番木瓜组织培养技术及植株再生的研究

利用番木瓜无菌种苗顶芽几下胚轴茎段为外植体,研究不同激素配比对芽诱导和生根的影响,获得番木瓜组织快繁技术。结果表明:赤霉素能提高番木瓜种子的发芽率,最适合番木瓜种子萌发的培养基为MS1.0mg/L 6-BA+1.0mg/L GA3;顶芽及茎段的芽诱导为MS+0.25mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;最适合番木瓜增殖为MS+0.2mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;最适合番木瓜生根培养为MS+1.0mg/L 6-IBA+0.5mg/L NAA+1.0g/L AC。本研究为实现今后番木瓜工厂化生产奠定了一定基础。     

树兰茎段丛生芽快繁体系的建立

【目的】建立茎段诱导丛生芽途径的树兰快速繁殖技术体系,为树兰种苗生产及工厂化育苗奠定基础。【方法】以树兰当年生分蘖苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同质量浓度6-BA、NAA和IBA组合对树兰茎段丛生芽诱导、增殖及生根的影响。【结果】不同质量浓度6-BA和NAA组合对树兰茎段丛生芽的诱导与增殖均有显著影响,树兰茎段丛生芽诱导最适宜培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率最高达到73.13%;增殖最适宜培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA,增殖系数最高达到5.2。不同质量浓度NAA和IBA组合对树兰组培苗生根有显著影响,生根最适宜培养基为MS+1.0mg/L NAA+1.5mg/L IBA,生根率可达100%,平均根数7.78条/株,株高7.44cm,茎粗2.82mm。【结论】建立了树兰茎段诱导丛生芽的组织培养快繁体系,在该体系下丛生芽的诱导率和增殖率均较高,生根状况良好。     

杂交相思组织培养研究初报

【目的】筛选杂交相思组织培养不同培养阶段的培养基配方,为实现杂交相思工厂化育苗提供技术参考。【方法】用杂交相思嫩茎为外植体,探究生长调节剂6-BA、NAA、IBA对其诱导出芽、继代增殖和诱导生根的效果。【结果】在不添加6-BA的情况下,添加0.2mg/LNAA时芽诱导率为60.0%,当添加0.2mg/L的6-BA后,诱导率为42.0%。当NAA为0~0.5mg/L时,随着6-BA的增加,增殖系数随之增加,6-BA为0.8mg/L时,增殖系数为4.2;当6-BA为1.0mg/L以上时,继代苗的增殖系数为1.0。以改良MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下添加0.5、1.0mg/L的IBA生根诱导率分别为17.5%、24.0%;以改良1/2MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下,添加0.5mg/L的IBA生根率为91.7%,当添加IBA为1.0mg/L时,生根率降到50.0%;生根苗移栽基质以黄心土与河沙或蛭石混合较好,移栽成活率在85.0%以上。【结论】改良MS＋NAA0.2mg/L培养基是较适宜芽诱导的培养基;改良MS＋6-BA0.8mg/L＋NAA0.5mg/L培养基较利于继代苗的生长;改良1/2MS＋NAA1.0mg/L＋IBA0.5mg/L培养基较改良MS培养基有利于诱导生根。     

白背三七组织培养技术

【目的】探讨不同激素配比对白背三七离体繁殖的影响,建立白背三七种苗再生繁殖体系。【方法】以当年生枝条为外植体,采用不同激素组合（0～0.1 mg/L 6-BA、0～0.2 mg/L KT、0～0.2 mg/L 2,4-D以及0～0.4 mg/L IBA、0～0.4 mg/L NAA）对带芽茎段进行不定芽诱导和增殖、壮苗和生根培养。【结果】在添加相同KT、2,4-D条件下,添加过高的6-BA（1.0 mg/L）会降低丛生芽增殖系数;而在相同6-BA、KT的条件下,添加2,4-D可提高芽的增殖,以在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.2 mg/L 2,4-D中茎段丛芽增殖系数最高,为15.4,丛生苗较壮、生长良好。不同IBA、NAA组合均可诱导丛生芽生根,但以培养基MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA的生根效果最好,接种10 d开始生根,15 d时生根率为85.3%,每株平均生根数为4~9条,移栽成活率可达82.3%。【结论】建立了白背三七种苗再生繁殖体系,可为白背三七的产业化生产提供技术支撑。     

翅萼石斛组织培养及快繁技术研究

以翅萼石斛蒴果为外植体,通过对其种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,建立翅萼石斛的组培快繁技术体系。结果表明:翅萼石斛种子萌发和原球茎诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖20 g/L;原球茎增殖和丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖20g/L+活性碳1.0g/L,接种45 d后增殖系数约5.8个、生长情况良好;生根壮苗的培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+香蕉泥100 g/L+活性碳1.0 g/L,生根率达100%,根系及幼苗长势良好。桂林地区移栽驯化宜在3~4月进行,选择水苔做基质,60 d后成活率为76.7%。     

凤尾兰的组织培养

以凤尾兰(YuccagloriosaLinnaeus)的茎尖、幼嫩茎段及嫩叶为外植体进行组织培养。结果表明以嫩叶为外植体的愈伤组织诱导率最高,由茎段诱导的愈伤组织继代增殖最好,由茎尖诱导的愈伤组织诱导不定芽表现最佳。筛选出最佳初代培养基MS 6-BA3.0mg/L NAA0.2mg/L;愈伤组织增殖培养基MS 6-BA8.0mg/L NAA0.1mg/L;不定芽诱导培养基为MS 6-BA5.0mg/L KT1.0mg/L;不定芽增殖培养基为MS 6-BA4.0mg/L NAA0.05mg/L 椰子水100mL/L;生根培养基为1/2MS NAA0.2mg/L。     

木薯良种GR891组织培养与快速繁殖技术

【目的】探讨木薯良种GR891的组织培养与快速繁殖技术。【方法】以越冬木薯种茎及其新长嫩茎的腋芽或顶芽为外植体,探讨不同消毒时间、6-BA和NAA浓度对木薯不定芽诱导或增殖、生根的影响。【结果】以带顶芽或腋芽的木薯幼嫩茎段作外植体进行不定芽诱导培养比较适宜;接种前采用0.1%升汞消毒10~15min,不定芽和愈伤组织诱导率均最高,分别为57.1%和61.9%。不定芽诱导培养基以MS＋0.5mg/L6-BA最佳,不定芽诱导率最高（72.2%）,芽生长较好;丛生芽增殖培养基以MS＋0.5~1.0mg/L6-BA为宜,其增殖倍数达3.0倍,并形成健壮的丛生芽;生根培养基以MS＋0.3~1.5NAAmg/L最佳,生根率可达90.0%以上。将生根苗移栽至混合基质（60%塘泥＋40%河沙）中,约1周后可萌生新根,移栽成活率达95.0%以上。【结论】在MS培养基中添加低浓度6-BA,有利于不定芽的诱导和增殖;6-BA和NAA配合使用均不利于不定芽的诱导和增殖;不定芽的诱导和生长无需添加外源NAA。0.9mg/LNAA对木薯不定芽生根效果较好,而6-BA对不定芽生根有一定抑制作用。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

菜头肾离体快繁技术探讨

菜头肾组织培养的外植体可选择茎段、嫩叶、嫩芽。菜头肾叶片愈伤组织诱导和茎段丛生芽诱导的最佳培养基配方是1/2 MS＋6-BA 1.0 mg.L-1＋NAA 0.2~0.5 mg.L-1。继代壮苗培养时仍采用1/2 MS＋6-BA 1.0mg.L-1＋NAA 0.2~0.5 mg.L-1培养基。最适的生根培养基为1/2 MS＋NAA 0.2 mg.L-1。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系的建立

【目的】建立铁皮石斛以芽繁芽离体培养技术体系,为广西铁皮石斛良种选育及种苗繁殖提供技术支持。【方法】以广西桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体,进行丛生芽诱导、增殖和壮苗生根培养,探讨不同消毒时间和不同激素配比对丛生芽诱导培养等过程的影响。【结果】3种材料外植体的最佳消毒时间为10min,污染率仅10．0％-20．0％;桂平种丛生芽最佳诱导培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率7．8％;容县种和西林种丛生芽诱导最佳培养基为MS＋1．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,丛生芽诱导率分别为23．1％和30．8％。3种材料丛生芽继代增殖最佳培养基为MS＋0．5mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋10％椰子汁,平均增殖倍数为3～5倍;壮苗生根最佳培养基为1／2MS＋0．5mg／LNAA＋0．2mg／LIBA＋10％香蕉泥,生根率在95．0％以上;以松树皮为移栽基质,移栽成活率在90．0％以上。【结论】以桂平种、容县种和西林种3种野生铁皮石斛后代材料茎段为外植体均可建立以芽繁芽离体培养技术体系;在诱导培养基和继代培养基中增加继代次数,可提高铁皮石斛的诱导率和增殖倍数。     

老虎须的组织培养与植株再生

以老虎须茎段为试验材料,采用不同激素组合对其进行愈伤组织诱导和分化、芽增殖与生根研究。结果表明:老虎须茎段愈伤组织诱导和分化的最适培养基分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L;生根的最适培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

广西优良珍贵树种灰木莲的组织培养

【目的】探索灰木莲组培快繁体系,为灰木莲的进一步开发和利用提供参考依据。【方法】以灰木莲盆栽苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同种类、不同浓度植物生长调节剂,研究不同培养基对腋芽萌发、芽增殖及生根的影响。【结果】1~5号培养基均可以诱导灰木莲腋芽萌发,其中3号培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L腋芽萌发速度最快,芽的诱导率89.3%;添加KT（Kinetin,激动素）的10~13号培养基增殖系数为2.2~2.7,没有添加KT的6~9号培养基增殖系数为1.8~2.2,11号培养基 MS+6-BA 0.3 mg/L +NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L芽的增殖系数可达2.7,为最适宜的增殖培养基;添加生长调节剂浓度在0.5 mg/L以上的17~21号培养基能诱导灰木莲组培苗生根,其中NAA浓度为0.5、1.5 、2.0 mg/L生根率分别为33.3%、45.4%、58.3%,21号培养基 1/2MS+NAA 2.0 mg/L上生根率最高。【结论】初步建立灰木莲组织培养体系,组培苗的芽诱导率和增殖率较高,苗木长势良好。     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

不同产地金线莲组培快繁试验

以不同产地金线莲幼嫩茎段为外植体诱导丛生芽,通过不同培养基配方的筛选,建立不同产地金线莲组培快繁体系。结果表明,不同产地金线莲最佳初代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,台湾南投产地为MS ＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,广西玉林产地为MS＋4.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT;最佳继代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L NAA,台湾南投产地为MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋0.3 mg/L NAA,广西玉林产地为MS ＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;在壮苗培养阶段,使用外源添加物蛋白胨后,不同产地金线莲外植体苗的生长状况在不同程度上得到了改善,最佳生根培养基分别是,福建永安产地为1/2MS ＋1.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA＋2.0 mg/L ABT1,台湾南投产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋0.5 mg/L IBA,广西玉林产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L IBA＋1.0 mg/L ABT1,同时添加1.5 g/L Ac;炼苗移栽基质V （蛭石）∶V（泥炭土）＝1∶1,移栽生根率均达90％以上。     

添加物和植物生长调节剂对铁皮石斛离体快速繁殖的影响

以铁皮石斛未成熟种子为外植体,在离体条件下进行原球茎诱导,类原球茎增殖、分化、生根试验研究。结果表明,以种子萌发直接诱导原球茎的适宜培养基为MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L NAA+0.5g/L活性炭(AC)+1.0g/L水解酪蛋白(CH),诱导率达95%以上。在MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH条件下可获得类原球茎最大增殖系数(达18.7),该培养基也适宜于维持类原球茎的增殖保存。类原球茎的最大分化率为93.7%,所需的培养基成分为MS+0.5mg/L BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH。试管苗在1/2 MS+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC培养基上生根率达100%,且根系健壮发达,移栽后全部成活,长势良好。     

兰州百合快速繁殖研究

【目的】优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系。【方法】采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基, 附加不同浓度NAA（0.2~1.0 mg/L）、 6-BA（0.5～2.0 mg/L）、KT（0.1～1.0 mg/L）、IBA（0.2~1.0 mg/L）、IAA（0.2～1.0 mg/L）, 对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比。【结果】6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2～1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度的增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA组合的平均小鳞茎最多,为5.9个。与0.5～1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/L组合相比,添加0.5～1.5 mg/L 6-BA+0.5～1.0 mg/L KT或0.2 NAA mg/L组合的培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基的丛芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多。在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2～1.0 mg/L IAA或IBA的培养基中,随着IAA或IBA浓度的升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同。从根的质量来看,MS培养基的根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合。【结论】鳞茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5～1.0 mg/L,不定芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效果最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。