衍生脂质和氧脂信号调控黄曲霉菌发育与产毒的研究进展

黄曲霉毒素污染是制约作物产业化发展的主要限制因子.黄曲霉菌特异性地侵染高含油量的作物种子(如花生种子),表明寄主脂质及其衍生脂类在黄曲霉菌生长、发育和产毒能力中扮演着霞要角色.主要综述了作物种子和黄曲霉菌通过脂氧合酶代谢途径(LOX途径)合成许多脂质衍生物和氧脂,以及这些衍生脂质和氧脂信号在调控黄曲霉菌发育和产毒方面的重要作用,对研究黄曲霉菌的抗性机制有一定的指导意义.     

玉米黄曲霉毒素污染拮抗菌的筛选·鉴定及控制效果

黄曲霉毒素是饲料等农副产品中重要的有毒有害污染物,是一类强致癌性、剧毒性真菌毒素,对畜禽健康危害巨大。该研究对黄曲霉毒素污染拮抗菌开展研究,为黄曲霉毒素污染治理提供技术支持。从河北迁安、迁西、遵化、玉田及丰南饲用玉米或饲料中分离细菌,通过室内外试验,获得对黄曲霉具有较强拮抗力的菌株B45和B6。经分子生物学及理化性质鉴定,菌株B45和B6为解淀粉芽孢杆菌。进一步开展了B45和B6对黄曲霉菌丝生长的抑制作用、黄曲霉毒素的消减作用及黄曲霉毒素的分解作用研究,结果表明,拮抗菌可以显著抑制产毒黄曲霉菌丝生长,降低黄曲霉毒素的产生及消除黄曲霉毒素。     

猪黄曲霉毒素中毒误认为食盐中毒病例分析

黄曲霉菌广泛存在于霉变花生、玉米及谷物中,大多数黄曲霉是不产毒的,其中有些菌素能够产生一种强烈的肝脏毒素,称为黄曲霉毒素。自然条件下,产生的黄曲霉毒素主要有4种,即B1、B2、C1和C2,以B1的毒性最强,可以引起动物饲料中毒,能诱发大鼠、鸭、鱼、猪及猴子的肝癌。这类饲料如     

弯曲乳酸杆菌HB02抑制黄曲霉生长及产毒

用厌氧培养法对1株具霉菌抑制活性的弯曲乳酸杆菌（HB02）进行了培养,用气相色谱和比色法测定了培养物中挥发性脂肪酸（VFA）及乳酸的含量,并通过共培养法检测了该菌对黄曲霉生长和产毒的抑制效果。试验结果显示：该菌在双层固体培养基上生长缓慢,而在改良MRS液体培养基中生长较快。37℃培养48h后培养液中乙酸51．75mmol·L^-1、丙酸0．77mmol·L^-1、丁酸0．37mmol·L^-1、乳酸28．06mmol·L^-1。乳酸试验表明,培养基中添加的乳酸越多,培养基pH值越低,黄曲霉菌丝产量越低,而黄曲霉毒素B1的产量则有增加的趋势,表明乳酸所致低pH值只能抑制黄曲霉生长而不能抑制其产毒。当HB02与黄曲霉共培养时,黄曲霉菌丝产量和黄曲霉毒素B,产量均比黄曲霉单独培养时低（P〈0．01）。结论：HB02可显著抑制黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1的产生。     

利用PCR-RFLP方法鉴别黄曲霉毒素产毒菌株

【目的】开发一种精准度高、灵敏性好、简便快捷的鉴别黄曲霉毒素产毒菌株的方法,为粮食储藏中黄曲霉毒素污染提供早期预警,为食品工业的质量安全控制提供技术保障,为黄曲霉毒素污染的生物防治提供无毒微生物来源。【方法】利用生物信息学方法分别以黄曲霉（Aspergillus flavus）、寄生曲霉（Aspergillus parasitieus）、米曲霉（Aspergillus oryzae）、酱油曲霉（Aspergillus sojae）的黄曲霉毒素合成基因簇中的关键调控基因aflR及其启动子序列为研究对象,采用PCR-RFLP方法对黄曲霉毒素可能产生菌株进行鉴别分析研究;为进一步验证PCR-RFLP方法对产毒菌株区分结果,利用大豆培养基对上述菌株进行发酵培养,并利用HPLC方法测定了菌株产毒能力。【结果】生物信息学分析结果表明黄曲霉毒素可能产生菌株的aflR高度同源, 但启动子和结构基因的部分碱基出现了规律性变异,并导致了限制性酶切图谱中的NheⅠ、PvuⅡ和HincⅡ等限制性酶切位点的改变;通过提取各菌株基因组DNA,PCR扩增得到aflR和启动子序列片段,测序得知片段长度分别为798 bp和 515bp;PCR-RFLP鉴定结果表明产生黄曲霉毒素菌株的aflR启动子片段经NheⅠ酶切后得到176 bp和339 bp 2个片段,不产毒菌株无该限制性酶切位点;试验进一步对黄曲霉菌和寄生曲霉菌aflR结构基因的分析发现,利用HincⅡ分别处理黄曲霉和寄生曲霉的aflR的结构基因,可以分别得到3个片段（387、250和161 bp）和2个片段（548、250 bp）;利用PvuⅡ分别处理黄曲霉和寄生曲霉的aflR结构基因,可以分别得到2个片段（652、146 bp）和3个片段（413、239和146 bp）;产毒试验表明,米曲霉菌和酱油曲霉菌不产生黄曲霉毒素,PCR-RFLP分析表明不产毒的黄曲霉菌的确丧失了产生黄曲霉毒素的能力;产生黄曲霉毒素各曲霉菌株之间产毒能力差异显著,不但产生的黄曲霉毒素总量高低相差几十倍,其产生的黄曲霉毒素组分也不尽相同。【结论】本研究阐明了在可能产生黄曲霉毒素关键基因aflR序列中存在的差异,通过PCR-RFLP方法快速鉴别黄曲霉菌株产毒与否,并且对黄曲霉和寄生曲霉两种曲霉进行了区分。黄曲霉毒素产生菌株鉴定方法的开发,将为粮油食品安全检测和质量控制,粮食食品生产过程的质量安全控制与监测提供基于分子水平的新型技术。     

1株海洋芽孢杆菌抑制黄曲霉生长和毒素合成的研究

采用滤纸片扩散法从海洋中分离筛选出1株抑制黄曲霉活性高的微生物,利用16S rDNA特异性扩增技术对其菌种进行鉴定,并研究其对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和毒素合成的影响,用Beacon黄曲霉毒素检测试剂盒测定黄曲霉毒素含量.结果表明:该菌株为一株海洋巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),其菌体对黄曲霉菌丝延长、孢子萌发和黄曲霉毒素生物合成都有明显地抑制作用,1×109CFU·mL-1菌体对黄曲霉孢子萌发的抑制率达87%,1×108CFU·mL-1菌体对黄曲霉毒素合成的抑制率可达50.75%.初步认为其抑制机制是该海洋巨大芽孢杆菌可产生某种次级代谢产物来抑制黄曲霉孢子萌发和菌丝延长.     

香菇菌丝的液体发酵碳源与多糖产量研究

[目的]研究香菇菌丝液体发酵碳源对香菇多糖产量的影响。[方法]以葡萄糖、淀粉和蔗糖作碳源,苯酚-硫酸法测定多糖,柱层析分离多糖,采用正交设计法对香菇真菌发酵的碳源进行研究。[结果]香菇真菌发酵生产香菇多糖的最佳碳源为6%葡萄糖,4%淀粉,2%蔗糖。淀粉对香菇多糖的产量有显著影响。对比试验发现,添加淀粉作碳源有利于香菇菌丝生长发育和多糖的积累。葡萄糖浓度与吸光度A490nm间存在极显著的线性关系。红外光谱分析显示,香菇菌丝发酵获得的香菇多糖为吡喃型的β-D-葡聚糖,纯化后与由子实体获得的香菇多糖没有本质的不同,但产量不高。[结论]香菇菌丝在富营养化条件下可以积累香菇多糖。该研究对香菇多糖的发酵生产具有一定的指导意义。     

花生收获前黄曲霉污染调查

于１９９７年夏季在花生收获前,采集了福建省花生主产区的漳浦,同时,晋江,惠安,福清等县的田间花生果荚样品。从这些样品中分离了１７３个黄曲霉菌株,并测定其产毒性,产毒菌株率为６２．４％,其中高毒菌株率为４．６％。各生产市,县的花生籽粒在收获前均受到黄曲霉不同程度的感染,田间平均感染率为６．１％,惠安,晋江两县较重,田间感染率分别为８．６％和８．５％。花生田土壤中的黄曲霉菌量为１００－２２００个／ｇ。     

黄曲霉侵染茶树籽产黄曲霉毒素的研究

以茶树籽为原料,真空冷冻干燥后粉碎并喷无菌水,使含水量分别为10%、15%、20%,人工接种产毒黄曲霉(Aspergillus flavus )ACCC30899,置于生化培养箱,观察产毒黄曲霉的生长状况;采用液相色谱串联质谱法分别于黄曲霉侵染7、14、21 d、含水量大于15%的茶树籽所产黄曲霉毒素组分进行测定。结果表明：茶树籽粉末含水量高于10%时黄曲霉可生长;茶树籽粉末含水量大于15%时黄曲霉生长状态良好,黄曲霉毒素组分测定值均低于检测下限(0.03 μg/kg),提示在产毒黄曲霉侵染含水量大于15%的茶树籽,产黄曲霉毒素的风险较小。     

花生生产必须严控黄曲霉污染

黄曲霉毒素是黄曲霉菌侵染花生、玉米等作物后产生的有毒代谢物,目前已知的重要致癌物之一。由于种植者和加工者对黄曲霉毒素污染的危害性重视不够,致使我国出口花生出现黄曲霉毒素超标问题,退货现象时有发生,已成为我国花生生产和出口的重要问题和难题之一。研究表明,黄曲霉毒     

液体深层发酵香菇抑菌活性研究

[目的]研究液体发酵香菇的抑菌活性及其抑菌稳定性。[方法]采用杯碟法测定香菇胞外发酵液和胞内提取液对常见致病菌的抑菌效果及抑菌稳定性。[结果]香菇胞外发酵液的抑菌效果强于其胞内提取液,其对黄曲霉的抑菌能力最强。稳定性研究结果表明,高温对其抑菌活性几乎没有影响,pH3.5～5.5时抑菌效果最好,偏碱性环境不利于其抑菌性能的发挥。[结论]为更好地开发香菇相关产品提供理论基础。     

花粉生物破壁法的研究

采用米曲霉、酵母、平菇、香菇4种微生物对混合花粉进行生物发酵破壁研究。结果表明,其破壁率分别为:米曲霉89.3%、酵母61.5%、平菇90.9%、香菇58.8%;平菇与香菇的发酵提取液风味较好,米曲霉发酵提取液有明显酱色与酱味,风味最差;可溶成分含量,米曲霉最高,平菇其次,香菇最差。     

香菇栽培配方优选试验研究

利用贵港市丰富的农业废弃资源作为香菇栽培的主要培养料,通过研究不同的栽培配方试验,筛选出适合当地香菇生产的优质配方,以提高香菇的品质和增加香菇的产量。结果表明：配方④（纯木屑30％、棉籽壳10％、玉米芯25％、麸皮24％、石膏1％）在香菇栽培过程中有较明显的优势,是适合当地香菇生产的优质配方,可为当地种植户种植提供参考。     

香菇·平菇·金针菇多糖提取技术研究

以子实体及菌丝体为试材对香菇、平菇及金针菇进行多糖提取技术研究。子实体按照粗品制备、半精品纯化、胃蛋白酶解3个步骤提取多糖。100g香菇、平菇及金针菇子实体中纯多糖平均提取量分别为15.0、7.8和26.6mg,并用咔唑反应、纸层析法对其进行鉴定。50g香菇、金针菇菌丝中多糖的平均提取量分别为15.2和20.4mg。对2个品种多糖提取率进行比较,结果表明:菌种液体培养提取多糖产量大且以金针菇最佳。采用子实体及液体培养菌丝提取多糖方法是有效的,且菌丝液体培养提取多糖产量高于子实体提取多糖产量。     

食用菌多糖对植物病毒抑制作用的初步研究

利用食用菌平菇(Pleurotus ostreatus)、金针菇(Flammulina velutipes)和香菇(Lentinus edodes)中提取的多糖,在寄主苋色藜上分别对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)进行抑制作用试验.结果表明,在不同浓度多糖的寄主上,3种食用菌多糖对TMV和CMV都有明显的抑制作用.在不同浓度多糖的寄主之间的作用效果没有显著的差异性;在抑制和钝化作用方面,不同的食用菌多糖之间存在显著的差异性,而在治疗作用方面差异性不显著.其中平菇多糖对TMV和CMV的抑制作用显著优于金针菇和香菇多糖.     

食用菌对山杨木质素及纤维素的降解

选择了10个对杨树木质素和纤维素有降解能力的菌种:榆黄蘑、香菇、金针菇、木耳、裂褶菌、平菇、茶树菇、杏鲍菇、柳蘑、蟹味菇,测定了能在培养基2上生长的9个菌株的降解木质素和纤维素快慢的先后顺序。用9种食用真菌(除蟹味菇外)对木材的木质素和纤维素降解一定时期后,测定了木质素和纤维素质量分数的变化数据,研究了它们对山杨木材木质素的分解能力。结果得出:裂褶菌先降解纤维素,其余的8种菌株均先降解木质素;降解的快慢与降解率无关;香菇、平菇对山杨的木质素降解率和纤维素降解率均比较高,为降解山杨木质素和纤维素的最佳菌株。     

香菇病毒对香菇菌丝生长和漆酶活性的影响

利用电镜观察检测到不正常生长的香菇菌丝中存在大量直径约30 nm的球状病毒,进一步酶解和电泳检测确定病毒的核酸为单链RNA。采用尖端生长点传代技术,经过3代传代,得到不含病毒的香菇菌株,该菌株在固体和液体培养基中的生长速度都远远高于带有病毒的菌株。脱除病毒的菌株在液体发酵中产漆酶的量也明显高于带有病毒的菌株,说明该香菇病毒对香菇的生长和产酶生理过程有明显的抑制作用。     

香菇子实体蛋白多糖Le-Ⅲ的分离、纯化及其性质研究

香菇子实体经热水提取,乙醇沉淀,脱蛋白,ＤＥＡＥ纤维素柱及纤维素凝胶柱层析得到淡黄色纤维状疏松固体Ｌｅ－Ⅲ,Ｌｅ－Ⅲ经聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ柱层分析,证明了分子量分布均一的多糖－蛋白质复合物。Ｌｅ－Ⅲ红外扫描有典型的多糖吸收峰,气相色谱测单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,摩尔比０．３１：０．４７：１．００：１．１５：８．９２。     

香菇药用成分及其抗肿瘤作用的研究进展

香菇是世界上著名的食用真菌之一,其含有多种对身体有益的成分。对香菇多糖抗肿瘤的免疫调节机制及临床应用做了详细的介绍,并对香菇中的其他成分如水溶性香菇胞外多糖、香菇发酵液、香菇蛋白、香菇水提取液、香菇嘌呤和核酸等抗肿瘤作用做了分析。