超声波酶法制备血红素工艺条件的研究

将超声波应用于酶法血红素的提取,研究了单因素条件即破碎功率、破碎时间和红细胞浓度(以红细胞与加入水的比例表示,V红细胞:V水)对血红素的产量和水解度影响,采用二次正交旋转组合试验设计优化工艺条件.结果表明,红细胞超声波破碎的最佳条件为:红细胞与加入水的比例为5:1,超声波破碎功率为185.34 W,破碎时间为8.76 min.     

FeCl_3盐析法提取牦牛血中G型免疫球蛋白的工艺

采用FeCl3盐析法对新鲜牦牛血中的G型免疫球蛋白(IgG)的提取工艺进行了研究.在单因素试验的基础上,通过响应面设计对工艺进行了优化.结果表明:FeCl3溶液浓度、pH值、反应温度及氯化铁溶液浓度与pH值交互作用对IgG提取量有显著的影响.FeCl3盐析法提取新鲜牦牛血中IgG的最佳工艺条件为:反应温度为34.06℃,氯化铁浓度为2.67mmol/L,pH值为4.36,反应时间为1.78h,在此条件下IgG的提取量为8.28mg/mL.     

辅酶Q10超声波破碎法提取工艺条件研究

为了获得超声波提取辅酶Q10的最佳工艺条件,系统研究了利用超声波法提取时输出功率、每次辐射时间、工作总时间、水添加量等因素对细胞破碎和辅酶Q10提取效果的影响。结果表明,超声波提取辅酶Q10的最佳工艺条件为:输出功率500 W,每次辐射/间歇时间12 s/10 s,工作总时间12 min,水添加量45 mL/g;采用优化的超声波提取工艺,辅酶Q10提取量可达到1.196 mg/g。证明超声波破碎法提取辅酶Q10是可行的,与未破壁提取、研磨法及反复冻融法提取效果相比,辅酶Q10提取效果良好。     

牦牛血中超氧化物歧化酶提取工艺研究

以新鲜牦牛血为原料,采用微波加热及有机溶剂提取相结合的方法提取牦牛血红细胞中的超氧化物歧化酶.结果表明:通过单因素及正交试验对提取工艺进行优化,得出最优工艺条件为:微波处理时间为16s,无水乙醇添加量为0.5倍,氯仿添加量为0.25倍,丙酮添加量为1.6倍,在上述条件下提取的超氧化物歧化酶的活力可达67.137U.mL-1.     

低温无水乙醇沉淀法提取牦牛血免疫球蛋白的工艺条件研究

以新鲜牦牛血为原料,采用低温无水乙醇沉淀法提取牦牛血中的免疫球蛋白,通过单因素及正交试验,得出最佳工艺条件为:稀释倍数3倍,乙醇添加量25%,盐浓度0.15mol.L-1,pH4.5,在此条件下提取的免疫球蛋白含量为9.283mg.mL-1,提取液经低温冷冻干燥后可得白色固体免疫球蛋白.     

超声波破碎法提取多食鞘氨醇杆菌中17β-雌二醇降解酶的优化及酶学性质

采用超声波破碎多食鞘氨醇杆菌细胞壁的方法提取雌二醇降解酶,通过单因素条件研究确定各因素对超声波破碎影响的高低,依据Box-Benhnken设计原则对破碎条件进行响应面回归模型分析(RSA)。研究得到最佳条件为:菌体浓度188 mg/mL,破碎功率400 W,总破碎时间29 min(超声3 s,间隔5 s),认为破碎功率对超声波破碎的影响最大。预测破碎后得到的粗酶液总酶活力为1.484 U,实际测得的粗酶液酶活力为1.477 U。根据试验结果认为:采用超声波破碎方法可以较好地提取氨肽酶,运用响应面分析法优化超声波破碎条件是可行的。     

细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮的工艺优化

采用单因素试验与L9(34)正交试验研究了超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮的最佳工艺条件,并与传统草珊瑚总黄酮提取方法进行对比。结果表明:超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮最佳工艺条件为乙醇40%、液料比1∶10(g∶mL)、提取功率450 W、提取时间40min,提取率达8.32%。与传统方法相比,超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮工艺简便、效率高,耗能小,得率比传统方法好,具有很好的应用前景。     

牦牛乳新鲜干酪加工工艺研究

针对牦牛乳新鲜干酪的加工过程,分析了凝乳温度、pH、CaCl2添加量、发酵剂添加量对新鲜干酪产率、感官评价、凝乳时间的影响,以上述3种指标为衡量依据,优化了新鲜干酪的加工工艺.结果表明:在发酵剂添加量为2%,凝乳温度为35℃,发酵pH 5.8,CaCl2添加量0.02g/100mL时,牦牛乳新鲜干酪出品率为20.07%,且品质最佳.     

冰醋酸法提取猪血红素的研究

[目的]合理利用动物血液,优化冰醋酸提取猪血红素的方法.[方法]试验以新鲜猪血为原料,采用冰醋酸法提取新鲜猪血中的血红素,考察冰醋酸的添加量、反应温度、反应时间、氯化钠添加量等因素对血红素提取的影响.[结果]试验表明,冰醋酸法提取猪血红素的最佳工艺为：冰醋酸添加量为血球4倍,氯化钠添加量为血球的2.4％,反应时间30 min,反应温度为95℃,此条件下提取的血红素含量为40.2％.[结论]研究可为猪血资源的合理开发利用提供理论依据.     

超声波辅助提取葡萄皮渣中白藜芦醇工艺的优化研究

为优化超声波辅助提取葡萄皮渣中白藜芦醇工艺,在二水平五因素试验基础上,采用响应曲面法研究了不同工艺参数(提取温度-提取时间-超声波功率组合)对葡萄皮渣中白藜芦醇提取量的影响.结果表明:当工艺参数为乙醇体积分数50％、液料比12∶1 (mL/g)、提取温度35.6℃、提取时间34.8 min和超声波功率231 W时,白藜芦醇的最高提取量为48.72 μg/gFW,且模型的预测精度较高(相对误差为0.73％).这些结果为超声波辅助提取技术在葡萄皮渣白藜芦醇提取中的应用提供了依据.     

鹿血血红蛋白酶水解工艺条件的优化

以静脉采集的抗凝梅花鹿血为材料,考察了蛋白酶种类、酶解条件对鹿血中血红蛋白水解度、氮收率和血红素含量的影响,优化了碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavorzyme)的分步酶解工艺,以获得具有良好感官品质和富含血红素的鹿血酶解产品.结果表明:蛋白酶种类和酶解方式对鹿血血红蛋白水解效果有明显影响,采用Alcalase和Flavorzyme分步水解的效果最好.Alcalase和Flavorzyme的最适酶解温度分别为55℃和50℃,最适酶解起始pH值分别为8.0和6.5,2种酶的适宜底物浓度为8%(m/m),适宜加酶量为6 000U/g.采用分步酶解工艺时,在底物浓度8%、酶解温度55℃、起始pH值8.0的条件下,先用4 500 U/g的Alcalase酶解1 h,再用1 500 U/g的Flavorzyme酶解3 h,可获得最高的水解度、氮收率和血红素含量,其值分别为27.95%、73.75%和3.326 mg/mL.     

嗜热真菌Neosartorya fischeri P1脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质分析

从云南酸矿废水中获得了一株脂肪酶活性较高的嗜热真菌,经显微形态及转录间隔区（ITS）序列分析鉴定为新萨托菌,命名为Neosartorya fischeri P1。通过同源克隆,从该真菌中获得了脂肪酶基因Lip024,并在Escherichia coli BL21 (DE3) 和Pichia pastoris GS115 中进行表达,表达量分别为0.09 U/mL、0.26 U/mL。重组酵母菌株在3.7L发酵罐进行高密度发酵后,重组酶酶活达5.22 U/mL。重组蛋白经超滤浓缩和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。重组酶酶学性质分析表明：该酶的最适pH为7.0,在pH 3.0~7.0的范围内非常稳定,酶活力均保持在95%以上;最适温度为50℃,并具有一定的热稳定性。此外,Ca2+和Mg2+能够显著提高Lip024重组脂肪酶的酶活。     

甘草酸微生物转化菌的筛选鉴定及发酵条件优化

首先,采用单因素方法对碳源、氮源、发酵接种量、初始p H、发酵时间、发酵温度等因素进行考查,在此基础上进行4因素3水平的正交试验优化。得到的优化发酵条件是甘草浸出液10%,发酵温度40℃,p H 5.0,接种量10%,装液量75 m L/250 m L,发酵时间为6.5 d,180 r/min。在最优条件下,甘草次酸的量达到7.67 mg/m L。     

毛细管区带电泳法测定中草药中的有机酸

阿魏酸、绿原酸、咖啡酸是三种结构相似的酚酸类化合物,本研究建立了毛细管区带电泳法测定中草药中的阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的分析方法,以pH=8.7的150 mmol/L硼酸为缓冲溶液,在0.5 psi进样8 s,分离电压23 kV,检测波长320 nm,温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0.01~0.2 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999,0.997和0.999,其检出限分别为0.2μg/mL、0.4μg/mL和0.2μg/mL(信噪比为3∶1)。该方法用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等药物中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定,其样品平均回收率在96.0%~100.4%之间,取得了满意的结果。     

赭绿青霉 Sp1菌株木聚糖酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究

[目的]从土壤中分离筛选获得了一株具有高产木聚糖酶能力的真菌Sp1.[方法]经过28S rDNA测序鉴定为赭绿青霉(Penicillium ochro-chloron ).通过对摇瓶发酵条件优化试验及酶特性研究.[结果]该菌株的最适产酶条件为:2;(W/V)粗制木聚糖+0.5;葡萄糖为碳源,0.44; KNO3+0.06;蛋白胨为氮源,发酵起始pH为5.0,150 mL三角瓶装液量为40 mL,转速为220 r/min,28 ℃下培养72 h木聚糖酶酶活可达387 U/mL.将菌株Sp1发酵所得粗酶液经过纯化后研究其酶学特性,酶最适反应pH为4.0,最适反应温度为55 ℃,在40 ℃,pH 2.2～6.0,酶活性稳定.终浓度为0.01 mol/L的Na+ 、K+ 和Zn2+ 对酶活有促进作用.[结论]所筛选的Sp1菌株具有较好的应用前景.     

耐消化道逆环境双歧杆菌优良菌株的筛选

为筛选耐消化道逆环境的优良双歧杆菌菌株，以来源于母乳婴儿粪便、未断奶仔猪粪便、市售双歧杆菌制剂和本实验室保存的双歧杆菌为出发菌株，采用改良MRS液体培养基，模拟人体胃肠道逆环境，对其耐消化道逆环境特性进行了研究。通过耐酸（pH3的PBS）、耐胆汁酸盐（质量浓度1～20mg／mL）试验对初筛得到的14株菌株进行复筛，得6株菌株，它们在pH3条件下作用120min后存活率均〉93％，活菌数均〉100cfu／mL；在含5mg／mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用24h后活菌数仍〉10^6cfu／mL，除J12和B03外，其他4株在含20mg／mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用24h仍有活菌被检出（活菌数〉100cfu／mL）。在此基础上，采用胃蛋白酶和胰蛋白酶模拟胃肠液得3株耐消化道酶菌株A03、A04和L-1，在含5mg／mL胃蛋白酶的PBS培养基（pH3）作用120min后其活菌数均高达约100cfu／mL，而在含10mg／mL胰蛋白酶的改良MRS液体培养基作用24h后，其活菌数均高达约10^9cfu／mL；这2种消化道酶对其几乎没有抑制作用。研究结果表明，双歧杆菌A03、A04和L-1菌株耐受消化道逆环境的能力最好，可用做微生态制剂菌株。     

改进的Fenton法对曙红Y的脱色研究

以曙红Y染料为研究对象,对日光/草酸铁/过氧化氢组成的改进Fenton试剂处理曙红Y染料废水进行了研究,探讨了反应时间、pH、过氧化氢投加量、草酸钠以及硫酸铁用量对脱色率的影响。并确定其最佳条件为:溶液pH值为3左右,草酸钠1 mL,硫酸铁2 mL,H2O20.5 mL,在此条件下光照30 min曙红Y溶液的脱色率达99.80%。     

绿豆核酸酶的提取及活力测定

[目的]优化绿豆核酸酶的提取条件并测定其活力。[方法]利用单因素和正交试验,考察提取时间、料液比、p H、芽长几个因素对从绿豆芽中提取核酸酶的影响,优选出各影响因素的最佳水平,并进行活力测定。[结果]提取时间20 h,料液比1∶12(g∶m L),p H 3.0,芽长是绿豆长的4倍时,绿豆核酸酶酶活最高为478.86 U/m L。影响绿豆核酸酶提取的因素主次顺序依次为提取时间、p H、料液比、芽长。采用饱和度为80%的硫酸铵盐析沉淀后,酶活达1 569.6 U/m L,较提纯前提高了2.28倍。[结论]该研究可为核酸酶的开发利用提供参考。     

香猪采食前后胃液分泌与血浆胃泌素浓度的变化

在装置长久性隔离小胃和临时性颈静脉插管的香猪试验发现,动物在早晨饲喂前小胃胃液分泌量极少,甚至没有。饲喂后小胃胃液分泌量骤然升高,约３ｈ达到高峰。进食前胃液酸度很低,甚至可达ｐＨ６６。进食后胃液酸度显著升高,ｐＨ在１９左右。游离酸含量比结合酸高３倍,同时胃蛋白酶活性明显增强,可维持５～６ｈ。血浆胃泌素水平正常变动范围在１６７±７８５ｐｇ／ｍｌ,并受进食的影响,进食后１,３ｈ均出现高峰。     

高效液相色谱法检测饼干中的三聚氰胺

建立由高效液相色谱法检测饼干中三聚氰胺的方法。样品用1%三氯乙酸和2.2%乙酸铅超声提取,色谱柱为Hypersil ODS 100 mm×4.6 mm,5μm,流动相为乙腈∶辛烷磺酸钠离子对试剂(pH 3)=15∶85(V/V),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为210 nm,柱温为40℃。三聚氰胺在0.2~10μg.mL-1范围内,有良好的线性关系。在空白样品中添加1、2和4μg.mL-1的标准工作液,平均回收率在80.5%~93.5%之间,相对标准偏差为7.7%(n=9)。