率和标志色保持率均为100％.结果表明本方法简单高效,能进行批量标志处理,是一种理想的曼氏无针乌贼标志方法,具有广阔的应用前景.     

曼氏无针乌贼遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)10个个体的遗传多样性进行了检测,从24个随机引物中筛选出10个,对每个曼氏无针乌贼的DNA进行扩增,结果表明,每个引物扩增出2～8条清晰可辨且重复性强的条带,10个引物共检测到48条清晰且重复性好的条带,相对分子质量在200～2 000 bp,其中多态位点为7个,占14.6%,平均杂合度H0为0.032.实验所得出的曼氏无针乌贼的遗传多样性是比较低的.由于缺乏历史资料和数据的比较,只依据本实验的结论不能断定究竟是过度捕捞还是环境破坏影响了曼氏无针乌贼的遗传多样性.     

曼氏无针乌贼海水网箱养殖技术及资源增殖作用初步研究

曼氏无针乌贼俗称乌贼、墨鱼等,在我国东、黄渤海均有分布,乌贼经济价值很高,近几年随着曼氏无针乌贼人工育苗技术的突破,乌贼人工养殖也逐渐成为热门话题。浙南地区港湾众多,气候适宜,是发展养殖的良好场所。前年,我们进行了乌贼海水网箱养殖试验,并取得成功,现将试验报告如下。一、材料与方法1.试验海区本试验地点位于浙江省苍南县霞关镇海区,该海区污染少,溶氧大于4毫克/升,pH值为7.6～8.2,     

曼氏无针乌贼繁养殖现状

正曼氏无针乌贼俗称墨鱼,隶属于软体动物门、头足纲、十腕目、乌贼科、无针乌贼属。有关曼氏无针乌贼的研究虽已有大量报道,但有关其基本生物学特性及繁养殖现状的报道较少。因此,笔者通过调查、查阅相关文献及结合自身对繁养殖工作的总结,对曼氏无针乌贼繁养殖现状及产业发展趋势进行了综述,为进一步优化繁养殖技术及加快产业发展提供参考,以期逐渐修复和振兴我国的曼氏无针乌贼资源。一、繁养殖现状为了拯救绝迹的曼氏无针乌贼,21世纪初,     

浙江近海曼氏无针乌贼卵巢周年变化的研究

曼氏无针乌贼Sepiella maindroni de Rochebrune在中国东、黄渤海均有分布。近年来，其产量不断下降。因此开展乌贼生物学的研究，合理地利用、保护乌贼资源已引起人们的注重。关于乌贼繁殖生物学，仅对其繁殖习性作了些研究。曼氏无针乌贼的人工孵化近年来作过初步探讨。在乌贼性腺发育方面，对金乌贼Sepia eseulenta Hoyle作过研究。然而曼氏无针乌贼的性腺发育至今还未见报道。本文拟对曼氏无针乌贼卵巢周年变化作些观察，为乌贼的增养殖提供些基础生物学资料。     

曼氏无针乌贼规模化全人工育苗技术初探

为研究曼氏无针乌贼规模化全人工育苗技术,2008～2010年以人工养殖的曼氏无针乌贼成体作亲本进行了育苗试验.试验中采取了下列技术措施:对乌贼亲体进行强化培育和生殖调控,促进性腺发育成熟;确立乌贼幼体的饵料系列并保障供给;做好育苗水体的水质调控和苗种的病害防治.3年共获受精卵4075.8 kg,平均孵化率82.5％;培...     

玻璃管动物标签标志曼氏无针乌贼幼体的效果初探

近年来,随着苗种繁育技术的突破,曼氏无针乌贼大规模增殖放流工作已在中国沿海迅速展开,但至今中国尚不能对增殖放流活动的实际效果进行准确评估,建立适于曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)的增殖放流标志方法是准确评估增殖放流效果的重要前提。本研究采用玻璃管动物标签法对曼氏无针乌贼幼体进行了标志,并对该标志的有效性、保持率及其对乌贼行为、生长及存活率的影响进行了评估。结果表明:将玻璃管动物标签植入内壳包膜后,可在乌贼幼体(胴长2.63～2.88 cm)背部标签所在位置形成明显的隆起,可直接通过肉眼或标签阅读器进行准确快速识别;室内养殖条件下,50 d后乌贼标志的保存率达100%;标志后乌贼行为活动正常,并仍保持较快的生长速度,50 d内即达到成体规格并达性成熟,其瞬时生长率达5.93%/d;标志乌贼的全长、胴长、胴宽、体重、壳长、壳宽和壳重等生长参数上均与对照组无显著差别(P0.05);标志乌贼实验期内的累计存活率达78.85%,与对照组相比无显著差别(P0.05)。研究认为,玻璃管动物标签是一种易识别、低损伤、保持率高的理想增殖标志,可有效运用于曼氏无针乌贼的大规模标志放流及增殖效果评估过程。本研究可为曼氏无针乌贼及其他头足类水产动物种质资源保护提供方法支持。     

曼氏无针乌贼的卵子发生及卵巢发育

采用组织学方法对人工养殖曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)卵子发生、卵巢发育周期进行组织学、细胞学观察。根据细胞大小、胞核形态及卵母细胞与滤泡细胞的关系,将曼氏无针乌贼卵子发生划分为卵原细胞期、卵母细胞期、成熟期和退化吸收期4个阶段,并阐述了各期卵母细胞的组织学特征。曼氏无针乌贼卵子发生过程具有种的特异性,大约孵化出膜12 d的乌贼可见有卵原细胞,此后进入增殖期。卵母细胞属于典型的滤泡型,发育过程中同时存在同步性与异同步性;卵母细胞无初级卵膜,只有次级卵膜和三级卵膜,次级卵膜由滤泡细胞分泌,三级卵膜由输卵管腺、缠卵腺以及墨囊分泌物共同构成。通过对卵巢的外观形态和组织学观察,将曼氏无针乌贼卵巢发育划分为6个时期。     

曼氏无针乌贼水泥池养殖技术

曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni de Rochebrune)俗称墨鱼,属软体动物门、头足纲、十腕目、乌贼超科、乌贼科、无针乌贼属。2004年宁波大学突破曼氏无针乌贼人工育苗技术后,又获得了曼氏无针乌贼的海水围塘养殖、水泥池养殖及网箱养殖成功,本文就水泥池养殖技术作一介绍。     

光照对曼氏无针乌贼行为习性的影响

设置了3个光照强度梯度和红、白、橙、绿、蓝5个光照颜色,研究光照对曼氏无针乌贼行为习性的影响。试验结果表明:曼氏无针乌贼对光色和光强都有反应,而且表现出正趋性;对于同一光强下的红、白、橙、绿4种光照颜色来说,曼氏无针乌贼较喜欢红光和绿光。     

胶州湾曼氏无针乌贼资源量与季节变化的调查研究

根据2005年和2006年逐月在胶州湾进行的底拖网调查，并对底拖网渔获物中的头足类进行定性定量分析与测定，利用扫海面积法评估胶州湾海域曼氏无针乌贼的资源量。调查分析了其分布特点与季节变化，并进行了渔获物中头足类组成的比较，分析了其种类组成、分布特点与季节变化特征。结果表明，胶州湾曼氏无针乌贼资源量有明显的季节变化，夏、秋两季的资源量明显高于其他季节，分别达到26.7t和21.5t（2006）；夏、秋两季的重量比明显高于其他季节，分别达到23.4%和27.8%。近几年，以曼氏无针乌贼为主捕对象的头足类资源量基本保持稳定，年平均资源量约14t，接近20世纪90年代中期的水平。     

曼氏无针乌贼胚胎发育的初步观察

将曼氏无针乌贼受精卵卵膜剥离,在显微镜或解剖镜下观察胚胎发育的全过程,结合室内人工育苗的孵化技术进行探讨。曼氏无针乌贼卵为粘性卵,呈黑色,类型属端黄卵,卵膜属三级卵膜,卵裂类型为不全卵裂,囊胚呈盘状,发生类型为直接发生型。在水温为23.8～26.2℃、盐度29.3时,最快14d孵出幼体,最慢23天孵出幼体,孵出幼体高峰期为18～21d,高峰期的孵出量占总孵出量的79.4%,孵化率为83.1%。胚胎发育速度与温度高低（20～30℃）成正比,盐度低于22对孵化率有严重影响。     

金乌贼和曼氏无针乌贼胚胎发育及其盐度耐受能力的比较研究

采集金乌贼(Sepia esculenta)及曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)受精卵,观察了金乌贼胚胎发育过程,比较分析了2种乌贼受精卵和仔乌的形态特征;分别研究了金乌贼受精卵在盐度20,25,30(对照)、33,36及曼氏无针乌贼受精卵在盐度15,20,25,30(对照)、36条件下的孵化率,分析了2种乌贼受精卵在192 h盐度突变过程中卵液渗透压和受精卵Na~+/K~+-ATPase活力的变化,比较了其在相同盐度20,25,30,36条件下的孵化率及耐受盐度突变的生理适应过程.结果表明,金乌贼胚胎发育第7天器官开始分化,第14天器官开始形成,盐度30、水温22～24℃时,其孵化时间为20～21 d;盐度30处理组,2种乌贼受精卵的孵化率均显著高于其他盐度处理组(P<0.01);在192 h盐度突变过程中,2种乌贼受精卵卵液渗透压随环境盐度的变化而变化,金乌贼受精卵卵液渗透压与环境渗透压相等,而曼氏无针乌贼受精卵卵液渗透压比环境渗透压平均高出60 mOsm/kg,2种乌贼受精卵均未检测到Na~+/K~+-ATPase活性.比较发现,虽然2种乌贼受精卵调节渗透压能力均较弱,但曼氏无针乌贼受精卵比金乌贼能更好地适应盐度变化.本研究旨在探明两种乌贼受精卵对盐度的适应性,为开展规模化人工繁育与资源增殖提供基础依据.     

Peroxiredoxin 6 from cuttlefish ( Sepiella maindroni ): molecular characterisation during development and the response to thermal stress

The aim of this work was to investigate the function of the peroxiredoxin family member Peroxiredoxin 6 in Sepiella maindroni (Smprx6) during embryonic development and the response to thermal stress. The 1064 bp full-length coding sequence of Smprx6 includes an open reading frame of 660 bp encoding a polypeptide of 219 amino acids with a predicted molecular mass of 24.4 kDa. The deduced protein sequence shares significant homology with other reported Prx6 enzymes. Phylogenetic analysis classified SmPrx6 into the 1-Cys-Prx cluster, and quantitative real-time PCR (qPCR) demonstrated constitutive mRNA expression in all tested tissues and during five different embryonic developmental stages, as previously documented in other cephalopods. Thermal stress induced Smprx6 expression, which peaked at 6 h then returned to control levels. Recombinant SmPrx6 was active at different concentrations and was thiol-dependant. The results suggest that SmPrx6 plays a major role in the development of Sepiella maindroni and its response to oxidative and thermal stress.     

曼氏无针乌贼胚胎发育生物学零度和有效积温的研究

通过室内恒温培育试验和数理统计方法，研究了曼氏无针乌贼（Sepiella maindroni）受精卵发育的生物学零点温度、有效积温及胚胎发育的温度系数（Q10）。结果表明，曼氏无针乌贼受精卵发育的生物学零点温度为（6．48±0．44）℃；受精卵发育为初孵幼体的有效积温为（396．91±2．81）℃·d；18．0～24．0℃为曼氏无针乌贼胚胎发育的最适温度范围。     

亚硝酸氮对曼氏无针乌贼幼体的急性毒性及免疫系统的影响

研究采用常规生物毒性实验方法,进行了亚硝酸氮对曼氏无针乌贼幼体的急性毒性实验,测定了在不同浓度亚硝酸氮急性毒性胁迫下,曼氏无针乌贼幼体内酸性磷酸酶(ACP),碱性磷酸酶(ALP)、超氧化物酶活性(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的变化,并对其致死浓度进行了测定。结果表明,96 h的急性毒性实验对曼氏无针乌贼幼体的存活和免疫系统的活性有明显影响。在亚硝酸氮胁迫下,ACP活性在0.03 mg/L时急剧上升到最高,随胁迫浓度的增高,活性逐渐下降,在3.34 mg/L时低于对照组,在最高浓度胁迫下活性降到最低;ALP活性随亚硝酸氮胁迫浓度的增高也出现先增加后降低的趋势。SOD活性在亚硝酸氮胁迫下逐渐升高,在0.03 mg/L时达到最高,随后逐渐下降,但直到6.67 mg/L时才低于对照组;CAT活性也在0.03mg/L时即达到最高,但在0.67 mg/L时即低于对照组,并在最高浓度时降到最低。本实验还得出,亚硝酸氮的LC50(mg/L)为3.71 mg/L,安全浓度(mg/L)为0.013 mg/L。     

曼氏无针乌贼缠卵腺组织学及超微结构的研究

采用组织学和电镜技术对曼氏无针乌贼的缠卵腺及其腺体细胞进行了研究。试验结果表明,缠卵腺由缠卵腺壁、分泌叶瓣两部分构成。其中分泌叶瓣由两类细胞组成:Ⅰ型细胞和Ⅱ型细胞,Ⅰ型细胞有分泌功能,分泌物以糖蛋白为主;Ⅱ型细胞无分泌功能,对Ⅰ型细胞起支持作用。     

饥饿对曼氏无针乌贼肝脏与卵巢脂肪酸组成的影响

在曼氏无针乌贼（Sepiella maindroni）性腺成熟阶段（4～5月）对其进行饥饿处理，以空腹处理组饥饿0d（禁食1d）、饥饿12d（禁食13d）和饥饿24d（禁食25d）为取样时间取其肝脏和卵巢组织进行脂肪酸组成及质量分数测定。结果表明，随着饥饿时问的延长，乌贼体质量下降，肝脏和卵巢萎缩，肝脏中的饱和脂肪酸（SFA）和单不饱和脂肪酸（MUFA）较空腹处理组有显著下降（P〈0．05），而多不饱和脂肪酸（PUFA）和高不饱和脂肪酸（HUFA）均有显著提高（P〈0．05）。与肝脏相比，乌贼卵巢中的各脂肪酸组成在饥饿12d变化较小，饥饿24d时∑SFA较空腹处理组有极显著下降（P〈0．01），而∑MUFA、∑PUFA＋∑HUFA和∑n-6 PU—FA显著高于空腹处理组（P〈0．05）。