热应激对小鼠睾丸Hsp70-2基因mRNA转录水平的影响

用半定量RT-PCR方法检测不同温度、相同时间(4 h)热应激处理小鼠睾丸组织中Hsp70-2基因的mRNA转录水平,以研究热应激对Hsp70-2基因mRNA转录的影响。结果显示,各热应激组小鼠睾丸Hsp70-2 mRNA转录水平下降,并且温度越高,其下降幅度越大。与对照组相比,33℃组小鼠Hsp70-2 mRNA相对转录水平显著(P<0.05)下降,而37℃组和42℃组下降极显著(P<0.01)。42℃组Hsp70-2 mRNA相对转录水平仅为对照组的44.7%。上述结果说明,热应激使Hsp70-2基因mRNA转录水平下降,热应激对雄性生殖机能的影响与Hsp70-2减少有关,而Hsp70-2 mRNA转录水平可以作为热应激对雄性生殖机能损伤程度的判断指标之一。     

CaM对小鼠胎儿成纤维细胞Hsp70表达的影响

[目的]证实小鼠胎儿成纤维细胞中钙调蛋白 (calmodulin,CaM) 基因参与热应激诱导型热休克蛋白70(Hsp70)的基因表达并明确其作用条件.[方法]取12.5 d孕鼠胚胎制备成纤维细胞(MEF),上述细胞随机分为对照组和热应激组:对照组在37℃条件下培养,热应激组包括I组(39℃、0.5 h),Ⅱ组(39℃,1 h),Ⅲ组(39℃,1.5 h),Ⅳ组(41℃、0.5 h),V组(41℃、1 h),Ⅵ组(41℃、1.5 h);每组3个重复.将选择的热应激组和对照组细胞分别加入不同浓度(25、50及100 mm=ol·L<'-1>)钙调蛋白拮抗剂W7,运用RT-PCR检测Hsp70、CaM mRNA表达量.[结果] 39℃和41℃热应激组Hsp70 mRNA表达量显著高于常温对照组(P<0.05):39℃应激1h的Hsp70 mRNA表达量极显著高于其它各组(P<0.01);39"C应激0.5 h和1 h CaM mRNA表达量极显著高于其它各组(P<0.01);41℃热应激组的CaM mRNA表达量与常温对照组比较差异不显著(P>0.05).在培养液中加100 mmol·L<'-1> W7、分别于37℃和39℃处理1 h后,其成纤维细胞的Hsp70 mRNA表达量极显著低于相应对照组 (P<0.01).[结论]中度热应激条件下,Hsp70和CaM基因表达量呈正相关,且39℃应激1 h可以显著诱导Hsp70和CaM基因表达;CaM通过某种途径参与了Hsp70基因表达.     

不同抗热应激添加剂对热应激小鼠精液品质的影响

为探讨抗热应激添加剂对热应激状态下小鼠精液品质的影响,选取年龄和健康状况相近的成年雄性鼠150只,按照常温、热应激、添加剂处理后热应激的方式进行分组试验,对各组精液品质等指标进行统计分析。结果表明,3组热应激添加剂在缓解热应激小鼠的精液品质的影响效果上存在显著差异,其中效果最好的为中药组,其次是电解质组,最后是维生素组。从Hsp70mRNA表达量上来看,抗热应激添加剂组明显高于常温对照组。但与热应激组比较,维生素组与电解质组表达量低,而中药组表达量高。     

大蒜素对急性热应激肉鸡物质代谢的影响

为了研究大蒜素对急性热应激肉鸡物质代谢的影响,选择48只23日龄AA健康肉鸡,随机分为常温组(Ⅰ)、常温添饲大蒜素组(Ⅱ)、热应激组(Ⅲ)、热应激添饲大蒜素组(Ⅳ),各组肉鸡饲养在特定的饲养室内(24±1)℃、湿度50％±5％].Ⅱ组和Ⅳ组日粮中含0.01％大蒜素;Ⅲ组和Ⅳ组肉鸡在试验的第4天迅速置于(36±0.5)℃、湿度70％±5％的饲养室内,24 h后观测4组肉鸡的生理生化指标.结果表明,添饲0.01％大蒜素显著提高(P＜0.05)热应激肉鸡血清总蛋白(TP)和球蛋白(GLO)含量、血糖(GLU)浓度,维持热应激条件下肉鸡的正常GLU水平,对热应激肉鸡脂类代谢的影响不明显.大蒜素对急性热应激肉鸡糖及蛋白质代谢的影响显著,对肉鸡热应激有一定的缓解作用.     

谷氨酰胺诱导小鼠热休克蛋白70表达的研究

 【目的】研究谷氨酰胺（Gln）对小鼠肝脏、子宫、卵巢组织热休克蛋白70（Hsp70）表达以及对小鼠早期胚胎体外发育的影响。【方法】选取24只8 w健康的雌性昆明小白鼠并随机分成4组,Ⅰ组为对照组,尾静脉注射生理盐水,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别注射不同剂量的Gln,注射后4 h处死,取肝脏、子宫和卵巢,采用RT-PCR和Western Blot法检测HSP70 mRNA和HSP70的表达;用添加不同浓度Gln的葡萄糖-CZB培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养,观察囊胚发育率和孵出率,用Western Blot方法检测小鼠囊胚Hsp70的表达。【结果】Gln注射组鼠组织中Hsp70表达量均高于对照组,且Hsp70表达量随着Gln注射量的增加而增加。Ⅱ组鼠肝脏、子宫和卵巢组织中Hsp70蛋白表达量比对照组分别增加了9.49%、5.49%和4.84%（P＞0.05）;Ⅲ组鼠各组织中Hsp70比对照组分别显著（P＜0.05）增加了23.56%、21.10%和14.30%;Ⅳ组肝脏组织中HSP70比对照组显著增加了35.33%（P＜0.05）,子宫和卵巢比对照组分别极显著（P＜0.01）增加了33.94%和33.77%;Gln为6和10 mmol?L-1的胚胎培养液中小鼠囊胚孵出率分别为73.21%和76.41%,显著（P＜0.05）高于对照组（61.88%）。【结论】Gln能诱导小鼠肝脏、子宫、卵巢组织和囊胚Hsp70的表达,并且Hsp70表达量随着Gln剂量的加大而增加;Gln对体外培养的小鼠早期胚胎的发育有明显促进作用。     

一种新型中草药复方制剂对母猪热应激的影响

为了解一种新型中草药复方制剂对母猪热应激的影响,将45头空怀母猪随机分为常温对照组、高温对照组和试验组。常温对照组和高温对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.1%新型中草药复方制剂,连用10 d。结果表明,饲喂新型中草药复方制剂10 d后试验组母猪血清中热应激蛋白70(HSP70)含量显著低于高温对照组(P0.05),血液免疫球蛋白G(Ig G)、母猪发情率均显著高于高温对照组(P0.05)。本试验使用的新型中草药复方制剂能够明显改善母猪热应激下的不良状况。     

EGCG对急性热应激肉鸡抗氧化能力的影响

为研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对急性热应激肉鸡血清及器官抗氧化能力的影响,选取144羽10日龄淮南麻黄公鸡,随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、急性热应激组(Ⅱ组)和急性热应激+EGCG组(Ⅲ组),每组6个重复,每个重复8羽。Ⅰ组和Ⅱ组饲喂基础饲粮,Ⅲ组饲喂在基础饲粮中添加400mg/kg EGCG的试验饲粮。至94日龄时,Ⅰ组环境温度维持为(22±1)℃,Ⅱ组和Ⅲ组升温至(33±1)℃,持续12h后,采集血清、脾脏、肝脏及空肠,用比色法检测抗氧化指标,并用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关基因表达水平。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组肉鸡脾脏指数,血清和脾脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,肝脏中T-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及Nrf2、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)、CAT、GSH-Px mRNA表达量显著降低(P0.05),而空肠中丙二醛(MDA)含量,肝脏中MDA和蛋白羰基(PC)含量及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)mRNA表达量显著升高(P0.05);2)与Ⅱ组相比,Ⅲ组肉鸡脾脏中CAT活性,肝脏中GSH-Px活性及CAT mRNA表达量显著升高(P0.05),而空肠和肝脏中MDA含量显著降低(P0.05)。综上,饲粮中添加EGCG可提高急性热应激肉鸡的抗氧化能力,进而缓解急性热应激导致的氧化损伤,其机制可能与EGCG激活Nrf2信号通路关键抗氧化基因表达有关,为EGCG应用于肉鸡生产奠定了理论基础。     

小鼠胚胎诱导型Hsp70基因的RNA干扰有效序列筛选

 【目的】应用RNA干扰技术沉默小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse embryonic fibroblast,MEF）中诱导型热休克蛋白70（Hsp72）基因的表达,从而筛选出对Hsp72基因具有确实干扰作用的siRNA。【方法】设计并合成4对特异性针对Hsp72基因的siRNA,借助LipofectamineTM 2000瞬时转染MEF,41℃热应激处理后,采用RT-PCR和Western blot检测Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量。【结果】在热应激组中,siRNA1、siRNA2两组及阳性、阴性和空白3个对照组的Hsp70 mRNA和Hsp70蛋白表达量均极显著高于常温对照组（P＜0.01）,siRNA3和siRNA4两组的Hsp70 mRNA的表达量极显著低于常温对照组（P＜0.01）;siRNA3组Hsp70蛋白表达量极显著低于常温对照组（P＜0.01）,而siRNA 4组与常温对照组差异不显著（P＞0.05）。与空白对照相比,4对siRNA中siRNA3和siRNA4对MEF中Hsp72 mRNA有极显著（P＜0.01）的抑制作用,其对Hsp72 mRNA的抑制率分别为86.2%和75.4%（P＜0.01）,对Hsp72蛋白表达的抑制率分别为77.3%和57.0%（P＜0.01）。【结论】体外合成的四对特异性针对Hsp72基因的siRNA中,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构表面位置的siRNA3和siRNA4对Hsp72基因具有显著的抑制作用,靶位点在Hsp72 mRNA二级结构复杂处的siRNA1和siRNA2对Hsp72基因的抑制作用不明显。     

急性热应激后小鼠的抗氧化能力和Hsp70基因的表达

为研究急性热应激后小鼠抗氧化酶活性的变化及其肝脏热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达规律,选取5～6周龄健康昆明雄性小鼠56只,平均分成7组(1个对照组和6个急性高温处理组).6个急性高温处理组小鼠分别为41℃、急性高温处理2h后再置于25℃环境中0、2、6、12、24、48 h的小鼠.分别测定各处理小鼠的脏器指数、...     

蛋鸡热应激与细胞凋亡相关基因表达

为阐明温度对蛋鸡热休克蛋白与细胞凋亡相关基因表达的影响,将90只蛋鸡平均分为3组,分别在25 ℃、30 ℃、35 ℃条件下饲养1周,采用qRT-PCR方法检测心脏和肝脏组织热休克蛋白与细胞凋亡相关基因表达情况。结果显示,35 ℃热应激组蛋鸡心脏和肝脏组织热休克蛋白70(HSP70)mRNA表达水平最高;35 ℃热应激组肝脏组织中细胞色素C氧化酶(CCO)、肿瘤坏死因子凋亡诱导因子配体(TRAIL)和应激活化蛋白激酶(SAPK)mRNA表达量最低,蛋白激酶(PKB)mRNA表达量最高。研究结果表明,温度升高会增加蛋鸡心脏和肝脏中热休克蛋白表达,通过调控细胞凋亡信号转导通路关键基因表达来抑制细胞凋亡,保护细胞免受损伤。     

中草药添加剂对荷斯坦奶牛产奶量及抗热应激能力的影响

[目的]探讨中草药添加剂对泌乳牛生产性能及抗热应激能力的影响。[方法]选取胎次和产奶量基本相同、健康的荷斯坦奶牛36头,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,中药Ⅰ组饲喂含4%复合中草药添加剂的基础日粮,中药Ⅱ组饲喂含3%复合中草药添加剂的基础日粮,进行对比分析试验。[结果]在泌乳奶牛基础日粮中添加一定量的复合中草药添加剂可提高泌乳奶牛产奶量及抗热应激能力,并能有效减少奶牛乳房炎等疾病的发病率,提高生产的经济效益,以中药Ⅰ组效果更好。[结论]在奶牛基础日粮中添加中草药添加剂是缓解热应激、提高奶牛夏季产奶量的有效途径之一。     

中草药添加剂对荷斯坦奶牛产奶量及抗热应激能力的影响(英文)

[Objective] The research aimed to explore the effects of Chinese herb additive on milk yield and anti-heat stress ability of Holstein cow.[Method] 36 Holstein cows with similar birth order and milk yield were equally and randomly divided into 3 groups which were control group, Chinese medicine Ⅰ group and Chinese medicine Ⅱ group. In control group, cows were fed with basic feed, while in Chinese medicine Ⅰ group, cows were fed with basic feed containing 4% compound Chinese herb additive and in Chinese medicine Ⅱ group, cows were fed with basic feed containing 3% compound Chinese herb additive.All cows in the 3 groups were analyzed comparatively.[Result] Adding some compound Chinese herb additive into basic feed would increase milk yield and anti-heat stress ability of Holstein cow,besides,it also could decrease cow diseases such as cow mastitis.Chinese medicine Ⅰ would generate the highest economic benefit of practical production.[Conclusion] Adding Chinese herb additive into basic feed is an effective way for reliefing heat stress and increasing milk yield.     

Vc和中草药添加剂对夏季种公鸡精液品质的影响

夏季选取40周龄体重一致的60只安卡红种公鸡随机分为4组,研究Vc和中草药添加剂对夏季种公鸡精液品质的影响.结果表明:日粮中添加Vc和中草药能显著提高种公鸡的采精量和精子密度,降低精子畸形率,其中以在基础日粮中同时添加Vc和中草药组效果最为明显.说明在热应激条件下,在日粮中添加适量的Vc和中草药可显著改善种公鸡的精液品质,进而提高每只种公鸡可利用的有效精子数.     

复方中草药对镜鲤(Cyprinus carpio L.)血清转氨酶及红细胞抗氧化酶活性的影响

在基础日粮中添加2%由不同比例的刺五加、枸杞子、金银花和黄芪配伍的复方中草药饲喂镜鲤(Cyprinus carpio L).,于第14天、第28天及第42天检测红细胞的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)、血清的谷草转氨酶(GOT)以及谷丙转氨酶(GPT)活性,以研究复方中草药对镜鲤的毒副作用。在28及42d时,复方Ⅰ组红细胞CAT活性与对照组差异显著(P0.05);28d时,各复方组红细胞SOD活性均与对照组差异极显著(P0.01);28d时,复方Ⅱ组血清GOT活性及复方Ⅲ组血清GPT活性与对照组差异极显著(P0.05);42d时,各复方组血清GPT活性与对照组差异极显著(P0.01)。结果表明,试验复方中药添加到镜鲤的饲料中,可以增强其血清转氨酶及红细胞抗氧化酶活性,其中复方Ⅰ效果最佳,建议用药时间为28d。     

热应激对小鼠垂体前叶细胞构筑的影响

[目的]通过在急性热应激条件下对小鼠垂体前叶细胞构筑变化的观察与测量,确定热应激对小鼠垂体前叶细胞构筑的影响。[方法]采用恒温恒湿热应激箱(42℃,相对湿度35.4%)建立热应激模型。常规石蜡切片,HE染色,在光镜下对垂体前叶细胞构筑进行观察。[结果]热应激组Ⅰ、Ⅱ的细胞密度、嗜碱性细胞概率、嗜碱性细胞体面积以及热应激组Ⅱ嗜酸性细胞体面积与对照组差异极显著(P<0.001)。热应激组Ⅰ嗜酸性细胞概率、嗜酸性细胞体面积与对照组差异显著(P<0.05)。[结论]热应激可导致垂体前叶细胞快速增殖和正常形态发生改变,甚至引发细胞凋亡。     

慢性冷热应激对三河牛血液生化指标及相关基因表达的影响

为研究冷热应激对三河牛血液生化指标及相关基因表达量的影响,利用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测冷热应激期和非应激期血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖(GLU)和尿素氮(BUN)含量及淋巴细胞中HSP70家族基因(HSPA1A、HSPA1B、HSPA8)mRNA表达量。结果显示:1)冷热应激期血清中CK和LDH活性相比非应激期均升高,热应激期升高尤为显著(P0.05);热应激期GLU含量相比非应激期显著降低(P0.05);热应激期BUN含量略低于非应激期,差异不显著;冷应激期GLU和BUN含量相比非应激期均显著升高(P0.05)。2)冷热应激期淋巴细胞中3个HSP70家族基因mRNA表达量相比非应激期显著升高(P0.05)。结果表明,慢性冷热应激改变了血液中酶的活性、糖和蛋白质的代谢,从而导致奶牛的一些组织细胞的损伤和营养代谢的紊乱,并冷热应激时血液淋巴细胞中HSP70家族基因mRNA表达量的上升,可在一定程度上反映其对动物机体的保护水平。     

复方中草药对镜鲤(Cyprinus carpio var.specularis)幼鱼非特异性免疫功能的影响

在基础日粮(对照组)中分别添加2%由不同比例的刺五加(Acanthopanax senticosus Harms)、枸杞子(L.Chinense Mill.)、金银花(Lonicera japonica Thunb)和黄芪(Astragalus membranaceus)配伍的复方中草药,记为复方Ⅰ、复方Ⅱ、复方Ⅲ、复...     

复合抗热应激添加剂对蛋鸡血液生化指标的影响

研究了复合抗热应激添加剂对蛋鸡血液生化指标的影响。Ⅰ、Ⅱ组为试验组 ,Ⅰ组为 0 .5 %中草药 +0 .2 %NaHCO3+ 1%NH4 Cl+ 0 .15 %蛋氨酸 + 0 .0 5 %赖氨酸 ;Ⅱ组为 0 .2 %NaHCO3+ 1%NH4 Cl +多维(2 0 0mg/kgVc + 2 5 0mg/kgVE) ;Ⅲ组为对照组。结果表明 :在热应激条件下 ,I、II组能提高血液Ca2 +、K+、GLU、TG、TP、ALKP、T3水平 ,ALB和CHO水平提高不显著 ;能降低血液Na+、CK、AST、LDH、ALT、T4 、皮质醇水平。     

中药饲料添加剂对断奶仔猪生长性能和内分泌功能的影响

选取胎次相近、日龄相同的杜—长—大哺乳仔猪16窝,随机分为4组,中药Ⅰ、Ⅱ组和抗生素组在相同的基础日粮中分别添加中药饲料添加剂Ⅰ(4 kg.t-1)、中药饲料添加剂Ⅱ(4 kg.t-1)和金霉素(70 g.t-1)+杆菌肽锌(30 g.t-1),对照组仔猪只饲喂基础日粮.于仔猪断奶前3 d,断奶后1、4、7、14、28 d采血,对血液部分激素指标进行分析,研究中药饲料添加剂对断奶仔猪生长性能和内分泌功能的影响.结果表明:(1)2个中药组仔猪日增重提高,料重比和腹泻率降低.(2)断奶后1 d,各组仔猪血清皮质醇含量与断奶前相比升高,而三碘甲腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)含量较断奶前降低;整个试验期间,2个中药组血清皮质醇含量始终较抗生素组和对照组低,T3、T4含量始终高于抗生素和对照组.可见,中药饲料添加剂能有效地防止早期断奶仔猪发生腹泻,降低仔猪血清皮质醇含量,提高T3、T4的含量,缓解仔猪应激,改善仔猪的生长性能.