锦州地区温度的时间分布对不同生态型大豆品种产量形成的有效性研究

本研究利用全国大豆品种生态型联合试验锦州试点1980—1982三年试验资料,对能够在本地成熟的44个不同生态型的大豆品种,研究分析温度的时间分布对它们产量形成的有效性。并分别建立了这种影响作用的数学模型。从而,定量地揭示了温度的时间分布对各生态型大豆品种产量形成的影响规律。其研究结果对确定良种大豆的适宜推广区域和杂交育种选取亲本以及大豆生态型的分类研究都具有一定参考价值。     

牦牛铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建及其表达研究

【目的】为解决医用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)来源的限制,利用基因工程方法构建牦牛Cu,Zn-SOD原核表达系统,为重组牦牛Cu,Zn-SOD作为注射用药奠定基础。【方法】RT-PCR扩增牦牛Cu,Zn-SOD编码基因,构建Cu,Zn-SOD/pET22b(+)重组表达载体,并转化到E.coli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE、活性染色及邻苯三酚法进行检测,采用BradFord方法测定融合蛋白浓度。【结果】本试验成功获得了牦牛Cu,Zn-SOD cDNA,长456bp,编码152个氨基酸。与普通牛SOD编码基因序列cDNA一致率为99.6%,氨基酸序列一致率为98.7%,表达产物分子质量约为32kD。酶粗提取液比活约为35U·mg-1。重组蛋白浓度0.2772(mg·mL-1)。【结论】本研究成功构建了牦牛Cu,Zn-SOD/pET22b(+)原核表达载体,表达量较高、稳定性强,重组表达产物具有较高生物学活性。     

牦牛初乳中激素含量的动态变化

对麦洼牦牛(Bos.grunniens)分娩前后乳腺分泌物的生化组成进行了分析,并与常乳进行了比较。结果表明,牦牛初乳中激素含量高,分娩当天的初乳中生长激素、催乳素、胰岛素和胰岛素样生长因子含量均显著高于常乳,其中生长激素含量在泌乳第2天下降至与常乳接近,而其他激素或生长因子在初乳期前几天均显著高于常乳。另外,牦牛分娩当天和第2天乳汁中胰蛋白酶抑制剂(TI)含量显著高于常乳。     

牦牛乳酸脱氢酶A的分离纯化、酶学性质及其基因的克隆

 【目的】分离纯化牦牛骨骼肌中的乳酸脱氢酶-A（LDH-A）,并克隆其cDNA。通过比较牦牛与普通牛的LDH-A的酶学性质和cDNA序列,为研究牦牛适应高海拔、低氧环境,在分子水平上找到一些线索。【方法】采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析等方法,分别从牦牛和普通牛骨骼肌中纯化LDH-A,并对其酶学性质进行比较;通过RT-PCR方法克隆牦牛LDH-A的cDNA序列,并与GenBank登录的普通牛LDH-A的cDNA序列进行比对。【结果】纯化的牦牛LDH-A比活力为103.9 U•mg-1蛋白,纯化倍数为18.2。SDS-PAGE和PAGE分析均显示一条带。酶动力学参数测定显示,牦牛LDH-A的Km NADH为0.097,Km 丙酮酸钠为1.897,均不同程度高于普通牛,其中对丙酮酸钠的Km大约是普通牛的2倍。根据牦牛LDH-A的cDNA序列预测的氨基酸序列与普通牛LDH-A的氨基酸序列比较,只有2个氨基酸残基的改变（257Val-Ala和315Tyr-Cys）。【结论】牦牛LDH-A对丙酮酸的高Km可避免骨骼肌中产生过多的乳酸,是适应进化的结果;这种升高可能与其氨基酸序列变化导致的空间结构微小改变有关。     

草鱼HSP90基因cDNA序列克隆及其组织表达差异

根据斑马鱼HSP90(Heat shock protein)序列(NM_131328)设计并合成一对引物,提取草鱼肝脏组织总RNA,RT-PCR扩增获得草鱼HSP90基因cDNA部分序列596 bp,获得GenBank登陆号为FJ517554.将测序结果利用DNAman软件与其他几种已知序列的鱼进行比对,结果表明,草鱼HSP90与斑马鱼、鲤、鲋的同源性依次为90%、89%、92%.同时利用半定量(Semi-quantitative,SQ)RT-PCR技术检测HSP90在草鱼脂肪、肌肉、肠、脑、粘液、性腺、鳔、肝脏、心脏、脾脏、鳃、鳍12个组织的表达差异.结果表明,HSP90在草鱼除了鳍外的其他11个组织中均检测到表达,其中在心脏中表达最高,但与鳃、性腺、脑、脾脏中的表达无显著差异(P>0.05),在脂肪、粘液、鳔组织中的表达显著低于其他几种组织(P<0.05),在肝脏、肌肉与肠中的表达无显著差异(P>0.05).     

草鱼HSP70基因cDNA部分序列克隆及其组织表达差异

根据鲤热休克蛋白70(Heat shock protein,HSP70)序列(AY120894)设计并合成一对引物,以草鱼(Cteno-pharyngodon idella)肝胰脏组织总RNA为模板,RT-PCR扩增获得草鱼HSP70基因cDNA部分序列,并进行了组织表达差异性研究。结果显示:所获为序列为480 bp,获得GeneBank登陆号为FJ483832。序列测序结果显示,HSP70扩增序列与鲤、斑马鱼、鲋的同源性为:93%、91%、93%。另外,所获序列HSP70在草鱼脂肪、肌肉、肠、脑、粘液、性腺、鳔、肝胰脏、心脏、脾脏、鳃、鳍12个组织的表达存在差异,HSP70在草鱼这12个组织中均检测到表达,其中在鳍中表达最高,极显著高于其他组织(P<0.01);在鳔中表达次之,且与脑、心脏、性腺中表达差异不显著;在粘液中表达最低。     

牦牛初乳对新生犊牛血液生化组成的影响

初乳是哺乳动物分娩后最初几天的乳腺分泌物。大量研究表明,初乳不仅为新生幼仔提供必要的常规营养成分,如蛋白质、矿物质、维生素等,而且提供免疫保护和代谢信息[1]。由于牛、羊等反刍动物的胎盘无法通过免疫球蛋白,因此,新生犊牛须借助初乳获得被动免疫[2]。牦牛是我国青藏高     

齿轮虚拟参数化造型的新途径

提出逆向二次开发三维CAD软件的理念，利用三维CAD软件所具有的宏记录的功能，开发者避免了编写大量的程序代码，只要修改宏文件即可，降低了开发难度。通过应用Visual Basic(VB)程序语言，基于三维机械CAD软件SolidWorks2000平台，开发齿轮三维虚拟参数化造型设计系统的实例，介绍了应用该方法逆向开发三维CAD软件的全过程。解决了工业生产中齿轮三维虚拟造型设计的难题，并且提供了一种对三维CAD软件开发的方法，提高开发CAD软件的能力。     

银耳多糖浸泡肉鸡种蛋对肉鸡鸡胚尿囊膜血管生成、雏鸡生长性能和抗氧化性能的影响

旨在探讨银耳多糖溶液浸泡种蛋对肉鸡鸡胚尿囊膜血管生成、雏鸡生长性能和抗氧化性能的影响,为银耳多糖在禽类养殖中的应用提供一定理论依据。选取大小相近的132枚肉鸡种蛋,进行常规孵化,随机分为3组,每组44枚。在7～9胚龄时,每天用0、20、40 mg/kg银耳多糖溶液浸泡3组种蛋6 min,浸泡后继续孵化。13胚龄时,固定其尿囊膜,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量鸡胚尿囊膜血管生成面积和小血管数量;14胚龄时采集鸡胚尿囊膜,测定鸡胚尿囊膜上血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor 2,FGF2)基因表达量;其余种蛋孵化至出雏并采集1日龄雏鸡血清及胸肌、肝脏、脑组织、小肠,并称质量。测定肝脏和血清抗氧化指标,及肝脏生长激素受体(growth hormone recepter, GHR)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-1,IGF-1)的基因表达量。结果表明,与对照组相比,高、低浓度组银耳多糖溶液浸...