水杨酸对秦艽愈伤组织总酚·总黄酮含量及抗氧化酶活性的影响

[目的]研究添加不同浓度的水杨酸(SA)对秦艽愈伤组织生长量、总黄酮、总酚含量及抗氧化酶活性的影响.[方法]以秦艽种子为原材料诱导出秦艽愈伤组织,在秦艽愈伤组织的继代培养中加入0、10、50、100、150、200μmol/L的SA,暗培养25 d后,测定秦艽愈伤组织的生长量、抗氧化酶活性和总黄酮、总酚含量.[结果]与对照组相比,当SA浓度为150μmol/L时秦艽愈伤组织鲜重达到最大值,SA浓度为100μmol/L时秦艽愈伤组织干重达到最大值,分别为2.8635、0.2017 g,显著高于对照组的鲜重和干重(P<0.05).秦艽愈伤组织SOD活性在SA浓度为150μmol/L时达到最大值,为183.95 U/g,是对照组的2.44倍;CAT活性在SA浓度为200μmol/L时达到最大值,为22.44 U/mg,是对照组的2.56倍;当SA浓度为200μmol/L时,POD活性虽有所上升,但仍然显著低于对照组(P<0.05),为61.16 U/mg,是对照组的0.40倍.SA浓度为100μmol/L时,秦艽愈伤组织总黄酮含量达到最大值,为0.77 mg/g,是对照组的1.35倍;SA浓度为50μmol/L时,总酚含量达到最大值,为0.98 mg/g,是对照组的1.31倍.[结论]一定浓度的SA处理下,有利于秦艽愈伤组织的生长和干物质的积累;适当浓度的SA对秦艽愈伤组织SOD、CAT活性有促进作用,而添加SA会对POD活性有抑制作用;当添加SA浓度为100、50μmol/L时,分别有利于秦艽愈伤组织中总黄酮、总酚含量的积累.     

葡萄愈伤组织中白藜芦醇含量的影响因素

以葡萄的叶片、叶柄及茎段诱导的愈伤组织为试验材料,考察紫外线照射、硝酸银处理和杂菌污染对其愈伤组织中白藜芦醇含量的影响。结果表明:经硝酸银处理的愈伤组织中白藜芦醇含量随处理浓度的提高呈现先增加后减少的变化趋势,在浓度为10 mg/L时,白藜芦醇含量达到最大;经紫外线照射的愈伤组织中白藜芦醇含量随照射时间的延长先增加后减少,茎段与叶片经紫外线照射3 min后白藜芦醇的含量最高,而叶柄经紫外处理5 min后白藜芦醇的含量最高。染菌的愈伤组织中白藜芦醇含量也明显高于对照。因此,在所试验的范围内提高葡萄愈伤组织中白藜芦醇含量,硝酸银的适宜浓度为10 mg/L,紫外线照射时间为3~5 min,另外杂菌感染也有助于葡萄愈伤组织中白藜芦醇含量的提高。     

AgNO3对银杏胚愈伤组织诱导及分化的影响

为探讨AgNO3对不同发育期银杏胚愈伤组织诱导及分化的影响,以银杏3个不同发育程度合子胚为外植体,添加0～5 mg/L AgNO3做处理。结果表明：AgNO3能显著提高胚的愈伤诱导率：早期心形胚鱼雷形胚,早期子叶胚,成熟胚子叶分别在浓度1,0．5,0．1 mg/L时达到最大诱导率,为87％,77％,98％。隔代添加AgNO3促进了早期子叶胚愈伤的分化：1．0 mg/L处理在第90天分化出愈伤化银杏叶和胚类似物,3．0 mg/L处理分化出短小叶片;常规添加AgNO3的处理在0．1 mg/L分化出芽点。遮光处理表明：黑暗培养对愈伤诱导率影响不明显;添加活性炭时,AgNO3促进胚轴愈伤而抑制子叶愈伤,胚轴愈伤组织白色透明。综合分析表明：AgNO3能提高银杏胚的愈伤组织诱导率并促进其分化。     

碳纳米管对粳稻愈伤组织分化影响的研究

采用粳稻辽粳294愈伤组织进行分化诱导试验,研究碳纳米管对粳稻愈伤组织分化和幼苗及根生长的影响。结果表明,添加浓度为10μg/m L碳纳米管的分化培养基,其粳稻愈伤组织出绿率为80%,成苗率达40%,明显高于不加碳纳米管的对照;当碳纳米管浓度为50μg/m L时,成苗率及苗长较10μg/m L处理时降低,但仍高于对照。说明一定浓度的碳纳米管可以促进粳稻愈伤组织分化及出苗和根系的生长。     

黄瓜花药培养愈伤组织诱导及再生的研究

以10个黄瓜多代自交系为试材,研究了黄瓜花药小孢子不同发育时期、基因型、预处理时间、植物生长调节剂对愈伤组织的发生和分化的影响.试验结果表明,小孢子在单核中后期时愈伤组织诱导率最高;不同基因型愈伤组织诱导率不同;4℃低温预处理72h最适宜诱导花药愈伤组织;诱导培养基(基本培养基为B5+蔗糖50 g/L+琼脂7g/L,下同)中添加0.25 mg/L6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L AgNO3时愈伤组织平均诱导率最高;较优的生芽和生根培养基分别为0.5 mg/LNAA+1.5 mg/LKT+1.0 mg/L AgNO3和0.1mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA+1.0ng/LAgNO3(有机元素加倍);基因型和培养基是愈伤组织发生和分化的主要影响因素.     

影响小麦组织培养效率的重要因素研究

以郑麦9023盾片为材料,对影响小麦组织培养的2,4-D,AgNO3,蔗糖进行了研究。结果表明,培养基中附加0.5 mg/L 2,4-D有利于胚性愈伤组织的诱导,添加5 mg/L和10 mg/L的AgNO3对根苗的分化有负效应,蔗糖30 g/L对根苗的分化最有利。     

贯叶连翘愈伤组织诱导及其金丝桃素检测

采用不同培养基及激素诱导贯叶连翘愈伤组织,研究了不同蔗糖浓度对愈伤组织生长的影响,同时采用HPLC对不同生长状态的愈伤组织中金丝桃素含量进行检测。结果表明:MS + 2 ,4 -D 0 .2mg/L +KT 0 .0 2mg/L的培养基中愈伤组织的诱导率最高;提高蔗糖浓度可以促进愈伤组织生长,但合成金丝桃素的最佳蔗糖浓度为30g/L ;褐化的愈伤组织中金丝桃素含量明显高于生长状态好的愈伤组织,增加量可达7.5～9倍。     

芦荟愈伤组织诱导的初步研究

以库拉索芦荟的茎段、茎尖、叶片和根为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度的2，4-D，NAA，KT或其组合，并附加AgNO3，Vc，研究外植体种类、大小，接种方式，激素配比，以及AgNO3，Vc对库拉索芦荟愈伤组织诱导及生长情况的影响．结果表明，外植体以2cm长度的茎段较好；接种方式以横放效果较好；NAA15mg／L 2，4-D4mg／L KT0．1mg／L的激素组合愈伤组织诱导率达到90％；添加AgNO3诱导出的愈伤组织生长旺盛，富有光泽，以10mg／L效果较好；添加Vc对愈伤组织的褐化有一定的抑制，以5mg／L效果较好．     

虎杖叶愈伤组织的诱导和白藜芦醇含量的测定

[目的]诱导虎杖叶的愈伤组织并测定其中白藜芦醇的含量。[方法]以虎杖叶为组织培养材料,在28℃和黑暗培养条件下,在含有浓度0.2 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和浓度1 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）的MS诱导培养基中进行诱导,15 d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,转接3次后,把愈伤组织切下放置在相同培养基上继续培养3次后,采用HPLC法测定虎杖叶愈伤组织中白藜芦醇的含量。[结果]诱导出的愈伤组织生长状况良好,并且测得虎杖叶愈伤组织中白藜芦醇的含量为0.24 mg/g。[结论]由叶诱导出的愈伤组织中含有白藜芦醇成分,用HPLC法测定其含量,方法简便、迅捷,结果可靠。     

褐变抑制剂对黄芩愈伤组织褐变及次生代谢产物的影响

研究了不同褐变抑制剂对黄芩愈伤组织继代培养中褐变、生长以及黄芩愈伤组织次生代谢产物黄芩苷、黄芩素含量的影响。结果表明：在MS＋0．5mg／L2,4-D＋1．0mg／L6-BA继代培养基中分别添加1．0g/L植酸、10mg／L抗坏血酸、2．0g/L聚乙烯吡咯烷酮能有效抑制黄芩愈伤组织褐变,促进其生长。在综合考虑愈伤组织的褐变率、生长增殖倍数（干重）基础上,以黄芩苷产量为指标,添加10mg／L抗坏血酸＋1．0g/L植酸组合效果最好;以黄芩素产量为指标,添加1．0g/L植酸效果最好。     

葡萄细胞培养生产白藜芦醇的研究

以巨峰和红地球葡萄的不同组织为试材,利用不同培养基对其愈伤组织进行诱导,测定愈伤组织中的白藜芦醇含量.结果表明:在B5基本培养基附加6 mg/L NAA和0.6 mg/L 6-BA的培养条件下,巨峰葡萄果皮愈伤组织的诱导率最高,达87%.愈伤组织中白藜芦醇的含量均高于其对应外植体中的含量,其中巨峰葡萄果皮愈伤组织中的白藜芦醇含量最高,达11.184 μg/g.经6次继代培养可诱导出生长势强、白藜芦醇含量为14.296 μg/g的巨峰葡萄优良愈伤组织.     

不同诱导子对黄芪悬浮培养细胞中黄芪多糖积累的影响

[目的]研究水杨酸、茉莉酸甲酯、硝酸银、高糖、高盐、超声等诱导子对黄芪细胞生长和黄芪多糖合成的影响.[方法]向细胞悬浮液中加入各种诱导子或对细胞悬浮液进行超声处理,测定细胞干重增殖倍数和黄芪多糖的合成量.[结果]加入10.0 mg/L水杨酸可使黄芪多糖的含量为对照组的2.04倍;添加较低浓度的茉莉酸甲酯浓度（1.0 mg/L）使黄芪多糖的含量达48.974 mg/g,比对照提高了2.50倍;添加4 mg/L浓度的硝酸银能使黄芪多糖含量提高1.60倍;高糖和高盐胁迫处理均能诱导黄芪多糖的合成.高糖处理能使黄芪多糖的产量比对照提高了1.92倍.低剂量的超声刺激对黄芪细胞生物量的积累有显著的刺激作用.[结论]诱导子的添加可有效促进黄芪悬浮培养细胞中黄芪多糖的积累.     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小（1.0、1.5和2.0 mm）的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明：以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为：将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基（N6＋24-D 1.5 mg/L＋L-脯氨酸0.7 g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L＋硝酸银5μmol/L）,在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖60 g/L＋gelrite 3 g/L）,继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖30 g/L＋gelrite3 g/L）进行光培养,2～3 d即可分化出苗;待幼苗长到4～5 cm高时,移至生根培养基（1/2 MS＋IBA0.8 mg/L＋蔗糖30 g/L）,14～21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。     

抑制玉米幼胚愈伤组织褐化的研究

褐化是植物组织培养中一种常见的问题,直接影响组织培养能否成功。为了控制植物组织培养中的褐化现象,选取‘丹黄25’、P138、H21 3个玉米自交系幼胚为外植体,着重探讨胚龄,2,4-D、甘露醇、L-脯氨酸和AgNO3浓度对玉米幼胚愈伤组织褐化的影响。结果表明,选取授粉11天的‘丹黄25’幼胚、13天的P138和H21幼胚接种到诱导培养基中,待长出愈伤后转移到添加2 mg/L 2,4-D、10 g/L甘露醇、10 mg/L L-脯氨酸、10 mg/L硝酸银的继代培养基上,愈伤组织褐化率显著降低,表明培养基的种类及添加物对愈伤组织的生长有重要影响。     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

文心兰组织培养初步研究

以文心兰花梗为材料,采用不同激素配比、光照强度、培养基分别进行愈伤组织诱导、芽分化诱导和幼苗形成试验。结果表明,在添JJIINAA1．Omg／L＋6-BA0．2mg／L＋TDZ0．3mg／L＋琼脂8g/L＋蔗糖30g／L的培养基上,愈伤组织的诱导率最高,可达70．O％;在250lx的散射光条件下,文心兰花梗愈伤诱导率达到最高;在6-BA0．4mg／L＋NAAO．2mg／L激素组合条件下,从愈伤组织分化出幼苗的形成率和商品化率可达到最佳效果;中、低无机盐浓度且全量的基本培养基较利于幼苗分化;当分化形成的幼苗株高为1-2cm时利于壮苗生根,生根苗在适宜条件下移栽,成活率可达99．O％以上。因此,采用适合的激素配比、光照强度、基本培养基对花梗进行愈伤组织诱导、分化芽和幼苗,同样可以实现文心兰的大量繁殖。     

辣椒胞质雄性不育系（CMS）子叶培养植株再生

笔者以细胞分裂素、生长素、赤霉素、硝酸银为培养基的附加成分,利用辣椒CMS9704A和8214A子叶作为外植体,研究辣椒CMS子叶再生体系,为辣椒CMS的遗传改良奠定基础。     

肉桂酸和不同光质对葡萄愈伤组织增殖及白藜芦醇累积的效应

以葡萄品种"黑比诺"叶片诱导出的愈伤组织为材料,研究了不同浓度的肉桂酸和不同光质对葡萄愈伤组织增殖及对其中白藜芦醇合成的影响.结果表明:肉桂酸浓度为21mg·mL-1时,白光有最利于葡萄愈伤组织的增殖;在肉桂酸浓度为27mg·mL-1时,绿光最有利于葡萄愈伤组织的增殖;白藜芦醇含量在肉桂酸浓度为27mg·mL-1的白光下最高,但产量却在蓝光下最高;葡萄愈伤组织采收后经紫外强度8μmol.m-2.s-1处理10min可显著提高其中的白藜芦醇含量;而当肉桂酸与紫外两个因素共同作用时对白藜芦醇合成的促进作用不如两因素单独作用时的强.