家鸡血清脂酶同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对我国3个优良地方鸡种（泰和、略阳、雪峰）以及2个外来鸡种（来航、罗斯）的血清脂酶同工酶进行了抽样测定。结果表明，上述鸡种脂酶位点（Es-1)由等位基因Es-1^A和Es-1^B所支配。计算了各鸡种Es-1位点的基因型和基因频率，进一步证实Es-1^B和Es-1^B基因频率在蛋用型鸡种和肉用型鸡种间的显著差异。在Es-1^A区域区分出一条新的同工酶变异体，证实Es-1^A基因可进一步区分为Es-1^A1和Es-1^A2两个等位基因。     

寿光鸡×斗鸡杂交后代的蛋白质(酶)多态分析

以著名的地方特色品种鸡纯系寿光鸡和斗鸡组合杂交、筛选优化出的杂交后代鸡为试材 ,采用(SDS) PAGE技术对杂交后代鸡及亲本的血液蛋白质、酶蛋白和 EST(酯酶同工酶 )进行多态分析。结果表明 ,在还原条件下 ,全血样品更能显示出蛋白质 (酶 )的多态变化 ,优化杂交后代母鸡的蛋白质结构出现新的亚基组分 S1 ～ S5,存在丰富的多态、酯酶 (EST)同工酶快区 Es-1位点 ,由多等位基因支配 ,新出现 Es-1 F、Es-1 C、Es-1 A2 等位基因 ,其差异变化的频率很可能直接或间接调控影响后代品系的生产性能。提示蛋白质和EST多态的遗传变异 ,是动物群体遗传分析和种质评估、保存利用及杂交亲本选配的有效遗传标记     

贵州乌蒙鸡血浆同工酶的多态性分析

采用水平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,检测分析了31份贵州乌蒙鸡血浆中的淀粉酶(Amy-1、Amy-2)、碱性磷酸酶(Akp-1、Akp-2)、酯酶-1(Es-1)同工酶的多态性。结果发现,除Amy-2和Akp-2位点呈单态外,其余位点均具有多态性,且akp-1、Akp-20、Amy-2i、Es-1C频率较高,Es-1A频率较低,Amy-1A和Amy-1B频率均在0.5000左右,Amy-1AB型频率很高。其多态位点百分比(P)和平均杂合度(H)均较高。这表明贵州乌蒙鸡血浆蛋白(酶)的多态程度较高,遗传多样性较为丰富,选择潜力较大,保种和开发利用价值较高。     

河南郑州红鸡血浆同工酶的多态性分析

采用水平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测分析了110份河南郑州红鸡血浆中的淀粉酶(Amy-1和Amy-2)、碱性磷酸酶(Akp-1和Akp-2)、酯酶-1(Es-1)同工酶的多态性,结果发现:除Amy-2和Akp-2位点呈单态外,其余位点均具有多态性,且akp-1、Akly20、Amy-21和Es-18频率较高,而Es-1A频率较低,Es-1c频率为0.0000,Amy-1A和Amy-1B频率均在0.5000左右,Amy-1AB型频率很高.其多态位点百分比(P)和平均杂合度(H)相对较高.表明,郑州红鸡血浆蛋白(酶)的多态程度较高,遗传多样性较为丰富,选择潜力较大.     

泰和乌骨鸡血清酯酶的多态性研究

应用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳和数字成像扫描系统对42日龄的泰和鸡和AA(Arbor Acres)肉鸡血清酯酶的多态性进行了分析.两种鸡的血清酯酶主要包括2个区域Es-1和Es-2.泰和鸡的Es-1有4种类型A型(A带出现,频率0.4878)、AB型(A带B带都出现.频率0.3415)、B型(B带出现,频率0.5365)和O型(A带B带均无,即无Es-1,频率0.0732).AA鸡的Es-1有3种类型A型(频率0.1667)、B型(频率0.5557)和O型(频率0.1667).两种鸡Es-2区条带出现的频率均为1.AA鸡Es-2的平均灰度(AA鸡vs泰和鸡201±15vs174±14,p=0.029)总灰度(454079±66910vs378968±66781,p=0.033)和净灰度(209817±4907vs157873±24214,p=0.045)均显著高于泰和鸡,但Es-1在品种间没有差异.两种鸡的Es-2的平均灰度和净灰度都显著高于Es-1(泰和鸡174±14vs150士10.p=0.004;3432±29043vs157873±24214,p=0.001.AA鸡201±15vs155±20,p=0.003;209817±4907vs117776±58087,p=0.050),但Es-2的总灰度值与Es-1的总灰度之间两种鸡均没有差异.     

鸡HMG box蛋白1(HBP1)基因启动子区多态性与腹脂率关联分析

为探讨HMG box蛋白1(HMG box protein 1,HBP1)基因启动子区多态性对鸡腹脂率的影响,以东北农业大学高、低脂双向选择品系第十九世代肉鸡为试验材料,采用直接测序法检测HBP1基因多态性和个体基因型,共获得168个SNPs位点基因型。应用滑动窗口法对位于该基因启动子区54个多态性位点构建单倍型,分别开展单位点和单倍型与鸡腹脂率的关联分析。结果表明,HBP1基因启动子区有7个(g.-5335GA、g.-4354TA、g.-3328CT、g.-3327GA、g.-1013TC、g.-990GA和g.-159AC)位点显著影响肉鸡腹脂率(P0.05)。此外,等位基因频率分析显示,这些位点等位基因频率在两系间分布存在极显著差异(P0.0001)。研究结果表明,HBP1基因为影响鸡腹脂率重要候选基因,7个多态性位点为影响鸡腹脂率重要分子标记。     

鸡卵球蛋白G_2和G_3位点对生产性能交互影响的研究

本试验利用新扬州鸡L.I品系,研究了鸡卵球蛋白G_2、G_3两位点在生产性能方面存在交互效应的可能性。结果表明:G_2、G_3两位点对300日龄产蛋量有显著的交互影响,基因G_2~D和基因G_3~A、G_3~B     

白色力克斯兔、哈尔滨白兔及其杂种血液蛋白多态性研究——Ⅰ 电泳图谱及多态性蛋白的基因分布

利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对白色力克斯兔(WR)、哈尔滨白兔(HW)及其杂种一代(F_1,WR×HW)和回交一代(B_1,WR×F_1)血液中的红细胞酯酶(Es—1,Es—2和Es—3)、血清转铁蛋白(Tf)、前转铁蛋白(Prt)、后白蛋白(Po)、血红蛋白(Hb)、血清过氧化氢酶(Cat)、血清过氧化物酶(Pod)和红细胞乳酸脱氢酶(LDH)等,10个蛋白位点进行测定。结果表明,Hb、Cat、Tf和LDH在所有被测群体中呈单态,Es-1、Es-2、Es-3、Po和Prt呈多态,分别受2,2,2,2和3个共显性等位基因控制,并表现出3,3,3,3和6种表型。X~2检验表明,哈尔滨白兔在Es-1、Es-2、Es-3、Po和Prt位点均处于平衡状态,其它各群体各有自己的平衡位点和非平衡位点。Pod在白色力克斯兔中呈单态,在其它群体均呈多态,该位点遗传机制不明。     

小豆种质资源同工酶遗传多样性分析与评价

 对 5 8份野生小豆和 2 4 9份栽培小豆种质资源进行了酯酶 (EST)、过氧化物酶 (PER)、苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧歧化酶 (SOD)的检测分析 ,共检测到 6个基因位点 ,33个等位基因。小豆等位酶基因在野生种中的分布频率高于栽培种 ,在国内地方种中的分布频率高于日本地方种。 4种同工酶的 6个基因位点的平均杂合度为0 .6 5 1,其中野生小豆的杂合度 (0 .6 36 )低于栽培小豆 (0 .6 6 4 ) ,说明小豆在长期的驯化和栽培过程中已经发生了遗传上的变异。依据同工酶谱带信息 ,把供试种质聚类并划分为 5个组群 ,野生种明显聚为 1类 ,栽培种聚为 4类 ,类群之间存在明显的遗传差异 ,但同工酶等位基因的多样性与地理区域的差异似乎看不出明显的相关性。     

兰州大尾羊血清淀粉酶酯酶及苹果酸脱氢酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶水平板电泳,对131只兰州大尾羊的血清淀粉酶(Amy)、酯酶(Es)和苹果酸脱氢酶(MHD)的多态性进行检测和分析。结果发现,Amy2基因座2个等位基因Amy2A和Amy2O的基因频率分别为0.166 4和0.833 6,3种基因型Amy2AA*、Amy2AO和Amy2OO的频率分别为0.007 7、0.277 6和0.694 7;Es基因座2个等位基因Es+和Es-的基因频率分别为0.409 4和0.590 6,3种基因型Es++、Es+–、Es––的频率分别为0.169 6、0.483 6和0.348 8;MDH基因座2个等位基因MDSF和MDHS的频率分别为0.264 8和0.735 2,3种基因型FF、FS和SS的频率分别为0.142 9、0.207 7和0.649 4。     

我国部分地方鸡种血浆蛋白质(酶)多态性分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和淀粉凝胶电泳法，检测我国12个地方鸡种淀粉酶、酯酶、运铁蛋白及碱性磷酸酶等4种血浆蛋白质(酶)结构基因座的多态性。12个地方鸡种中所测的4个座位均表现出多态。根据检测座位的基因频率，计算群体平均基因杂合度。并用模糊聚类法对所研究的12个地方鸡种进行聚类。结果表明：泰和乌骨鸡和白耳鸡在λ为0．996时首先聚在一起，然后再与狼山鸡、仙居鸡、河南斗鸡、萧山鸡、固始鸡和藏鸡等依次聚为一大类，表明泰和乌骨鸡和白耳鸡有较近的亲缘关系，而北京油鸡与其他鸡种距离较远。     

应用微卫星DNA标记进行边鸡群体遗传多样性分析

目前,微卫星DNA标记已被广泛应用于动物遗传育种研究中,可有效地进行群体遗传多样性分析,并可估算群体间的遗传距离。为了从分子水平上揭示边鸡群体的遗传结构及系统地位,利用鸡基因组中均位于常染色体上的5个微卫星DNA标记,检测了边鸡群体的遗传多样性,并以大骨鸡做了比较分析;同时,初步探讨了边鸡在国内几个地方鸡种中的系统地位。结果表明,5个微卫星位点共检测到38个等位基因,其中ADL0146位点的等位基因数最少(5个),而ADL0136和ADL0185两个位点的等位基因数最多(9个),平均等位基因数为7.6个.边鸡群体在5个微卫星位点的平均多态信息含量、平均基因杂合度(h)和平均有效等位基因数(Ne)分别为0.667 1、0.745 7和4.044 3,边鸡群体内比大骨鸡群体有更丰富的遗传多样性;聚类分析结果显示,边鸡与大骨鸡亲缘关系最近,而与鲁西斗鸡亲缘关系相对较远。该系统聚类结果与这些地方鸡种的系统分化与选育历史是基本一致的。     

应用血液蛋白遗传标记研究广东鸡种类缘性

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法和醋酸纤维素薄膜电泳法检测广东鸡地方品种杏花鸡、胡须鸡和清远麻鸡的血浆淀粉酶(Amy—1、Amy—2)、碱性磷酸酶(Akp—1、Akp—2)、酯酶(Es—1)、血红蛋白(Hb)等六种血液蛋白的多态型,计算各群体各位点的表型及基因频率,求出各品种间的相似系数、遗传距离和分比时间,用系统聚类法、模糊聚类法、Tocher聚类法和主坐标分析法研究广东地方鸡种的亲缘关系。研究结果表明:三个广东地方鸡种的血液蛋白表型及基因频率分布有很多相似之处,但又各有其特征;它们之间的亲缘关系都密切,其中杏花鸡与清远麻鸡的亲缘关系最为密切。     

武定鸡农大Ⅰ系血液蛋白多态性与生产性能关系的研究

 采用垂直板电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）对127只第15世代武定鸡农大Ⅰ系的血清转铁蛋白（Tf）、酯酶（Es-1）、淀粉酶（Amy-1）、碱性磷酸酶（Akp-1）等4个血液蛋白座位的多态性进行了检测,计算了各座位基因型频率、基因频率和遗传多样性指数,并进行了基因频率的Hardy-Weinbery平衡适合性检验,特别是对血液蛋白多态性与生产性能的关系进行了分析。结果表明: 在4个测定座位中,Tf不具多态性,只表现为一种表型（BB型）;其余3个座位呈现出多态性,在 Amy-1座位AB型个体严重过量。4个血液蛋白座位的优势基因分别为TfB,Es-1^C,Amy-1^B,Akp-1^S,其中Es-1,Akp-1座位处于平衡状态,Tf和Amy-1偏离平衡状态。血液蛋白多态性与生产性能之间存在相关关系。Akp-1^F,Es-1^AC,Amy-1^AB 3种基因型可能有利于体重增长;Akp-1^S,Es-1^CC,Amy-1^AB对产蛋性能可能有促进作用。     

鸡线粒体ND1基因变异/异质性及其与性状的关联分析

【目的】探究鸡线粒体ND1基因的异质性,并在此基础上进行线粒体异质性在不同品种间和固始鸡资源群中的分布研究及其对重要经济性状的效应分析。【方法】选用固始鸡、卢氏鸡、来航鸡、白洛克鸡、白羽丝毛乌骨鸡、藏鸡、肉鸡以及河南斗鸡8种各具特色鸡种的血样DNA,利用PCR-RFLP技术进行mt.A4589G变异/异质性在自然群体的分布研究。此外,利用实验室先前构建的固始鸡资源群的血样DNA,通过PCR-RFLP技术进行mt.A4589G变异/异质性在固始鸡资源群的分布研究及其与固始鸡资源群F₂代性状的关联分析,包括腹脂、腿肌率、盲肠长度等屠体性状指标,胫长、胸深、体斜长等生长性状指标,肌纤维直径、肌肉pH、剪切力等肉质性状指标以及葡萄糖、淀粉酶、甘油三酯等血液生化指标,进而掌握鸡线粒体ND1基因异质性及其潜在效应。【结果】（1）在8个鸡品种中,从线粒体ND1基因全长检测到一个同义突变mt.A4589G,其分布具有明显的品种特性：外来品种如肉鸡、白洛克和白来航鸡的优势等位基因为A,而国内地方品种如丝羽乌骨鸡、河南斗鸡、卢氏鸡、固始鸡和藏鸡均为G;（2）通过PCR-RFLP检测到mt.A4589G在不同品种以及固始鸡资源群中皆存在异质性。在8个不同品种中,仅从固始鸡、河南斗鸡和肉鸡中检测到5个AG异质性个体,异质性发生的频率为0.063,表明mt.A4589G异质性的分布具有一定的品种特性。而在固始鸡资源群中,mt.A4589G存在较不同品种间更为广泛的异质性,在F₀、F₁和F₂代的异质性发生频率分别为0.81、0.41和0.70,表明mt.A4589G异质性具有普遍性;（3）mt.A4589G异质性与固始鸡资源群F₂代性状的关联分析表明,mt.A4589G异质性对腹脂、皮脂厚度、8周胫长、腿肌纤维直径、葡萄糖和乳酸脱氢酶等的影响都达到差异显著水平(P<0.05);（4）mt.A4589G不同的异质性等级与固始鸡资源群F₂代性状的关联分析表明,mt.A4589G异质性等级除与腹脂、腹脂率和腿肌率等屠体性状显著相关（P<0.05）外,还与生长性状（8周胫长等）、血清生化指标（葡萄糖等）均产生显著的关联（P<0.05）。【结论】mt.A4589G是一个异质性变异,其异质性的分布具有明显的品种特性,在自然群体的异质性发生频率较低,而mt.A4589G在固始鸡资源群中存在广泛的异质性。通过mt.A4589G异质性及其不同异质性等级与固始鸡资源群F₂代性状的关联分析发现,mt.A4589G变异/异质性与鸡的腹脂、血液中葡萄糖水平等性状均产生了显著的关联（P<0.05）。     

藏鸡和隐性白羽鸡GH基因的SNP检测及其与生长性状间的关联分析

 利用改良等位基因特异性PCR（Modified Allele Specific PCR, M-ASP）结合PCR-RFLP以及直接测序方法对藏鸡和隐性白羽鸡生长激素（Growth Hormone, GH）基因内含子4 （Intron4）的一个位点进行了SNP检测，并进行了该基因与藏鸡生长性状的关联分析。检测结果显示，GH基因Intron4的这个位点同时具有M-ASP和SacI-RFLP多态。测序结果表明，该位点发生了C→G的碱基突变，产生了CC、CG和GG三种基因型。两个等位基因和三种基因型在两鸡种中的分布基本一致。其中，基因型CC和等位基因C的频率最高。χ2检验结果表明，基因型频率或者等位基因频率在两鸡种之间没有显著差异（P＞0.05），而分别在两鸡种内部却存在显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）差异。方差分析结果表明，基因型与藏鸡的2周龄体重等12个生长性状有显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）关联；基因型CC与藏鸡的7周龄体重存在显著关联（P＜0.05）。这暗示了GH基因是影响藏鸡生长的主效基因或者它与主效基因相关，而该位点的碱基突变可以作为筛选藏鸡高的7周龄体重的分子标记。     

6个地方鸡种羽毛性状遗传的研究

 以丝羽乌骨鸡（S）、仙居鸡（X）、固始鸡（G）、萧山鸡（XIS）、北京油鸡（Y）、狼山鸡（L）6个地方鸡种为试验素材,通过品种间的正反交试验、回交试验、横交试验,观测羽型性状、羽色性状、羽速性状在不同组合下产生的F1和F2代中的表现和分离比例,分析各性状遗传规律。结果表明：羽型性状受常染色体基因H/h控制,片状羽型对丝状羽型为显性,片状羽型在仙居鸡、固始鸡、萧山鸡、北京油鸡、狼山鸡群体中均为显性纯合,遗传符合孟德尔遗传规律,观测值与理论值相一致（P>0.05）;狼山鸡的黑羽,北京油鸡的红羽和萧山鸡、仙居鸡、固始鸡的黄羽对丝羽乌骨鸡隐性白羽的遗传方式是完全显性遗传;各鸡种具有独特的羽速种质特性,丝羽乌骨鸡、仙居鸡为快羽型,固始鸡、北京油鸡、萧山鸡为慢羽型,狼山鸡为快慢羽混合型,伴性快慢羽基因（k/K）在6个地方鸡种中遗传稳定,符合伴性遗传规律,观测值与理论值相一致（P>0.05）。      

血液生化遗传标记在禽类建立高产品系中的理论与应用研究

本研究以家鸡为试验材料、用电泳的方法测定分析了一些蛋白质(酶)的多态性,确定下列血液蛋白质(酶)作生化遗传标记:碱性磷酸酶(Akp-1和Akp-2)、淀粉酶(Amy-1和Amy-2)、酯酶(Es-1)、血红蛋白(Hb-1)和转铁蛋白(Tf).应用上述生化遗传标记调查分析了广东省3个著名地方鸡种的起源分化和彼此间关系、粤黄鸡内品系间的分化和粤黄鸡102系内家系间的关系,并对淀粉酶Amy-1多态性及其与生活力等的关系作了专门的研究.结果表明,应用生化遗传标记辅助建立家禽品系是可行的,既可综合多个生化遗传标记建立品系,也可根据单一生化遗传标记(如Amy-1)建立品系。     

藏獒血液蛋白遗传多样性的研究

采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对河曲藏獒、青海藏獒、青海藏狮犬和青海土种犬共4个群体103只犬的9个血液蛋白基因座(Tf、Po、Es-1、Es-2、Sα_2:、Hb、Alb、Pr、Amy)的多态性进行了检测,分析了两个藏獒群体的群体内和群体间的遗传变异,并以Nei氏标准遗传距离(D)为基础用UPGMA法探讨了不同犬群之间的遗传关系.结果表明,在4个被测犬群中,Tf、Po、Es-1、Es-2和Sα_2 5个基因座上存在多态性,其中Tf、Es-1和Po分别由3个等住基因所控制,Es-2和Sα_2,分别由2个等位基因所控制,而Hb、Alb、Pr和Amy基因座均呈现单态;河曲藏獒群体内遗传变异较青海藏獒丰富,而两个藏獒群体间的遗传分化程度很低(G_(ST)=0.0187);以Nei氏标准遗传距离(D)为基础的UPGMA法聚类结果表明.青海藏獒与青海藏狮犬和青海土种犬的遗传关系近于河曲藏獒.     

白色力克斯、哈尔滨白兔及其杂种血液蛋白多态性研究 Ⅱ 用血液蛋白多态性剖析亲本品种与杂种后代的遗传关系

本文根据所测定的白色力克斯兔(WR)、哈尔滨白兔(HR)及其杂种一代(F_1)和回交一代(B_1)5个血液蛋白位点——红细胞酯酶(E_(s-1);E_(s-2)、E_(s-3))、前转铁蛋白(Prt)和后白蛋白(Po)的基因分布,估算了各群体内的平均杂合度和群体间的遗传距离并进行了聚类分析。结果表明,白色力克斯兔和哈尔滨白兔亲缘关系最远;杂种一代和回交一代亲缘关系最近;杂种一代和回交一代与两亲本品种均有一定联系,但与白色力克斯兔亲缘关系较近,与哈尔滨白兔较远;回交一代中正常毛型(B_1N)与力克斯毛型(B_1R)间基因分布也存在一定差异。各群体平均杂合度的大小顺序为HW>B_1N>F_1>WR>B_1R。