芦笋茎叶多糖的提取纯化研究

以多糖得率、多糖纯度为指标,对芦笋茎叶多糖提取工艺中料液比、温度、乙醇浓度、沉淀时间等影响因素进行了试验分析,确定芦笋茎叶粗多糖提取的最佳条件为:料液比为1∶20;提取温度为90℃;提取时间为2h;沉淀乙醇浓度为80%;沉淀时间8h。并确定了sevag脱蛋白、多次醇沉的纯化工艺。     

灵芝多糖提取纯化及抗氧化研究

采用Sevag法和HCl法研究了灵芝多糖纯化过程中的去蛋白方法,通过不同体积分数乙醇分级醇沉多糖的沉淀量探索了不同来源灵芝多糖的抗氧化性。结果表明,Sevag法和HCl法都可除去灵芝多糖提取液中的杂蛋白,但两种方法的去蛋白效果和多糖损失率差异明显。Sevag法的蛋白去除率(82.41%)高于HCl法(41.60%);同时其多糖损失率(36.03%)也比HCl法(14.41%)大;乙醇分级沉淀灵芝多糖研究表明,40%、65%和80%乙醇沉淀灵芝多糖量比例为0.41∶0.42∶0.17;多糖浓度与清除羟基自由基和超氧阴离子的能力呈正相关,且分级沉淀的多糖在等浓度条件下其抗氧化性也显示出明显差异,总的清除能力为80%乙醇40%乙醇65%乙醇。     

富含多糖的强旱生植物半日花基因组DNA提取方法

半日花(Helianthemum soongoricum)属强旱生植物,其组织富含多糖和多酚等次生代谢物质,采用常规CTAB和SDS等方法提取的半日花基因组DNA由于含有多糖等杂质,无法进行PCR扩增和限制性酶切等试验,为此,在CTAB法的基础上进行了改进。第1步通过向植物组织CTAB提取液中添加高盐和乙醇来沉淀部分多糖,第2步将获得的DNA粗提液,经过CTAB分离溶液沉淀、NaCl溶解、乙醇沉淀等方法,可有效去除半日花组织中的残余多糖等杂质,提取DNA的质量和纯度经凝胶电泳条带清晰、无降解、无多糖等杂质。PCR扩增和限制性内切酶的结果表明,通过改进的方法所获得的DNA,可以进行PCR扩增试验,扩增条带清晰,基因组DNA能被限制性内切酶完全酶切,该方法为后续半日花分子生物学研究奠定了重要基础。     

乙醇法沉淀茶多糖的抗氧化活性评价

以粗茶多糖提取物(TPs-CK)为原料,设置70%和80%2个乙醇浓度沉淀制备茶多糖样品TPs-70和TPs-80,通过检测其DPPH清除活性和还原力变化,对茶多糖样品进行抗氧化活性评价。结果表明,70%浓度乙醇更适宜于沉淀茶多糖,可溶性蛋白含量低,DPPH清除率和还原力变化试验表明,茶多糖TPs-70和TPs-80极显著性低于TPs-CK和抗坏血酸,两者之间未见显著性差异,TPs-80略低于TPs-70;检测分析茶多糖样品中抗氧化组分含量发现,茶多糖、茶多酚、总黄酮等组分皆有析出,与TPs-CK相比,茶多糖样品TPs-70和TPs-80中茶多酚和总黄酮含量呈极显著性降低。相关性分析表明,茶多糖、茶多酚和总黄酮与茶多糖样品抗氧化活性表达呈正相关,茶多酚呈显著性正相关。综上所述,70%浓度乙醇更适宜于沉淀制备茶多糖样品,且抗氧化活性强。     

(木奈)嫩芽总RNA的提取与纯化

以嫩芽为材料,对Trizol法进行改进提取总RNA,试验结果表明,加入10%PVPP与材料共研磨,并在Trizol提取液中加入1%β-巯基乙醇,可以完全排除酚类物质、色素等杂质的干扰;采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3 mol/LLiCl沉淀RNA、在RNA的粗提液中加入适量的3 mol/LNaAc(pH5.2)和低浓度的无水乙醇沉淀多糖等方法相结合,可以有效地去除多糖的干扰,获得纯净、完整的RNA样品,用它为模板进行RT-PCR反应,获得PPO基因保守区约600～800 bp的cDNA条带;而单独采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖的方法,不能将样品中的多糖去除干净,这些残留的多糖会抑制逆转录酶的活性,导致逆转录反应的失败.     

苦瓜多糖提取工艺的研究

研究了苦瓜多糖的提取工艺。选取料水比、浸提温度、浸提时间和乙醇沉淀浓度等4项考察因素，采用正交实验对苦瓜中多糖进行了提取条件优化的实验。实验结果表明：料水比1：20，浸提温度100℃，浸提时间1h，乙醇沉淀浓度85％为最佳提取条件；苦瓜多糖粗品的提取率为鲜苦瓜的3．02％，其中多糖含量为28．6％。     

柰嫩芽总RNA的提取与纯化

以嫩芽为材料，对Trizol法进行改进提取总RNA，试验结果表明，加入10％PVPP与材料共研磨，并在Trizol提取液中加入1％β-巯基乙醇，可以完全排除酚类物质、色素等杂质的干扰；采用在匀浆液中加入终浓度为20％乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3mol／L LiCl沉淀RNA、在RNA的粗提液中加入适量的3mol／LNaAc(pH5．2)和低浓度的无水乙醇沉淀多糖等方法相结合，可以有效地去除多糖的干扰，获得纯净、完整的RNA样品，用它为模板进行RT-PCR反应，获得PPO基因保守区约600～800bp的cDNA条带；而单独采用在匀浆液中加入终浓度为20％乙醇沉淀多糖的方法，不能将样品中的多糖去除干净，这些残留的多糖会抑制逆转录酶的活性，导致逆转录反应的失败。     

五味子多糖的研究进展

综述五味子多糖的药理研究、分级方法、检测方法等方面研究.五味子多糖药理作用涉及消化系统,心血管系统,中枢神经系统,生殖系统以及抗氧化,抗衰老等方面;五味子分级是研究分离具有高药效的多糖成分,其方法为不同条件下的沉淀分级法;五味子多糖提取检测研究有热水浸提法--苯酚-硫酸法测定方法、正交设计法--红外光谱法检测方法等;但目前的研究还不够完善,在提取检测方法方面有待进一步研究和应用.     

红枣多糖提取工艺参数的优化及分子量的分布研究

以正交法优化了红枣多糖的热水浸提工艺参数,采用分级醇沉和分步醇沉的方法研究了红枣多糖分子量的分布。结果表明,热水浸提红枣多糖的最优工艺条件为料液比1∶15、温度100℃、时间6h、提取2次;在醇浓度小于80%时,多糖得率与醇浓度呈指数相关;乙醇浓度达80%时,可沉淀出大部分红枣多糖;分步醇沉试验结果表明,红枣多糖的分子量分布广泛,以60%和70%醇浓度沉淀出的中等分子量的多糖比例最多,低分子量和高分子量红枣多糖所占比例较少。     

仙人掌多糖的提取

研究了提取方式、提取时间、沉淀时间、酒精用量对提取仙人掌中多糖效果（量）的影响。结果表明,酸提,提取时间０．５ｈ,沉淀时间４８～６０ｈ,酒精用量５．５倍,为提取仙人掌多糖的最经济方法。     

构树果实多糖提取工艺条件的优化

为探讨构树果实多糖提取的最佳工艺条件,用恒温水浴法提取,乙醇沉淀纯化,苯酚-硫酸法测定构树果实多糖的含量,对影响构树果实多糖提取率的料液比、提取时间、提取温度等因素进行分析,用正交试验法对构树果实多糖提取的工艺条件进行优化,并对提取率进行验证.结果表明:构树果实多糖提取的最佳工艺条件为:料液比1:30,浸提温度95℃,...     

竹汁沉淀的探讨

研究了导致竹汁产生沉淀的非生物因素，分析了沉淀物质的组成及不同处理对沉淀产生的影响，结果表明：竹汁在贮存过程中产生沉淀的主要非生物因素是蛋白质和多酚类化合物等大分子物质聚集而凝沉，多糖和部发金属离子也参与了沉淀的形成。     

甘蔗叶多糖的提取与含量测定

[目的]为了进行甘蔗多糖的深入研究和利用。[方法]对甘蔗叶多糖提取与含量测定进行研究。建立80%乙醇去杂—热水提取—乙醇沉淀—去色素的提取工艺,从甘蔗叶中提取粗多糖,用苯酚—硫酸法比色测定多糖的含量,在波长490 nm处测定吸光值。[结果]结果表明,甘蔗多糖在80℃9、5%乙醇沉淀的条件下多糖提取率最高,为1.34%,在8~80μg范围内具有良好的线性关系,平均回收率为97.9%,RSD=0.6%。[结论]此方法简便、准确率高、重现性好,可用于甘蔗多糖提取与含量测定。     

野生美味牛肝菌多糖提取条件优化

试验按L9(34)正交设计,以多糖含量作为多糖提取率指标,对野生美味牛肝菌子实体多糖提取条件(料液比、提取温度、提取时间、乙醇沉淀浓度)进行优化。结果表明,4个因素对野生美味牛肝菌多糖提取率的影响表现为料液比提取温度大于乙醇沉淀浓度提取时间,其中料液比和提取温度的影响分别达到极显著和显著水平,确定野生美味牛肝菌多糖提取的最佳工艺为料液比1∶25、提取温度90℃、提取时间2 h、乙醇浓度95%。     

一种改良的真菌总RNA提取方法

以棉花黄萎病菌株VD8为试材,利用改良的CTAB提取RNA方法,应用LiCl选择性沉淀RNA,减少沉淀时间,在醋酸钠条件下用异丙醇祛除多糖,结果表明,利用该方法从富含多糖的黄萎病菌菌丝中获得了质量较好的总RNA,缩短了提取时间。     

富硒黑木耳中硒多糖提取分离工艺的优化

以富硒黑木耳为原料,采用水浸提、乙醇沉淀多糖、Sevage脱蛋白、干燥等方法对富硒黑木耳中硒多糖的提取分离工艺进行了初步研究,并用蒽酮比色法和原子吸收法对多糖含量、硒含量分别进行了检测.结果表明,富硒黑木耳含硒多糖最佳提取条件为在料液比1:20、提取时间2h、提取温度60℃条件下提取两次,此时多糖提取率最高,水溶性多糖含量为18.95%,硒的含量为32.56μg·g-1.     

丙酮沉淀法提取金花茶多糖的研究

[目的]确定丙酮沉淀法提取花金花茶（Camellia chrysantha（Hu）Tuyama）多糖的最佳工艺条件。[方法]以金花茶为研究对象,以水为溶剂,在一定的条件下提取金花茶多糖,提取液用丙酮进行沉淀,选取沉淀剂用量、沉淀时间和离心时间3个因素做单因素试验,然后以离心时间、丙酮加入量、沉淀时间作为因素,进行正交试验,来确定最佳提取条件。[结果]丙酮沉淀法的最佳工艺条件为：离心时间为15 min,丙酮加入量为20 ml、沉淀时间为12 h,在此条件下的所得粗茶多糖含量量为0.003 7 g。[结论]该研究建立的检测方法简便、快速,具有较强的实用性。     

猴头菌多糖热水浸提工艺研究

[目的]优化热水浸提猴头菌多糖的工艺参数。[方法]采用热水浸提法对猴头菌中的多糖进行提取,对影响浸提效果的浸提温度、浸提时间、料液比、浸提次数等因素进行了研究。[结果]试验表明,猴头菌多糖提取的最佳工艺参数为：料液比1∶15 g/ml,浸提温度80℃,浸提时间2 h,浸提次数2次,乙醇沉淀多糖的终浓度为75%,此条件下猴头菌多糖的提取率可达8.87%。[结论]研究可为猴头菌及其他菌类热水浸提多糖提供参考。     

平菇中性多糖和酸性多糖的分离、纯化与鉴定

目的:探讨平菇中的多糖类物质,为深入研究和开发利用平菇提供资料.方法:采用热水抽提,乙醇沉淀,DEAE-C32及Sephadex G75柱层析等方法分离多糖;用苯酚-硫酸,α-萘酚-硫酸及茚三酮鉴定多糖和蛋白质的存在.结果:从平菇中得到两种多糖,一种为中性多糖,含量为5.8%,另一种为酸性多糖,含量为7.25%.结论:平菇中两种多糖的获得为平菇的深加工提供了实验数据.     

仙人掌多糖提取的二次优化研究

在以仙人掌多糖提取时间、提取温度和料液比3个因素最佳配合基础上,选取酒精用量、沉淀时间两因素进行二次回归正交组合设计试验,对其提取工艺参数进行优化研究。利用MATLAB7.0软件对仙人掌多糖提取产量的二次多项数学模型解逆矩阵分析表明:在酒精用量为6.52倍,沉淀时间59.7h的条件下,仙人掌多糖提取最大预测值为35.22g/100ml,实际值为35.17g/100ml,两者基本相符。利用优化工艺参数提取仙人掌多糖时,具有最大的提取产量。