农杆菌介导的百合遗传转化受体系统的研究

[目的]研究农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[方法]选取改进MS培养基为基本培养基,以百合的鳞片为材料进行外植体再生和抗生素筛选试验,确定农杆菌介导的百合遗传转化受体系统。[结果]MS改进培养基中添加0.5 mg/L2,4-D、1.0 mg/L BA最有利于鳞片不定芽的分化,分化率为59.1%。小叶块在添加0.1 mg/LBA、1.0 mg/L2,4-D的MS改进培养基中的分化率最高,达94.4%,且生根情况较好。以百合的鳞片和小叶块作为农杆菌介导的基因转化的受体材料时,所用头孢霉素的浓度以400 mg/L最好,鳞片和小叶块周围几乎没有农杆菌菌斑。潮霉素筛选鳞茎的亚致死浓度为14 mg/L,潮霉素筛选小叶块的亚致死浓度为18 mg/L。[结论]该研究为百合农杆菌介导的转基因研究奠定了基础。     

兰州百合快速繁殖研究

优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系.采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基,附加不同浓度NAA(0.2~1.0 mg/L)、6-BA(0.5~2.0 mg/L)、KT(0.1~1.0 mg/L)、IBA(0.2~1.0 mg/L)、IAA(0.2~1.0 mg/L),对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比.6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2~1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA组合平均小鳞茎最多,为5.9个.与0.5~1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/I组合相比,添加0.5~1.5 mg/L6-BA+0.5~1.0 mg/L KT或0.2NAA mg/L组合培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基从芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多.在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2~1.0 mg/LIAA或IBA培养基中,随着IAA或IBA浓度升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同.从根质量来看,MS培养基根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合.鳞茎诱导最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5~1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好.     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

毛百合鳞片组织培养再生体系的建立

以毛百合鳞片为外植体,比较了不同激素种类及浓度对鳞片小鳞茎等诱导的影响,旨在建立毛百合鳞片组织培养再生体系.结果表明:最佳不定芽诱导培养基为MS+ 0.5 mg/L NAA+ 0.5 mg/L 6-BA,诱导率达到86.7％,分化系数6.77;最佳增殖培养基为MS+ 0.1 mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA,增殖系数7.8;毛百合小鳞茎生根较容易,最佳生根培养基为1/2MS +0.3 mg/L NAA,生根率91.7％,平均生根数7.20.     

百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 30 g/L蔗糖+5500 mg/L琼脂,光照强度1 500 ～2 000 lx.芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+ 90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5500mg/L琼脂,黑暗条件.提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率.     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

兰州百合快速繁殖研究

【目的】优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系。【方法】采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基, 附加不同浓度NAA（0.2~1.0 mg/L）、 6-BA（0.5～2.0 mg/L）、KT（0.1～1.0 mg/L）、IBA（0.2~1.0 mg/L）、IAA（0.2～1.0 mg/L）, 对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比。【结果】6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0 mg/L 6-BA与0.2～1.0 mg/L NAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度的增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA组合的平均小鳞茎最多,为5.9个。与0.5～1.0 mg/L KT+0.2 NAA mg/L组合相比,添加0.5～1.5 mg/L 6-BA+0.5～1.0 mg/L KT或0.2 NAA mg/L组合的培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基的丛芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多。在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2～1.0 mg/L IAA或IBA的培养基中,随着IAA或IBA浓度的升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同。从根的质量来看,MS培养基的根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合。【结论】鳞茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+NAA 0.5～1.0 mg/L,不定芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L IBA,生根效果最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好。     

兰州百合快速繁殖研究

【目的】优化兰州百合组织培养体系,提高其植株再生率,建立高频植株再生体系。【方法】采用正交试验设计,以鳞片为外植体,以MS和1/2MS培养基为基本培养基,附加不同浓度NAA（0.2～1.0mg/L）、6-BA（0.5～2.0mg/L）、KT（0.1～1.0mg/L）、IBA（0.2～1.0mg/L）、IAA（0.2～1.0mg/L）,对兰州百合进行鳞茎诱导、增殖和生根培养,筛选最佳激素配比。【结果】6-BA浓度过低或过高均不利于小鳞茎形成,当1.0mg/L6-BA与0.2～1.0mg/LNAA配比时,鳞茎诱导率和平均生成鳞茎数较高;随着NAA浓度的增加,平均生成鳞茎数不断增加,其中以1.0mg/L6-BA＋1.0mg/LNAA组合的平均小鳞茎最多,为5.9个。与0.5～1.0mg/LKT＋0.2NAAmg/L组合相比,添加0.5～1.5mg/L6-BA＋0.5～1.0mg/LKT或0.2NAAmg/L组合的培养基更利于芽增殖,但其丛芽长势较弱,其中以添加0.5mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA培养基的丛芽长势和小鳞茎长势较好,平均分化鳞茎较多。在以MS、1/2MS为基本培养基、分别添加0.2～1.0mg/LIAA或IBA的培养基中,随着IAA或IBA浓度的升高,鳞茎生根率不断降低,根质量不断下降,而平均根数和根长表现有所不同。从根的质量来看,MS培养基的根质量不如1/2MS培养基;而在1/2MS培养基中,1/2MS与IBA组合优于与IAA组合。【结论】鳞茎诱导的最佳培养基为MS＋1.0mg/L6-BA＋NAA0.5～1.0mg/L,不定芽增殖的最适培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA,最佳生根培养基为1/2MS＋0.2mg/LIBA,生根效果最好,生根率为100.0%,根中等长度、粗壮,质量最好。     

绿花百合组培芽增殖与试管鳞茎膨大的影响因素研究

为优化绿花百合组培芽增殖与试管鳞茎膨大的条件,分析了培养基中蔗糖含量、激素浓度及其配比、硫酸腺嘌呤及水解酪蛋白对绿花百合组培芽增殖的影响,以及蔗糖含量、激素浓度及其配比对试管鳞茎膨大的影响。结果表明:在(23±1)℃和12 h/d光照培养条件下,MS培养基附加0.2 mg/L TDZ、0.2 mg/L NAA、30 mg/L硫酸腺嘌呤、200 mg/L水解酪蛋白和30 g/L蔗糖,有利于绿花百合增殖,增殖系数为5.59;适宜绿花百合鳞茎膨大的最佳培养基为MS附加0.5 mg/L 6-BA、0.3 mg/L NAA及60 g/L蔗糖。因此,蔗糖浓度及温度过高或过低均不利于绿花百合组培芽增殖,光培养下绿花百合组培芽增殖系数高于暗培养,添加适宜浓度的水解酪蛋白对不定芽的分化有良好的促进作用,并且细胞分裂素和生长素协同作用对组培芽增殖和鳞茎膨大有显著的促进作用。     

大百合鳞片诱导不定芽的影响因素研究

以大百合鳞片为外植体材料,研究确定诱导鳞片形成不定芽的影响因素。结果表明:大百合鳞茎的中层鳞片启动与分化能力强,是最佳的外植体;以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.20mg/L的培养基诱导启动效果最好,启动率为86.7%,能培养具有较强分化能力的不定芽5.3个。     

不同浓度的外源激素对香石竹组织培养的影响

研究了不同浓度的外源激素对香石竹组织培养过程中愈伤组织诱导、芽分化和芽增殖的影响。结果表明,愈伤组织的诱导与BA与NAA浓度比及KT浓度有关;芽诱导与BA、KT、NAA均有关;芽增殖与BA的浓度及BA和NAA的浓度比有关。MS+BA 0.3 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L培养基对愈伤组织诱导效果最好;最佳的芽分化培养基为MS+BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L,芽分化率达65%;芽增殖培养基以MS+BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最佳,增殖芽数最多,玻璃化率最低。     

杜仲组培快繁的研究

研究了植物生长调节剂、基本培养基、采样时间对杜仲腋芽诱导和生长的影响,并对丛芽增殖培养基中植物生长调节剂浓度和生根培养基类型进行了筛选。结果表明,最佳取材时间为4月中旬至6月下旬;以MS为基本培养基,在添加0.05mg/LNAA+0.5mg/LBA或者0.1mg/LIBA+0.5mg/LBA的培养基中,腋芽的诱导和生长较好;继代增殖培养以MS+0.5mg/LBA+0.01mg/LNAA的培养基丛芽数量最多,增殖系数最高;在White培养基上生根率可达57.5%。     

变异绣球无性系建立的研究

以具有有利变异的绣球带腋芽茎段为外植体进行离体培养,通过不同浓度激素对外植体芽分化和生根影响的试验证明:促进嫩茎侧芽生长的理想培养基为1/2MS BA0.1mg/L NAA0.1mg/L;芽分化增殖的理想培养基为1/2MS BA0.5mg/L NAA0.1mg/L;生根培养的理想培养基为1/3MS NAA0.3mg/L IAA0.2mg/L;试管苗生根移栽的理想基质为炉灰渣.     

小红参愈伤组织的诱导及分化

通过不同外植体、基本培养基、暗培养、激素对小红参愈伤组织诱导和分化的试验研究,结果表明诱导小红参愈伤组织产生的最佳条件为:以真叶和顶芽(或侧芽)为外植体,在MS BA 0.2 mg/L NAA 3.0mg/L培养基上,进行暗培养,愈伤诱导率达95%。芽形成的愈伤组织组织在MS BA 5.0 NAA 1.5~2.0中均能分化出幼苗,分化率达100%,但叶形成的愈伤组织未能分化出苗。     

频繁开花高产小桐子组织培养的初步研究

为了奠定频繁开花型高产小桐子的快繁及转基因基础,通过对小桐子茎段腋芽培养、叶片和叶柄愈伤诱导及不定芽分化的不同激素组合培养进行研究。结果表明：适合该高产品种的茎段培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋IBA0．1mg／L．叶片愈伤诱导及不定芽分化培养基为Ms＋6-BA2．5mg／L＋IBA0．5mg／L．叶柄愈伤诱导及不定芽分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋IBA0．2mg／L．生根培养以1／2MS＋IBA0．5mg／L＋AC0．1％较为适宜。引起小桐子组培苗玻璃化现象的主要原因之一是BA浓度过高：在不定芽的分化培养中．愈伤过多会严重影响不定芽的数量及质量。     

激素水平对紫叶酢浆草分化增殖的影响

研究了不同外植体和激素水平对紫叶酢浆草组织培养的影响。结果表明:紫叶酢浆草的叶片比叶柄更容易分化出不定芽,是最适宜的外植体;诱导不定芽分化的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L,不定芽增殖的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,试管苗在MS+2,4-D0.5mg/L培养基上生根较好。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

棉花子叶离体培养与植株再生

以棉花无菌苗子叶为外植体，就激素对其不定芽的分化及植株再生的影响进行了研究。实验结果表明，BA对子叶不定芽的诱导效果最好；TDZ次之，ZT和KT不能诱导子叶形成不定芽，IAA与BA配合使用，叶片不定芽分化频率明显提高；NAA与BA配合使用叶片不定芽分化频率有所下降；2，4－D对子叶不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加1．5mg/L GA3有利于芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的MS或MS＋0．5mg/L NAA培养基上诱导生根，形成完全植株。     

胡杨叶片不定芽再生体系的研究

该文以胡杨试管苗叶片为材料 ,进行了不同培养基及不同影响因子对胡杨叶片不定芽再生能力影响的试验 .结果表明 :胡杨叶片再生的最适培养基是MS +BA 0 .5mg L +NAA 0 1～ 0 2mg L +腺嘌呤 4 0mg L +水解乳蛋白 5 0 0mg L +白砂糖 2 5g L +琼脂 5g L ,再生频率达 10 0 % ;叶片培养的最佳取材位置是自茎尖展叶始第 1～ 3片叶 ;叶片正面向上或正面向下接种培养 ,对其形成不定芽无显著影响 ;由丛生芽和愈伤组织两个途径得到的无菌苗上的叶片在再生能力方面没有明显差异 .     

野葛愈伤组织诱导及分化的研究

对野葛叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究,结果表明:6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为芽,6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.