瓜叶菊花梗和花托的愈伤组织诱导与植株再生研究

为建立瓜叶菊愈伤组织再生体系，以瓜叶菊花梗、花托为外植体进行了愈伤组织诱导和分化研究．结果表明：1）在MS＋2，4-D2mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋2，4-D2mg／L＋6-BA1mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋6-BA2mg／L＋NAA0．1mg／L培养基上花梗、花托的出愈率可达100％，但在3／4MS＋6-BA1mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋6-BA1mg／L培养基上花梗的出愈率不及花托；2）3／4MS无激素培养基对花托愈伤组织芽的分化较好，诱导率可达95％，3／4MS＋6-BA1mg／L培养基对花梗愈伤组织芽的分化较好，诱导枣为90％；3）W生苗在1／2MS＋IBA0．2mg／L培养基中生根完成植株再生。     

花魔芋组织培养的研究

[目的]筛选适合花魔芋生长的诱导、分化和生根培养基。[方法]以湖北省秭归县的花魔芋球茎和鳞片作为外植体,以MS培养基为基本培养基,添加不同激素,分别组配成10种诱导培养基和分化培养基进行组织培养,然后将诱导的魔芋丛芽切成单株后接入MS＋NAA0．1—0．5mg／L生根培养基。研究不同激素配比对愈伤组织形成和芽分化以及生根的影响。[结果]球茎和鳞片在MS＋6-BA1.0mg／L＋NAA1．0mg／L培养基上容易诱导愈伤组织,诱导效率分别为92％和90％,且愈伤组织容易分化。球茎在MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．15mg／L培养基上分化效率为86．7％,鳞片在MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L培养基上分化效率为83．3％。将球茎和鳞片分化出的不定芽转至MS＋NAA0．5mg／L的培养基上,生根率可达94％,20d后培养出完整植株。[结论]该试验初步建立魔芋的再生体系,为进行大规模生产魔芋种苗提供良好技术支持。     

魔芋无毒叶柄离体快繁体系的建立

以经检测合格无毒的花魔芋试管苗叶柄为外植体,构建魔芋脱毒离体快繁体系。在12种培养基上进行愈伤组织诱导,筛选出M8（Ms＋6-BA0．5mg／L＋MA0．1mg／L）为愈伤组织诱导最适培养基,诱导率达100％;以叶柄愈伤组织为外植体,在5种培养基上进行芽的分化,筛选出帕（Ms＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L）为芽分化最适培养基,分化率达66．7％;以芽分化中形成的有效芽苗为外植体,在7种蚌养基上进行根的诱导,筛选出M11（MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．15mg／L）为生根培养最适培养基,生根率达100％。     

菊花脑叶片组织培养再生植株的研究

[目的]建立菊花脑叶片组织培养再生技术。[方法]以菊花脑叶片作为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同激素设计10种培养基,研究不同种类和浓度的激素组合对菊花脑不定芽和根诱导率的影响,筛选愈伤组织诱导、芽诱导及生根的最佳培养基。[结果]将无菌苗的叶片外植体接种于最佳愈伤组织诱导培养基MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg/L NAA,培养15d可获98．0％的诱导率;之后将带有少量外植体的愈伤组织切下,接种到最佳芽诱导培养基MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／L NA量上培养,可获94．0％的出芽率;然后再将1cm以上的再生芽转接至最佳生根培养基MS＋IBA 0．05mg／L上生根,生根率这100％;生根25d以上的幼苗经炼苗和移栽后,成活率在95％以上。[结论]建立了菊花脑叶片组织培养再生植株的技术程序．     

半夏的组织培养与快繁试验

以传统中药半夏的小块茎为外植体进行组织培养,对适合不定芽分化增殖、生根的培养基进行了研究。结果表明,利于愈伤组织诱导的培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L,利于不定芽增殖的培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．5mg／L,利于生根的培养基为MS＋NAA0．5mg／L。试验表明,应用本项组织培养技术大批量生产优质半夏种苗是可行的。     

巨峰葡萄外植体愈伤组织的诱导和植株再生

选取了栽培品种巨峰作为试材,进行了外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究．通过葡萄品系巨峰无菌外植体的获得,叶片的愈伤组织诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生．结果表明：外植体消毒灭菌过程中,用1g／L汞处理7min,外植体污染率和茎尖褐变的比率适中,而且茎尖被诱导分化的成活率最高,可达30．0％．最适的分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．01mg／L;叶片愈伤组织诱导的培养基选择MS附加5．0mg／L6-BA和0．5mg／LNAA较为适宜;MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．05mg／L最适宜巨峰葡萄愈伤组织再生不定芽;将所得的不定芽继代增值诱导生根,1／2MS＋IBA0．2mg／L为理想的生根培养基,根长适中,根数较多．初步建立了巨峰葡萄栽培品系的再生体系．     

频繁开花高产小桐子组织培养的初步研究

为了奠定频繁开花型高产小桐子的快繁及转基因基础,通过对小桐子茎段腋芽培养、叶片和叶柄愈伤诱导及不定芽分化的不同激素组合培养进行研究。结果表明：适合该高产品种的茎段培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋IBA0．1mg／L．叶片愈伤诱导及不定芽分化培养基为Ms＋6-BA2．5mg／L＋IBA0．5mg／L．叶柄愈伤诱导及不定芽分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋IBA0．2mg／L．生根培养以1／2MS＋IBA0．5mg／L＋AC0．1％较为适宜。引起小桐子组培苗玻璃化现象的主要原因之一是BA浓度过高：在不定芽的分化培养中．愈伤过多会严重影响不定芽的数量及质量。     

6种枸杞植物花药培养单倍体的诱导

[目的]获得6种枸杞花粉植物。[方法]以6种枸杞花药为材料,在含不同激素的9种MS培养基上分别进行光照和黑暗离体培养。[结果]6种材料都诱导出了愈伤组织,最高愈伤组织诱导率可达20％,愈伤组织转入培养基（MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L）分化出大量绿色小芽,转入生根培养基（MS＋NAA0．1mg／L）中,20d后得到完整植株。[结论]材料不同,在同一培养基上的诱导率不同,在光照培养下愈伤组织诱导率比暗培养条件下的诱导率高。     

盆栽红掌新品种组培快繁技术研究

红掌新品种组培快繁技术研究结果表明,不同激素配比对愈伤组织诱导、芽分化、生根等有影响。温度25±2℃、光照强度1500Lx、光照时间12h/d的培养条件下,在MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂粉5.6g/L中,添加6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L诱导愈伤组织效果最好,诱导率可高达90%以上;6-BA1.5mg/L+KT 1.0mg/L有利于芽诱导;6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L不定芽的增殖效果最好,增殖倍数可达25;NAA有利于生根;珍珠岩∶泥炭(2∶1)混合基质瓶苗移栽成活率可达94%。     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体,建立快速繁殖体系,研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽;生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生,其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA;以胚轴为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。     

苹果叶片愈伤组织的诱导培养

为获得优质的愈伤组织,以国光和富士苹果的幼嫩叶片为外植体,研究了不同的消毒方法、植物生长调节剂种类及其浓度、光照条件、叶片放置方式等因素对叶片愈伤组织诱导的影响。结果表明:(1)直接进行光培养,愈伤诱导率只有50%～55%,先暗培养14 d再光培养与先暗培养21 d再光培养叶片的愈伤组织诱导率都达100%,但前者产生的愈伤组织结构紧密呈淡黄色,后者出现白化疏松的愈伤细胞。暗培养14d为诱导叶片愈伤组织形成的有利条件。(2)未添加激素的MS基本培养基比添加激素的MS培养基有利于降低叶片的褐变率。(3)采用叶片远轴面接触培养基比近轴面接触培养基的愈伤诱导率高约25%～30%,且诱导愈伤组织形成的时间较早。(4)国光叶片在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中,富士叶片在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的培养基中愈伤组织的诱导效果最佳。     

茶树花药愈伤组织诱导及增殖研究

以茶树花药为外植体,以MS培养基为基本培养基,探究适合花药愈伤组织诱导的花药发育时期,不同光照时间对花药愈伤组织诱导的影响,不同植物生长调节物质对花药愈伤组织诱导及增殖的影响,为建立茶树组织培养体系提供依据。研究结果表明：利于花药愈伤组织的形成的处于单核中期的花蕾直径在0.7～0.8 cm,黑暗条件下较12 h/d光照条件下茶树愈伤组织的诱导率高,茶树花药经过低温预处理24 h后,在培养基MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.4 mg/L+2,4-D1.0 mg/L上愈伤组织诱导率最高,诱导率为84.6%,茶树花药愈伤组织增殖率最高的培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.2 mg/L。     

天门冬组织培养条件的优化

以天门冬(Asparagus cochinchinensis)幼嫩茎段为外植体,考察1 g/L HgCl2灭菌时间对外植体的消毒效果,以及激素浓度组合对外植体愈伤组织、不定芽的诱导和不定芽生根的影响.结果表明,1 g/L HgCl2处理7 min,外植体褐化率和污染率较低;MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的愈伤组织诱导率最高,且生长势最强,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L KT培养基中的出芽率最高;1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA培养基中生根率最高,可达76％.     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体,在1/4 MS基本培养基上,对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导,探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中,暗培养20 d后,愈伤组织的诱导率达到90.10%;暗培养30 d后,胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%;将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上,光培养20 d,平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株,将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上,分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。      

冬枣花药愈伤组织的诱导与增殖

[目的]获得冬枣花药胚性愈伤组织。[方法]以冬枣花药为试材,研究了碳源种类、基本培养基、植物生长调节剂对冬枣花药愈伤组织诱导及增殖的影响。[结果]麦芽糖为诱导冬枣花药愈伤组织的最适碳源,MS为最适基本培养基,1．0mg／LTDZ为最适诱导与增殖生长调节剂浓度。[结论]在MS＋麦芽糖20g／L＋TDZ1．0mg／L的培养基中,冬枣花药愈伤组织诱导率最高,达86．8％。获得的愈伤组织可进行增殖,愈伤组织呈黄绿色颗粒状,为胚性愈伤。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

轮叶党参叶片的组织培养研究

以轮叶党参叶片为外植体,研究了培养基及不同激素组合对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,叶片作为外植体可以比较容易地诱导出愈伤组织,最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+KT 0.5mg/L,最高出愈率为94.2%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,最高诱导率可达69.2%;根诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,生根率达85.9%,建立了较为完善的轮叶党参再生体系。     

不同激素对甘薯胚性细胞悬浮系植株再生的影响

以甘薯品种济薯21和徐薯18的茎尖为材料,采用不同激素配比,对甘薯胚性愈伤组织的诱导及高效植株再生进行了研究。结果表明,济薯21和徐薯18较适宜的茎尖胚性愈伤组织诱导培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.2 g/L KC l+2.0 mg/L 2,4-D和MS+2.0 mg/L 2,4-D;济薯21胚性细胞团在MS+1.0 mg/L ABA+1.0 mg/L GA3培养基上植株再生率最高,达到96%,徐薯18胚性细胞团在MS+1.0 mg/LABA培养基上的植株再生率最高,达到91%。     

培养基和植物激素对非洲菊叶片愈伤组织诱导的研究

为了完善非洲菊组培快繁体系和推动非洲菊种苗工厂化生产,本试验以非洲菊叶片为外植体,对影响非洲菊愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及其浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以MS诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达78.3%;2,4-D比NAA和IBA能够较快地诱导叶片产生愈伤组织,其中以1.0mg/L2,4-D诱导率最高,可达100%,且形成愈伤组织多;6-BA诱导愈伤组织的效果优于KT和TDZ,2.0mg/L6-BA的诱导率为89.7%;叶片在6-BA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA0.4mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织生长快,并可分化出不定芽。     

3个烟草品种愈伤组织诱导的比较

[目的]研究不同品种烟草在不同培养基上愈伤组织的诱导情况。[方法]以烟草HY-9-7、云烟97和K326的幼嫩叶片为材料,分别在MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.2 mg/L和MS＋NAA 2.0 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L培养基上诱导愈伤组织,选出愈伤组织诱导率最高的烟草品种和最优培养基。[结果]MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.2 mg/L是诱导烟草愈伤组织的理想培养基;K326在最优培养基上诱导率最高,愈伤组织生长状态最好。[结论]为烟草基因工程的研究和种质资源的创新提供理论支撑。