蝴蝶兰·文心兰遗传转化体系的初步研究

[目的]优化蝴蝶兰和文心兰的遗传转化条件。[方法]以培养3周的蝴蝶兰原球茎和文心兰愈伤组织为试材,以大肠杆菌为生长培养基,研究3种农杆菌菌株的侵染力,以及菌液浓度、侵染时间、酚类诱导物(AS)和共培养时间对转化的影响。[结果]以蝴蝶兰原球茎为农杆菌介导的外植体进行遗传转化的优化条件为:预培养时间3d,菌液侵染浓度OD600=0.3,菌液侵染时间10min,pH值5.4,菌液侵染后,与农杆菌共培养5d并添加100μmol/LAS,此条件下的瞬间表达率最高。将蝴蝶兰遗传转化的条件运用于文心兰,得到的转化率较低。3种农杆菌菌株中,EHA105菌株侵染力最强,其次是AGL1,LBA4404最弱。[结论]该研究为进一步研究蝴蝶兰和文心兰的遗传转化体系提供理论依据。     

抗旱营养调节剂“旱地龙”对甘蔗矿质营养和光合特性的影响

为进一步探讨“旱地龙”对甘蔗抗旱增产的调节作用机制,研究了喷施不同质量浓度“旱地龙”对甘蔗品种新台糖22号（ROC22）叶片矿质营养和光合指标的影响。结果显示,喷施“旱地龙”能明显提高甘蔗叶片的矿质营养含量,“旱地龙”喷施质量浓度以3g/L、2g/L、4g/L分别对提高甘蔗叶片N、P、K含量效果最好,分别比C K （0 g/L ）提高0.13、0.04、0.12个百分点。在光合指标方面,以“旱地龙”3g/L喷施处理对提高叶绿素含量和4g/L喷施处理对提高气孔导度作用较大,分别比CK增加0.19 mg/g和0.05μmol/（m2· s）;喷施“旱地龙”各处理的净光合速率和蒸腾速率在整个伸长期均高于CK ,以4 g/L处理作用较大,分别比CK增加4.94μmol/（m2· s）和0.42 mmol/（m2· s）,气孔导度与净光合速率的变化趋势一致,以“旱地龙”4 g/L喷施处理最高,为0.32μmol/（m2· s）。可见,喷施“旱地龙”可有效促进甘蔗对N、P、K等矿质元素的吸收,提高叶片叶绿素含量,促进光合作用。     

蝴蝶兰的组织培养和遗传转化体系的研究进展

蝴蝶兰是观赏价值和经济价值很高的著名盆栽植物,用种子、茎尖、茎段、根尖、叶、花梗等外植体进行组织培养均获得了成功。不同外植体、不同培养基和不同激素种类及配比、不同浓度的6-BA和NAA组合对蝴蝶兰原球茎诱导率有显著影响。在兰花的转基因研究中,以基因枪法成功转化的报道最多,其次是农杆菌介导法,其它转化方法还有PEG法、电激法、花粉管通道法等。但仍需进一步探索和完善蝴蝶兰遗传转化体系,为以后目的外源基因的转入奠定基础,同时对于蝴蝶兰转基因技术的研究以及生物技术在兰花上的应用也具有重要的现实意义。     

蝴蝶兰花梗离体培养及叶片诱导类原球茎研究

以蝴蝶兰(Phalaenopsis)花梗为外植体,诱导腋芽萌动并获得无菌苗,以无菌苗叶片诱导类原球茎,建立蝴蝶兰离体培养植株再生系统。结果表明,以1 cm×0.7 cm的叶片大小规格、平放方式培养类原球茎诱导率最高,达60%;在Hyponex培养基上的诱导率最高,达77.5%;以附加10 mg/L 6-BA和2 mg/L NAA的效果最好,诱导率为83.4%;培养基中添加椰子汁对叶片诱导有影响,椰子汁浓度以20%最好,诱导率为81.5%。     

文心兰组织培养初步研究

以文心兰花梗为材料,采用不同激素配比、光照强度、培养基分别进行愈伤组织诱导、芽分化诱导和幼苗形成试验。结果表明,在添JJIINAA1．Omg／L＋6-BA0．2mg／L＋TDZ0．3mg／L＋琼脂8g/L＋蔗糖30g／L的培养基上,愈伤组织的诱导率最高,可达70．O％;在250lx的散射光条件下,文心兰花梗愈伤诱导率达到最高;在6-BA0．4mg／L＋NAAO．2mg／L激素组合条件下,从愈伤组织分化出幼苗的形成率和商品化率可达到最佳效果;中、低无机盐浓度且全量的基本培养基较利于幼苗分化;当分化形成的幼苗株高为1-2cm时利于壮苗生根,生根苗在适宜条件下移栽,成活率可达99．O％以上。因此,采用适合的激素配比、光照强度、基本培养基对花梗进行愈伤组织诱导、分化芽和幼苗,同样可以实现文心兰的大量繁殖。