Bluetongue Virus （BTV） Serological Survey and Evidence of Emergent BTV-8 Serotype in Morocco

Bluetongue （BT） is an infectious, non-contagious arthropod-borne disease that infects all ruminants, including sheep, cattle, deer, goats and camelids. Bluetongue virus （BTV） belonged to Reoviridae is ARN genome of 19 Kb. Twenty-six BTV serotypes have long been recognized, to be associated with severe disease in certain breeds of sheep, whereas cattle and goats are usually sub-clinically affected. Before 2004, BT was considered an exotic disease in Morocco, however, the first outbreak was observed in 2004 in sheep. This outbreak was caused by the isolated BTV-4. Two years later a BTV-1 emerged in Morocco. Both serotype 1 and serotype 4 circulated after 2007 across the country. The aims of the present work was to perform a serological study on sheep from different regions in Morocco in order to clarify the current BTV epidemiological situation and its evolution from 2009 to 2012, to determine the co-infection rate, and to confirm the possible circulation of other BTV Serotype mainly the BTV-8. All of 436 sera were tested by serum neutralization using reference strains. Results confirm the presence of BTV-4, BTV-1 and BTV-8. However, the present study report for the first time the emerging BTV-8 circulation in Morocco. Moreover, the founding reveal as well a higher co-infection rate in cattle compared to sheep.     

用斑马鱼检测猪链球菌2型的致病力

 【目的】猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2，SS2）菌株致病力各异，以斑马鱼为实验动物，建立了较为简便可靠的SS2致病力检测方法。【方法】选用1 005尾AB系斑马鱼（Danio rerio）以检测SS2不同分离株的致病力。检测8株基因型均为mrp+ef+、对猪有致病力的SS2菌株。【结果】结果斑马鱼接种菌株12 h后呈败血症病变，96 h内对斑马鱼的半数致死量（LD50）在5.36×103至5.01×104 cfu之间。上述接种菌株的斑马鱼均从体内重新分离到接种菌。同时检测1株基因型为mrp-ef-、对猪无致病力的SS2菌株，斑马鱼接种后96 h内不表现任何病变，亦不出现死亡，对斑马鱼的LD50>106 cfu。SS2有毒力株和无毒力株对斑马鱼的LD50差异极显著（P＜0.01）。【结论】斑马鱼可作为研究猪链球菌2型菌株感染的动物模型。     

2009-2011年市售商品化猪流行性乙型脑炎弱毒活疫苗的质量评估

为了解目前市售商品化猪流行性乙型脑炎弱毒活疫苗的质量,利用TCID50效价测定和RT-PCR 2种方法对2009-2011年市场销售的主要国产疫苗产品进行了检测。结果发现,目前市售的疫苗产品中活病毒含量差异较大,虽然部分产品可达103.80 TCID50/头份,但有些产品含量极低。RT-PCR检测结果与TCID50效价测定的结果基本一致。这表明目前市售的乙脑疫苗质量良莠不齐,部分疫苗的抗原含量可能难以满足生产要求,这为规模化猪场乙脑防控的疫苗选择提供了重要参考依据。     

灭虫净2~#药效试验研究

施用灭虫净2#,选择鲢鱼鱼种进行半致死浓度(LD50)的试验,草鱼鱼种进行车轮虫病治疗试验。试验结果表明:鲢鱼鱼种半致死浓度(LD50)的95%可信限为0.1698~0.1795 mL/m3;草鱼鱼种车轮虫病的适宜治疗剂量为0.22 mL/m3。     

育成公鸭硝基苯急性毒性试验

本试验采用Weil′s平移法对金定育成公鸭进行硝基苯(NB)急性毒性试验。结果表明,NB对公鸭的经口急性中毒半数致死量(LD50)为447.20mg·kg-1BW,其可信区间为210.09-951.92mg·kg-1BW。急性中毒公鸭主要表现神经症状,剖检变化以腺胃胃壁增厚、黏膜脱落及肠道充血较明显。说明NB对公鸭具有较强的急性毒性作用。     

西地碘粉的急性毒性研究

[目的]研究西地碘粉对小鼠的经口急性毒性。[方法]选用清洁级ICR小鼠60只,采用寇氏法进行急性毒性试验,观察小鼠西地碘粉急性中毒症状,并测定西地碘粉经口给药对小鼠的LD_(50)。[结果]小鼠经口给药后的急性中毒症状主要包括:给药后15 min,高剂量组小鼠出现精神沉郁,被毛粗乱无光,并逐渐转入抑制,反应迟钝、不食、麻痹。0.5~1.0 h后有小鼠出现呼吸困难,伴随脖颈伸直、食欲废绝;3 h后开始出现死亡,小鼠死亡前出现惊厥、抽搐、震颤等神经症状。急性死亡发生于给药后3~24 h。中毒死亡后剖检发现中毒症状主要表现为对肝脏的损伤,其次是肺和心脏。根据各剂量组死亡率,计算出西地碘粉对小鼠的急性经口LD_(50)为4 972.75 mg/kg.,其LD_(50)95%可信限为4 382.77~5 642.16 mg/kg。[结论]西地碘粉对小鼠的经口LD_(50)介于501~5 000 mg/kg,属于低毒性药物。     

炎毒热清及其微乳制剂小鼠急性毒性试验和体外抑菌作用

[目的]为评价炎毒热清(AEE)及其微乳制剂(AEE-ME)的安全性和抑菌活性。[方法]用灌胃法对小鼠进行急性毒性试验,并采用改良寇氏法计算半数致死量及其95%可信区间;采用杯碟法研究抑菌作用。[结果]AEE经小鼠口服LD50为10.937 g/kg,95%可信区间为9.309~12.850 g/kg;AEE-ME经小鼠口服LD50为5.357 g/kg,95%可信区间为4.388~6.566 g/kg。AEE对猪大肠杆菌O149、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌、无乳链球菌的MIC分别为10.00、20.00、20.00、10.00 mg/ml;AEE-ME对上述4种菌的MIC依次为5.00、10.00、5.00、5.00 mg/ml,对绿脓杆菌的MIC为20.00 mg/ml。[结论]AEE属实际无毒性物质,AEE-ME为低毒性物质,二者均有抑菌活性且AEE-ME抑菌作用强于AEE。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3毒力的进一步研究

通过Reed-Muench法检测从江西发生持续高热的病猪体内分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失株Jiangxi-3第9代(Jiangxi-3 F9)的病毒滴度;将此毒株接种于PRRSV和猪圆环病毒2型(PCV2)抗原与抗体均为阴性的60日龄健康猪进行猪半数致死量(LD50)的测定,并且对LD50试验中存活下来的试验猪再次进行较大剂量的攻毒试验,另将病毒接种于PRRSV和PCV2抗原和抗体均为阴性的6月龄健康猪,对所有攻毒试验猪通过体温检测、临床症状观察、RT-PCR、ELISA等方法进一步研究Jiangxi-3 F9的毒力.结果表明:Jiangxi-3 F9的病毒滴度为105.25 TCID50·mL-1,Jiangxi-3 F9病毒的LD50为1022·mL-1.动物试验各项检测结果说明Jiangxi-3 F9毒力强.     

微粉化对马钱子小鼠的急性毒性的影响

目的观察马钱子粗粉及其超微粉分别对雄性、雌性昆明小鼠的急性毒性反应,考察微粉化对其毒性的影响。方法一次性分别灌胃给予雄性、雌性昆明小鼠不同剂量的马钱子超微粉或粗粉,观察急性毒性反应,记录死亡潜伏期,用序贯法计算LD50及其95%可信限。结果马钱子超微粉雄性小鼠LD50为194.7 mg/kg,95%可信区间为208.7～180.7 mg/kg,马钱子超微粉雌性小鼠LD50为163.0 mg/kg,95%可信区间为198.2～127.8 mg/kg;马钱子粗粉雄性小鼠LD50为295.7 mg/kg,95%可信区间为331.7～259.7 mg/kg,马钱子粗粉雌性小鼠LD50为271.8 mg/kg,95%可信区间为323.7～219.9 mg/kg;粗粉的死亡潜伏期长于超微粉,而雄性动物的死亡潜伏期也长于雌性。结论马钱子超微粉及其粗粉对小鼠的毒性反应相似,其急性毒性存在量时效关系,但马钱子超微粉比粗粉的毒性大,临床应用马钱子超微粉应减少用量。     

牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

[目的]为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定.[方法]将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2～4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方法扩增分离株的5'UTR基因片段并克隆测序分析.[结果]分离到的8 株病毒可发生细胞病变,在MDBK细胞上的TCID50为103～106.毒株血清中和实验结果,RT-PCR反应结果,克隆后重组质粒经BamH I、Hind III双酶切鉴定、重组质粒PCR鉴定结果均得到预计扩增片段.重组质粒测序结果与GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒NADL株序列同源性为82.0;～94.8;.[结论]证实所分离到的病毒为BVDV,命名为B-S-1、B-S-2、B-S-3、B-S-4、B-S-5、B-S-6、B-G-1和B-G-2.     

炎毒热清及其微乳制剂小鼠急性毒性试验和体外抑菌作用(英文)

[Objective] The aim of this study is to evaluate the safety and bacteriostasis of Yandureqing(AEE)and its microemulsion(AEE-ME).[Method]The acute toxicity was tested in mice by intragastric administration,and median lethal dose(LD50)as well as its 95% confidence interval was calculated by modified Karber method;the bacteriostasis was investigated by cylinder plate method.[Result]LD50 of AEE in mice was 10.937 g/kg with the 95% confidence interval of 9.309-12.850 g/kg;and LD50 of AEE-ME in mice was 5.357 g/kg with the 95% confidence interval of 4.388-6.566 g/kg.The MICs of AEE to Escherichia coli O149 from swine,Staphylococcus aureus,Salmonella pullorum and Streptococcus agalactiae were 10.00,20.00,20.00 and 10.00 mg/ml,respectively;while the MICs of AEE-ME to the 4 kinds of bacteria mentioned above were 5.00,10.00,5.00 and 5.00 mg/ml in turn,and that to Pseudomonas aeruginosa is 20.00 mg/ml.[Conclusion]AEE is an actually nontoxic drug and AEE-ME belongs to the low toxic preparation.AEE and AEE-ME have obvious bacteriostasis,in which AEE-ME is superior to AEE.     

兽药新制剂促反刍LD50和安全性试验

对兽药新制剂促反刍注射液(CFC)进行了急性毒性试验、局部刺激试验和过敏性试验。用90只小白鼠按点斜法试验设计,以剂间比为1:0.8的7个剂量组测得CFC腹腔注射的LD_(50)为35.05mL/kg,95％置信区为31.2～39.39 mL/kg,相当于制剂主药总量5054～6389mg/g符合化学物质分级低毒级标准。证明CFC为低毒药物,无过敏性,比较安全。因此有轻度刺激性,适于静脉注射。     

氟哌酸对鸡胚和雏鸡毒性的观察

本文对10日龄鸡胚采用尿囊腔注射和3日龄雏鸡采用经口服一次给药的方法,观察了氟哌酸的急性毒性。结果表明,氟哌酸对鸡胚的最小致死剂量为320mg/kg胚重;对3日龄雏鸡的LD_(50)为4985±753.18mg/kg体重。对雏鸡的毒性主要表现为严重的胃肠道反应和中枢神经症状。蓄积毒性试验表明,本品无明显蓄积毒性,不影响雏鸡增重,未见其它不良反应。     

Molecular Diversity and Association Analysis of Drought and Salt Tolerance in Gossypium hirsutum L. Germplasm

Association mapping is a useful tool for the detection of genes selected during plant domestication based on their linkage disequilibrium（LD）. This study was carried out to estimate genetic diversity, population structure and the extent of LD to develop an association framework in order to identify genetic variations associated with drought and salt tolerance traits. 106 microsatellite marker primer pairs were used in 323 Gossypium hirsutum germplasms which were grown in the drought shed and salt pond for evaluation. Polymorphism（PIC=0.53） was found, and three groups were detected（K=3） with the second likelihood ΔK using STRUCTURE software. LD decay rates were estimated to be 13-15 cM at r2 0.20. Significant associations between polymorphic markers and drought and salt tolerance traits were observed using the general linear model（GLM） and mixed linear model（MLM）（P 0.01）. The results also demonstrated that association mapping within the population structure as well as stratification existing in cotton germplasm resources could complement and enhance quantitative trait loci（QTLs） information for marker-assisted selection.     

辛硫磷及毒死蜱对中华稻蝗的毒力研究

本文采用点滴法分别测定了辛硫磷和毒死蜱对中华稻蝗5龄若虫的毒力,做出了毒力回归曲线并得到毒力回归方程及LD50值。辛硫磷的毒力回归方程为Y=2.79X-6.07,LD50=1.96μg/g虫重,毒死蜱的毒力回归方程为Y=2.86X-7.01,LD50=3.69μg/g虫重。比较两种农药的毒力回归方程、LD50值和95%置信区间,结果表明辛硫磷对中华稻蝗5龄若虫的药效较毒死蜱强。     

传染性法氏囊病病毒变异株二价弱毒疫苗的研究

选用传染性法氏囊病病毒变异株JD1、NB、HZ1弱毒株配制成JN（JD1+NB毒株组成）和JH（JD1+HZ1毒株组成）两种二价弱毒疫苗。分别在14日龄首免和28日龄二免SPF鸡,并于一免后14 d、21 d,二免后12 d分别用强毒株传染性法氏囊病病毒（IBDV）BC6/85株攻击;同时观察疫苗的安全性。结果表明JN和JH疫苗均能诱导SPF免疫鸡产生优良的免疫应答反应,并能使免疫鸡对IBDV-BC6/85株的攻击产生100%的保护。JN和JH疫苗的最佳免疫剂量分别为6 000 TCID₅₀和10 000 TCID₅₀。     

3种重金属离子对中华鳑鲏鱼的急性毒性及安全浓度研究

[目的]找出Hg^2＋、Cu^2＋和Cd^2＋3种重金属离子对中华鳑鲏鱼（Rhodens sinensis Gunther）的急性毒性效应和安全浓度。[方法]采用静水生物法研究了Hg^2＋、Cu^2＋和Cd^2＋对中华鳑鲏鱼的急性毒性作用,采用概率单位-对数图解法计算了3种重金属离子对中华鳑鲏鱼24、48、72、96h的半致死质量浓度（LC50）。[结果]Hg^2＋和Cu^2＋对中华鳑鲏鱼的毒性较强;Cd^2＋对中华鳑鲏鱼的毒性相对较弱。3种金属离子的毒性大小顺序为：Hg^2＋〉Cu^2＋〉Cd^2＋,它们对中华鳑鲏鱼24h的LC50分别为0.222、0.344和10.360mg/L,48h的LC50分别为0.215、0.279和8.820mg/L,72h的LC50分别为0.204、0.256和7.910mg/L,96h的LC50分别为0.193、0.236和7.270mg/L,安全浓度分别为0.00193、0.00236和0.07270mg/L。[结论]中华鳑鲏鱼对Cd^2＋有较强的耐受力,对Cu^2＋比较敏感。     

磺胺喹噁啉对小鼠的急性毒性试验

研究了磺胺喹噁啉对小鼠的急性毒性作用。采用改良寇氏法测定小鼠口服磺胺喹噁啉的LD50。将小鼠随机分为5组,分别灌服不同剂量的磺胺喹噁啉和生理盐水。观察小鼠灌服不同剂量磺胺喹噁啉后的临床症状以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬活性,测定脏器指数。结果表明,磺胺喹噁啉对小鼠口服的LD50为4889.90 mg/kg,95%可信限为5471.71~4308.09 mg/kg。磺胺喹噁啉中毒后,小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力降低,心脏指数和脾脏指数降低,肝脏指数和肾脏指数升高。主要病理变化为心脏色泽暗淡,心肌纤维肿胀;肝脏和肾脏明显肿大,肾小管上皮细胞肿胀变性,部分肾小管上皮细胞破裂;脾脏肿大,脾小体萎缩,淋巴细胞减少。研究结果说明,小鼠磺胺喹噁啉中毒后,非特异性免疫功能活性降低,心脏、肝脏、脾脏和肾脏等主要器官都受到一定程度的损害。     

表达猪2型圆环病毒ORF2蛋白的重组伪狂犬病毒的生物学特性研究

为了探讨重组伪狂犬病毒TK-/gG-/ORF2 作为疫苗候选株的潜在价值,对该病毒的增殖特性、遗传稳定性、安全性、免疫原性及保护力进行了研究.结果表明:重组病毒的增殖滴度与亲本株相当,遗传稳定性良好,以100倍的免疫剂量接种小鼠时对小鼠是安全的;重组病毒在免疫小鼠后可诱导小鼠产生针对PRV和PCV2的特异性免疫应答,并且对致死剂量(100LD50)PRV Ea株强毒的攻击具有100%的免疫保护效果.     

亚硒酸钠对小鼠的半数致死量测定

研究亚硒酸钠对小鼠的急性毒性作用和半数致死量(LD50)。给70只小鼠分别以2.77、4.3、6.67、10.3、16和24.8 mg.kg-1剂量的亚硒酸钠溶液一次性灌胃,对照组以相同剂量的蒸馏水灌胃,观察7d内小鼠的毒性反应和死亡情况,以改良寇氏法计算LD50,并观察毒性作用。结果表明,亚硒酸钠对小鼠的LD50为10.8 mg.kg-1,其95%可信限为9.0~13.0 mg.kg-1。进而说明,亚硒酸钠有一定的毒性,需要进行毒理学研究,临床应用时应考虑其安全用量。