精氨酸对子宫内发育迟缓仔猪抗氧化功能和精氨酸代谢的影响

[目的]本文旨在研究精氨酸对子宫内发育迟缓(IUGR)仔猪抗氧化功能和精氨酸代谢的影响。[方法]选择6头胎次和体况相近的妊娠母猪,分娩后,分别从每头母猪所产仔猪中挑选1头正常初生体质量(NBM)新生仔猪和2头IUGR新生仔猪,即6头NBM新生仔猪和12头IUGR新生仔猪。所有IUGR仔猪随机分成2组,分别饲喂基础人工乳(IUGR组,n=6)和添加6 g·L-1精氨酸(Arg)的基础人工乳(IUGR+Arg组,n=6),所有NBM仔猪饲喂基础人工乳(NBM组,n=6),试验期7 d。[结果]与IUGR组相比,日粮补充Arg均显著降低IUGR仔猪背最长肌和空肠黏膜丙二醛(MDA)含量(P0.05);显著提高空肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性(P0.05);显著提高血清一氧化氮(NO)水平、总NO合酶(TNOS)、诱导型NO合酶(i NOS)、结构型NO合酶(c NOS)活性,空肠黏膜NO水平、TNOS和c NOS活性,以及空肠黏膜与血清中Arg水平和Arg代谢相关氨基酸(Arg、Cit和Pro)水平。[结论]在早期断奶IUGR仔猪日粮中添加精氨酸具有增强IUGR仔猪抗氧化功能和促进精氨酸代谢的作用。     

日粮补充亮氨酸对超早期断奶宫内发育迟缓仔猪内源消化酶活性及胰腺抗氧化能力的影响

[目的]本试验旨在研究亮氨酸对超早期断奶宫内发育迟缓(IUGR)仔猪内源消化酶活性及胰腺抗氧化能力的影响。[方法]从正常分娩的16头母猪中选择正常初生体质量(NBW)和IUGR新生仔猪各16头,所有仔猪于14日龄断奶。试验采用2×2因子设计,NBW仔猪和IUGR仔猪分别饲喂基础日粮(含1.45%亮氨酸)或亮氨酸日粮(含1.80%亮氨酸),即NC(NBW+基础日粮)、NL(NBW+亮氨酸日粮)、IC(IUGR+基础日粮)与IL(IUGR+亮氨酸日粮)共4组,每组8头猪,35日龄屠宰取样。[结果]IC组胰腺、十二指肠、空肠和回肠的淀粉酶活性显著低于其他组(P0.05),IL组胰腺的淀粉酶活性显著低于NC组(P0.05);IC组胰腺、十二指肠和回肠的脂肪酶活性显著低于其他组(P0.05),IL组十二指肠的脂肪酶活性显著高于NC组(P0.05);IC组胰腺的糜蛋白酶活性显著低于其他组(P0.05),IC组十二指肠的糜蛋白酶活性显著低于IL组(P0.05)。与NC组和IL组相比,IC组胰腺SOD、GPx活性和GSH含量显著降低(P0.05),MDA含量显著升高(P0.05)。与NC组相比,IC组胰腺SOD1 mRNA的表达水平显著降低(P0.05),而GPx1、GPx7、CAT mRNA表达水平差异不显著(P0.05);另外,IL组胰腺SOD1、CAT mRNA的表达水平显著高于IC组(P0.05)。[结论]IUGR会导致早期断奶仔猪内源消化酶活性、胰腺中抗氧化酶活性和非酶抗氧化物质含量降低及抗氧化酶mRNA表达下调,引起机体消化吸收功能紊乱,而亮氨酸对胰腺的抗氧化功能和胃肠道的消化吸收功能有一定的改善作用。     

日粮添加二甲基甘氨酸钠对宫内发育迟缓断奶仔猪肝脏抗氧化能力及免疫指标的影响

[目的]本文旨在研究日粮添加二甲基甘氨酸钠(DMG-Na)对宫内发育迟缓(IUGR)断奶仔猪器官指数、肝脏抗氧化能力和血清免疫指标的调节作用。[方法]分别选择正常初生体质量(NBW)仔猪和IUGR仔猪各16头,21日龄断奶,饲喂基础日粮或补充1 g·kg~(-1)DMG-Na的试验日粮至49日龄。共分成4个处理组,即NC(NBW+基础日粮)组、ND(NBW+DMGNa日粮)组、IC(IUGR+基础日粮)组、ID(IUGR+DMG-Na日粮)组,每组8头猪。[结果]与NBW仔猪相比,IUGR仔猪肾脏指数显著降低(P0.05),肝脏谷胱甘肽(GSH)含量减少(P0.05),抑制羟自由基能力显著降低(P0.05),血清补体3(C3)水平下降(P0.05),血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量显著升高(P0.05)。此外,IUGR仔猪肝脏GST和TNF-αm RNA表达量也显著升高(P0.05)。日粮添加1 g·kg~(-1)DMG-Na后,49日龄仔猪脾脏指数显著增加(P0.05),肝中GST活力显著增强(P0.05),血清C3水平和白细胞介素10(IL-10)含量显著提高(P0.05),并且仔猪肝脏CAT、GST、GCLC、GCLM和IL-10 m RNA表达量均显著增加(P0.05)。[结论]IUGR断奶仔猪肝脏的抗氧化能力下降,免疫功能受损。日粮补充1 g·kg~(-1)DMG-Na有增强IUGR断奶仔猪肝脏的抗氧化功能和修复仔猪免疫损伤的潜力。     

加味二术散对断奶仔猪空肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响

【目的】研究加味二术散对断奶仔猪空肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响,为防治断奶仔猪应激综合症提供有效方剂。【方法】将45头断奶仔猪随机分为空白对照组(饲喂基础日粮)、中药组(饲喂基础日粮中添加质量分数0.3%加味二术散的日粮)和抗生素组(饲喂基础日粮中添加质量分数0.5%硫酸粘杆菌素的日粮)。于试验第7,14和21天,分别从各组随机选取3头仔猪放血致死,采集各组仔猪的空肠黏膜,测定其总超氧化物歧化酶(TSOD)、过氧化氢酶(CAT)及总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、白介素-2(IL-2)和分泌型免疫球蛋白A(SIg A),研究加味二术散对断奶仔猪空肠黏膜抗氧化能力和免疫力的影响。【结果】中药组仔猪空肠黏膜中T-SOD酶活力在第7和14天显著高于空白对照组(P0.05),在第7,14和21天均显著高于抗生素组(P0.05);CAT在试验第7天显著高于空白对照组和抗生素组(P0.05);T-AOC在试验第14天显著高于空白对照组和抗生素组(P0.05);MDA含量在试验第14天显著低于抗生素组和空白对照组(P0.05),在第7天时显著低于抗生素组(P0.05)。中药组仔猪空肠黏膜中IL-2和SIg A含量在试验的第14天均显著高于空白对照组和抗生素组(P0.05)。【结论】加味二术散可有效改善断奶仔猪空肠黏膜的抗氧化能力和免疫力。     

日粮高胆碱水平对宫内发育迟缓猪背最长肌糖酵解的影响

[目的]研究添加高胆碱日粮对宫内发育迟缓(IUGR)猪肌肉糖酵解的作用。[方法]从正常分娩的12头母猪中选择正常初生体质量(normal birth weight,NBW)和IUGR新生仔猪各12头,所有仔猪于23日龄断奶。试验采用2×2因子设计,NBW仔猪和IUGR仔猪各分别饲喂基础日粮(正常胆碱水平,NC)与添加胆碱的试验日粮(高胆碱水平,HC),即NBW+NC、NBW+HC、IUGR+NC与IUGR+HC共4组,每组6头猪,饲养至200日龄结束,称体质量后随机选择4头屠宰。[结果]IUGR猪肌糖原含量显著低于正常初生体质量仔猪,其乳酸含量及糖酵解潜值显著升高(P<0.05),乳酸脱氢酶活性有提高的趋势(P=0.057),糖原合酶(GS)的表达量显著降低(P<0.05),葡萄糖转运载体(GLUT4)mRNA表达量有下降趋势(P=0.074),M2-型丙酮酸激酶(PKM2)mRNA及M-型6磷酸果糖激酶(PFKM)mRNA的表达量显著增加(P<0.05)。高水平胆碱有使IUGR猪肌糖原含量升高(P=0.051)、乳酸含量(P=0.091)和糖酵解潜值(P=0.074)降低的趋势;高水平胆碱促使IUGR猪肌酸激酶活性显著升高(P<0.05),GS和GLUT4 mRNA的表达量显著升高(P<0.05),而PFKM mRNA表达量有下降的趋势(P=0.087)。[结论]IUGR猪的肌肉糖酵解关键酶表达量显著升高,糖原合成能力下降,乳酸含量显著升高,添加高水平胆碱可缓解IUGR猪肌糖原的大量分解,表现为糖酵解关键酶增加,乳酸含量下降,可见胆碱对提高肉品质有积极作用。     

饲粮添加白藜芦醇对低出生重哺乳仔猪肝脏氧化还原状态和线粒体功能的影响

【目的】通过研究白藜芦醇(RES)对低出生重(LBW)哺乳仔猪机体氧化还原状态和线粒体功能的影响,探讨RES改善LBW哺乳仔猪氧化还原状态的可能机制。【方法】选取体况接近、产期一致和胎次相近的初产母猪所产仔猪,4日龄时,选取20头LBW(BW:1.16±0.07 kg)和10头正常出生重(NBW)(BW:2.07±0.10 kg)哺乳仔猪,按体重相近、公母比例一致的原则分为NBWC组(饲喂基础饲粮)、LBWC组(饲喂基础饲粮)和LBW+RES组(基础饲粮添加600 mg/kg RES)三个处理,每个处理10个重复,每个重复1头猪。基础饲粮为人工乳,饲养21天。在第22天,屠宰并收集所有试验猪的血清与肝脏样品,检测氧化还原状态与线粒体功能指标。【结果】①与NBW仔猪比较,LBW仔猪肝脏CAT酶活和ATP含量显著下降(P0.05),肝脏COX I mRNA表达量显著下调(P0.05);②饲粮添加RES显著提高血清和肝脏CAT酶活(P0.05),显著提高肝脏ATP含量(P0.05),上调肝脏NRF1的mRNA表达量(P0.05)。【结论】与NBW仔猪相比,LBW仔猪肝脏抗氧化能力下降,线粒体功能受阻;而饲粮添加600 mg/kg RES显著提高LBW仔猪肝脏抗氧化能力,改善线粒体功能。     

低出生重对仔猪肝脏抗氧化功能的影响及精氨酸的营养效应

【目的】旨在探讨低出生重(LBW)对仔猪肝脏抗氧化功能的影响及饲粮添加精氨酸的营养效应。【方法】试验1选取10头正常出生重(NBW)仔猪和10头LBW仔猪,出生后2～4 h内屠宰,比较出生体重对新生仔猪肝脏抗氧化能力的影响。试验2选取4日龄的10头NBW和20头LBW仔猪,NBW仔猪饲喂基础饲粮,LBW仔猪分为两组,分别饲喂基础饲粮和添加1.0%L-精氨酸的饲粮,均配制成人工乳,饲喂21 d,考察出生体重对哺乳仔猪肝脏抗氧化功能的影响及精氨酸的营养效应。【结果】与NBW新生仔猪相比,LBW新生仔猪肝脏T-SOD和GSH-Px活性显著降低(P0.05)。饲喂21 d后,与NBW仔猪相比,LBW仔猪肝脏ASA和AHR活性显著降低,Nrf2和NQO-1表达量显著提高(P0.05)。与LBW仔猪相比,1.0%Arg添加显著提高了LBW仔猪肝脏AHR、T-SOD和GSH-Px的活性,显著降低NQO-1、IL-1β和IL-6的表达量(P0.05)。【结论】在本试验条件下,LBW仔猪肝脏抗氧化能力较NBW仔猪低,补充1.0%Arg可改善LBW哺乳仔猪肝脏抗氧化功能。     

精氨酸对早期断奶仔猪肠道生长、组织形态及IL-2基因表达水平的影响

 【目的】研究精氨酸对超早期断奶仔猪肠道发育和肠道免疫的影响。【方法】试验选用70头7日龄断奶的二元杂交仔猪,随机分成5个处理,每个处理14头,分别饲喂添加0.0%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%精氨酸的日粮。试验开始后第7天和第14天,每个处理分别选取6头猪屠宰取样,检测胃肠指数、小肠组织形态以及小肠IL-2基因表达水平。【结果】试验第7天,添加精氨酸一定程度上促进了胃和小肠以及小肠绒毛的生长（P＞0.05）,显著提高了空肠和回肠IL-2基因表达水平（P＜0.05）;试验第14天,添加0.6%和0.8%精氨酸显著提高仔猪小肠重量和长度（P＜0.05）,空肠和回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值也均有提高的趋势（P＞0.05）。【结论】精氨酸能促进超早期断奶仔猪的肠道发育,阻止肠绒毛萎缩,提高肠道IL-2基因表达水平,增强肠道免疫功能。     

植物乳杆菌C88对H2O2诱导氧化损伤的 Caco-2细胞的保护作用

【目的】文章旨在研究植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）C88的抗氧化作用。【方法】采用0.1 mmol•L-1 和0.2 mmol•L-1浓度H2O2连续处理Caco-2细胞12—48 h造成氧化损伤,通过测定细胞培养液上清和细胞裂解液的自由基清除能力及抗氧化物酶活性,评价植物乳杆菌C88对Caco-2细胞抗氧化损伤的保护作用。【结果】与氧化损伤模型组相比,植物乳杆菌C88在1011CFU/mL浓度下,能显著提高细胞裂解液的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性(P＜0.05)和总抗氧化（T-AOC）能力(P＜0.05);以及细胞裂解液的羟自由基清除率(P＜0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）(P＜0.05)和超氧化歧化酶（SOD）活性。细胞裂解液的羟自由基清除率低于氧化应激对照组。【结论】植物乳杆菌（L. plantarum）C88通过提高Caco-2细胞的自由基清除能力和抗氧化酶活性,表现出了较强的抗氧化活性。     

不同断奶模式对仔猪免疫器官指数和免疫球蛋白含量的影响

【目的】研究不同断奶模式对仔猪免疫器官指数以及免疫球蛋白A（IgA）、IgG、IgM含量的影响。【方法】选用27窝“杜×长×大”仔猪,随机分为3个试验组,分别为常规断奶组（C组）、喷洒气味剂组（S组）和先混群后断奶组（M组）,每组3个重复,每个重复3窝。C组仔猪28日龄进行常规断奶、混群;S组仔猪28日龄断奶、混群,同时每天向仔猪身上喷洒体积分数2%戊二醛溶液,持续喷洒7 d;M组仔猪21日龄原地混群,28日龄断奶。断奶后第8天称试验猪体质量,解剖采集扁桃体、脾脏、胸腺、下颌淋巴结、腹股淋巴结,称取其质量,计算免疫器官指数;刮取空肠和回肠黏膜,采集血液分离血清,ELISA方法测定肠黏膜和血清中IgA、IgG、IgM和白介素2（IL-2）的含量。【结果】与C组相比,S组免疫器官指数均提高,除脾脏和下颌淋巴结指数差异不显著（P＞0.05）外,其他均差异显著（P＜0.05）;M组免疫器官指数均显著高于C组和S组（P＜0.05）。S组回肠黏膜、M组空肠和回肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量均较C组显著提高（P＜0.05）,S组空肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量与C组无显著差异（P＞0.05）, M组空肠和回肠黏膜中IgM含量均较S组显著提高（P＜0.05）。S组血清中IgA、IgM含量较C组显著提高（P＜0.05）,M组血清中IgA、IgM、IgG含量均较C组显著提高（P＜0.05）,M组IgG含量显著高于S组（P＜0.05）。S组回肠黏膜中IL 2含量显著高于C组（P＜0.05）,M组肠黏膜和血清中IL 2含量均显著高于C组和S组（P＜0.05）。【结论】在仔猪体表喷洒体积分数2%戊二醛溶液和先混群后断奶的断奶模式均能减轻仔猪断奶应激,提高免疫器官指数,增强机体免疫应答水平,其中先混群后断奶模式的效果更优。     

外源性γ-氨基丁酸抵抗仔猪氧化应激的效果及机制

【目的】 研究外源性γ-氨基丁酸（GABA）抵抗仔猪氧化应激的作用效果,及海马神经元GABA受体调节凋亡信号通路在其中可能的介导作用,为GABA作为动物应激调节剂的应用提供科学依据。【方法】 基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型,考察外源性GABA对仔猪血清及海马组织中氧化/抗氧化相关指标、仔猪日增重、脑海马GABA受体以及大鼠海马神经元中GABA受体及凋亡信号通路相关基因表达水平的影响。【结果】 低、中、高浓度的GABA灌喂组（LD+OS; MD+OS;HD+OS）仔猪血清的MDA含量均极显著低于氧化应激（OS）组(P<0.01),而GSH水平均极显著高于OS组(P<0.01),同时HD+OS 组仔猪血清T-AOC水平极显著高于OS组和对照组(P<0.01);且高浓度(100 mg·kg^-1 BW)GABA降低仔猪血清MDA含量和增加GSH水平的幅度均高于低浓度(20 mg·kg^-1 BW)和中浓度(60 mg·kg^-1 BW)GABA。因此,后续研究仅考察100 mg·kg^-1 BW GABA的作用效果及其抗氧化应激的机制。OS组仔猪0-7、8-14和0-28日龄的日增重极显著低于对照组(P<0.01),而HD+OS组0-7、8-14和0-28日龄仔猪的日增重极显著高于OS组(P<0.01);OS组仔猪15-28日龄的日增重显著低于对照组(P<0.05),HD+OS组15-28日龄的日增重极显著高于OS组(P<0.01)。以上结果表明,100 mg·kg^-1 BW GABA的灌喂极显著地增加了仔猪的日增重。对照组、OS组和HD+OS组在前、中、后期的腹泻率均无显著差异(P>0.05)。氧化应激组海马组织的MDA含量极显著高于对照组和HD+OS组 (P<0.01),而T-AOC和GSH的水平均极显著低于另外两组(P<0.01),表明GABA能提高仔猪海马组织抗氧化能力。HD+OS组的海马组织GABA_A和GABA_B受体水平均极显著高于对照组和氧化应激组(P<0.01),表明GABA提高了海马组织GABA_A和GABA_B的水平。氧化应激组脑海马Bcl-2蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),Bax和Caspase-3蛋白水平极显著高于对照组(P<0.01)。HD+OS组的Bcl-2蛋白水平极显著高于氧化应激组（P<0.01）,Bax蛋白水平极显著低于氧化应激组（P<0.01）,Caspase-3蛋白水平显著低于氧化应激组（P<0.05）。与此一致的是,氧化应激组、GABA+OS+Picrotoxin组和GABA+OS+CGP54626组大鼠海马神经元的Bax和Caspase-3蛋白水平均显著高于对照组和GABA+OS组（P<0.05）,表明GABA缓解了氧化应激状态下海马神经元的损伤,而GABA受体抑制剂的添加阻挡了GABA的抗应激损伤作用。【结论】 GABA降低了仔猪海马的氧化应激水平,而GABA抗应激的作用机制可能与其降低凋亡蛋白基因的表达相关,而GABA_A和GABA_B受体介导了该过程。     

镉和低pH胁迫对中华绒螯蟹免疫应答及相关基因表达的影响

为了探究重金属镉和低pH胁迫对中华绒螯蟹抗氧化能力的影响,实验设置了2个pH(7.8、6.5)、3个镉浓度组(0、1.45、2.90mg/L)和3个处理时间(7d、14d、21d),研究镉和低pH胁迫对中华绒螯蟹血细胞总数 (THC)、血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性、过氧化氢酶 (CAT)活性、总抗氧化能力 (T-AOC)、丙二醛 (MDA)含量以及肝胰腺中谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)、谷胱甘肽-s-转移酶 (GST)、热休克蛋白70(HSP70)和溶菌酶 (LZM) 基因4种免疫相关基因mRNA表达水平的影响。结果显示,随镉浓度升高THC显著下降,且同浓度下pH6.5时THC均低于pH7.8。pH值为7.8时,随着镉浓度的升高中华绒螯蟹血清SOD活性和T-AOC均先升后降；而CAT活性(除了第7d)和MDA含量逐渐升高。pH值为6.5时,镉浓度2.9mg/L胁迫21 d时,SOD、CAT活性和T-AOC均显著低于pH7.8 (P < 0.05)。整个实验过程中,镉浓度2.9mg/L 、pH6.5时MDA含量均显著高于pH7.8 (P < 0.05)。pH值为7.8时,GPx、GST、HSP70、LZM mRNA表达量均随着镉浓度升高逐渐升高,镉浓度2.9mg/L胁迫21 d时,各基因表达量都达到最高。在14、21 d时,镉浓度2.9mg/L、pH6.5时GPx、GST mRNA表达量均显著降低,并显著低于同浓度pH7.8表达量(P < 0.05)；而HSP70、LZM mRNA表达量在21 d时显著降低,也显著低于同浓度pH7.8表达量(P < 0.05)。综上,抗氧化酶活性以及相关基因mRNA表达量在低pH和镉应激刺激下呈上调或下调趋势以应对氧化应激,低pH和镉协同处理对中华绒螯蟹的抗氧化防御的影响显著大于单一因素的作用,高浓度镉(2.9mg/L)处理的效果更显著。该研究结果为以后研究水体酸化和重金属污染对甲壳类动物影响提供了理论依据。     

葡萄籽原花青素及维生素E对氧化应激仔猪生长性能、 血清氧化还原状态和肝脏氧化损伤的影响

【目的】研究饲粮添加葡萄籽原花青素(grape seed procyanidins, GSPs)和维生素E(vitamin E,VE)对氧化应激仔猪生长性能、血清氧化还原状态及肝脏氧化损伤的影响。【方法】24头28 d的断奶仔猪(L×Y),随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪。NC组和Diqaut组饲喂基础饲粮,GSPs+Diquat组和VE+Diquat组分别饲喂在基础饲粮中添加100 mg•kg-1 GSPs和50 mg•kg-1 VE的试验饲粮。在试验第10 d对Diquat组、GSPs+Diquat组和VE+Diquat组试猪腹腔注射Diquat（10 mg•kg-1）, NC组注射生理盐水。试验期为17 d。【结果】结果显示,与NC组相比,注射Diquat导致仔猪生长性能,血清和肝脏抗氧化能力以及肝脏ALT和AST活性显著降低（P＜0.05）,血清ALT和AST活性显著升高（P＜0.05）;饲粮添加100 mg•kg-1 GSPs或50 mg•kg-1 VE 均显著改善应激仔猪血清GSH-px活性和抗 能力及肝脏ALT和AST活性(P＜0.05),降低血清ALT、AST活性和MDA含量(P＜0.05)。与此同时,GSPs还显著增加仔猪血清SOD活性、抗•OH能力及肝脏T-AOC和抗•OH能力(P＜0.05),降低肝脏MDA含量(P＜0.05)。【结论】饲粮添加100 mg•kg-1 GSPs或50 mg•kg-1 VE均能有效缓解Diquat所致仔猪氧化应激,且在血清和肝脏抗氧化方面GSPs效果较好。     

玉米赤霉烯酮对断奶小母猪子宫形态学及热应激蛋白70分布和表达的影响

【目的】研究不同水平玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEA）对断奶小母猪子宫形态学和子宫内热应激蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）的阳性分布规律及mRNA相对表达量的影响。【方法】选择25-28日龄健康三元杂交（杜×长×大）断奶小母猪40头,产床上适应环境10 d后转入单体笼（0.48 m²）。根据日龄（35-38）和平均体重（14.01 ± 0.86 kg）,将40头试验小母猪分为4个处理,每个处理10个重复,每个重复1头猪。对照组（Control）饲喂基础饲粮,处理1（ZEA0.5）、处理2（ZEA1.0）和处理3（ZEA1.5）分别在基础饲粮基础上添加0.5、1.0和1.5 mg·kg^-1的ZEA（ZEA的测定值分别为0、0.52±0.07、1.04±0.03和1.51 ± 0.13 mg·kg^-1）,小母猪单笼饲养,自由采食和饮水,预饲期10 d,正式期35 d。试验结束前一天对小母猪禁食12 h,全部放血屠宰,打开腹腔后无菌条件下迅速切取一份子宫组织置于2 mL无RNA酶的冻存管中液氮速冻,而后转至-80℃冻存,检测HSP70的mRNA相对表达量,另切取子宫组织块迅速固定于Bouin’s液,待做组织切片检测子宫形态学的结构和HSP70的阳性分布规律。【结果】随着饲粮中ZEA水平的升高,子宫肌层和内膜明显增厚,子宫腺数量明显增多,子宫腺密度明显增大;子宫肌层和内膜厚度随着饲粮中ZEA水平的升高呈一次（P＜0.001）和二次（P＜0.001）线性升高,1.5 mg·kg^-1 处理的子宫肌层和内膜厚度显著高于1.0 mg·kg^-1处理（P＜0.05）,1.0 mg·kg^-1处理显著高于0.5 mg·kg^-1处理（P＜0.05）,0.5 mg·kg^-1处理又显著高于对照组（P＜0.05）。免疫组化结果显示,HSP70免疫阳性物质主要分布于子宫肌层平滑肌细胞、子宫腺上皮细胞、腔上皮细胞和血管内皮细胞的胞质内,偶见胞核着色。对照组免疫阳性较弱呈浅黄色,随着饲粮中ZEA水平的升高,HSP70免疫阳性反应明显增强,颜色加深,呈黄色和棕黄色块状分布。断奶小母猪子宫中肌层、腺上皮、腔上皮及所测部分总HSP70免疫阳性物质的累积光密度（integrated optical density,IOD）随着饲粮中ZEA水平的升高均呈一次（P＜0.001）和二次（P＜0.05）线性升高;总体上,1.5 mg·kg^-1 处理的子宫HSP70免疫阳性物质的IOD显著高于0.5 mg·kg^-1处理（P＜0.05）,0.5和1.0 mg·kg^-1处理又显著高于对照组（P＜0.05）。mRNA相对表达量结果显示,随着饲粮中ZEA水平的升高,断奶小母猪子宫内HSP70的mRNA相对表达量呈一次、二次线性升高（P＜0.001）,尽管1.0 mg·kg^-1和1.5 mg·kg^-1处理差异不显著（P＞0.05）,但1.5 mg·kg^-1 处理显著高于0.5 mg·kg^-1处理（P＜0.05）,0.5 mg·kg^-1处理又显著高于对照组（P＜0.05）。【结论】饲粮中0.5 mg·kg^-1 ZEA足以使子宫肌层和内膜明显增厚,子宫腺数量明显增多,使得子宫形态发生改变;本试验条件下,随ZEA浓度升高,HSP70免疫阳性反应增强,诱导子宫内HSP70的高水平表达,抵抗毒素应激对子宫细胞的损伤。     

饲粮中添加色氨酸对仔猪混群后行为及相关激素的影响

【目的】研究饲粮中添加色氨酸对仔猪混群后行为、相关激素水平和 5-羟色胺受体2A（5-HT2A）基因表达的影响。【方法】将144头体重相近（8.00±0.25）kg 的28日龄断奶仔猪随机分为3个处理组,即对照组、处理组Ⅰ和Ⅱ;每组设6个重复,每个重复有8头猪。对照组饲喂色氨酸含量为0.21%的基础饲粮,处理组I和Ⅱ分别在基础饲粮的基础上添加0.1%和0.2%的色氨酸,饲喂28 d后混群,观察猪的争斗行为和日常行为,测定唾液皮质醇浓度、下丘脑5-羟色胺含量和5-HT2A基因表达量。【结果】混群后,与对照组相比,添加色氨酸的处理组仔猪争斗时间和争斗次数显著降低（P＜0.05）,趴卧行为显著提高（P＜0.05）,站立行为显著降低（P＜0.05）,采食、犬坐行为无显著差异（P＞0.05）;随饲粮色氨酸水平的提高,仔猪唾液皮质醇含量显著降低（P＜0.05）,下丘脑中5-羟色胺浓度显著升高（P＜0.05）,下丘脑中5-HT2A mRNA相对表达量依次降低,其中添加0.2%的色氨酸组与对照组相比差异显著（P＜0.05）。【结论】在满足仔猪色氨酸营养需要（0.21%）的基础上,额外添加0.1%和0.2%的色氨酸能提高仔猪下丘脑5-羟色胺的含量,调控5-HT2A基因mRNA的表达水平,降低仔猪混群后唾液皮质醇的含量,进而缓解仔猪混群后的应激行为。     

银杏叶提取物对断奶仔猪血清生化指标和抗氧化功能的影响

【目的】研究银杏叶提取物（EGB）对断奶仔猪血清生化指标和抗氧化功能的影响。【方法】将160头25日龄的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪随机分为4组,每组4个重复,每重复10头。第1组为对照组,饲喂基础日粮;第2、3、4组分别饲喂在基础日粮中添加质量分数0.1%,0.2%和0.3% EGB的试验日粮。试验期为28 d,分别于第14和28天采集血样,测定断奶仔猪血清生化指标和抗氧化功能指标。【结果】与对照组相比,日粮中添加质量分数0.2%,0.3% EGB可显著降低断奶仔猪血清甘油三酯含量（P＜0.05）,显著提高血清球蛋白含量（P＜0.05）;添加质量分数0.1%,0.2% EGB,总体上可显著提高断奶仔猪血清总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和总抗氧化能力（P＜0.05）,显著降低血清丙二醛和一氧化氮含量（P＜0.05）。另外,与对照组相比,日粮中添加EGB使断奶仔猪血清高密度脂蛋白胆固醇和总蛋白含量呈增加趋势,血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量呈降低趋势。【结论】断奶仔猪日粮中添加质量分数0.2% EGB效果最佳,此时EGB可降低断奶仔猪血脂含量,提高血清球蛋白水平和抗氧化能力。     

荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平

 【目的】探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。【方法】根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列，设计并合成引物，将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体，重组质粒经筛选、鉴定，体外转录出RNA，梯度稀释作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测，建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台，并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变。【结果】经1、2、4、6和10 h的运输应激后，组织中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势，运输应激到10 h时HSP70 mRNA的转录水平升到最高，肝脏和心脏组织中HSP70 mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍；HSP90 mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势。【结论】运输应激可以影响HSP mRNA转录水平的变化，并且对不同家族的HSP mRNA转录水平的影响不同；HSP70 mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一。     

运输应激猪HSPs mRNA转录、分布及免疫器官病理性损伤相关性研究

【目的】研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平,探讨其相关性。【方法】利用组织学、原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平的变化。【结果】在长途运输应激初期（1～2 h）,淋巴结和脾脏出现急性病理性损伤变化,损伤程度较为严重;运输应激4 h时,组织的病理性损伤与应激初期相似,但血管的充血程度有所减轻;淋巴结和脾脏中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10 h时,HSP70 mRNA的转录水平升到最高,分别为对照组的9.59和11.46倍;HSP90 mRNA的转录水平在应激初期（1～2 h）急剧升高（P＜0.01）,运输应激2 h时,淋巴结和脾脏中HSP90 mRNA的转录水平分别为对照组的59.67和13.03倍,到运输应激持续到6 h后,升高不再显著。HSPs mRNA在淋巴结和脾脏细胞中的定位无肉眼可见的随着应激时间的延长而发生相应的变化,但HSP70和HSP90 mRNA之间的定位存在着差异。【结论】运输应激可以导致组织损伤和HSPs mRNA转录水平的变化,但对不同家族的HSPs mRNA转录水平的影响不同;HSP90 mRNA的转录水平与组织损伤有着良好的相关性,有望成为猪运输应激的判定指标之一。     

罗伊氏乳杆菌I5007对新生仔猪肠道形态、二糖酶活性和紧密连接蛋白表达的影响

【目的】罗伊氏乳酸杆菌是普遍存在于人和动物肠道的有益乳酸杆菌,研究表明,口服罗伊氏乳酸杆菌能显著降低腹泻的发病率和严重程度。研究罗伊氏乳酸杆菌I5007（Lactobacillus reuteri I5007）对新生仔猪肠绒毛发育和肠黏膜屏障功能的影响。【方法】试验选取9窝1日龄的杜×长×大初生仔猪,每窝挑选8头体重相近、出生状况良好的仔猪,按体重分为3组,每组3窝仔猪。即：对照组（灌服0.1%无菌蛋白胨溶液）,前4日龄灌服组（1-4 d,每日每头灌服活菌总数为1.2×10¹⁰ CFU 的L. reuteri I5007）和隔4日龄灌服组（1、5、9、13、17和21 d灌服,灌服剂量同前4日龄灌服组）。试验期21 d,试验期间仔猪由各自母猪哺乳饲喂。于试验第7、14和21 天,每个处理组随机选取4头仔猪,空腹称重、麻醉和屠宰,截取相同位置的十二指肠、空肠和回肠,测定其肠绒毛形态,并测定试验结束时（21 d）空肠和回肠二糖酶活性和紧密连接（TJ）蛋白的表达。【结果】灌服L. reuteri I5007对仔猪生长性能没有显著影响（P＞0.05）,但对不同阶段仔猪的肠道形态有不同程度的影响。7 d时,隔4日龄灌服组与对照组相比,仔猪十二指肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度、杯状细胞数和回肠杯状细胞数均显著增加（P＜0.05）,前4日龄灌服组仔猪的十二指肠绒毛高度/隐窝深度、杯状细胞数和回肠杯状细胞数也均显著高于对照组仔猪（P＜0.05）,但对十二指肠绒毛高度无显著影响（P＞0.05）;14 d时,隔4日龄灌服组仔猪十二指肠的绒毛高度/隐窝深度和回肠杯状细胞数均显著高于对照组（P＜0.05）,前4日龄灌服组仔猪的回肠杯状细胞数也显著高于对照组（P＜0.05）,但却低于隔4日龄灌服组（P＜0.05）;21 d时,隔4日龄灌服组显著提高了仔猪十二指肠和回肠的杯状细胞数（P＜0.05）,前4日龄灌服组与对照组相比,仅提高了回肠杯状细胞数（P＜0.05）,反而降低了十二指肠绒毛高度/隐窝深度（P＜0.05）。另外,前4日龄灌服组仔猪空肠隐窝深度显著低于隔4日龄灌服组仔猪（P＜0.05）,但其十二指肠杯状细胞数和绒毛高度/隐窝深度均显著低于隔4日龄灌服组仔猪（P＜0.05）。在二糖酶活性上,隔4日龄灌服组仔猪空肠蔗糖酶和麦芽糖酶活性均显著高于对照组（P＜0.05）,前4日龄灌服组仅提高了仔猪空肠麦芽糖酶活性（P＜0.05）,且该组空肠蔗糖酶活性和麦芽糖酶活性均显著低于隔4日龄灌服组（P＜0.05）。隔4日龄灌服组对仔猪空肠和回肠的3种TJ蛋白（Claudin-1、Occludin和ZO-1）均有显著的促表达作用（P＜0.05）,前4日龄灌服组仔猪空肠Claudin-1、ZO-1和回肠Claudin-1的表达也均高于对照组（P＜0.05）,但是其空肠Occludin显著低于隔4日龄灌服组（P＜0.05）,且其回肠Claudin-1（P = 0.1）和ZO-1（P = 0.1）相比于隔4日龄灌服组也有降低的趋势。【结论】本试验条件下,新生仔猪隔4日龄灌服L. reuteri I5007（1.2×10¹⁰ CFU/头/日）,能有效促进仔猪肠绒毛发育,提高空肠二糖酶活性,促进仔猪肠上皮细胞TJ蛋白的表达,在改善新生仔猪的肠黏膜屏障功能中可能起到一定的作用。     

4种中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响

【目的】探讨不同中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响,筛选能有效提高长江鲟幼鱼免疫力及抗病力的中药复方,为中药在长江鲟养殖生产中的推广应用提供参考依据。【方法】将17味中药按照中药配伍理论设计4种中药复方,分别是复方I（鱼腥草:金银花:大黄:茯苓:甘草︰黄芪=3:3:1:2:1:2）、复方II（板蓝根:大黄:五加皮:党参=3:3:4:3）、复方III（金银花:杏仁:贯众:大青叶:山豆根:桔梗=3:2:2:2:3:2）、复方IV（黄芪:黄柏:甘草:山楂:五味子:大黄:党参=3:3:1:2:2:2:2）,以不添加中药为对照组,按0.5 g/kg的添加量进行长江鲟幼鱼饲喂试验,并于第7和第14 d采集血样测定各项血清生理指标。【结果】与对照组相比,复方I组和复方II组可不同程度地提高长江鲟血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化物酶（POD）、碱性磷酸酶（AKP）活性及总抗氧化能力（T-AOC）、热休克蛋白70（HSP70）含量,降低丙二醛（MDA）含量,但仅部分指标差异达显著水平（P<0.05,下同）;复方III组和复方IV组可明显提高长江鲟血清SOD、CAT、GSH-Px、POD、AKP活性及T-AOC,降低MDA和皮质醇（COR）含量,且大部分指标与对照组的差异达显著水平。相关分析结果表明,SOD活性与GSH-Px活性及T-AOC、POD活性与GSH-Px活性呈极显著正相关（P<0.01,下同）,POD活性与SOD活性、CAT活性及T-AOC呈显著正相关,SOD活性与COR含量、T-AOC与COR含量呈极显著负相关,GSH-Px活性与COR含量、T-AOC与MDA含量呈显著负相关。【结论】在基础饲料中添加适宜的中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激能力有显著促进作用,尤其以复方III（金银花、杏仁、贯众、大青叶、山豆根、桔梗）和复方IV（黄芪、黄柏、甘草、山楂、五味子、大黄、党参）的效果最佳,可有效缓解长江鲟幼鱼机体面临的应激反应,达到保护效果。