T4噬菌体展示系统研究进展

T4噬菌体展示技术是一种将外源蛋白与噬菌体表面特定蛋白质融合并展示于其表面,从而获得特定功能蛋白质的基因工程技术。本文主要介绍T4噬菌体展示技术的原理、展示方式和应用。     

浅述EM菌剂在畜禽业中的应用及其发展前景

EM是EffectiveMicroorganisms的英文缩写，即“有效微生物菌群”。它是日本琉球大学比嘉照夫教授发明的复合微生物制剂，是由光合菌，乳酸菌，酵母菌和放线菌等５科１０属８０多种微生物复合培养而成的有效微生物群。其主要特点是：组成复杂，结构稳定，功能广泛。由于EM菌剂在促进畜禽生长，增加畜禽抗病能力，去除粪便恶臭，改善生态环境方面都表现出了良好的作用，已为很多国家和地区推广和应用。１EM菌剂在畜禽业中的应用１．１提高饲料利用率在饲料或饮水中添加EM菌后，使体内的微生态平衡发生变化，不同功能的微生物在体内生长代…     

“体验式”教育模式在高校学生工作中的应用

本文针对当前高校教育模式存在的问题,结合当前大学生管理的实际需要,提出符合大学生性格特点的体验式教育模式,并探索如何在当前高校学生工作中引入体验式教育模式以求达到最佳教育效果。     

缩胆囊素主动免疫对猪生产性能的影响

[目的]利用分子生物学技术扩增猪CCK基因活性片段,检验主动免疫CCK融合蛋白对肉猪生长是否有促进作用。[方法]采用RT-PCR技术成功扩增猪缩胆囊素基因C-端活性片段,并在大肠杆菌中进行表达。[结果]主动免疫0.5和1.5mg/mlCCK疫苗处理组肉猪,试验期肉猪平均日增重较空白对照组分别提高5.81%和7.36%（P〈0.05）,采食量分别提高4.04%和2.53%。利用SDS-PAGE可获得相对分子质量45000的融合蛋白。融合蛋白主要以可溶形式表达。Wesrtern Blot证实融合蛋白与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性。[结论]主动免疫CCK对肉猪生长具有一定促进作用。     

鸡缩胆囊素卵黄抗体的制备与应用研究

[目的]制备缩胆囊素卵黄抗体,研究其对肉鸡生长的促进作用.[方法]采用缩胆囊素（CCK）融合蛋白作为免疫原制备油乳剂疫苗免疫产蛋鸡.采用ELISA检测蛋鸡血清、蛋黄液、蛋黄粉中CCK抗体效价.[结果]20日龄胡须鸡饲养试验结果表明饲料中分别添加200和500 g/t含CCK抗体卵黄粉的胡须鸡试验全期体增重较阴性蛋黄粉组分别提高4.14％和5.52％,而采食量则分别提高2.14％和2.75％,但差异均不显著（P＞0.05）,且对料重比无显著影响.ELISA结果表明CCK融合蛋白能在鸡体内引起免疫反应,加强免疫后蛋鸡的血清和蛋黄中的CCK抗体均可维持在较高水平.[结论]缩胆囊素卵黄抗体对胡须鸡有一定的促生长作用.     

豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究

[目的]探索从豆粕中提取大豆异黄酮的工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上,采用L9（34）正交试验优化豆粕中异黄酮的提取工艺。[结果]豆粕异黄酮最佳提取工艺条件为：用体积分数为70%的乙醇水溶液,以20∶1（V/W,ml∶g）的液料比提取2 h,提取温度为75℃。[结论]优化的豆粕异黄酮提取工艺简便、合理,为异黄酮的分离纯化及生理活性的开发研究奠定了基础。     

缩胆囊素抗体对猪生长性能的影响

本研究将CCK33基因四串体片段克隆到原核表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-4CCK33。将其转化大肠杆菌BL21中表达,经SDS-PAGE可检测到分子量约为53 kDa的融合蛋白,最高表达量占菌体总蛋白的30.08%,蛋白可溶性分析表明,融合蛋白主要是以可溶性形式表达。Western-blotting证实,可溶表达的融合蛋白与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性。将纯化的可溶性融合蛋白制成油乳剂疫苗,主动免疫蛋鸡,ELISA检测结果表明,该融合蛋白能在鸡体内引起免疫。用含CCK抗体的蛋黄粉饲喂82天龄肉猪,试验结果表明,在肉猪饲料中添加100g/t含CCK抗体蛋黄粉,试验期间平均日增重和采食量与阴性蛋黄粉组相比,分别提高6.64%和8%,差异显著（P<0.05）。     

let-7b介导IGF2BP3表达抑制鸡成肌细胞增殖效果的研究

为探讨miRNA let-7b介导IGF2BP3对鸡成肌细胞增殖的调控作用,利用let-7b过表达载体转染成肌细胞,通过双荧光素酶靶标验证、MTT、qPCR、western blotting和ELISA分析,测定了相关基因的表达情况。结果表明:(1)采用双荧光素酶报告系统和突变实验证明let-7b作用于IGF2BP3的3'UTR。(2)let-7b在成肌细胞中过表达后,细胞增殖受到一定程度的影响,与空质粒组相比,细胞数量呈现下降的趋势。(3)let-7b可使靶基因IGF2BP3的mRNA表达量下调2.33倍,差异显著(P0.05),对IGF2、IGF1的mRNA表达量的影响则差异不显著(P0.05)。研究表明,miRNA let-7b主要是通过靶向调控IGF2BP3的mRNA和蛋白质表达水平,并进一步影响IGF2的运输、稳定和迁移功能,从而影响鸡成肌细胞的增殖。     

鸡缩胆囊素卵黄抗体的制备与应用研究

[目的]制备缩胆囊素卵黄抗体,研究其对肉鸡生长的促进作用。[方法]采用缩胆囊素(CCK)融合蛋白作为免疫原制备油乳剂疫苗免疫产蛋鸡。采用ELISA检测蛋鸡血清、蛋黄液、蛋黄粉中CCK抗体效价。[结果]20日龄胡须鸡饲养试验结果表明饲料中分别添加200和500 g/t含CCK抗体卵黄粉的胡须鸡试验全期体增重较阴性蛋黄粉组分别提高4.14%和5.52%,而采食量则分别提高2.14%和2.75%,但差异均不显著(P0.05),且对料重比无显著影响。ELISA结果表明CCK融合蛋白能在鸡体内引起免疫反应,加强免疫后蛋鸡的血清和蛋黄中的CCK抗体均可维持在较高水平。[结论]缩胆囊素卵黄抗体对胡须鸡有一定的促生长作用。     

重组缩胆囊素融合蛋白制备及其免疫原性研究

成功扩增了猪缩胆囊素(CCK)基因C末端片段,并在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE检测到相对分子质量约为45 000的融合蛋白,最高表达量占菌体总蛋白的40.21%,蛋白可溶性分析表明,融合蛋白主要是以可溶性形式表达. Western-blotting证实,可溶表达的融合蛋白能与CCK-8阳性血清具有良好的免疫反应性. 以纯化后的蛋白为免疫原制备油乳剂疫苗免疫蛋鸡,结果表明,CCK蛋白可在鸡体内引起免疫反应,加强免疫后蛋鸡血清和卵黄中CCK抗体可维持在较高水平. 为了研究含有CCK抗体的蛋黄粉对鸡生长性能的影响,将其作为添加剂饲喂20日龄肉鸡,试验结果表明,饲喂添加100 和300 g/t含CCK抗体蛋黄粉的肉鸡与阴性对照组相比,试验全期体增质量分别提高2.34%、3.80%,采食量分别提高0.91%、2.65%,且对饲料体增质量比无显著影响.