紫花苜蓿花粉管通道法转基因技术初探

以紫花苜蓿品种阿尔冈金为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体进行了花粉管通道法转基因研究.于授粉后6h、9h、12h、20h、24h、28h、32h、48h滴加质粒DNA溶液,荚果成熟后收获转化种子,分别使用2套引物对To代植株进行PCR检测,结果表明:20～48h所得到的To代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后32h导入质粒DNA所获得的转化率最高,为16.7%,PCR检测初步证明外源基因已整合到受体植物基因组中.     

三种中药及绿茶对烟焦油引起的小鼠肝ANDM和GST活性变化的影响

通过烟焦油对小鼠肝微粒体ANDM和GST的作用,探讨甘草、黄芪、五味子及绿茶的抗烟毒作用。采用钙沉淀法制备肝微粒体,Lowry法测定蛋白含量并测定小鼠肝微粒体中的ANDM、GST活性水平。结果表明,2%LD50(0.01 g/kg)的烟焦油可使小鼠肝脏中ANDM显著升高,对GST的影响不明显,经统计学检验差异无显著性(P>0.05)。大剂量甘草、黄芪、五味子及绿茶组可使焦油升高的ANDM明显降低,并明显升高GST活性,经统计学检验差异有显著性(P<0.01)。说明甘草、黄芪、五味子及绿茶有明显的抗烟毒作用。     

反义RNA干扰MSTN对牛肌肉卫星细胞脂肪生成相关基因的影响

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)超家族成员,在骨骼肌中高表达;敲除MSTN后,肌肉质量增加、脂肪含量变少,但抑制MSTN表达后,如何影响脂肪沉积,尚未研究清楚.为了探究抑制MSTN表达后对脂肪相关基因表达的影响,本研究利用反义RNA技术,成功构建了双向表达载体pMSTN-CMV-CAG-antiMSTN,并通过Western blot筛选出抑制效果最佳的MSTN的反义载体.利用最佳反义MSTN载体在牛(Bos taurus)肌肉卫星细胞中有效干扰MSTN表达后,检测了脂肪合成相关基因(脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN),乙酰CoA羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase-1,SCD-1))、脂肪酸氧化分解相关基因(肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠB(carnitine palmitoyltransferase 1b,CPT-ⅠB),乙酰辅酶A氧化酶(acyl-CoAoxidase,ACOX1)和烯酰辅酶A水合酶(enoyl-CoA hydratase 1,ECHDC1))以及脂肪转运蛋白(fatty acidtransport proteins,FATP)表达的变化.结果显示,在MSTN基因被干扰后,肌肉卫星细胞中脂肪酸合成相关基因表达量上调,脂肪氧化分解相关基因中ACOX1和CPT-1B表达量上调,而ECHDC1基因表达量下调,另外,FATP表达基本没有变化.MSTN功能缺失后,脂肪合成和脂肪氧化分解过程都得到了加强,所以MSTN敲除所导致的脂肪减少并不是由于抑制了脂肪合成,而是由于脂肪分解加强,为肌肉提供更多的能量.MSTN下调后,CPT-1B的表达上调最为显著,而CPT-1B是脂肪酸β氧化的关键基因,所以研究结果提示MSTN对于脂肪的影响主要是通过影响β氧化过程实现的.研究结果为MSTN下调所导致的脂肪含量下降提供了理论依据,为MSTN作用于脂肪沉积的机制做出了初步探讨.     

溶栓药替奈替普酶研究进展

替奈替普酶(Tenecteplase)是在阿替普酶(Alteplase)的基础上,用Asn、Glu和Ala-Ala-Ala-Ala代替其分子中的Th103、Asn117和Lys296-His-Arg-Arg2993个位点而得到的生物技术制品,属于新型的第3代溶栓药,具有体内半衰期长,溶栓效果好,溶栓时间短,纤维蛋白特异识别性强,使用方便及危险性低等特点.替奈替普酶主要用于可以引起心肌梗死等较为严重的血栓性疾病的溶栓治疗,是目前有效的溶栓药物之一.文章对溶栓药的研究概况及第3代溶栓药替奈替普酶的基础研究和临床应用进行了综述.     

烟焦油及被动吸烟对小鼠肺芳香烃羟化酶活性的影响

为研究烟焦油和被动吸烟对小鼠肺芳香烃羟化酶(AHH)活性的影响,同时观察烟焦油对AHH活性影响的剂量反应关系和时间反应关系,以1%LD50(5.29 mg/kg),2%LD50(10.58 mg/kg)和3%LD50(15.87mg/kg)的烟焦油分别使小鼠染毒24,48 h和72 h,每日1次,然后测定肺AHH的活性。被动吸烟组置于体积50 L自制染毒柜中,烟雾浓度为69.41 g/m3,每日2次。对照组不吸烟,但处于相同条件。2周后测定肺AHH的活性。结果表明,2%LD50烟焦油组在72h后和3%LD50烟焦油组在48 h和72 h后均可以提高小鼠肺AHH的活性。2%LD50和3%LD50烟焦油作用小鼠72 h和48 h比较,对AHH活性的影响差异显著(P<0.05)。被动吸烟也可提高小鼠肺AHH的活性。表明烟焦油在一定的浓度和时间内可使AHH的活性上调,这种上调作用表现为剂量依赖性和时间依赖性,被动吸烟也可提高小鼠肺AHH的活性。     

谷胱甘肽和活性氧对哺乳动物配子作用的研究进展

文章综述了近年来关于谷胱甘肽对哺乳动物精子、卵母细胞和胚胎早期发育的作用及活性氧对精子功能的影响。在雄性和雌性配子中,谷胱甘肽起着保护精子和卵母细胞免受氧化损害的作用。在卵母细胞减数分裂中谷胱甘肽具有维持纺锤体形态的作用,受精后,巯基在精核的形成中起着积极的作用,并促进早期胚胎发育到囊胚阶段。在卵母细胞成熟过程中,谷胱甘肽的浓度发生着变化。它的合成受促性腺激素的调节,在精子的发生过程中随着精子的成熟,谷胱甘肽的浓度逐渐降低,但活性氧对精子功能也有多方面的作用。文章对卵丘细胞中小分子巯基化合物在谷胱甘肽合成中的重要作用也进行了综述。     

RFLP标记技术在植物育种中的应用

ＲＦＬＰ是一种新的ＤＮＡ水平的遗传标记。ＲＦＬＰ标记技术可用于：构建植物的遗传连锁图;进行重要经济性状的遗传分析和改良;缩短回交育种进程;利用外源种质;研究植物的亲缘关系;辅助主要基因的分离、克隆;显著提高育种过程中的选择效率。     

分子标记及其在植物育种中的应用

本文介绍了限制性片断长度多态性（ＲＦＬＰ）、随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）、扩增片断长度多态性（ＡＦＬＰ）、简单重复序列（ＳＳＲ）、染色体原位杂交（ＩＳＨ）分子标记的基本原理、特点及其在植物育种中的应用。在植物育种中分子标记可用于绘制品种、品系的ＤＮＡ指纹图谱、种质资源遗传多样性的研究、种质资源的创新与鉴定、分子标记辅助选择。