花斑裸鲤GeHSP70基因的克隆及其对重金属Cu2+胁迫的应答

【目的】克隆花斑裸鲤GeHSP70基因,并进行生物信息学分析;研究正常和Cu2+胁迫条件下Ge-HSP70的表达模式。【方法】采用分子生物学技术克隆花斑裸鲤GeHSP70基因的全长cDNA,分析其生物信息学特征。采用Real-time PCR技术分析正常和0.01 mg/L Cu2+胁迫（胁迫0,12,24,48 h）条件下GeHSP70 mRNA在花斑裸鲤肝脏、肾脏、脑和鳃4个组织中的表达情况,并采用ELISA试剂盒检测肝脏、鳃组织中GeHSP70蛋白的表达水平。【结果】花斑裸鲤GeHSP70序列共1 387 bp,由123 bp的5′-UTR、592 bp的3′-UTR和672 bp的编码区构成,编码223个氨基酸;GeHSP70蛋白是疏水性蛋白,分子质量为11.15 ku,等电点为5.01,包含2个HSP70家族的特征序列：IDLGTTYS（11-18位氨基酸）和IFDLGGGTFDVSIL（199-212位氨基酸）。GeHSP70基因核苷酸序列与鲫鱼的同源性最高（93%）,在系统进化树中与同科或属中鱼种聚合成一个分支,显示出高度保守性。Real-time PCR结果表明,正常条件下花斑裸鲤GeHSP70在鳃组织中的表达量最高,其次是肝脏,在脑和鳃组织中表达量较低;随着0.01 mg/L Cu2+胁迫时间的延长,花斑裸鲤肝脏、肾脏和鳃组织的GeHSP70 mRNA表达量先升后降,在24 h表达量最高,而脑组织的表达量持续升高;GeHSP70在花斑裸鲤肝脏和鳃组织的蛋白水平表达量总体均表现为先升后降,表明Cu2+能够诱导GeHSP70的表达。【结论】成功克隆了花斑裸鲤GeHSP70 cDNA全长,在0.01 mg/L Cu2+胁迫下花斑裸鲤GeHSP70在mRNA水平和蛋白水平呈规律性应答,表明GeHSP70是潜在的反映水环境质量的生物标志物。     

花斑裸鲤GeHSP70基因的克隆及其对重金属Cu2+胁迫的应答

【目的】克隆花斑裸鲤GeHSP70基因，并进行生物信息学分析；研究正常和Cu2+胁迫条件下Ge-HSP70的表达模式。【方法】采用分子生物学技术克隆花斑裸鲤GeHSP70基因的全长cDNA，分析其生物信息学特征。采用Real-time PCR技术分析正常和0.01 mg/L Cu2+胁迫（胁迫0，12，24，48 h）条件下GeHSP70 mRNA在花斑裸鲤肝脏、肾脏、脑和鳃4个组织中的表达情况，并采用ELISA试剂盒检测肝脏、鳃组织中GeHSP70蛋白的表达水平。【结果】花斑裸鲤GeHSP70序列共1 387 bp，由123 bp的5′-UTR、592 bp的3′-UTR和672 bp的编码区构成，编码223个氨基酸；GeHSP70蛋白是疏水性蛋白，分子质量为11.15 ku，等电点为5.01，包含2个HSP70家族的特征序列：IDLGTTYS（11-18位氨基酸）和IFDLGGGTFDVSIL（199-212位氨基酸）。GeHSP70基因核苷酸序列与鲫鱼的同源性最高（93%），在系统进化树中与同科或属中鱼种聚合成一个分支，显示出高度保守性。Real-time PCR结果表明，正常条件下花斑裸鲤GeHSP70在鳃组织中的表达量最高，其次是肝脏，在脑和鳃组织中表达量较低；随着0.01 mg/L Cu2+胁迫时间的延长，花斑裸鲤肝脏、肾脏和鳃组织的GeHSP70 mRNA表达量先升后降，在24 h表达量最高，而脑组织的表达量持续升高；GeHSP70在花斑裸鲤肝脏和鳃组织的蛋白水平表达量总体均表现为先升后降，表明Cu2+能够诱导GeHSP70的表达。【结论】成功克隆了花斑裸鲤GeHSP70 cDNA全长，在0.01 mg/L Cu2+胁迫下花斑裸鲤GeHSP70在mRNA水平和蛋白水平呈规律性应答，表明GeHSP70是潜在的反映水环境质量的生物标志物。     

花斑裸鲤GeHSP70基因的克隆及其对重金属Cu2+胁迫的应答

【目的】克隆花斑裸鲤GeHSP70基因,并进行生物信息学分析;研究正常和Cu~(2+)胁迫条件下GeHSP70的表达模式。【方法】采用分子生物学技术克隆花斑裸鲤GeHSP70基因的全长cDNA,分析其生物信息学特征。采用Real-time PCR技术分析正常和0.01mg/L Cu~(2+)胁迫(胁迫0,12,24,48h)条件下GeHSP70mRNA在花斑裸鲤肝脏、肾脏、脑和鳃4个组织中的表达情况,并采用ELISA试剂盒检测肝脏、鳃组织中GeHSP70蛋白的表达水平。【结果】花斑裸鲤GeHSP70序列共1 387bp,由123bp的5′-UTR、592bp的3′-UTR和672bp的编码区构成,编码223个氨基酸;GeHSP70蛋白是疏水性蛋白,分子质量为11.15ku,等电点为5.01,包含2个HSP70家族的特征序列:IDLGTTYS(11-18位氨基酸)和IFDLGGGTFDVSIL(199-212位氨基酸)。GeHSP70基因核苷酸序列与鲫鱼的同源性最高(93%),在系统进化树中与同科或属中鱼种聚合成一个分支,显示出高度保守性。Real-time PCR结果表明,正常条件下花斑裸鲤GeHSP70在鳃组织中的表达量最高,其次是肝脏,在脑和鳃组织中表达量较低;随着0.01mg/L Cu~(2+)胁迫时间的延长,花斑裸鲤肝脏、肾脏和鳃组织的GeHSP70mRNA表达量先升后降,在24h表达量最高,而脑组织的表达量持续升高;GeHSP70在花斑裸鲤肝脏和鳃组织的蛋白水平表达量总体均表现为先升后降,表明Cu~(2+)能够诱导GeHSP70的表达。【结论】成功克隆了花斑裸鲤GeHSP70cDNA全长,在0.01mg/L Cu~(2+)胁迫下花斑裸鲤GeHSP70在mRNA水平和蛋白水平呈规律性应答,表明GeHSP70是潜在的反映水环境质量的生物标志物。     

水体铜对黄河鲤肝胰脏抗氧化酶活性和总抗氧化能力的影响

为了研究不同浓度的水体铜对黄河鲤肝胰脏抗氧化能力的影响,采用0.01、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70和1.00 mg·L-1 Cu2 分别刺激黄河鲤1、3、5、7 d后,测定黄河鲤肝胰脏抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和谷胱甘肽过氧化物酶GPx)的活性及总抗氧化能力(T-AOC).结果表明,黄河鲤暴露于0.01mg·L-1Cu2 溶液时,SOD、CAT和GPx活性及T-AOC高于对照组,其中GPx活性达到最大,且显著高于对照组(P<0.05),T-AOC 3、5、7 d时,显著高于对照组(P<0.05);Cu2 度为0.05 mg·L-1时,SOD和CAT活性及T-AOC(P<0.05)达到最大,其中SOD和CAT活性3、5、7 d时,显著高于对照组(P<0.05),GPx活性1 d时高于对照组,3、5、7 d时低于对照组,其中5、7 d时,显著低于对照组(P<0.05);Cu2 浓度为0.10 mg·L-1时,SOD活性3、5、7 d显著低于对照组(P<0.05),CAT和GPx活性及T-AOC显著低于对照组(P<0.05);高浓度组(0.30、0.50、0.70和1.00 mg·L-1)Cu2 抑制了SOD、CAT和GPx活性及T-AOC.结果提示,黄河鲤肝胰脏SOD、CAT和GPx活性及T-AOC对铜的污染均具指示作用,其中最为灵敏的是GPx活性.可以用来指示低剂量重金属的污染.     

Cu2+、Cd2+胁迫对小麦幼根SOD活性及其基因表达的影响

采用水培试验探索不同浓度(0 mg/L、5 mg/L、30 mg/L和60 mg/L)Cu2+或Cd2+胁迫(24 h、48 h、72 h和96 h)后对小麦幼根超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative PCR, Real-time Q-PCR)检测Cu/ZnSOD基因表达。结果表明,Cu2+胁迫处理72 h后,各处理SOD活性均较对照极显著提高(P<0.01),且30 mg/L浓度下SOD酶活性最高,是对照的3.67倍;而Cd2+胁迫处理后,幼根SOD活性整体呈现“升-降-升”的趋势,胁迫前期酶活性的降低程度与Cd2+浓度成正比,至72 h酶活性最低。Cd2+胁迫条件下Cu/ZnSOD的表达量明显高于Cu2+胁迫。不同时间Cu2+胁迫下,Cu/ZnSOD基因表达均呈现5 mg/L浓度处理高于60 mg/L和30 mg/L,表明低浓度促进而高浓度抑制该基因表达;而对于Cd2+胁迫,Cu/ZnSOD基因随浓度的升高和时间的延长呈现明显下降趋势,至96 h最低。本实验结果表明,Cu2+、Cd2+胁迫处理后浓度对基因表达的影响较大。该结果为深入探讨重金属胁迫下小麦幼根中SOD特性的研究提供理论参考和技术支持。     

镉长期暴露对中华稻蝗抗氧化机制的影响

采用生长于Cd2+污染条件下的小麦苗喂养中华稻蝗的慢性染毒方法,研究了Cd2+胁迫对中华稻蝗SOD、CAT、GPx活性和H2O2浓度的影响.结果表明,在Cd2+的作用下,中华稻蝗体内SOD、CAT、GPx活性和H2O2浓度均发生变化,表明Cd2+可导致中华稻蝗体内产生ROS.SOD、CAT、GPx 3种酶对Cd2+有一定的耐受性:当Cd2+浓度在这3种酶的耐受范围内,酶活性提高,反之酶活性降低.Cd2+与抗氧化系统间的关系复杂,SOD、CAT、GPx共同承担清除ROS、保护中华稻蝗的重要作用.     

不同浓度Cu2+、Hg2+、Zn2+胁迫对绿豆幼苗超氧化物歧化酶活性的影响

采用恒温培养箱培养的方法,在金属离子胁迫的前4 d,研究了不同浓度Cu2+、Hg2+、Zn2+单一胁迫和复合胁迫对绿豆幼苗超氧化物歧化酶活性的影响.结果表明:单一胁迫时,绿豆幼苗在较低浓度(≤8 mg/L)的金属离子胁迫下,有自身调节能力,SOD酶活性升高,且对Cu2+和Zn2+ 的反应敏感;复合胁迫下,Cu2++Hg2+复合离子与Zn2++Hg2+复合离子均在低浓度胁迫条件下SOD酶活性升高.     

CU2+胁迫对禾花鲤[Procypris mterus)过氧化氢酶活性的影响

本研究旨在探讨Cu2+浓度梯度、胁迫时间时禾花鲤(Procypris mterus)血液和肝脏的过氧化氢酶(cat-alase,CAT)活性的影响,为采花鲤的重金属胁迫研究及水污染生物监测提供理论参考依据,进一步指导禾花鲤的健康养殖.采用可见光法测定了不同Cu2+浓度(0、0.067、0.084、0.101、0.118和0.134 mg·L-1)和胁迫时间(0、1、5和11 d)下禾花鲤CAT活性的变化.结果显示,在试验的各个持续时间段(1、5和11 d),低Cu2+"浓度处理组(0.067 mg·L-1)血液及肝脏的CAT活性高于其它各处理组,且活性随着胁迫时间的延长而增加.而中、高Cu2+"浓度处理组(0.084、0.101、0.118和0.134 mg·L-1)血液和肝脏中的CAT活性则随着Cu2+浓度的升高和胁迫时间的延长被显著抑制(P<0.05),活性变化在5 d后趋于稳定.试验表明鱼体过氧化氢酶的活性受水体中Cu2+浓度的影响,低Cu2+浓度能诱导鱼体血液和肝脏中的CAT活性增加,但随胁迫的加剧,CAT活性受到抑制.     

重金属对鲢鱼肝组织SOD和CAT活性影响研究简报

为了进一步探讨重金属污染对水生动物伤害作用的机理,以超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性作为指标,进行了Cu2+、Zn2+和Cd2+3种重金属离子的水生毒理学研究。试验在40cm×25cm×30cm的玻璃缸中进行,水温18～22℃;试验时将6～12cm鲢鱼暴露于不同浓度的Cu2+、Zn2+、Cd2+溶液中96h,测定其肝组织SOD和CAT活性。SOD活性的测定采用邹国林等改进的邻苯三酚自氧化法,CAT活性的测定采用南京大学生物系的碘量法。1　Cu2+对SOD和CAT活性的影响不同浓度的Cu2+对2种酶活性的影响基本一致。当Cu2+浓度为0～0 02mg/L时,2种酶的活性…     

不同采收期草莓果实抗氧化物质含量和抗氧化活性的变化

以“章姬”和“0362”为试材,研究不同时期采收的草莓果实抗氧化物质含量(总酚、总黄酮)和抗氧化活性(DPPH,TEAC和FRAP值)的动态变化 结果表明,在试验期内,随采收时期的推移,章姬、0362红熟期果实抗氧化物质含量和抗氧化活性均呈上升趋势;抗氧化物质含量和抗氧化活性在两品种间存在差异。统计分析表明,草莓果实的总酚和总黄酮含量与抗氧化活性之间存在明显的线性正相关,总酚与DPPH,TEAC和FRAP的相关系数分别为0.8228,0.8812,0.8419。因此,不同时期采收的草莓果实的抗氧化活性的变化与果实酚类物质含量的变化有关。     

发芽温度对绿豆芽抗氧化成分和抗氧化能力的影响

研究了发芽温度对绿豆芽多种抗氧化成份和抗氧化能力的影响,其中抗氧化成份包括维生素C、维生素E、总多酚和黄酮类化合物。当绿豆于20℃发芽时,维生素C和黄酮类化合物的含量(鲜重)达到最大,分别为66.4和693.5 mg.kg-1,而维生素E和总多酚的含量(鲜重)在15℃时达到最大,分别为5.1和145.8 mg.kg-1。抗氧化能力包括1,1-二苯基-2-苦基苯基(DPPH.)清除率、羟基(.OH)清除率和总还原力等都在20℃时达到最大。     

猪血红蛋白抗氧化肽的酶法制备及其体外抗氧化活力观察

为建立猪血红蛋白抗氧化活性肽的酶法制备工艺,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和AS1398中性蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白8 h,结果显示：采用AS1398中性蛋白酶获得的产物水解度最高,其酶解过程中第2小时获得的抗氧化活性肽（NDAPⅡ）还原力最高,较猪血红蛋白还原力高31.8%;AS1398中性蛋白酶的酶解条件为底物5%（质量分数）,底物中含酶400U/g,温度45℃,pH 7.0。NDAPⅡ的还原力随浓度的增加基本呈线性增长趋势,虽然在低浓度下其还原力较阳性对照物BHT及VC弱,但在40 mg/mL质量浓度条件下,其还原力已略高于天然抗氧化剂VC,极具作为天然抗氧化剂的潜力。     

Variability in total antioxidant capacity,antioxidant leaf pigments and foliage yield of vegetable amaranth

Twenty vegetable amaranth genotypes were evaluated for total antioxidant capacity, antioxidant leaf pigments, vitamins, and selection of suitable genotypes for extraction of juice in a randomized complete block design(RCBD) with three replications. Vegetable amaranth was rich in chlorophyll, β-cyanins, β-xanthins, betalains, carotene, ascorbic acid and total antioxidant. The genotypes VA14, VA16, VA18, VA15, and VA20 could be selected as amaranth vegtable varieties with high yields and abundance antioxidant leaf pigments and vitamins to produce juice. The genotypes VA13 and VA19 had above-average foliage yield and high antioxidant profiles while the genotypes VA2, VA3, VA9, VA11, VA12, and VA17 had a high antioxidant profiles and below-average foliage yield. These genotypes could be used as a donor parent for integration of potential high antioxidant profiles genes into other genotypes. The correlation study revealed a strong positive association among all the antioxidant leaf pigments, total antioxidant capacity and foliage yield. Selection based on total antioxidant capacity, antioxidant leaf pigments could economically viable to improve the yield potential of vegetable amaranth genotypes. Total carotene and ascorbic acid exhibited insignificant genotypic correlation with all the traits except total antioxidant capacity. This indicates that selection for antioxidant vitamins might be possible without compromising yield loss.     

茶叶中天然抗氧化剂的提取

提出一种利用茶厂下脚料提取茶多酚的新工艺.该工艺采用对人体无害的沉淀剂与溶解剂,不用或少用有机溶剂进行提取,有显著的社会效益与经济效益.     

板栗鞣花酸鞣质的提取纯化及抗氧化活性

以板栗生物量栗蓬、栗叶和栗花为研究对象,利用高效液相色谱法和核磁共振波谱法对栗蓬、栗叶中鞣花酸进行初步定性定量与结构分析,并对其抗氧化性进行研究。结果表明:栗蓬、栗叶样品中都有游离鞣花酸,含量分别为1.263、1.669mg/g;样品的提取物都具有明显的还原力、清除自由基和亚硝酸盐的能力,是同浓度的抗败血酸抗氧化能力的2倍。     

微胶囊技术在抗氧化剂中的应用

综述了微胶囊技术在食品工业中的应用现状,讨论了抗氧化剂微胶囊化的意义和研究现状.微胶囊抗氧化剂可提高产品的热稳定性,是应用于油脂和含油脂食品的一种较安全、高效和成本较低的油脂微胶囊抗氧化剂.     

马尾藻多糖分离提取及抗氧化活性初步观察

以马尾藻为原料,分别采用水提醇沉、超声波破壁、微波处理、酶法提取4种方法分离提取马尾藻多糖,比较不同提取方法对多糖提取率的影响.通过皮下注射地塞米松或配合马尾藻多糖腹腔注射处理小鼠后,测定胸腺指数、脾脏指数,以及血清中IL-6、TNF-α和胸腺组织匀浆中GSH含量,观察马尾藻多糖对小鼠细胞因子及体内抗氧化能力的影响;通过清除羟自由基、超氧阴离子和抑制红细胞溶血试验观察马尾藻多糖体外抗氧化活性.结果表明,在4种提取方法中,酶法提取率最高.马尾藻多糖处理小鼠后,胸腺中GSH和血清中IL-6、TNF-α的含量随多糖浓度的增加而升高;马尾藻多糖清除羟自由基和对抗过氧化氢溶血的能力随着浓度的增加而升高,且对超氧阴离子具有一定的清除作用.马尾藻多糖具有提高机体细胞因子水平和抗氧化作用,具有开发利用价值.     

番茄体外抗氧化活性研究

以总还原力、羟基自由基(.OH)、DPPH.自由基以及总抗氧化能力为指标,对未加热和加热处理的大番茄和樱桃番茄的体外抗氧化能力进行了测定和比较。结果表明:两种番茄都具有一定的抗氧化作用,在一定浓度范围内,抗氧化活性与浓度呈量效关系;加热前后樱桃番茄的抗氧化作用均强于大番茄;热处理有利于提高两种番茄的抗氧化活性。     

杨梅果汁的抗氧化特性研究

选用浙江余姚的四个杨梅品种为研究材料,对杨梅的主要理化指标进行了分析测定,并研究了杨梅汁的抗氧化效果.综合实验结果得到如下结论:花色苷、黄酮、总酚含量最低的粉红种对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力最弱;总酚含量最高的迟大种清除羟自由基、超氧阴离子的能力最强.杨梅中酚类物质的含量与抗氧化能力有着较明显的相关性.