猪免疫旋毛虫抗原和感染后的抗体应答

为了明确猪在免疫旋毛虫抗原和感染旋毛虫肌幼虫后的抗体应答反应,应用 ELISA 法,肌幼虫凝胶层析纯化抗原、新生幼虫和成虫可溶性抗原,对用肌幼虫可溶性抗原、肌幼虫 ES 抗原、成虫可溶性抗原、成虫 ES 抗原、灭活新生幼虫抗原制备的免疫原免疫后猪血清抗体以及攻击感染后的猪血清抗体进行了检测。用肌幼虫纯化抗原检测时,感染猪在感染后7d 抗体即出现变化,第14～21d 时上升较快,第28d 达最高值,抗体可持续6个月以上;各免疫组在第1次免疫后抗体滴度有不同程度升高,第2次免疫后上升较快,其中肌幼虫可溶性抗原及其 ES 抗原免疫组抗体应答较其它几种抗原免疫组强。用成虫可溶性抗原检     

猪带绦虫卵对实验猪的攻虫效力研究

用猪带绦虫卵攻击免疫猪和空白对照猪,以观察虫卵的侵袭力,动物实验历时2a,设计使用8－12日龄仔猪102头,分3次实验,共22个组,我们用不同剂量、不同抗原成分的猪囊尾蚴细胞疫苗,以不同免疫次数,对使用对象动物（猪）进行免疫后,于不同免疫期,以不同量的猪带绦虫卵进行攻虫,尽管使用疫苗剂量的差别有100倍,免疫期相距有4倍,攻虫量相差至15倍,而虫卵的效力都很显著。这种不是采用最佳免疫剂量,最佳免疫期,最佳攻虫剂量,却是更为紧密地接近于猪实际所处的易受感染环境的免疫实验,才能检出疫苗的免疫力和实用性,剖检出的猪囊尾蚴虫体的数量和状态,表面上看是猪带绦虫卵的攻虫效力,实则是猪囊尾蚴细胞灭活油乳剂疫苗免疫力的体现,只有用不同数量的虫卵攻击不同成分疫苗免疫猪的不同免疫期这样复杂的情况,才能够获得猪带绦虫卵真实的攻击力,猪带绦虫卵的侵袭力是不稳定的,是受许多生物学因素控制。     

猪肉绦虫培养抗原对猪的免疫试验

本文评估了感染性猪肉绦虫的排泄—分泌同种抗原兔疫猪后的保护效果。试验表明,免疫猪在攻击感染后,其肌肉中囊尾蚴数量减少。     

旋毛虫感染刺激宿主产生抗旋毛虫抗体的消长规律

应用旋毛虫成虫期、新生幼虫期及肌幼虫期的排泄分泌物(ES)抗原作为包被抗原,ELISA方法检测感染旋毛虫试验小鼠2个月内不同天数血清中抗旋毛虫抗体Ig M和Ig G水平,并采用Excel软件绘制其抗体消长规律曲线并进行数据分析,了解旋毛虫感染宿主后不同发育时期刺激宿主机体产生抗旋毛虫抗体的变化规律,旨在为临床上能够合理利用旋毛虫不同发育时期的ES抗原诊断旋毛虫的感染提供理论依据。结果表明:可以利用旋毛虫3个发育时期ES抗原的混合物来检测旋毛虫45 d前的感染(即5~14 d的感染检测Ig M、15~45检测Ig G);感染45 d之后,可以利用单一肌幼虫时期ES抗原检测Ig G,最有意义的发现是利用旋毛虫成虫期和新生幼虫期的ES抗原可以有效检测14~19 d的感染。此研究成功获悉旋毛虫感染宿主后不同发育时期刺激机体产生抗旋毛虫抗体的消长规律,为进一步研究利用旋毛虫不同发育时期抗原诊断旋毛虫感染情况及解决"诊断盲区"(感染后14~19 d)问题提供了重要的科学依据。     

旋毛虫基因重组抗原对小鼠的免疫保护试验

分别用５μｇ和１５μｇ的旋毛虫基因重组抗原对小鼠进行腹腔注射免疫，结果于免疫后第４周小鼠体内的抗体效价明显上升，至第７周达到高峰，当每只鼠用９０条旋毛虫肌幼虫口服攻击后，抗体效价稍有下降，但到攻虫后的第５周基本回升至攻击前水平。     

烟草甲Lasioderma serricorne Fabricius对储存烟叶危害损失的初步研究

研究了不同数量的烟草甲成虫繁殖1代和2代后代的幼虫数量、危害损失烟叶重量与成虫数量的关系．结果表明，因幼虫危害损失的烟叶重量随虫量的增加而增加，二者呈直线关系．烟叶切丝后的长丝率、中丝率、短丝率和烟沫率与成虫数量亦成直线相关，随着虫量的增加，长丝率减少，中丝率、短丝率和烟沫率增加．将供试成虫对数与繁殖1代和2代幼虫危害桶失烟叶重量及幼虫危害后的出丝率进行理论曲线拟合。经F检验。方程代表性均好。     

豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析

为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的IgG免疫球蛋白对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础.     

家蚕生物反应器表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白的免疫原性研究

将传染性法氏囊病病毒(IBDV)浙江分离株JD1的多聚蛋白(VP2/4/3)基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,重组载体与杆状病毒Bm-BacPAK6的线性化基因组DNA共转染家蚕细胞后,将获得的重组病毒BacPAK-A感染家蚕5龄起幼虫进行虫体内表达.用感染后第5日的蚕血淋巴作抗原制备油佐剂苗免疫14日龄非免疫鸡,安全性试验表明,接种1倍和5倍免疫剂量的试验鸡在临床反应和剖检中均无异常变化;在免疫-攻毒试验中设杆状病毒表达的IBDV VP2蛋白和正常蚕血淋巴免疫对照组,并于28日龄加强免疫,25 d后用IBDV强毒BC6/85攻击.通过临床保护率、病理保护率及血清学试验表明,基于多聚蛋白制备的疫苗更成功地诱导了体液免疫应答,比VP2蛋白对IBDV强毒的攻击具有更高的保护力,更适于作为IBD基因工程亚单位疫苗的抗原成分.     

电子束处理对杂拟谷盗的辐照效应

利用不同剂量的电子束对杂拟谷盗幼虫、成虫进行辐照处理,研究其辐照效应.结果表明:杂拟谷盗幼虫对电子束辐照的敏感性高于成虫.幼虫经250 Gy剂量辐照后,可以完全阻止其发育为成虫,在14 d内全部死亡;成虫经250 Gy剂量辐照后,则需42 d才能全部死亡,而且不能产生下一代成虫.250Gy的剂量可以作为电子束辐照防治杂...     

猪囊尾蚴“四性细胞系”代射产物（可溶性抗原）的免疫原性

应用仔猪20头,以猪囊尾蚴“四性细胞系”的可溶性抗原作为免疫原,对经过第1次用不同细胞剂量疫苗免疫的猪,再次用与细胞数量相适应的细胞代射产物的不同剂量疫苗,对其中的11头进行第2次免疫以第2次还是注射细胞疫苗的3头、只注射1次细胞疫苗的2头,和空白对照猪2头作对照组,以观察代射产物抗原的免疫原性。于第1次细胞疫苗免疫后的68d,最长94d用细胞加代谢产物疫苗进行了这次免疫,14d后攻虫,每头使用人有钩绦虫卵,6000枚,3个月后屠宰检查虫体。第1次用10万细胞疫苗免疫,第2次用1千万细胞加代谢产物疫苗免疫该组动物中的2头,平衡有5个囊尾蚴,但这2头猪均发生了囊尾蚴钙化;另一组第1次用100万细胞疫苗免疫,第2次用2千万细胞加代谢产物疫苗免疫该组全部3头动物,平均有3.6个囊尾蚴,这3头猪也都有囊尾蚴钙化。2个实验组出现免疫猪的100%的钙化现象,是免疫治疗作用,是猪囊尾蚴四性细胞系代谢产物的特殊免疫作用。     

Effects on Trichinella spiralis of host responses to purified antigens

Purification of two antigens (48-kilodalton polypeptide and a group with major subunits of 50 and 55 kilodaltons) from the infective larvae of the parasitic nematode Trichinella spiralis was recently reported. Immunization of mice with either of these antigens induces strong resistance to a subsequent challenge infection. In the study reported here the mechanism of this resistance was investigated by monitoring the parasite's life cycle in mice immunized with the antigens. Immunized mice were able to expel intestinal adult worms and to inhibit the fecundity of adult female worms at an accelerated rate compared to control mice. Accelerated expulsion and inhibition of fecundity may account entirely for the level of resistance induced by immunization. Although the effects of the immune response apparently are exerted on adult worms, the target antigens are expressed only by developing larvae. This suggests that immune effector mechanisms act on intestinal larvae in such a way that they develop into defective adults.     

3种苦马豆素人工抗原的合成及其免疫原性研究

比较了3种苦马豆素(Swainsonine,SW)人工抗原对小鼠的免疫原性,筛选出最佳的蛋白载体,为制备疯草毒素疫苗奠定基础。活性酯法制备SW-OVA、SW-BSA、SW-HSA 3种SW人工抗原,冷冻干燥后,紫外分光光度法测定偶联率。将56只昆系小白鼠随机分为SW-OVA大剂量组(A组)、SW-OVA小剂量组(B组)、SW-BSA大剂量组(C组)、SW-BSA小剂量组(D组)、SW-HSA大剂量组(E组)、SW-HSA小剂量组(F组)和空白对照组(G组),每组8只。A~F组分别接种3种SW人工抗原,首次免疫抗原的大、小剂量分别为50μg/只和100μg/只,第15天进行第2次免疫,抗原量均为第1次免疫抗原量的1.5倍,第29天进行第3次免疫,抗原量均为第2次免疫抗原量的1.5倍,G组对照,注射等量生理盐水。第28天开始检测血清中SW抗体效价。紫外光谱测定结果显示,本试验制备的SW-OVA、SW-BSA、SW-HSA 3种SW人工抗原偶联率分别为13、10和19。ELISA测定结果显示,A和B组的SW抗体效价一直保持很高的水平,A和B组小鼠血清的SW抗体效价于第98天分别到达最高峰13(log2)和12(log2);C~F组的SW抗体效价较低。结果证实,SW-OVA作为理想的免疫原,能够刺激小鼠的免疫应答,诱导产生很高的SW抗体,在防治动物疯草中毒方面具有理想的应用前景。     

抗菌肽不同处理方式对虹鳟免疫指标的影响

为明确中国鲎基因工程抗菌肽不同处理方式对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)存活率的影响,分别在虹鳟仔鱼和成鱼两个阶段采用浸泡和混合饲料两种方式应用抗菌肽。采集仔鱼全鱼组织,成鱼血清及头肾组织,通过对SOD、ALP、CAT、IL-1β、IFN-γ、TNF-α等免疫相关酶水平及细胞因子表达量变化情况的检测,验证抗菌肽不同处理方式对虹鳟免疫指标的影响。结果发现:应用84 U/mL抗菌肽浸泡虹鳟仔鱼10次,浸泡后第4天,试验组免疫相关酶水平明显高于对照组,其中IL-1β、IFN-γ差异极显著(P<0.01),其他差异显著(P<0.05)。浸泡后第15天,试验组免疫相关酶水平仍高于对照组健康鱼,其中IL-1β、IFN-γ差异极显著(P<0.01),其他差异显著(P<0.05),但对照组发病鱼免疫相关酶水平与试验组相比显著下降,SOD、ALP、IL-1β、IFN-γ均差异极显著(P<0.01),其他差异显著(P<0.05)。试验结束统计仔鱼存活率,试验组存活率高达95.1%,对照组存活率仅为29.9%。成鱼期采用混合饲料和浸泡两种方式应用抗菌肽。结果显示,混合饲料的最适添加量为50 mg/kg饲料,浸泡最佳浓度为84 U/mL,最佳浸泡时间为3 min。研究表明,对不同处理方式进行对比,在仔鱼期进行浸泡对虹鳟免疫指标的影响最为显著。其可能与抗菌肽种类、作用方式及养殖虹鳟疾病暴发特点有关。本研究可以为虹鳟养殖过程中抗菌肽的应用方式提供依据。     

新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体被动免疫持续期试验

为了确定鸭新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体被动免疫持续时间,试验取3批哈药集团生物疫苗有限公司试制的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体,按1.0 mL·只^-1颈部皮下接种1日龄易感雏鸭,分别在注射抗体后1、3、5、7 d攻毒(抗体试验组),分析攻毒保护情况,剖检试验雏鸭,观察病理变化,同时设攻毒对照组(不接种卵黄抗体但攻毒)和健康对照组(不接种卵黄抗体也不攻毒)。结果显示:雏鸭接种卵黄抗体后1~5 d,卵黄抗体对雏鸭的攻毒保护率均在90%以上;注射后第7天的攻毒保护率为53.3%;攻毒对照组雏鸭均90%~100%发病。剖检发病雏鸭,可见肝脏和脾脏均呈典型的坏死及出血性病理变化;抗体试验组存活雏鸭剖检无病理变化;健康对照组雏鸭均100%健活,剖检无病理变化。说明注射卵黄抗体5 d内能对机体产生良好的保护作用,而7 d后保护作用大幅减弱,确定新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的被动免疫持续期为5 d。     

脂肪细胞膜抗血清对猪胴体品质和肉品质的影响

将36头5周龄的断奶上海大白猪随机分成6组.对照组C1和C2、皮下免疫试验组S1和S2、腹腔免疫试验组A1和A2,每组6头猪.试验周期为11周和17周.试验组A1和A2腹腔注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,试验组S1和S2皮下注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,对照组C1和C2以相同剂量注射正常山羊血清.11周末和17周末屠宰结果显示:①各试验组猪板油重和背膘厚都显著低于对照组(P＜0.05);11周末,与对照组相比,试验组S1和A1中猪眼肌面积均显著升高;17周末,腹腔免疫组猪眼肌面积显著高于对照组(P＜0.05).②11周末,腹腔免疫组猪半腱肌和里脊、皮下免疫组猪背最长肌和里脊中脂肪含量均明显低于对照组(P＜0.05);17周末,与对照组相比,腹腔免疫组猪半腱肌中脂肪含量显著下降(P＜0.05).③11周末,腹腔免疫组猪背最长肌和里脊中蛋白质含量显著高于对照组(P＜0.05);17周末,各试验组背最长肌和里脊中蛋白质含量与腹腔免疫组半腱肌中蛋白质含量均显著高于对照组(P＜0.05).表明,山羊抗猪脂肪细胞膜被动免疫具有较好改善猪胴体品质和肉品质的作用.     

猪链球菌2型CVCC606株免疫相关抗原的纯化及其免疫保护研究

以猪链球菌2型CVCC606免疫断乳仔猪制备高免血清,纯化血清IgG,制备亲和层析柱,亲和纯化其免疫相关抗原;SDS-PAGE分析抗原的组成,研究其对猪链球菌2型CVCC606攻击的BALB/c小鼠的免疫保护作用。结果表明:以亲和层析方法纯化获得的免疫相关抗原分子量集中于29.0~97.2 kD,对5倍LD50剂量的猪链球菌CVCC606攻击的BALB/c小鼠的保护率为60%,呈现了部分的保护作用。所获得的免疫相关抗原中含有保护性抗原。     

弓形虫代谢分泌抗原对仔猪IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α表达水平的影响

通过免疫后攻毒的方法研究了弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)免疫后对不同免疫组仔猪机体白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响.结果表明:免疫后各免疫组仔猪的IL-2、IL-4、IFN-γ含量均不同程度的升高;其中E/SA组IL-2、IL-4和IFN-γ的水平显著升高,与对照组差异显著(P0.05),其含量分别由免疫前的105.05、105.33、67.50pg.mL-1升高到免疫后的194.03、342.50、296.50pg.mL-1;TNF-α水平变化不显著.试验证实弓形虫代谢分泌抗原疫苗能够促进仔猪IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌,并引起宿主抗弓形虫感染的免疫应答.     

缩胆囊素主动免疫对猪生产性能的影响

[目的]利用分子生物学技术扩增猪CCK基因活性片段,检验主动免疫CCK融合蛋白对肉猪生长是否有促进作用。[方法]采用RT-PCR技术成功扩增猪缩胆囊素基因C-端活性片段,并在大肠杆菌中进行表达。[结果]主动免疫0.5和1.5mg/mlCCK疫苗处理组肉猪,试验期肉猪平均日增重较空白对照组分别提高5.81%和7.36%（P〈0.05）,采食量分别提高4.04%和2.53%。利用SDS-PAGE可获得相对分子质量45000的融合蛋白。融合蛋白主要以可溶形式表达。Wesrtern Blot证实融合蛋白与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性。[结论]主动免疫CCK对肉猪生长具有一定促进作用。     

电子束对锯谷盗幼虫和成虫的辐照效应研究

[目的]控制锯谷盗对烟草及其他仓储物的危害。[方法]利用不同剂量的电子束对锯谷盗幼虫、成虫进行辐照处理,研究其辐照效应。[结果]锯谷盗的幼虫、成虫对电子柬辐照的敏感性依次降低。幼虫和成虫经辐照后21d的半致死剂量加。分别为67．6和104．2Gy。幼虫经300Gy剂量辐照后可以完全阻止其发育为成虫,并且在35d内全部死亡;成虫经300Gy剂量辐照后则需49d才能全部死亡,但不能产生下一代成虫。[结论]300Gy剂量可以作为电子束辐照防治锯谷盗的参考剂量。