枯草芽孢杆菌改善水质提高凡纳滨对虾幼体抗逆性的研究

投放不同浓度梯度的枯草芽孢杆菌于凡纳滨对虾幼体养殖环境中,监测不同枯草芽孢杆菌使用浓度下与养殖环境相关的水质因子（氨氮、亚硝酸盐氮、化学需氧量）的变化;观察不同枯草芽孢杆菌使用浓度下凡纳滨对虾幼体对人工制造的胁迫环境的抗逆性;观测不同枯草芽孢杆菌使用浓度下凡纳滨对虾幼体的成活率与体重增长率。研究枯草芽孢杆菌对水质改善和凡纳滨对虾幼体抗逆性的影响。结果表明,枯草芽孢杆菌能显著（P〈0.05）降低化学需氧量、氨氮含量,抑制亚硝酸盐氮的产生;当枯草芽孢杆菌投放浓度为1.25×10^4cfu/ml时,水体中化学需氧量、氨态氮、亚硝酸盐氮含量均值比对照组分别降低了65.30%、59.70%、88.64%,成活率比对照组提高了10.00%,体重增长率是对照组的2.44倍;当枯草芽孢杆菌使用浓度为1.25×10^4～1.25×10^6cfu/ml时,对虾抗逆性显著（P〈0.05）增强,对虾在氨氮、亚硝酸盐氮、高锰酸钾、甲醛胁迫下24小时的成活率均值分别比对照组提高了16.94%、24.44%、44.17%、18.61%。     

溶藻弧菌VZ5株在凡纳滨对虾育苗中应用的研究

在凡纳滨对虾育苗涵状幼体期以不同频次添加溶藻弧菌VZ5株,并在糠虾幼体后搭配添加芽孢杆菌Bz5株,测定育苗过程中水质、水体中弧菌密度变动以及对虾幼体生长和存活状况,研究溶藻弧菌VZ5株在凡纳滨对虾育苗中应用的效果。结果表明,添加溶藻弧菌的3个处理组仔虾期氨氮浓度显著低于对照组;仔虾期幼体干重分别为0．0463±0．0009、0．0420±0．0006、0．0407±0．0009g／尾,显著高于对照组（0．0253±0．0003g／尾）。滏状幼体期每天添加溶藻弧菌的处理组幼体成活率显著高于其他处理组（P〈0．05）。溶藻弧菌VZ5株能够有效降低水体中氨氮的积累和促进对虾幼体生长。     

益生菌对凡纳滨对虾生长和全虾营养组成的影响

研究了芽孢杆菌制剂（Bacillus sp．，10^9CFU·g^-1）对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei（初始体重0．03g·尾^-1）生长性能、全虾营养成分和氨基酸的影响。7种试验饲料中芽孢杆菌制剂的添加量分别为0，0．5，1．0，1．5，2．0，2．5和3．0g·kg^-1饲料。芽孢杆菌制剂对凡纳滨对虾的成活率没有显著影响。摄食添加益生菌1．0和1．5g·kg^-1饲料的凡纳滨对虾的增重率高并且饲料系数低于对照组，特别是添加量为1．0g·kg^-1时，差异显著；然而，其它添加量并不存在显著性差异。添加益生菌对凡纳滨对虾全虾的水分、蛋白质和灰分含量的影响不显著；投喂添加益生菌1．0和1．5g·kg^-1饲料，脂肪含量高于对照组。饲料中添加益生菌可以改变凡纳滨对虾全虾中部分氨基酸的含量。     

凡纳滨对虾养殖土池中使用益生菌制剂效果分析

以凡纳滨对虾为研究对象,通过在养殖池中施用益生菌制剂,在露天土池中的使用量分别为0、0.3g/m3、0.45g/m3、0.6g/m3水体,研究了在凡纳滨对虾养殖水体中使用益生菌制剂对氨氮(NH+4-N)、亚硝酸盐氮(NO-2-N)、化学需氧量(COD)等水质指标的影响和对凡纳滨对虾成活率以及饲料系数的影响,目的是探讨益生菌制剂在凡纳滨对虾养殖池塘中的适宜使用量。     

枯草芽孢杆菌的分离及其净化水质的研究

对水产养殖水体及底泥中的芽孢杆菌进行分离,得到一株枯草芽孢杆菌,并研究了枯草芽孢杆菌对养殖凡纳滨对虾池水质的净化作用。试验池中枯草芽孢杆菌密度4×109个/L,间隔7 d后再以相同的剂量施放1次,于施放菌液后的第1、3、5、7、9、11天上午采集水样。试验池中COD、亚硝酸盐、H2S比对照池显著降低,总碱度显著上升,表明枯草芽孢杆菌对养殖凡纳滨对虾池水质具有明显的净化作用。     

饲料中益生菌对凡纳滨对虾生长、肠道菌群及部分免疫指标的影响

以初体质量为(0.11±0.00)g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,在室外水泥池进行10周饲喂实验,研究饲料中添加单一益生菌和复合益生菌对凡纳滨对虾生长、消化酶、肠道和粪便菌群及部分免疫指标的影响.以基础饲料为对照组,在基础饲料中分别添加地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、虾乐333(复合益生菌)、地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌(1:1)、虾乐333+地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌(1:1:1)各1 g/kg,配制5种实验饲料.实验结果显示,复合益生菌饲喂组对虾的特定生长率显著高于对照组(P<0.05),而单一益生菌饲喂组与对照组差异不显著(P<0.05).饲料中添加益生菌能使凡纳滨对虾肠道蛋白酶和淀粉酶活力升高,其中复合益生菌饲喂组淀粉酶活力显著高于对照组(P<0.05).与对照组比,饲料中添加益生菌显著降低了肠道及粪便弧菌数(P<0.05),不同程度提高了凡纳滨对虾血清蛋白浓度、酚氧化酶活力、溶菌酶活力和总抗氧化力,其中添加复合益生菌能使血清蛋白浓度及溶菌酶活力较对照组显著提高(P<0.05).上述结果表明,与饲喂单一益生菌相比,复合益生菌对凡纳滨对虾的生长、免疫力具有更好的促进作用.     

小球藻与芽孢杆菌对对虾养殖水质调控作用的研究

通过在凡纳滨对虾养殖水体中添加小球藻和芽孢杆菌,研究其对养殖水质的调控作用。结果表明,小球藻和芽孢杆菌联合处理组对水质的调控效果优于只添加芽孢杆菌组或小球藻组。菌-藻联合处理组能很好地降低水体中氮、磷的含量,对氨氮的作用尤为明显;实验进行的第5天内,NH4 -N含量显著低于对照组(P<0·05),降低率为32·94%,NO2--N降低率为10·29%,PO34--P降低率为36·02%。小球藻 芽孢杆菌组NH4 -N含量平均为0·277mg/L,日均积累速率0·0135mg/L·d,而对照组为0·0472mg/L·d;NO2--N平均含量为0·334mg/L,日均积累速率为0·0617mg/L·d。小球藻在调控水质的同时也向水体释放有机物,从而引起水体COD的上升。     

地衣芽孢杆菌De株对黄鳍鲷生长及其养殖池塘主要环境因子的影响

运用综合对比分析法，对黄鳍鲷（Sparuslatus）养殖中定期泼洒地衣芽孢杆菌（Bacillus lichenformis）De的应用效果进行了探讨。结果表明，施用地衣芽孢杆菌De可在一定程度上优化水体环境和养殖生产性能，使养殖黄鳍鲷的成活率、体长增长率和体质量增长率分别提高18．2％、21．0％和312％；显著降低水中氨氮（NH3-N）、亚硝酸盐（NO2^-N）、活性磷酸盐（PO；一一P）质量浓度及底泥中有机碳的质量分数（P〈0．05），其中养殖前、后期的底泥有机碳质量分数分别较对照组降低49．77％和22．63％，NO2^-N、PO4^3-P质量浓度则总体较对照组降低25．82％和41．00％，NH3-N质量浓度在养殖前、中和后期较对照组降低36．33％、18．10％和14．28％；水体中弧菌数量在养殖后期较对照组降低61．76％，底泥中的总异养细菌数量在养殖中、后期较对照组提高38．61％，整个养殖期间水体及底泥中的芽孢杆菌数量分别较对照组提高15．34％和26．37％。     

4种微生物制剂对凡纳滨对虾育苗水质及仔虾存活的影响

采用平板法测定标注为地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、粪肠球菌和植物乳杆菌制剂的活菌密度,通过16S rRNA基因测序分析对其进行菌种鉴定。在盛水250 L的玻璃钢桶中投放凡纳滨对虾无特定病原的无节3期幼体5×10~4尾,各组由溞状Ⅰ初期至仔虾Ⅰ期,连续10 d,每日分别投菌制剂1次,地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌组每次投菌5×10~8 cfu/L,粪肠球菌和植物乳杆菌组每次投菌1×10~8 cfu/L,同时投放饵料,对照组始终不投菌制剂,定期测定水质并分析仔虾存活情况。试验结果显示,4种制剂均由密度高的单一菌种构成;地衣芽孢杆菌组水体氨氮、无机磷和化学需氧量均显著高于对照组,而在育苗早期粪肠球菌和植物乳杆菌组亚硝态氮含量显著降低(P0.05);除地衣芽孢杆菌组仔虾Ⅲ期存活率显著低于枯草芽孢杆菌组外,各组存活率间差异不显著(P0.05),但枯草芽孢杆菌组仔虾存活率和活力均表现最佳,而地衣芽孢杆菌组表现最差。可见,无明显胁迫条件下,连续投放微生物制剂对凡纳滨对虾育苗水质及仔虾存活率总体上无显著提高作用,但两种芽孢杆菌制剂的作用效果存在明显差异。     

饲料中添加益生菌对凡纳滨对虾抗感染和5种免疫基因表达的影响

为研究饲料中添加益生菌对凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染能力和非特异性免疫基因表达水平的影响,以初体质量为(6.95±1.20)g的凡纳滨对虾为研究对象,在室内养殖箱进行3周的养殖实验和2周的副溶血弧菌人工感染实验;其中,对照组每日投喂普通商品饲料,实验组每日投喂在普通商品饲料中添加地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌/枯草芽孢杆菌(1:1)配制成的3组实验饲料,实验饲料中益生菌的终浓度为10⁷ cfu/g。并采用实时荧光定量RT-PCR方法,对保护率最高的地衣芽孢杆菌/枯草芽孢杆菌实验组进行凡纳滨对虾相关免疫基因表达水平的分析。实验结果表明,在饲料中添加单一益生菌或复合益生菌均可显著提高对虾抗副溶血弧菌感染的能力(P<0.05),且复合益生菌的保护效果更佳,其相对免疫保护率为31.11%。感染副溶血弧菌后,地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌实验组凡纳滨对虾血淋巴中的先天免疫缺陷基因(innate immune deficiency gene,IMD)、对虾素3a分子(penaiedin 3a)、酚氧化酶原(prophenoloxidase,proPO)、溶菌酶(Lysozyme,LZM)和甲壳素Crustin的mRNA的相对表达量均显著上调,且分别在18～24 h达到最大值。实验结果提示:饲料中添加芽孢杆菌可有效提高凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染的能力,这种能力的提高可能是通过增加抗病相关基因的表达量实现的。     

南美白对虾精养虾池放养密度试验

在连江进行南美白对虾精养虾池放养密度试验,通过水质测定,生长测定和效益分析等方面寻找能取得最好效益的适宜放养密度。研究表明:除了溶解氧与对虾放养密度成反比外,COD、PO_4-P、NO_2-N、NO_2-N、NH_4-N等水质指标均与放养密度无关,只是随着养殖时间延长,COD、PO_4-P逐渐增加。研究还表明:放养密度与对虾的体长、体重成反比,而与饵料系数成正比。养殖结果显示:在适当的条件下,提高放养密度可以增加单位面积的产量和产值。     

蛋白分离器对循环水养殖水质理化因子的调控作用

通过测定5个关键水质理化因子,研究蛋白分离器对南美白对虾养殖水质的调控作用。结果表明:使用蛋白分离器后,水体的pH值维持在8.0～8.3,养殖水体中氨氮最高达到0.917mg/L,亚硝酸盐最高达到0.324mg/L,DO含量在3.775～6.300mg/L,COD含量峰值为14.27mg/L。     

养殖密度对循环水系统中大菱鲆(Scophthalmus maximus)生长的影响

将初始体重为(580.9±44.65)g的大菱鲆成鱼按照低密度A组14.30 kg/m2、中密度B组20.49 kg/m2、高密度C组31.32 kg/m2的标准分为3个不同养殖密度组,并放养于循环水养殖系统中120 d,同时对大菱鲆成活率、体重差异、饵料系数、溶菌酶水平及养殖水体中总氨氮(TAN)、亚硝酸氮(NO2--N)、COD浓度的变化进行测定。研究表明,实验结束时A、B、C三组大菱鲆养殖密度分别达到30.09、41.30、60.07 kg/m2,各实验组成活率都在95%以上。大菱鲆养殖密度对增重率的影响主要体现在研究前期,并且随着养殖密度的增加,各实验组体重差异度出现显著变化(P0.01)。大菱鲆A、B、C组的饵料系数分别为0.73、0.75、0.82,与养殖密度呈正相关。研究开始第5天,高密度组大菱鲆溶菌酶水平升高,20 d后血液溶菌酶水平逐渐降低,40 d之后显著低于低密度组。研究期间系统运行稳定,循环水养殖大菱鲆的不同密度对系统各项水质指标总氨氮(TAN)、亚硝酸氮(NO2--N)、COD浓度的变化有显著影响(P0.05)。研究结果显示,随着养殖密度的升高,各项水质指标显著升高,但高密度组各项水质指标均未超过渔业水质标准所规定的浓度。     

包膜硫酸钠/过氧化氢/氯化钠加合物在南美白对虾养殖上的应用

对包膜硫酸钠/过氧化氢/氯化钠加合物进行稳定性和释放性能进行分析,结果发现:该物质在空气中敞开放置10d后过氧化氢分解率只有0.62%;该物质投放进水中后迅速释放出过氧化氢,10min过氧化氢的释放率达到18.6%,10h后过氧化氢的释放率为82.4%。将该物质应用在南美白对虾养殖上,结果表明:试验开始后,对照池和试验池的溶氧均呈上升趋势,试验池中的溶氧比对照池上升的幅度大;与对照池相比,试验池中的氨氮、亚硝酸盐氮、硫化物、化学耗氧量和细菌数量呈下降趋势,pH值没有明显的变化;该物质对养殖水体的作用效果持续10h以上。     

不同流向对曝气生物滤池处理对对虾养殖污水效果的影响

采用上流式和下流式曝气生物滤池处理凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖污水,连续进行30 d,分析出水水质,并观察系统运行情况和装置污染状况。研究了养殖污水中化学需氧量、氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、无机氮及活性磷酸盐6项指标的去除效果。实验结果表明:从养殖污水主要污染物指标的去除效果和稳定性上看,上流式优于下流式曝气生物滤池。在系统进水化学需氧量质量浓度为7.62～8.20 mg/L、氨氮质量浓度为0.62～0.65 mg/L、硝酸盐氮质量浓度为0.54～0.59 mg/L、亚硝酸盐氮质量浓度为0.23～0.27 mg/L、无机氮质量浓度为1.40～1.47 mg/L、活性磷酸盐质量浓度为0.24～0.29 mg/L,水温为25℃～30℃时,上流式曝气生物滤池对养殖污水中6项指标的去除率分别为:45.2%、88.9%、58.5%、78.8%、75.3%和25.1%。可见,对氨氮的去除效果最佳,亚硝酸盐氮和无机氮次之,化学需氧量和硝酸盐氮的去除效果较差,活性磷酸盐去除率最低。     

精养虾池主要生态因子变化特点与相关性分析

2011年4月至7月,对海南省儋州市排浦对虾养殖场3口凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）精养池塘水体中的叶绿素a（Chl-a）、浮游动物、异养细菌、弧菌、活性磷（PO34--P）等16项环境因子进行全程定期测定,分析养殖过程中主要生态因子的变化特点及其相互关系。结果显示,养殖过程中水体的溶解氧（DO）、pH和透明度呈现缓慢下降的趋势,悬浮物（TSS）、化学耗氧量（COD）、亚硝酸盐氮（NO2--N）、氨氮（NH4＋-N）、浮游动物、异养细菌和弧菌则呈现出逐渐增加的趋势。ρ（Chl-a）的变化特征表现为养殖前期低,中后期逐渐升高;Chl-a与硝酸盐氮（NO3--N）呈极显著的正相关,与PO34--P呈负相关。桡足类密度与TSS呈极显著的正相关,与异养细菌、弧菌、轮虫密度呈显著正相关,与Chl-a、COD呈正相关,但不显著。异养细菌与COD呈极显著的正相关,与TSS呈显著的正相关,与透明度呈显著的负相关;弧菌与TSS呈极显著的正相关,与COD呈显著的正相关,与pH、DO呈显著的负相关。     

三都澳四个水产养殖点水质周年变化分析

2011年8月-2012年7月对三都澳四个水产养殖点的营养盐(N、P)、溶解氧(D0)、化学需氧量(COD)、pH值进行了分析,结果表明,无机溶解氮(DIN)组成结构在春、秋、冬季节中主要以NO3-N为主,其次为NH4-N和NO2-N.夏季营养盐结构,NO3-N所占比例明显减低,NO2-N所占比例超过NH4-N.营养盐NO3-N浓度的周年变化为:冬季＞秋季＞春季＞夏季;NO2-N的浓度为:夏季＞秋季＞春季＞冬季;NH4-N浓度:夏、秋偏低,春、冬较高;P04-P的浓度:冬季＞秋季＞夏季＞春季.水体中DO浓度的周年变化为:冬季=春季＞秋季=夏季.pH变化的周年变化为:春季＞冬季＞夏季＞秋季.三都澳四个养殖点周年属于中度营养状态.     

生物絮团在斑节对虾养殖系统中的形成条件及作用效果

为确定斑节对虾（Penaeus monodon）养殖系统中生物絮团形成所需的最适碳源及添加量,试验选取葡萄糖、蔗糖、糖蜜3种碳源按碳（C）与氮（N）比（C/ N）为20：1添加,再按日投饲量的0％、25％、50％、75％和100％添加蔗糖,以期获得其最适添加量。结果显示,添加3种不同糖作为碳源均可以显著提高斑节对虾的特定生长率（P ﹤0.05）,而添加蔗糖可以显著提高斑节对虾的成活率（P ﹤0.05）;与其他组相比,添加75％的蔗糖组可以显著提高斑节对虾的特定生长率和成活率（P ﹤0.05）,促进异养细菌和浮游植物的繁殖,水体氨氮（NH4-N）、亚硝酸氮（NO2-N）等有害物质的浓度较低,过多的添加蔗糖却会起到反作用。结果表明添加75％的蔗糖最适合生物絮团在斑节对虾养殖系统中形成,并促进斑节对虾的生长。     

移植川蔓藻对育苗用海水净化作用的研究

针对近海水域污染严重海水中COD含量高，N、P极富营养化，达不到海水育苗用水标准的状况，采取大型蓄水池移植川蔓藻（Ruppir rostellata Koch)净化育苗用水，在一段时间内，大大降低海水COD、N、P等化学指标。COD平均消除率达94．38％，PO4^3-P、NH3－N等降解几近零，NO2^-N、NO3^-N未检出。采用同样技术用净化水培育日本对虾（Penaeus Japonicus Bate)，无节幼体到仔虾平均成活率高达66．3％和72．1％。     

凡纳滨对虾-鲻网围分隔混养模式下经济与生态效益评价

为探索新型对虾生态养殖模式,于池塘中构建围网开展了凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）-鲻（Mugil cephalus）混养试验。鲻密度依次为0尾（M0,对照组）、250尾（M250）、500尾（M500）和800尾（M800）。结果显示,鲻放养组的饵料系数均比对照组低,但组间差异不显著（P〉0.05）。M250组对虾产值（30.30×10^4元·hm-2）及总产值（31.02×10^4元·hm^-2）为各组最高,M800组对虾产值（20.96×10^4元·hm^-2）及总产值（23.30×10^4元·hm^-2）最低。试验结束后,放养较多鲻的处理组（M500和M800）的总有机碳（TOC）有约20 mg·L^-1幅度的下降,而M0和M250则变动极小,但组间差异不显著（P〉0.05）。养殖末期鲻放养组的亚硝态氮（NO2-N）质量浓度均高于对照组M0,且M250组NO2-N及氨氮（NH4-N）质量分数居于各组最高（P〉0.05）。试验表明,在池塘围网混养少量鲻（M250）时对虾产量最高,而混养较多鲻（M500和M800）时饲料成本较为节约且水质指标较好。采取养殖前期多放鱼,后期适当分鱼以降低密度的措施,可能更有利于虾塘经济与生态效益的提高。