云南保种乳用圭山羊遗传多样性蛋白电泳研究

 采用水平式淀粉胶蛋白电泳技术,对路南保种乳用圭山羊33个个体的46个遗传座位的血液蛋白及同工酶的多态性进行了研究.结果发现AKP,LAP,CES-I,ESD,ME和Pa6个座位具多态性,多态座位的基因AKP⁰,LAP^A,CES-I¹,ME^B,ESD¹和Pa^A的基因频率较高;多态座位百分比P=0.1304,平均杂合度H=0.0501.在Tf座位,出现两种表型AA,AB,但多态性贫乏;LDH谱带中发现一种不同的类型.结果表明,该品种山羊与已检测的其它山羊比较,蛋白多态水平较高,遗传背景较丰富.     

云南盐津乌鸡血液蛋白及同工酶遗传多态性研究

 采用水平式淀粉凝胶电泳技术,对云南盐津乌鸡34只个体共计34个基因座位的血液蛋白及同工酶多态性进行研究,发现LAP,AKP-1,AKP-2,CKs-1,PEP-B5个座位具有多态性,多态座位百分比和平均杂合度分别为P=0.1470,H=0.0586.对多态座位基因频率进行计算发现盐津鸟鸡LAP^B,aKP-1,AKP-2°,CEs-l^A,PEP-B^A频率较高.这些结果表明云南盐津乌鸡遗传多样性程度较常见的外国鸡种高,且具有独特基因型.属选育程度低,选择潜力大的地方品种,具有较高的保种价值.     

中国部分乌鸡品种血清酶蛋白多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定鸡血清脂酶(E_s-1),碱性磷酸酶(Akp)、碱性磷酸酶-2(Akp-2)的多态性结果表明,E_s-1由常染色体上等显性等位基因E_s-1^A,E_s-1^B所支配,其中E_s-1^B基因在我国药用和肉用乌鸡中出现频率较高(0.7768～0.8700),而E_s-1^A基因在蛋用型莱航和罗斯鸡中占优势(0.6169～0.6818).Akp、Akp-2均由显隐性基因所控制,其出现频率亦因鸡种不同而表现一定的差异.试验中发现有些个体E_s-1^A基因可进一步区分为E_s-1^A1和E_s-1^A2,从而使所研究鸡种中E_s-1的等位基因数目扩展至3个.     

武定鸡农大Ⅰ系血液蛋白多态性与生产性能关系的研究

 采用垂直板电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）对127只第15世代武定鸡农大Ⅰ系的血清转铁蛋白（Tf）、酯酶（Es-1）、淀粉酶（Amy-1）、碱性磷酸酶（Akp-1）等4个血液蛋白座位的多态性进行了检测,计算了各座位基因型频率、基因频率和遗传多样性指数,并进行了基因频率的Hardy-Weinbery平衡适合性检验,特别是对血液蛋白多态性与生产性能的关系进行了分析。结果表明: 在4个测定座位中,Tf不具多态性,只表现为一种表型（BB型）;其余3个座位呈现出多态性,在 Amy-1座位AB型个体严重过量。4个血液蛋白座位的优势基因分别为TfB,Es-1^C,Amy-1^B,Akp-1^S,其中Es-1,Akp-1座位处于平衡状态,Tf和Amy-1偏离平衡状态。血液蛋白多态性与生产性能之间存在相关关系。Akp-1^F,Es-1^AC,Amy-1^AB 3种基因型可能有利于体重增长;Akp-1^S,Es-1^CC,Amy-1^AB对产蛋性能可能有促进作用。     

种植密度、底肥、追肥对鄂马铃薯18农艺性状及产量的影响

以马铃薯新品种鄂马铃薯18为材料,采用3因素3水平正交设计(L_3³),研究了种植密度、底肥、追肥对鄂马铃薯18农艺性状及产量的影响。结果表明,种植密度是马铃薯产量、株高、单株块茎数的主要影响因素,种植密度、底肥、追肥对马铃薯产量的影响程度为密度>追肥>底肥。9个处理组合中A₃B₃C₁(密度60000株/hm^₂,底肥750kg/hm^₂,追肥150kg/hm^₂)处理下产量最高,为33390.00kg/hm^₂,分析发现A₃B₂C₁处理组合(密度60000株/hm^₂,底肥600kg/hm^₂,追肥150kg/hm^₂)可获得最高产量,是最佳处理组合。     

牦牛应激型 HSPA1A和 HSPA2基因的克隆及序列分析

为了解牦牛应激型 HSPA1A和 HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型 HSPA1A和 HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型 HSPA1A和 HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型 HSPA1A基因全长2 134 bp,开放阅读框全长1 926 bp,编码641个氨基酸,分子质量为70.26 ku; HSPA2基因全长1 911 bp,开放阅读框全长1 911 bp,编码636个氨基酸,分子质量为69.85 ku。将 HSPA1A和 HSPA2基因开放阅读框编码的氨基酸序列进行ScanProsite分析,均得到3个HSP70蛋白家族标记。核苷酸序列同源性分析表明, HSPA1A和 HSPA2基因具有较高的保守性,牦牛与牛的 HSPA1A和 HSPA2基因核苷酸序列同源性最高,分别为99.8%和99.1%。遗传进化关系分析表明,牦牛与牛的应激型 HSPA1A和 HSPA2基因亲缘关系最近。     

大豆GmCYP85A2基因克隆与表达特性分析

【目的】克隆大豆GmCYP85A2基因并进行表达特性分析,为进一步研究GmCYP85A2基因的功能及其对大豆叶柄角的调控机制奠定基础。【方法】以郑豆196作为试验材料,利用同源克隆技术克隆GmCYP85A2基因,对其编码蛋白进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测GmCYP85A2基因在大豆植株不同组织（根、茎、叶片、叶柄、花、花芽和豆荚）及不同光照处理时间（0,4,8,12,16,20,24 h）下叶柄中的相对表达量,分析该基因的表达特性。【结果】成功克隆了大豆GmCYP85A2基因,其长1 524 bp,开放阅读框长1 401 bp,编码466个氨基酸;编码蛋白分子质量为53.4 ku,理论等电点（pI）为9.00,具有典型的P450超家族保守结构和蛋白三级结构,亚细胞定位结果表明该蛋白为分泌型蛋白。启动子分析结果表明,该基因转录起始位置ATG上游2 kb的基因组序列含有多个响应光照以及与生长发育、逆境胁迫相关的顺式作用元件。基因表达特性分析结果表明,GmCYP85A2基因主要在花、花芽、豆荚及叶柄中表达,且以花中的表达量最大;在营养生长时期,叶柄中GmCYP85A2的表达量受光照影响而上调,并伴随着叶柄角的变大。【结论】克隆了大豆GmCYP85A2基因,并研究了该基因的表达特性,分析了其在叶柄角调控中的可能机制。     

猪场废水高剂量次氯酸钠消毒下消毒副产物的赋存特征研究

为了明晰猪场废水高剂量NaClO消毒产生消毒副产物（DBPs）的赋存特征,本研究采集了典型猪场废水厌氧消化+改良A²O工艺的不同工艺段出水,采用全二维气相色谱-质谱联用（GC×GC-qMS）结合三维荧光（3D-EEM）分析,研究了猪场废水厌氧消化+改良A²O工艺处理过程有机物变化对DBPs的影响。猪场原水、厌氧消化池出水、改良A²O池出水经100 mg·L^-1 NaClO消毒后共检测到10类38种DBPs。猪场原水消毒后检测到大量氯酚类和氯杂环类DBPs,厌氧消化+改良A²O工艺对这部分DBPs前体物有很好的去除效果,经厌氧消化处理后氯酚类和氯杂环类DBPs分别减少了88.50%、77.64%。但厌氧消化会增加酯类和烃类,使氯酯类和氯烃类DBPs产生量分别增加了392.18%、68.37%,改良A²O工艺可以去除部分氯酯类和氯烃类DBPs前体物。改良A²O工艺出水有机物C/N升高、H/C降低,HIX增大,腐殖化程度与稳定程度升高、芳香度升高,可能是出水消毒后氯烃类DBPs增加的原因。厌氧消化+改良A²O工艺难以去除氯酯类和氯烃类DBPs前体物,猪场废水处理系统需要加强对这部分前体物的去除能力。     

椽竹各器官生物量模型

 对耐寒丛生竹种椽竹Bambusa textilis var. tasca 种群的生物量结构进行了研究,并对其各器官生物量与胸径和平均壁厚的相关模型进行了拟合。结果表明：椽竹各器官生物量的分配中,竹秆所占比例最大,为总生物量的74.62%,远超过毛竹Phyllostachys pubescens等竹种的相应值。椽竹的胸径和平均壁厚与各器官生物量之间均呈极显著相关性,其中竹枝生物量干质量（B_t）,竹叶生物量干质量（B_f）,竹秆生物量干质量（B_s）,地上部分生物量干质量（B_a）,全竹生物量干质量（W_bt）与胸径（D）和平均壁厚（A）间相关关系的拟合模型分别B_t ＝－2 672.765 + 1 299.919D + 59.298D² －36.222D³,B_f ＝－2 756.615 + 1 290.910D + 95.822D² －34.991D³,B_s ＝－4 016.535 + 2 161.650D + 21.755D² －45.453D³,B_a ＝－7 445.916 + 3 952.480D + 45.439D² －96.666D³,W_bt ＝－7 360.122 + 3 933.155D + 41.158D² －93.171D³,B_t ＝－1 914.129 + 739.465A + 30.261A² －61.285A³,B_f ＝－3 342.800 + 1 228.745A －1.165A² －104.356A³,B_s ＝－6 103.838 + 1 790.994A + 44.430A² －13.674A³,B_a ＝－9 770.036 + 2 464.708A + 19.688A² － 23.782A³,W_bt ＝－9 914.842 + 2 912.175A + 25.624A² －23.513A³。根据以上公式估算出椽竹林单株平均秆生物量为1.52 kg·株^－1,单株平均全竹生物量2.31 kg·株^－1,单位面积秆生物量3.28 kg·m^－2;单位面积全竹生物量4.96 kg·m^－2。表8参29     

组合型孔排种器护种机构的优化设计与试验

目的 解决水稻精量穴直播机组合型孔排种器在实际应用过程中护种带容易跑偏、打滑,导致护种带磨损严重、伤种率偏高的问题。方法 对护种机构同步原理进行分析,优化设计了轴套结构(A)和护种带硬度(B)。以水稻品种‘培杂泰丰’和 ‘秀水134’ 种子为试验材料,设计了以不同轴套结构[尼龙轴套结构(A₁)和滚针轴承&铜套结构(A₂)]和不同护种带硬度[40(B₁)、45(B₂)、50(B₃)、55(B₄)和60 HA(B₅)]为变量的双因素试验。结果 A和B对水稻种子伤种率影响极显著(P<0.01),且A与B之间存在显著交互作用(P < 0.05);A₂B₂和A₂B₃对伤种率影响最小;A₁与A₂之间差异极显著,且A₂组的伤种率明显小于A₁组,说明A₂优于A₁;B₂与B₃差异不显著,但与其他试验组差异显著。A对穴径影响显著,B对穴径无显著影响,且A₂B₂、A₂B₃和A₂B₄对穴径影响较小;A₁、A₂对穴径的影响差异极显著,且A₂明显优于A₁。工作100 h后,试验组A₂B₃、A₂B₄和A₂B₅的护种带磨损量较小;试验组A₂B₃最优,其护种带磨损体积为72.6×10^?3 mm³,伤种率为0.04%,成穴性最好、播种效果最佳。结论 优化设计的滚针轴承&铜套的轴套结构合理,可以显著减小轴套与转轴之间的摩擦系数,且更耐高温、更耐磨;有效地提高了护种带的同步性,显著地提升了排种器的可靠性和播种质量。     

马关山羊促卵泡素 β受体 （ＦＳＨβ）基因的克隆与表达分析

采用 ＲＴ－ＰＣＲ方法从马关山羊垂体组织中克隆 ＦＳＨβ基因,分析其序列特征与组织表达量,并对其表达量与产羔数进行关联分析。结果表明克隆的 ＦＳＨβ基因 ｍＲＮＡ全长为 ５８３ｂｐ,包含一个 ３９０ｂｐ完整的开放阅读框,编码１２９个氨基酸 （ＧｅｎＢａｎｋ登录号为 ＧＵ３５９０４４.１）。马关山羊与云岭黑山羊和波尔山羊 ＦＳＨβ基因编码区的碱基同源性分别为 ９９.２％和 ９８.７％。与云岭黑山羊相比,马关山羊 ＦＳＨβ基因的编码区存在 ３处突变,分别为第 １０,２６,３４３碱基处;与波尔山羊相比,该基因编码区存在 ５处突变,分别为第 １０,２６,１５１,３４３,３６０碱基处,以上密码子突变均为错义突变。序列进化树分析显示,马关山羊 ＦＳＨβ蛋白与波尔山羊和云岭黑山羊有较近的亲缘关系,其次是牛、猪、人和鼠。荧光定量 ＰＣＲ检测表明,马关山羊 ＦＳＨβ基因的ｍＲＮＡ表达水平显著高于云岭黑山羊 （Ｐ＜０.０１）,且表达量与产羔数之间存在正相关,相关系数分别为为０.９７３２,０.９５４４,０.９４７１。本文为深入研究马关山羊产羔性状的分子机制奠定了基础。     

西农莎能奶山羊遗传检测的研究

通过对西农莎能奶山羊九个血液蛋白位点和四项外形特征的遗传抽样检测，结果表明：西农莎能奶山羊在七个血液蛋白位点和四项外形特征上具有多态性，并存在有原种瑞士莎能奶山羊不具有的Ｈｂ￣Ｂ和Ｔｆ￣Ｂ基因，以及其他莎能羊种中不具有的Ａｃｐ￣Ａ和Ｃａｔ￣Ｂ基因。     

榕江小香羊GnRH基因多态性及其与繁殖性状关联性分析

为了探讨Gn RH基因SNP与榕江小香羊繁殖性状关联性,试验以榕江小香羊为研究对象,采用DNA池法及PCR-SSCP技术检测Gn RH基因单核苷酸多态性。结果表明,榕江小香羊Gn RH基因内含子3检测到1个SNP位点T-68G,该位点表现为3种基因型,分别命名为TT、TG和GG。基因型与繁殖性状关联分析显示,榕江小香羊GG基因型个体的产羔数显著高于TT和TG基因型个体(P0.05)。研究结果提示Gn RH基因可能是影响山羊产羔数的主效基因或与主效基因连锁,T-68G位点可望作为提高山羊个体繁殖性能的分子遗传标记。     

云南红骨山羊和非红骨圭山山羊屠宰性能的测定

 红色骨骼是红骨圭山山羊区别于其他山羊的典型性状,试验分析和比较红骨山羊与非红骨圭山山羊的体尺性状及屠宰性状,为红骨山羊的选育提供基础数据。试验以全放牧条件下17~19月龄红骨圭山山羊和非红骨圭山山羊各8只、公母各半为研究对象,对其进行活体、胴体和屠体测定,比较两者之间活体指标和屠体性状的差异。红骨山羊和非红骨山羊的活体指标、胴体体尺各指标间均无显著性差异,但屠宰性能指标中红骨山羊的胴体净肉重显著高于非红骨山羊（P<005）,肉骨比极显著高于非红骨山羊（P<001）,胴体骨骼重显著低于非红骨山羊（P<005）。红骨圭山山羊具有骨骼轻、产肉率高、肉骨比较高等特点,在生产上具有较好的利用与开发前景。     

4个微卫星标记在波尔山羊中的遗传多态性研究

根据比较基因组学方法,利用绵羊6号染色体上与主效多胎基因(FecB)紧密连锁的4个微卫星标记OarAE101、OarHH55、BM1329和BMS2508,对波尔山羊进行了等位基因频率、多态信息含量、有效等位基因数和杂合度的遗传检测。结果表明,4个微卫星位点在波尔山羊上多态性丰富;OarAE101基因座的多态信息含量(PIC)、有效等位基因数(Ne)、平均杂合度(He)分别为0.847 4,6.553 1和0.862 8;OarHH55基因座分别为0.767 6,4.302 9和0.796 8;BM1329基因座分别为0.841 4,6.305 2和0.857 6;BMS2508基因座分别为0.783 1,4.6104和0.8096。4个微卫星位点均为高度多态位点,可用于波尔山羊遗传多态性评估和多胎性状研究。     

山羊生长分化因子9基因外显子2 的PCR-SSCP分析

【目的】寻找与产羔数相关的遗传标记，为山羊高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】以控制Belclare绵羊和Cambridge绵羊高繁殖力的生长分化因子9（growth differentiation factor 9, GDF9）基因为候选基因，根据绵羊GDF9基因序列设计4对引物，采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外显子2在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)以及低繁殖力山羊品种(波尔山羊、文登奶山羊、辽宁绒山羊、北京本地山羊)中的单核苷酸多态性，同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。【结果】山羊与绵羊的GDF9基因外显子2核苷酸序列同源性为99%(955/965)。引物1和引物4存在多态性。对于引物1扩增片段，5个山羊品种均检测到AA、AB和BB 3种基因型，测序分析发现外显子2第26 bp处有1个G→A的单碱基突变，但没有引起氨基酸改变；济宁青山羊A等位基因频率为0.9128，B等位基因频率为0.0872；AA基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型的多0.54只(P<0.01)，比BB基因型的多0.63只(P<0.01)。对于引物4扩增片段，5个山羊品种均检测到CC、CD和DD 3种基因型，测序分析发现外显子2第792 bp处有1个G→A的单碱基突变并且导致缬氨酸改变为异亮氨酸；济宁青山羊C等位基因频率为0.9266，D等位基因频率为0.0734；CC基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.57只(P<0.01)，比DD基因型的多0.62只(P<0.01)。【结论】初步表明GDF9基因可能是控制济宁青山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。     

9个山羊群体乳上皮黏蛋白MUC1遗传多态性及群体聚类分析

采用SDS-PAGE法分析山羊乳MUC1遗传多态性。结果显示,9个山羊群体中,乳MUC1在SDS-PAGE上均呈现出丰富的遗传多态性,表现为1条或2条迁移率不同的区带,317个个体共检测到7个不同分子量的MUC1区带,分别代表A,B,C,D,E,F和G7个等位基因;共检测到17种基因型。山羊乳MUC1在群体内存在较大的基因杂合度,且基因频率和基因型频率在群体间存在一定的差异。根据乳MUC1基因频率可将9个山羊群体划分为两大类,该聚类结果与这些羊群体的外貌特征、已知的羊品种形成史以及所处的地缘位置基本一致。