东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

为建立东方百合元帅、提拔、西伯利亚的高频愈伤体系,以幼叶、花丝、生长点为外植体,进行了不同激素组合的MS固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生研究。结果发现,Picloram比2,4-D更有利于胚性愈伤组织的诱导,幼叶、花丝更能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株,生长点的出愈率较低。幼叶在MS＋2mg／L Pieloram培养基,花丝在MS＋2mg／LPicloraIn＋0．1mg／L ABA培养基,生长点在MS＋2mg／LPieloram＋0．03mg／LTDZ培养基上能高效诱导出愈伤组织,来自幼叶的胚性愈伤组织在MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LKT＋0．1mg／LIBA培养基上能高频再生出芽,来自花丝的胚性愈伤组织在Ms＋1．5mg／LBA＋0．3mg／LKT＋0．2mg／LIBA培养基上能高频再生出芽。愈伤组织生长呈直线生长趋势。     

甜玉米和糯玉米幼胚离体培养试验

以N1、N28、T5、1＇6等4个玉米（Zea mays L．）自交系为材料,进行幼胚离体培养．通过愈伤组织的诱导、继代、分化和植株再生等试验,对影响玉米幼胚愈伤组织诱导率和胚性率的因素进行了分析．结果表明,甜、糯玉米幼胚诱导出愈伤组织的能力较为普遍,但诱导率及胚性率因基因型不同、所选用培养基不同而不同,基因型是影响玉米幼胚愈伤组织诱导和幼苗再生的一个重要因素;选择大小为1～2mm的幼胚作为外植体有利于诱导出理想的胚性愈伤组织;2,4-D是愈伤组织诱导和继代不可缺少的植物激素,在愈伤组织诱导及继代过程中2,4-D含量以2．0mg／L为宜;AgNO3有利于胚性愈伤组织的诱导和生长,最佳含量为10mg／L,比对照高27．15％．     

茶树幼胚培养萌发率与再生途径影响因素研究

从激素浓度与组合、基本培养基和蔗糖浓度等几个方面进行了茶树幼胚培养中萌发率和再生途径的影响因素研究。试验结果表明，茶树幼胚的萌发需要有一定量的生长素的刺激作用，但较强烈的细胞分裂素的作用对茶树幼胚的萌发有抑制作用；所使用的激素种类对于胚的再生途径有较大的影响，在MS＋KT2．0＋IBA0．1＋GA31．0mg／L培养基上，80％以上的幼胚可以继续发育成熟并萌发成苗；而高糖浓度则会诱导产生较多的胚性愈伤组织并从而导致不定胚的形成。     

5个水稻品种的再生能力比较

[目的]通过对天津市推广种植水稻品种进行组织培养,探索适合天津市推广水稻品种的培养条件,为天津市水稻的遗传改良工作奠定基础。[方法]对5个天津市推广种植的水稻的成熟胚进行离体培养,研究诱导和分化培养基、激素配比、不同接种方式及分化前不同预处理等对其再生的影响。[结果]在NB培养基中添加2．00mg／L2,4一D和0．50mg／L6．BA比只添加2．00mg／L2。4一D的愈伤诱导率高3．79一14．64个百分点;对于津原系列的品种其半粒接种方式愈伤诱导率要高于整粒接种方式;NB＋1．00mg／L6一BA＋0．25mg／LN从＋2．00mg／LKT的分化培养基得到了较高的分化率;干燥处理和预分化均能提高愈伤分化率。[结论]该研究探索影响水稻成熟胚愈伤组织诱导和分化的因素,建立其植株再生体系,为进一步的遗传转化奠定了基础。     

重穗型恢复系蜀恢527成熟胚高频率植株再生及其基因转化的研究

以籼稻重穗型恢复系蜀恢527的成熟胚为外植体,研究了影响其愈伤组织诱导及植株再生频率的各种因素。结果表明。在基本培养基NMB中添加2．0mg／L的2,4-D有利于蜀恢527成熟胚愈伤组织的诱导和继代培养;MS＋6-BA2．0mg／L＋KT2．0mg／L＋NAA0．25mg／L的分化培养基有利于愈伤组织的分化;继代两次的愈伤组织分化率最高。利用本研究建立了适合蜀恢527成熟胚遗传转化的高效植株再生体系,在此基础上利用农杆菌介导法将稻瘟病抗性基因Pi-d2导入蜀恢527并获得了经PCR检测为阳性的转化植株。     

冰糖橙胚性愈伤组织的诱导与植株再生

以冰糖橙成熟果实中的未发育胚珠为外植体，培养诱导胚性愈伤组织并进行植株再生。结果表明：在不同的培养基和不同的培养条件下胚性愈伤组织和胚状体的发生频率不同；麦芽提取物和GA3有利于胚性愈伤组织的发生，暗培养有利于胚性愈伤组织的诱导；在MKBN(MT KT0．5mg／L BA0．5mg／L NAA0．1mg／L)培养养基上，胚状体的再生率达88．24％，以酸橙作砧木进行试管嫁接，嫁接成活率达88．89％。     

虎舌红叶片不定梢诱导研究

[目的]建立虎舌红的高频再生体系,为利用转基因技术改良其品质奠定基础。[方法]以虎舌红试管苗顶端叶片为试材进行组织培养和不定梢诱导试验。[结果]外植体在9种培养基上均能诱导出愈伤组织,4号培养基的不定芽再生率最高,为45．80％,植株生长健壮;其次是7号培养基,其不定芽再生率为39．76％。从整体上看,不定芽的再生率都不高,最高的也未超过50．00％。综合考虑愈伤组织诱导和不定芽再生,适合虎舌红叶片不定芽再生的培养基为：1／2 MS＋TDZ 2．0mg／L＋IAA0．2～0．4mg／L＋AgNO3 3．0～5．0mg／L。选健壮苗接种于1／2MS＋IBA 0．3mg／L＋NAA 0．5mg／L培养基上,20d后生根率可达90％,炼苗后再生植株的移栽成活率达80％以上。[结论]该研究成功建立了虎舌红叶片的离体再生体系。     

枇杷幼胚培养与体胚诱导植株再生

以枇杷3个品种“解放钟”、“长红3号”和“早钟”幼胚为外植体，进行枇杷的幼胚离体培养诱导体胚发生研究。结果表明：附加2mg／L2，4-D的MS培养基可高频率诱导枇杷幼胚愈伤组织；采用附加1mg／L2，4～D、0．25mg／LKT的MS培养基与附加1mg／L2，4-D、0．25mg／LKT和5mg／LAgNO3的MS培养基交替暗培养，可长期保持枇杷愈伤组织胚性；枇杷具有很强的体胚发生能力和很高的成苗率。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

铁皮石斛种子胚培养的产业化研究

以成熟铁皮石斛种胚为研究材料,对诱导铁皮石斛种胚萌发、原球茎增殖及分化、壮苗和生根培养基进行筛选,以及其他一些影响因子进行比较研究,从中选出最适宜铁皮石斛组培快繁的一整套稳定、高效的生产程序,为工厂化育苗提供技术支撑。结果显示：种子在MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋椰汁10％＋蔗糖3％的培养基上,萌发快,萌发率89．8％,原球茎发生率76．9％;原球茎在MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖3％培养基上增殖,5～7周增殖率达10倍以上;继代几次后改用1／2MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋土豆泥10％＋蔗糖3％培养基,增殖和分化同时进行;分化苗在1／2MS＋NAA 1mg／L＋IBA 1mg／L＋土豆泥10％＋蔗糖3％或1／2MS＋NAA 2mg／L＋香蕉泥10％＋蔗糖3％培养基上生根,出根快,茎粗壮,根系发达。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0.5~2.0 mg/L 6-BA、0.1~0.5 mg/L IAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0~0.5 mg/L IAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0.5~2.0 mg/L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当 IAA浓度在0.1~0.5 mg/L 时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA 2.0 mg/L、IAA 0.3 mg/L的诱导效果最好,分化率高达86%。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100.0%。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;不定芽生根最佳培养基为MS+0.1 mg/L IAA。     

广西优良珍贵树种灰木莲的组织培养

【目的】探索灰木莲组培快繁体系,为灰木莲的进一步开发和利用提供参考依据。【方法】以灰木莲盆栽苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同种类、不同浓度植物生长调节剂,研究不同培养基对腋芽萌发、芽增殖及生根的影响。【结果】1～5号培养基均可以诱导灰木莲腋芽萌发,其中3号培养基MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.1mg/L腋芽萌发速度最快,芽的诱导率89.3%;添加KT（Kinetin,激动素）的10～13号培养基增殖系数为2.2～2.7,没有添加KT的6～9号培养基增殖系数为1.8～2.2,11号培养基MS＋6-BA0.3mg/L＋NAA0.05mg/L＋KT1.0mg/L芽的增殖系数可达2.7,为最适宜的增殖培养基;添加生长调节剂浓度在0.5mg/L以上的17～21号培养基能诱导灰木莲组培苗生根,其中NAA浓度为0.5、1.5、2.0mg/L生根率分别为33.3%、45.4%、58.3%,21号培养基1/2MS＋NAA2.0mg/L上生根率最高。【结论】初步建立灰木莲组织培养体系,组培苗的芽诱导率和增殖率较高,苗木长势良好。     

西双版纳甜糯山药茎尖组培技术优化研究

甜糯山药是西双版纳的特有品种，传统的繁殖方式效率不高。为推广、扩繁该品种，本研究以西双版纳甜糯山药的茎尖和茎段为材料，对各阶段的培养基、培养条件进行筛选优化，获得了一套适合西双版纳甜糯山药茎尖、茎段组培的快繁体系。其中：最适诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+PVP 150 mg/L+VC600 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.8 g/L；最适分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+PVP 150 mg/L+VC600 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.8 g/L，培养30 d分化率可达到73.33%；最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂7.8 g/L，培养30 d后生根率达到80.00%；最后组培苗通过炼苗移栽至装有育苗土（沙∶土∶基质=1∶1∶1）的穴盘中，10～15 d后成活率可达65%以上。     

红茄子叶的不定芽诱导及植株再生

【目的】研究不同激素浓度和组合对红茄不定芽及根诱导的影响,建立红茄的高频再生体系,为开展茄子的遗传转化研究奠定基础。【方法】以红茄子叶为外植体,采用0．5～2．0mg／L6-BA、0．1～0．5mg／LIAA激素组合对不定芽进行诱导,采用0～0．5mg／LIAA对根进行诱导,筛选出最佳的分化培养基和生根培养基。【结果】在不定芽诱导培养基中,当6-BA浓度在0．5～2．0mg／L时,随着浓度增加,不定芽分化率逐渐升高;当IAA浓度在0．1,-0．5mg／L时,随着IAA浓度的增加,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6．BA2．0mg／L、IAA0.3mg／L的诱导效果最好,分化率高达86％。在根诱导培养基中,随着IAA浓度的增加,根诱导率呈先降低后升高趋势,诱导率可达100．0％。【结论】红茄子叶不定芽诱导最佳培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0-3mg／LIAA;不定芽生根最佳培养基为MS＋0．1mg／LIAA。     

核桃(Juglans regia L.)的离体繁殖

本试验证明核桃的叶片、叶柄、叶脉、茎尖等外植体在适合的培养基上可诱导出愈伤组织。核桃茎尖和胚可以诱导出多芽。讨论了培养基成分和外植体来源对核桃外植体生长与分化的影响,以及防止核桃组织氧化褐变的措施。     

菊花茎段组织快繁体系的建立

通过对菊花茎段采用不同的消毒处理,然后进行诱导、增殖和生根试验,建立了菊花离体快繁体系：消毒灭菌处理以70％酒精浸泡10s后,在0.1％升汞溶液中浸泡3min为最佳;带腋芽茎段诱导的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;腋芽增殖的最适宜培养基为MS＋6-BA2.0 ～3.0 mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1;利用不带腋芽的茎段诱导愈伤组织的最适宜培养基是MS＋6-BA0.5mg·L-1＋ NAA0.5mg·L-1;愈伤组织再分化成丛生芽的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;诱导生根的适宜培养基为1/2MS＋ NAA0.5 mg·L-1;生根率为100％;试管苗移栽到疏松透气的蛭石＋珍珠岩＋园土（1：1：1）混合基质中,成活率可达98％.     

牛尾菜丛生芽诱导及再生体系研究

以牛尾菜顶芽为外植体,探讨不同浓度6-BA（0.5～5.0 mg/L）和NAA（0.1～1.0 mg/L）配比对丛生芽诱导、增殖和生根的影响。结果表明,适宜丛生芽诱导的培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋0.3%AC,丛生芽萌动早、无褐化,诱导率为75.0%;丛生芽增殖最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L,增殖系数为4.2;生根最佳培养基为1/2MS＋NAA 1.0 mg/L,生根率为87.0%,根较粗壮,生根数4～7条,根平均长度为1.2 cm;在混合基质营养土、木屑、黄泥（1∶1∶2）中,幼苗移栽成活率达80.0%以上。     

番木瓜实生苗茎段组培快繁条件的优化

【目的】探讨不同激素对番木瓜实生苗茎段分化的影响,为提高番木瓜繁育效率提供参考依据。【方法】番木瓜种子采用直接接种、无菌水处理18 h后接种等4种方式预处理获得最佳种子处理方式;再以获得的实生苗茎段为外植体进行芽诱导培养基、增殖壮苗培养基、生根培养基的优化筛选。【结果】经6-BA 1.0 mg/L与GA31.0 g/L等体积混合液浸泡18 h后接种的番木瓜种子发芽率高达93.3%,接种培养后污染率低至3.3%;适合番木瓜茎段芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖壮苗培养基为MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L,增殖系数最高达4.3,生根诱导培养基为MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L。【结论】MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L、MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L和MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L分别作为番木瓜实生苗茎段芽诱导、增殖壮苗和生根诱导培养基,可提高番木瓜实生苗茎段组培育苗效率。     

减少秋石斛在组织培养中的褐化研究

秋石斛（Dendrobium hybrida）在不同激素配比的MS培养基中,其增殖率和褐化率几乎成正比例,在原球茎增殖、芽分化和生根的3个阶段,培养基中添加AC0.5～1g/L和胰蛋白胨0.5～1g/L,能够降低褐化率。试验结果表明：秋石斛的原球茎增殖最佳培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.05mg/L＋椰子水50ml/L＋胰蛋白胨0.5g/L;芽分化培养基最佳为1/2MS＋IBA0.5g/L＋NAA1.0＋AC0.5g/L＋胰蛋白胨0.5g/L;生根培养最佳为改良1/2MS＋IBA1.0mg/L＋AC1.0g/L＋胰蛋白胨1.0g/L。