颠茄高频再生体系的建立及卡那霉素抗性筛选（摘要）

[目的]建立颠茄高频再生体系及筛选卡那霉素（Kan）抗性。[方法]以颠茄叶片及腋芽为外植体,研究了培养基中6-BA和NAA不同配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽对Kan的敏感性。[结果]MS＋4.5mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA为叶片不定芽分化的最佳培养基,不定芽分化率达100%,在1.0cm×1.0cm叶块上的不定芽分化数平均达5.85;MS＋3.0mg/L6-BA＋0.1mg/LNAA为腋芽不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100%,每个腋芽不定芽分化平均数为4～8个;400.0mg/LKan为颠茄叶片遗传转化的最佳筛选浓度。[结论]为颠茄无菌苗的快速繁殖以及基于叶盘法的遗传转化奠定了基础。     

红掌组织培养中不定芽诱导和增殖的研究

[目的]研究红掌组培中不定芽诱导和增殖的最佳培养基。[方法]对不同浓度MS培养基、不同浓度细胞分裂素6-BA、不同浓度生长素NAA和IBA对红掌组织培养中不定芽诱导和增殖的影响进行研究。[结果]MS培养基对红掌不定芽诱导效果最好,分化率为85.96%,增殖系数为4.12;1.0 mg/L 6-BA为红掌不定芽诱导和增殖的最佳浓度,分化率为96.30%,增殖系数为6.67;0.3 mg/L IBA为红掌不定芽诱导的最佳生长素浓度,诱导率为96.31%。[结论]红掌组培中不定芽诱导和增殖最佳配比为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA0.3 mg/L。     

红掌组培快繁技术优化研究

[目的]对红掌组培快繁技术体系进行优化。[方法]以红掌红粉佳人品种为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究红掌的不定芽诱导、增殖和生根等情况,以筛选出最佳的培养配方和方法。[结果]最佳愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其愈伤组织诱导率为73.3%,不定芽分化率为90.9%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L上诱导出的芽数量与大小最适宜;生根培养以1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.0 g/L培养基表现最好;移栽基质以珍珠岩+草炭土(1∶1)混合栽培基质成活率最高,达95.6%。[结论]为红掌种苗的工厂化生产提供了参考。     

乌药的离体培养和植株再生研究

[目的]为乌药的规模化人工育苗提供理论依据。[方法]以乌药植物当年生健壮枝条为外植体,研究不同激素种类及浓度对其不定芽的诱导及生根的影响,筛选出最佳培养基。[结果]适宜于乌药组织培养的最佳外植体取材时间为6~7月,以当年生带芽茎段的嫩枝为最适宜;2.5 mg/L 6-BA是乌药不定芽增殖时最有效的浓度;诱导乌药外植体不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2 mg/L;乌药苗在增殖过程中的继代周期以40~50 d为宜;最佳壮苗培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L,生根率98%~100%。[结论]采用合适的外植体以及激素种类与浓度为最佳配比的培养基可使传统的中药材乌药植物成功地诱导不定芽的分化、生根与再生。     

中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。     

红叶石楠快繁条件优化

[目的]为了优化红叶石楠的快繁条件。[方法]通过L16(43)正交试验,配置不同基础培养基、不同植物激素种类及水平对红叶石楠不定芽进行增殖培养。[结果]不同因素影响红叶石楠快繁的大小顺序为:基础培养基>6-BA>NAA。B5培养基为最佳培养基。6-BA浓度为1.0～2.0mg/L时不定芽数变化不明显;6-BA浓度为2.0～4.0mg/L时不定芽数随浓度的提高显著增加,在浓度为4.0mg/L时最多,平均增殖系数达到22.38,继续增加6-BA浓度到8.0mg/L时不定芽数则明显减少。NAA浓度为0.05～0.20mg/L时不定芽数随NAA浓度的提高而增加,在浓度为0.20mg/L时平均增殖系数最高,达到20.25;当NAA浓度从0.20mg/L逐渐增加到0.40mg/L时不定芽数呈下降趋势。因此确定最优水平组合为B5+6-BA4.0mg/L+NAA0.20mg/L。[结论]该方法可快速优化红叶石楠的快繁条件,有效提高红叶石楠的增殖效率。     

辣根茎尖的组织培养

[目的]研究辣根茎尖组织培养,为其优良品种的快速繁殖提供新途径。[方法]分别就不同消毒时间对茎尖接种污染率的影响、不同激素配比的培养基对茎尖出愈率、分化率的影响、不同激素浓度对不定芽生根的影响进行了探讨分析。[结果]酒精消毒时间为35 s时外植体污染率和褐化率均较低;MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA培养基对茎尖形成愈伤组织的诱导率较高,为82.3%;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基诱导茎尖分化率较高,达80%;MS+0.2 mg/L Kt培养基适合辣根不定芽的继代繁殖;MS+0.1 mg/L NAA为辣根不定芽生根培养基。[结论]该研究结果为辣根茎尖的组织培养提供了试验基础,为其优良品种的快速繁殖奠定了基础。     

宜兴百合鳞茎不定芽的诱导及增殖

以宜兴百合(Lilium lancifalium Thunb.)鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,并通过正交设计增殖鳞茎不定芽.结果在MS+1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA培养基上,鳞片以直接发生方式形成了鳞茎不定芽,诱导率为100％,平均不定芽数为5.5.6-BA浓度在0.4～1.2 mg/L范围内,鳞茎不定芽的增殖率随6-BA浓度的升高而增大,在MS+1.2 mg/L 6-BA +0.2 mg/L IAA +0.1 mg/L NAA培养基上,不定芽的增殖系数为3.83,不定芽在1/2MS+1.0 mg/L NAA培养基上生根良好.     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

番茄与茄子嫁接接合部愈伤组织分化与植株再生

以番茄为砧木,茄子为接穗进行嫁接,通过外力去除接穗,使嫁接接合部愈伤组织分化出不定芽,分化率为54.55%,从形态上观察,部分不定芽产生了变异,变异率为9.09%;将嫁接接合部愈伤组织接种在MS 1.0mg/L6-BA 2.0 mg/L ZT 0.1 mg/L NAA和MS 2.0 mg/L6-BA 0.2 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA的2种培养基上,愈伤组织分化率最高为60.00%,在MS 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L ZT 0.2 mg/L IAA和MS 2.0mg/L6-BA 0.2 mg/L IAA 0.1 mg/L NAA2种培养基上分化的芽出现变异,变异率为3.33%。     

蓝堇草离体快繁和植株再生研究

[目的]为蓝堇草的引种栽培和转基因研究建立平台。[方法]研究了外植体类型、植物生长调节剂类型及浓度配比对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。[结论]以叶片为外植体,在MS＋6-BA0.5mg/L＋IBA3.0mg/L培养基上进行愈伤组织的诱导,并将愈伤组织转接到MS＋6-BA0.5mg/L＋IBA1.0mg/L培养基上诱导不定芽的分化效果最好。     

大丁草愈伤组织及试管苗培养的研究

[目的]研究大丁草愈伤组织及试管苗的培养条件。[方法]以大丁草花柄为外植体,采用组织培养方法,进行愈伤组织诱导和分化培养、不定芽的继代分化增殖培养以及试管苗生根培养、移栽和定植的研究。[结果]花柄愈伤组织诱导培养的理想培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化培养和不定芽继代分化增殖培养的的理想培养基为MS+0.8 mg/L AgNO3+0.1 mg/LNAA+1.2 mg/L6-B;将继代分化增殖培养不定芽用浓度为1.2 mg/L IAA溶液处理24 h,再接种到1/2MS+0.1 mg/L NAA的培养基上进行生根培养的方法,是不定芽生根培养的理想方法;试管苗移栽成活率为92.8%,定植成活率为97.7%。[结论]定植成活的试管苗保持了野生大丁草的所有植物学特征,且生长旺盛,可用于进行培养繁殖。     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

延龄草愈伤组织的诱导及植株再生

[目的]建立延龄草愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系。[方法]以延龄草块根、根尖为外植体,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究植物生长调节剂对延龄草愈伤组织形成、增殖和分化的影响。[结果]1/2MS是最适合延龄草块根、根尖诱导愈伤的培养基,添加6-BA 1.2 mg/L和IAA 0.6 mg/L的1/2MS培养基最适合于愈伤组织的诱导,其中以根尖愈伤组织的诱导效果最好,在添加6-BA 0.5 mg/L、IAA 0.6 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高,附加6-BA 1.2 mg/L、IAA 1.0 mg/L的1/2MS培养基为生根适宜培养基。[结论]延龄草的块茎和根尖外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

OT型百合品种黄天霸花器官组培快繁体系的建立

[目的]研究OT型百合品种黄天霸花器官的离体培养快速繁殖技术,为其种球产业化生产提供技术支持.[方法]以黄天霸花蕾和半开花的不同部位为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同外植体的愈伤组织诱导效果、0～3.0 mg/L6-BA对外植体愈伤组织分化、1.0～3.0 mg/L 6-BA＋0～0.2 mg/L NAA组合对叶片不定芽诱导、30.0～80.0 mg/L蔗糖对鳞茎形成及生根的影响,调查不同基质对组培苗移栽种植的效果.[结果]花蕾和半开花不同部位愈伤组织诱导从易到难表现为：子房＞柱头＞花药＞花托＞花丝、花瓣,子房和柱头的愈伤组织诱导率均超过50.0％.在MS培养基中,随着6-BA用量的增加（0～3.0 mg/L）,外植体愈伤组织分化率先提高后稍有下降,适宜分化培养基为MS＋ 2.5 mg/L 6-BA.在不同6-BA和NAA组合中,以培养基MS＋3.0 mg/L 6-BA的无菌叶片不定芽诱导效果较优.添加60.0 g/L蔗糖的MS培养基利于不定芽结鳞茎生根;带鳞茎组培苗移栽于大田菜园土即可成活.[结论]成功建立的OT型百合品种黄天霸花器官离体快速繁殖体系可用于其种球工厂化生产,扩大规模化种植.     

草莓花药组织培养脱毒快繁技术研究

[目的]研究草莓花药组织培养的脱毒快繁技术,实现草莓无病毒栽培。[方法]在基本培养基中分别添加0.5、1.0、1.5、2.0mg/L的6-BA和KT,研究不同激素浓度对不同发育期的草莓花药愈伤组织诱导和不定芽的诱导、增殖的影响。[结果]单核期花药的诱导率高达78.9%,单核靠边期或接近双核期花药的诱导率只有21.1%。6-BA和KT为2.0mg/L时,愈伤组织的生长状况均最好,细胞间联系致密,表面突起更多、更紧。草莓花药在6-BA中比KT分化出的愈伤组织多。6-BA1.5mg/L的培养基愈伤组织分化率最高,诱导丛芽的效果最好,丛芽多而健壮,丛芽发生率达112.6%,增殖系数达1.95。[结论]6-BA比KT更适合诱导草莓花药愈伤组织。草莓花药愈伤组织的诱导、不定芽的诱导和增殖最适合的培养基均是MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L。     

海南龙血树离体快繁的研究

[目的]加强龙血树组织培养的再生体系,为其迅速繁殖及大规模工厂化育苗提供依据。[方法]以龙血树的幼嫩茎段为外植体,用9种6-BA、NAA不同浓度配比的诱导培养基和NAA不同浓度的生根培养基进行对比试验,研究海南龙血树的组织培养与快速繁殖。[结果]龙血树幼嫩茎段的诱导和生长与6-BA、NAA有关系,两者的配比直接影响茎段的再生频率。6-BA浓度对愈伤组织的形成影响极为显著,NAA的影响不是很明显。MS+0.3 mg/L NAA的生根时间最短,15 d左右生根,根数多,根系良好,移栽成活率高达95%。[结论]龙血树幼嫩茎段的诱导和不定芽增殖的最适培养基为MS+6.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,增殖系数达10以上,最适宜的生根培养基为MS+0.3 mg/L NAA。     

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。     

西瓜花药培养中不定芽的诱导与增殖

[目的]探讨西瓜不定芽的诱导与增殖。[方法]在西瓜花药愈伤组织诱导的基础上,研究不定芽的诱导与增殖。[结果]MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IAA培养基可以使愈伤组织再分化成不定芽。不定芽在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA中进行增殖,随着继代培养次数的增加,玻璃化和黄化现象变得更加严重。采取降低6-BA浓度甚至不添加任何激素、提高琼脂的含量、增加光照时间与强度等措施,可以有效减少西瓜不定芽的玻璃化现象。[结论]当培养基中细胞分裂素与生长素的比例为10∶1~100∶1时,由西瓜愈伤组织诱导出不定芽的可能性较大。     

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响.结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+GA30.5mg/L和MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA30.5mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1mg/L+GA3 5mg/L和MS+6-BA 2.0mg/L+ZT 2.0mg/L+GA3 5mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%.结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础.