RAPD标记检测与肉鸡肥度性状关联的QTLs——肉鸡个体间RAPD指纹变异

采用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＰＡＤ）技术分析了肉鸡群个体间ＲＡＰＤ指纹的变异程度。１０个随机引物在３６只公鸡中共扩增出８３个片段,其中有６７个是多态性片断,多态率为８０．７２％,１１个随机引物在３６只母鸡中共扩增了９９个片段,其中有８６个是多态性片段,多态率为８６．８７％,公、母鸡群体内个体间遗传相似系数分别为０．７８５８、０．７３２８。结果表明：ＲＡＰＤ标记的多态性明显,作为一种ＤＮＡ标记,它可以     

葡萄无核基因的RAPD遗传标记

报道了用随机引物和混合分离分析（ＢＳＡ）方法检测葡萄无核基因连锁的遗传标记。ＤＮＡ混合样来自Ｂ７２－２１６×Ｂ４５－１８７的杂交后代。两个事样分别由９个表现型为无核和有核杂种组成，除有核与无性状外，其他性状是随机的。用１０碱基随机序列的１０９个引物筛选混合样以期获得多态型ＤＮＡ片段。结果在引物ＵＢＣ－２６９扩增后，５００对碱基的ＤＮＡ我态型片段出现在无核样，而有核样不该多态型片段，进一步用杂种、父     

应用RT-PCR和RFLP分析肾型鸡传染性支气管炎病毒基因型

对来自浙江省３个不同地区的肾型鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ－ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ）和参考株Ｈ１２０,通过蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ处理、酚－氯仿法抽提基因组ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增得到了预期为１．７２ｋｂ的Ｓ１蛋白基因ｃＤＮＡ,用限制性内切酶ＨａｅⅢ,ＰｓｔＩ,Ｋｓｐ６３２１对Ｓ１基因ｃＤＮＡ进行ＲＦＬＰ分析。结果表明ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ毒株的ＲＦＬＰ带型相同,但与经典的肾型ＩＢＶ代表株（即Ｔ株、Ｇｒａｙ株、Ｈｏ     

葡萄无核基因的RAPD遗传标记

报道了用随机引物和混合分离分析（ＢＳＡ）方法检测葡萄无核基因连锁的遗传标记。ＤＮＡ混合样来自Ｂ７２－２１６×Ｂ４５－１８７的杂交后代。两个混合样分别由９个表现型为无核和有核杂种组成，除有核与无核性状外，其他性状是随机的。用１０碱基随机序列的１００个引物筛选混合样以期获得多态型ＤＮＡ片段。结果在引物ＵＢＣ－２６９扩增后，５００对碱基的ＤＮＡ多态型片段出现在无核样，而有核样不出现该多态型片段。进一步用杂种、父本及其无核基因的供给者无核白（ＴｈｏｍｐｓｏｎＳｅｅｄｌｅｓｓ）和百乐葡萄（Ｐｅｒｌｅｔｅ）作模板，用引物ＵＢＣ－２６９扩增，一些杂种、亲本及无核基因的供给者也拥有５００对碱基的多态型片段。据此分析，葡萄的无核性是由多基因控制的，这些基因有主效和微效之分；本研究获得的分子标记ＵＢＣ－２６９５００与葡萄无核基因之一有连锁关系，而且与主效基因之一有连锁     

RAPD标记在日本兵库县20个酒米品种类群划分中的应用

应用ＲＡＰＤ分子标记对日本兵库县２０个酒米品种的类群进行了研究。筛选出对不同基因型酒米品种ＤＮＡ扩增具有较好多态性的引物１１个,它们分别是Ａ０２、Ａ０８、Ｂ１８、Ｃ１５、Ｄ０３、Ｄ０８、Ｇ０５、Ｍ１１、Ｑ１６、Ｓ１３和Ｔ０６。根据这些随机引物对不同品种总ＤＮＡ具有特性性的扩增谱带,建立不同品种的ＲＡＰＤ多态性标准模式图,可以快速鉴别品种和进行纯度分析;依据扩增谱带建立０、１型数据,计算２０个酒米品     

葡萄无核基因RAPD标记的序列分析

报道了用Ｑｉａｇｅｎ Ｋｉｔ纯化ＲＡＰＤ遗传标记，用细菌质粒ｍ１３克隆ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ片段，采用自动荧光ＤＮＡ测序仪（型号３７３Ａ）测定了该ＤＮＡ片段的核苷酸组成及其排列顺序。无核白ＲＡＰＤ标记由５１９对核苷酸及其特定序列组成。因为无核白是无核基因的原始供体，作者认主所获无核白ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ序列，可以作为合成探针的基础，用于检测无核葡萄育种和无核品种的无核性。     

葡萄无核基因RAPD标记的序列分析

报道了用ＱｉａｇｅｎＫｉｔ纯化ＲＡＰＤ遗传标记，用细菌质粒Ｍ１３克隆ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ片段，采用自动荧光ＤＮＡ测序仪（型号３７３Ａ）测定了该ＤＮＡ片段的核苷酸组成及其排列顺序。无核白ＲＡＰＤ标记由５１９对核苷酸及其特定序列组成。因为无核白是无核基因的原始供体，作者认为所获无核白ＲＡＰＤ标记的ＤＮＡ序列，可以作为合成探针的基础，用于检测无核葡萄育种和无核品种的无核性。     

分子标记及其在植物育种中的应用

本文介绍了限制性片断长度多态性（ＲＦＬＰ）、随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）、扩增片断长度多态性（ＡＦＬＰ）、简单重复序列（ＳＳＲ）、染色体原位杂交（ＩＳＨ）分子标记的基本原理、特点及其在植物育种中的应用。在植物育种中分子标记可用于绘制品种、品系的ＤＮＡ指纹图谱、种质资源遗传多样性的研究、种质资源的创新与鉴定、分子标记辅助选择。     

DNA提纯方法对6种甘蔗亚族植物RAPD的影响

甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰ＲＡＰＤ扩增反应的主要成分。本研究以ＣＡＴＢ法和ＳＤＳ法为基础,着重对抗氧化剂（ＰＶＰ等）、酶（蛋白酶Ｋ、ＲＮａｓｅＡ）和酚抽提等因素对提取ＤＮＡ的质量及其ＲＡＰＤ的影响进行了比较筛选。结果表明：①甘蔗ＤＮＡ提取质量和纯度与ＲＮａｓｅＡ、抗氧化剂等处理直接相关,蛋白酶Ｋ、ＣＡＴＢ和ＳＤＳ的处理无明显差异;②对于甘蔗ＲＡＰＤ反应,模板ＤＮＡ中含有一定量的ＲＮ     

用RAPD和RFLP定位水稻香味基因（I）

本文用ＣＴ９９９３／ＫＤＭＬ１０５的Ｆ２分离群体为材料，以香味和非香两类混合集群核ＤＮＡ为模板进行ＲＡＰＤ分析，结果表明，在检测过的３００个随机引物中，只找到１个引物在香味与非香群体之间扩增出多态性产物，这个只在非香九体中扩增到１．５ｋｂ片段表现与香味性状紧密连锁，就该引种对亲本，Ｆ２个体和其它不同品种的ＲＡＰＤ分析，进一步证明了这种多态的可靠性，该分子标记的ＲＡＰＤ分析可直接应用于水稻育种实践。     

藏山羊RAPD及RFLP标记的初步研究

利用简单随机抽样获得亚东山羊,高原型藏山羊样本,以吕梁山羊为对照进行基因组ＤＮＡ ＲＡＰＤ及ＲＦＬＰ标记的分析。结果表明,序列为５‘－ＴＧＧＴＧ－ＣＡＣＴＣ－３’的随机引物可以作为区分亚东山羊与高在型藏山羊的标记引物,Ｓ及ＭＡＰＤ在某种程度上揭示了类群间遗传相似性;     

银杏主要栽培品种的分子鉴别

以１５个银杏主要栽培品种的种子胚乳为材料,利用筛选出来的１２种具多态型的引物进行ＲＡＰＤ分析。结果表明,１５个品种之间在分子水平上存在很大差异,并确定了这些品种的ＲＡＰＤ标记基因型,以标记基因型为依据,可以利用单倍体种子胚乳和二倍体叶片组织在ＤＮＡ水平上对这些品种进行有效的鉴别。依据各个品种的标记基因型对这些型品种进行了分子聚类的结果与传统的三大类分类法非常吻合。     

尿激酶原基因cDNA在BHK21细胞中的表达

将人尿激酶原基因ｃＤＮＡ分别插入到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子和ｐＳＶ２ｎｅｏ的ＳＶ４０启动子下游,构建了重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ－２－ＵＫ分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞。ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ在哺乳动物细胞中能够表达,７２ｈ表达量分别为２８．７ｎｇ／ｍｌ和１３．５ｎｇ／ｍｌ。     

6种寄主桃蛀果蛾遗传变异的RAPD分析

用２５种随机引物对苹果、梨、杏、酸枣、枣、山楂６种寄主桃蛀果蛾基因组ＤＮＡ进行了随机扩增多态 ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，结果表明， ２５种随机引物中有 ２２种出现不同程度的 ＤＮＡ多态性标记，多态百分比为７１．９％．根据Ｎｅｉ氏片段共享度公式计算了６种寄主桃蛀果蛾两两配对间的遗传距离，６种寄主桃蛀果蛾的平均遗传距离为０．５４２ ６，其中梨桃蛀果蛾与酸枣桃蛀果蛾遗传距离最远为０．７０４，枣与酸枣遗传距离最近为０．４６２ ７，用ＵＰＧＭＡ法构建了６种寄主桃蛀果蛾的分子聚类图．     

尿激酶原基因cDNA在BHK21细胞中的表达

将人尿激酶原（Ｐｒｏ－ＵＫ）基因ｃＤＮＡ分别插入到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子和ｐＳＶ２－ｎｅｏ的ＳＶ４０启动子下游,构建了重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ,分别将这两种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞。ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ｐｃＤＮＡ３－ＵＫ和ｐＳＶ２－ＵＫ在哺乳动物细胞中能够表达,７２ｈ表达量分别为２８．７ｎｇ／ｍｌ和１３．５ｎｇ／ｍｌ。     

用RAPD分析鉴定葡萄属远缘杂种

用随机扩增多态型ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在幼苗期鉴定了圆叶葡萄和真葡萄亚属杂交的杂种。结果表明，以两个杂交组合后代及其亲本ＤＮＡ作模板，用随机引物ＵＢＣ２５０－ＵＢＣ－２６６和ＵＢＣ－２７２可以分别扩增出１４００，１４００，３５０６ ５００ｂｐ的多态性片段，作为来自无核亲本的分子标记。     

四川省四大地方品种猪的随机扩增多态DNA分析

使用２１种随机引物，对四川省四个地方猪品种共１８个个体进行了随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析。结果表明：ＲＡＰＤ标记具有个体特异性，其多态总频率为７８．４％；品种内遗传变异的大小顺序依次为荣昌猪、内江猪、雅南猪和成华猪；内江猪、雅南猪和成华猪间的亲缘关系较近，而荣昌猪与这三个品种的亲缘关系却较远。研究结果与这四个品种的地理分布状况和品种形成历史间存在一致性     

用RAPD分析鉴定葡萄属远缘杂种

用随机扩增多态型ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在幼苗期鉴定了圆叶葡萄和真葡萄亚属杂交的杂种。结果表明，以两个杂交组合后代及其亲本ＤＮＡ作模板，用随机引物ＵＢＣ－２５０，ＵＢＣ－２６６和ＵＢＣ－２７２可以分别扩增出１４００，１４４０，３５０和５００ｂｐ的多态性片段，作为来自无核亲本的分子标记     

番茄乙烯形成酶基因的克隆及其反义基因的表达载体构建

从成熟的番茄果实中提取总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增合成乙烯形成酶ｃＤＮＡ,并将其克隆至载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ的ＥｃｏＲＶ位点,经限制酶谱分析,构建亚克隆进行全序列测定和序列分析。将所克隆基因以反义基因的形式定向重组到载体ｐＳＰＲＯＫ上,同时将带有完整启动子和终止子的标记基因ＢＡＲ基因引入ｐＳＰＲＯＫ中,最终获得表达乙烯形成酶反义基因和ＢＡＲ基因的植物表达载体ｐＢＡＲ－ＥＦＥ。     

西农莎能奶山羊乳蛋白遗传学特性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和统计模型方法对２２５只西农莎能奶山羊乳中主要蛋白质的特性进行了系统的遗传分析。结果表明，西农莎能奶山羊酪蛋白基因位点间具有显著的连锁关系；β－乳球蛋白（β－ＬＧ）和Ｋ－酪蛋白（Ｋ－ＣＮ）基因位点分别对３０５ｄ产奶量、乳蛋白率和于物质率有显著影响，其中β－ＬＧＢＢ型和Ｋ－ＣＮＡＡ型个体表现出较好的泌乳性能。