鸡传染性法氏囊病琼扩抗原和阳性血清的研制

取人工接种IBD强毒及自然感染发病雏鸡的法氏囊组织,经研碎、离心、上液加福尔马林灭活制成抗原,同已知IBD阳性血清做AGP反应,出现清晰的沉淀线,用IBD弱毒苗及强毒苗,3次免疫健康雏鸡后,采血分离血清,同IBD抗源做AGP反应,其抗体效价可达32×以上。自制的抗原、血清,已应用于科研、疫情诊断及抗体检测,效果很好。     

重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在多联疫苗中的免疫效果评价

旨在研究重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在多联疫苗中的免疫效果。将50羽21日龄SPF鸡平均分为5组,分别用新流法(新城疫ND-禽流感H9-传染性法氏囊IBD)三联疫苗进行免疫,1组为非免疫对照组,2组免疫剂量0.05 mL,3组免疫剂量0.1 mL,4组免疫剂量0.2 mL,5组免疫剂量0.3。免疫后第21天采血,检测ND/H9血凝抑制抗体和IBD琼脂免疫扩散抗体。并用传染性法氏囊病毒强毒BC6/85株F₁代点眼攻毒,攻毒剂量为每只0.1 mL,观察96 h后剖检。结果表明,免疫后21 d,第5组血清中ND/H9 HI抗体分别为8.1log 2和 9.0log 2,IBD抗体4个试验组均显著高于对照组(P<0.05),5组显著高于2组。1组攻毒鸡全部发病,法氏囊外观发黄,呈胶冻样,囊内剖开有黏液,部分肉眼可见出血。1组未攻毒对照和免疫组,均未见异常,免疫攻毒保护率为100%。结果表明,重组鸡传染性法氏囊病毒VP2蛋白在三联疫苗中免疫剂量为每只0.05 mL,具有良好的免疫保护力,且不影响疫苗中其他抗原的免疫效果。     

不同法氏囊病活疫苗对鸡法氏囊发育的影响和对新城疫免疫效果影响的评价

评价常用的6种IBD疫苗株对鸡法氏囊发育的影响和对新城疫免疫效果影响,为临床选用疫苗提供参考.将SPF鸡分成6个试验组和1个对照组,每组25只.7日龄时,试验组分别用A80株、D78株、B87株、KS96株、MB株和2512株滴口免疫,每只鸡各1羽份.各组分别在免疫后4 d、9 d、20 d随机抽取5只鸡计算法氏囊指数.各组于IBD免疫后14 d用La Sota株活疫苗点眼、肌肉注射La Sota株油佐剂灭活疫苗各1羽份,对照组同时进行免疫.免疫后每隔7 d检测1次NDV抗体.42日龄时各组以鸡新城疫强毒F48E9攻击,观察攻毒保护效果.结果表明:27日龄A80、D78、B87和KS96组法氏囊指数和对照组相比差异不显著(P>0.05);MB和2512与对照组之间差异极显著(P<0.01).A80、D78对ND疫苗诱生机体产生抗体的影响小(P>0.05);MB、2512对ND抗体影响大,抗体水平显著低于对照组(P<0.01);B87、KS96对ND抗体生成有一定的影响,和对照组相比低1个滴度左右,但从统计分析来看影响较小(P>0.05).用F48E9攻毒,结果显示A80、D78、B87、KS96和对照组保护率均为100%,而MB株组保护率为80%,2512株组保护率为70%.A80、D78、B87和KS96这4株疫苗株对法氏囊的发育影响很小;MB和2512对法氏囊发育有明显的抑制作用.MB和2512对新城疫的免疫保护有较大影响,而弱毒A80、D78以及中等毒力的B87、KS96对新城疫的免疫保护影响轻微.     

免疫增强剂提高禽用二联苗免疫效力的研究

为评价免疫增强剂(VA5)对禽用联苗的免疫增强作用,将VA5分别与市售鸡新城疫-传染性法氏囊(新法)二联苗合用免疫SPF鸡和蛋鸡、与新城疫-H9亚型禽流感(新流)二联苗合用仅免疫SPF鸡,评价免疫后的抗体效价和SPF鸡攻毒后的保护效力。结果显示,SPF鸡或蛋鸡免疫含VA5的新法二联苗、新流二联苗后,新城疫血凝抑制(HI)抗体效价比常规苗组提前1周达到6 log2,禽流感HI抗体效价比常规苗组提前1周达到7 log2,法氏囊血清琼扩抗体和中和抗体比常规苗组均提前1周合格,且3种抗体持续高于常规疫苗组。免疫含VA5疫苗组的SPF鸡对新城疫强毒攻毒,以临床症状判断,可达全保护;以囊病变和临床症状判断,对法氏囊的攻毒提供全保护;H9变异株攻毒后不排毒。对上述3种病毒的保护力均高于常规苗。上述结果表明,VA5免疫增强剂能够提高鸡新法二联苗、新流二联苗对鸡的免疫效力,具有很好的应用前景。     

鸡传染性法氏囊病基因工程活疫苗(VAXXITEK HVT+IBD)免疫效果评估

为评估鸡传染性法氏囊病基因工程活疫苗(VAXXITEK HVT+IBD)的免疫效果,以最小出厂剂量(HVT:2 000 pfu/只)经皮下接种1日龄SPF鸡,28 d后以传染性法氏囊病病毒标准强毒BC6/85株攻毒。攻毒后连续观察4 d,记录临床不良反应,至第4天剖检法氏囊。结果表明:试验鸡在临床上均表现正常;法氏囊剖检显示疫苗免疫组100%正常,攻毒组100%出现典型法氏囊病变。VAXXITEK HVT+IBD疫苗免疫鸡对传染性法氏囊病强毒攻击能产生良好保护。     

鸡传染性法氏囊病母源抗体对弱毒疫苗免疫效果的影响

雏鸡传染性法氏囊病 (IBD)母源抗体高低不一是造成免疫失败的主要原因 ,利用琼脂扩散试验对不同日龄的 2 76群鸡母源抗体以及免疫前后抗体的检测 ,了解鸡传染性法氏囊病母源抗体对IBD弱毒疫苗免疫效果的影响 ,从而找出最佳免疫时机     

法氏囊活性肽对传染性法氏囊病毒弱毒疫苗的免疫增强效果

将7日龄黄羽肉鸡300只均分为5组,即对照组、常规疫苗剂量配合活性肽组、常规疫苗剂量减半配合活性肽组、生理盐水组和活性肽组。通过间接ELISA测定血清抗体水平及计算法氏囊指数等试验方法,研究活性肽和传染性法氏囊弱毒疫苗联合应用的免疫效果。结果表明:常规免疫剂量配合活性肽组和疫苗剂量减半配合活性肽组的法氏囊指数显著高于对照组,常规免疫剂量配合活性肽组的血清抗体滴度显著高于对照组,而常规剂量减半组与对照组在血清抗体滴度上差异不显著。说明活性肽对传染性法氏囊弱毒疫苗有免疫增强作用,疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽应用能达到常规疫苗免疫效果。     

鸡IBD蜂胶囊毒组织灭活苗的研制与应用

为了预防鸡IBD的区域性流行,以当地典型发病鸡群的法氏囊为组织源,以蜂胶为佐剂,研制鸡IBD蜂胶囊毒组织灭活苗。室内试验表明,对10日龄AA肉鸡接种后,20、50d血清AGP抗体阳性率和对强毒攻击的保护率均达100%;田间试验表明,对6批7~15日龄,3万多只不同品种的雏鸡免疫,未发生一起IBD;常规检验表明,该苗安全、无毒副作用,保存期内性质稳定。     

鸡传染性法氏囊病流行毒株的分离与鉴定

对洛阳、焦作、平顶山、南阳四地区鸡传染性法氏囊病的发病鸡群进行了病原分离，经AGP和Dot－ELISA法检测、鸡体回归试验、鸡胚传代及理化特性的测定，证明为IBD强毒，其中南阳株毒力稍弱于其它3株。四种野毒株的毒价分别为10-7．88、10-7．5、10-6．56和10-5．6ELD50／0．2ml。     

传染性法氏囊病重组亚单位疫苗免疫效力及安全性试验

以传染性法氏囊病(IBD)重组亚单位疫苗3批次实验室制品分4个剂量(即0.500 ml、0.250 ml、0.125 ml、0.075 ml)分别免疫12组14日龄SPF鸡。接种后观察各组鸡只的食欲和精神状态。免疫后第21 d,以琼脂免疫扩散试验检测IBDV血清抗体;除N组(不免疫不攻毒)外其他组均以标准强毒株BC6/85进行攻毒。攻毒后第4 d剖检,观察法氏囊及注射部位的眼观病变,检测法氏囊中IBDV抗原。结果,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)的免疫保护率与对照组(N)的免疫保护率之间差异均显著(χ2>χ20.004 2),但3个组(D、H、L)的免疫保护率与对照组的免疫保护率之间差异均不显著(χ2<χ20.004 2)。将12个试验组(A组至L组)的血清抗体水平进行方差分析,差异显著(p<0.05);以q检验进行多重比较,9个组(A、B、C、E、F、G、I、J、K)之间及3个组(D、H、L)之间差异不显著(p>0.05),而前9组与后3组之间差异显著(p<0.05)。上述结果表明,该实验制品可诱导鸡只产生显著的血清抗体水平及抗强毒攻击的免疫力,并具有可接受的安全性。     

抗IBD高免卵黄抗体的研制

应用ＩＢＤ二价弱毒细胞苗和二价油乳剂灭活苗对鸡进行加强免疫，待高免鸡血清ＩＢＤＡＧＰ抗体效价达１：２５６以上时，收集高免蛋，用于制备抗ＩＢＤ高免卵黄抗体，制出的高免卵黄抗体ＩＢＤＡＧＰ效价为１：６４～１：１２８，用这种高免卵黄抗体对万余只ＩＢＤ病鸡进行治疗，剂量为每只鸡肌注１ｍｌ，总有效率在９０％以上。由此可见，ＩＢＤ高免卵黄抗体具有特异性好、治愈率高、取材方便、制造简便和使用方便等优点，适用于基层推广使用。     

家蚕表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的免疫原性初步研究(英文)

在家蚕培养细胞及幼蚕中表达传染性法氏囊病病毒（IBDV）主要宿主保护性抗原VP2蛋白的基础上,初步研究了该表达产物的免疫原性。Western免疫印迹和ELISA均检测到春蚕和秋蚕中的VP2蛋白活性。含VP2的春蚕蚕血制成的注射疫苗皮下注射18日龄非免疫鸡,两周后二免;含VP2的秋蚕蚕血冻干制成口服疫苗,隔天喂服18日龄非免疫鸡。于首免后第10,13,21,28,37日分别采血,第37日攻毒。病毒血清中和试验显示注射组及口服组的中和抗体滴度最高可达1∶4211.3和1∶3118.9,攻毒结果显示它们对IBDV中国标准强毒株BC6/85的攻击保护率为100%和80%。以上研究表明家蚕表达的VP2蛋白具有良好的免疫原性,从而为开发实用化低成本的疫苗打下了扎实基础。IBDV亚单位疫苗的口服免疫有效是一个重要发现。     

雏鸡感染传染性法氏囊病病毒后对新城疫疫苗的免疫反应

本文对人工感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)雏鸡接种新城疫(ND)疫苗后的红细胞凝集抑制(Hi)抗体滴度和免疫保护力进行了检测。结果表明,人工感染IBDV雏鸡一次接种ND疫苗后的Hi抗体滴度和免疫保护力,明显低于未感染IBDV的对照雏鸡;人工感染IBDV雏鸡二次接种ND疫苗后的Hi抗体滴度和免疫保护力,比一次接种ND疫苗时明显升高。     

鸡白细胞介素2口服免疫佐剂增强传染性法氏囊病病毒DNA疫苗免疫效果的研究

将含萧山鸡白细胞介素2基因的真核表达质粒pCI-IL-2的减毒鼠伤寒沙门氏茵ZJ111(ZJ111/pCI-IL-2)口服接种小鼠和雏鸡,并与传染性法氏囊病病毒(IBDV)DNA疫苗联合免疫雏鸡观察其免疫效力.结果表明:利用减毒沙门氏菌作为栽体的鸡白细胞介素2口服免疫增强剂具有相对的安全性,重组ZJ111/pCI-IL-2茵能明显增强IBDV DNA疫苗对强毒株攻击保护率;增强IBDV DNA疫苗诱导的抗体的效价(P＜0.05);增强IBDV DNA疫苗所诱导的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖反应(P＜0.05),上述结果初步表明以减毒沙门氏菌为载体的白细胞介素2免疫增强剂具有良好的安全性和免疫增强作用,为研制低成本、实用化的禽类口服免疫增强剂奠定了基础.     

应用对流免疫电泳对鸡传染性法氏囊病抗体的检测

本项工作应用不连续对流免疫电泳(DCIE)法与琼脂双扩散(AGP)法相对照,对115只1日龄雏鸡和60只4周龄雏鸡人工感染传染性法氏囊病毒(IBDV)后的血清沉淀抗体消长情况进行了检测。两法对比,DCIE法检出IBDV血清沉淀抗体的时间较AGP法明显提前,灵敏度高,方法简单快速。     

传染性法氏囊病重组亚单位疫苗保存期试验

将14日龄SPF鸡分为5组,A、B和C组分别接种保存期为203、403、70 d的传染性法氏囊病重组亚单位疫苗,D和E组不接种。35日龄时,对A、B、C、D组的鸡以100倍法氏囊感染剂量的标准强毒株IBDV BC-6/85进行滴鼻。攻毒后第4天,将所有鸡致死,进行剖检,观察法氏囊眼观病变,取法氏囊组织以琼脂免疫扩散试验检测传染性法氏囊病毒抗原。法氏囊未见到明显肿大、变黄或胶冻样渗出物或出血等眼观病变及法氏囊中传染性法氏囊病毒抗原检测阴性判定为受到免疫保护。将各组的试验数据以x2检验进行统计分析。结果,A、B、C、D组的免疫保护率差别具有统计学意义,A与D组、B与D组、C与D组之间的免疫保护率具有极显著差异。结果表明,在2~8℃保存1年该疫苗的稳定性和免疫原性仍然相当好。     

传染性囊病抗原-抗体复合苗免疫雏鸡的效果

用ＩＢＤＶ抗体与某ＩＢＤ商品疫苗民ＩＢＤＶ－Ａｂ复合苗,用ＩＢＤＶ－Ａｂ复活 合苗与ＩＢＤ商品疫苗在有母源抗体的雏鸡中进行免疫对比试验,试验鸡随机分为４组,饲养在隔离器中,第１组为空白对照组,第２组为攻毒对照组,第３组在１０ｄ龄用复合苗进行免疫第４组在１０ｄ龄用商品苗进行免疫、各组从１１ｄ龄起每隔１０ｄ采血,用酶联免疫吸附试验检测血清中ＩＢＤ抗体水平,３５ｄ龄时进行攻毒试验,试验结果显示,２１ｄ龄     

中雏和大雏感染传染性法氏囊病后对新城疫疫苗免疫效应的影响

本项工作对人工感染传染性法氏囊病毒(IBDV)的中雏和大雏接种新城疫(ND)疫苗后的免疫机能变化进行了研究。结果表明,人工感染 IBDV 的雏和大雏接种 ND 疫苗后,其血清 HI 抗体滴度低于对照鸡;其血清 IgG 和 IgM含量的增高程度不如对照鸡明显;但对 NDV 攻击仍有很高的免疫保护力。