砀山酥梨叶片培养和植株再生

以砀山酥梨叶片为外植体,首次系统地研究了基本培养基、植物生长调节剂、碳源、暗培养时间和琼脂用量等对其再生不定芽的影响。结果表明,砀山酥梨叶片再生不定芽的适宜组合为NN69 6-BA 2.5 mg.L-1 IBA 0.3 mg.L-1 山梨醇20 g.L-1 琼脂8.0 g.L-1,暗培养20 d。叶片再生频率最高为83%,平均再生芽数2.17。叶片再生苗在生根培养基1/4 MS IBA 0.5 mg.L-1 NAA0.3 mg.L-1 蔗糖20 g.L-1 琼脂6.0 g.L-1上已经生根。     

葡萄砧木“1202”离体再生体系的建立

以葡萄砧木"1202"为试材,研究了不同外植体类型、不同植物生长调节剂浓度及配比、不同外植体放置方式等对其不定芽再生频率的影响。结果表明:叶片的再生效果最好,不定芽率达68.78%;葡萄砧木"1202"叶片不定芽再生的最适培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,pH 5.8;叶片最佳放置方式为远轴面接触培养基。将再生不定芽置于3/4 MS+IBA 0.35 mg/L培养基上诱导生根,生根率达80%。再生植株培养35～50 d后移栽炼苗,成活率可达90%。     

澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立

以澳洲青苹试管苗的叶片为外植体诱导不定芽再生,研究不同的BA浓度、TDZ浓度、暗培养时间、叶片放置方式和AgNO3对叶片不定芽再生的影响。结果表明:最适宜的叶片不定芽再生的培养基为MS TDZ 2.0mg/L NAA 0.3 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L和MS BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L,最适的暗培养时间是20 d,在上述2种培养基中澳洲青苹离体叶片不定芽的再生频率分别达到100.0%和91.7%。     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

美女樱叶片离体培养研究

以美女樱品种"Quartz"离体叶片为外植体,探讨了不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银质量浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明:6-BA的诱导效果好于TDZ。在培养基MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.15mg/L+蔗糖30g/L上可以使美女樱叶片不定芽的再生率达26.8%。2mg/LAgNO3可以将美女樱叶片的不定芽再生率提高到31.3%,并缩短不定芽发生时间。暗培养5d可以促进美女樱叶片不定芽的再生,活性炭对美女樱叶片离体再生有一定抑制作用。     

窄冠黑青杨叶片再生体系的建立

以窄冠黑青杨(Lu31、Lu6)的叶片为材料,进行了不同激素配比及不同影响因子对叶片、根系再生和增殖的研究。结果表明:窄冠黑青杨叶片最适再生培养基是1/2MS BA0.3mg/L NAA0.01~0.05mg/L,再生频率达90.0%,不定芽达10~13个;生根的培养基是1/2MS IBA0.25mS/L 琼脂6g/L 蔗糖20g/L;增值的培养基是1/2MS BA0.3mg/L NAA0.05mg/L 琼脂6g/L 糖25g/L;叶片培养的最佳位置是自茎尖展叶的1~3片叶。     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

光皮桦叶片再生体系的建立

【目的】建立光皮桦叶片高效再生体系,为光皮桦的良种培育及遗传转化研究提供依据。【方法】以光皮桦无菌叶片为外殖体,分别用含0.6 mg/L TDZ 的MS、WPM和1/2MS培养基进行不定芽诱导分化,筛选最佳基本培养基;向筛选出的最佳基本培养基中添加0.05 mg/L NAA及不同质量浓度（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/L）TDZ的激素组合组成不定芽分化培养基,用于诱导不定芽分化,筛选最佳不定芽诱导分化培养基;以1/2MS培养基为基本培养基,分别附加0,0.05,0.1,0.5,1.0,2.0 mg/L的IBA或0.5,1.0,2.0,3.0 mg/L的NAA组成生根培养基,用于再生苗生根,筛选最佳生根培养基,建立光皮桦叶片再生体系。【结果】光皮桦无菌叶片诱导不定芽的最适基本培养基为MS培养基,其诱导的不定芽最多,且芽生长状况良好,颜色深绿;最适不定芽诱导分化培养基为：MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上叶片丛生芽诱导率可达到80.00%,平均不定芽数高达12.00个,且芽生长健壮,呈深绿色;最适再生苗生根培养基为：1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上再生苗的生根率达100%,平均根数为14.5个,平均根长为11 cm,根较粗壮,基部无愈伤组织,且产生了很多毛细根。【结论】建立了光皮桦无菌苗叶片的高效再生体系。     

平邑甜茶与M_7离体叶片不定芽再生的研究

以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensisRehd)和M7(Malus pumila Var.ParadisiacaSchneid)的组培苗叶片为材料,研究了暗培养、接种方式和植物生长调节剂对叶片不定芽再生的影响。结果表明,适合二者叶片不定芽再生的最佳暗培养时间是14d。平邑甜茶叶片以远轴面向下接触培养基再生效果好,叶片接种方式对M7叶片不定芽再生无显著影响。适合平邑甜茶叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L,再生率达93.3%。适合M7叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.3mg/L,再生率达96.7%。适合平邑甜茶新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.03mg/L+GA30.5mg/L,适合M7新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.05mg/L+GA31.0mg/L。适合平邑甜茶生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L,生根率为86.7%。适合M7生根的最佳培养基是1/2MS+IBA1.0mg/L,生根率为93.3%。     

盖杨叶片高频植株再生体系建立

[目的]利用生物技术手段提高盖杨抗寒性并扩大其栽培区域。[方法]以盖杨叶片为外植体,研究不同激素组合对盖杨叶片分化及生根的影响,建立盖杨叶片高频植株再生体系。[结果]盖杨不定芽分化最适培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.20 mg/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.0 g/L,p H 6.5,不定芽再生频率为96.67%,平均分化芽数20.3个;最适生根培养基配方为1/2MS+IBA0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.0 g/L,p H 6.0,生根率可达100%,平均生根数15.8条。[结论]该研究建立了盖杨高效组织培养再生系统,为该杨树品种的快速无性繁殖和基因的遗传转化提供了依据。     

黄金梨叶片再生体系建立研究

从外植体接种方式选择、暗培养时间、植物生长调节剂浓度和配比等方面研究了黄金梨叶片再生植株的影响因素。结果表明:适于黄金梨叶片再生的诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,在此培养基上,叶面朝上接种的叶片经过15 d的暗培养转入光照培养,可获得45%的再生率和平均2.2个不定芽;1 cm以上的不定芽经1/2 MS+3.5 mg/L IBA诱导10 d后,转入1/4 MS无激素培养基继续培养可获得高达91.6%的生根率和5个以上的不定根数。     

Adventitious shoot regeneration from the leaves of in vitro grown ‘Zhongli 1’ pear (Pyrus spp.)

The pear (Pyrus spp.) is one of the most important temperate fruit crops. The technique of adventitious shoot regeneration from leaves is considered to be one of the shortcuts in the research on pear genetic modification and cellular engineering, which, however, has not been widely used. As the regeneration frequency of pear leaves is usually very low, the research on adventitious shoot regeneration from pear leaves is eagerly needed. In this experiment, the factors affecting shoot and bud regeneration from the leaves of ‘Zhongli 1’ pear were studied, and an efficient protocol for shoot regeneration was established. The results showed that different types of basic media, different combinations of plant growth regulators, leaf placement on medium, periods of dark culture and the use of silver nitrate (AgNO₃) on culture media all significantly affected the adventitious shoot regeneration frequency of ‘Zhongli 1’ pear. The details are as follows: (1) Among three kinds of basic media, NN69 was better for ‘Zhongli 1’ shoot regeneration, followed by half (½) MS, while full MS had no effect on shoot regeneration; (2) Thidiazuron (TDZ) was better than 6-benzylaminopurine (6-BA) for ‘Zhongli 1’ regeneration, with an optimal concentration of 1.5 mg · L^?1, and the regeneration rate under this concentration could reach 85%, with 2.72 buds per leaf. 0.5 mg · L^?1 indole-3-butyric acid (IBA), which induced a higher regeneration frequency, was a better choice for pear regeneration compared with 0.3 mg · L^?1 naphthaleneacetic acid (NAA). Among the different combinations of plant growth regulators, TDZ + IBA was better for inducing high regeneration frequency; (3) The abaxial surface of leaves touching the medium was beneficial for leaves to uptake nutrients from the medium, and because of that, the regeneration frequency of leaves was significantly higher than that of leaves touching the medium with their adaxial surfaces (obverse side of leaf); (4) Dark culture was necessary for bud regeneration, and the best duration for dark culture of ‘Zhongli 1’ pear was 21 days; (5) The addition of 1.0 mg · L^?1 AgNO₃ into the culture medium could promote adventitious shoot regeneration significantly. A high adventitious shoot regeneration frequency was obtained in this research, which will be beneficial for further research on efficient and stable in vitro plant regeneration systems and genetic modification of pear.     

苹果组培苗离体叶片诱导不定芽分化

以福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片为试材,研究了植物生长调节剂、基因型、暗培养、AgNO3对苹果叶片不定芽分化的影响.结果表明:福早红、鲁加3号和鲁加6号3个苹果品种的组培苗叶片分化最佳培养基分别为MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.20 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.10 mg/L,MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.05 mg/L;基因型是决定苹果组培苗叶片分化的重要因素,3个苹果品种叶片分化不定芽的能力从大到小依次是福早红、鲁加6号、鲁加3号;暗培养可以明显促进苹果叶片进行脱分化,提高叶片的分化率,苹果叶片暗培养处理的最佳时间为15 d;AgNO3抑制苹果叶片愈伤组织的形成,不能促进其叶片不定芽的形成.     

胡杨叶片不定芽再生体系的研究

该文以胡杨试管苗叶片为材料 ,进行了不同培养基及不同影响因子对胡杨叶片不定芽再生能力影响的试验 .结果表明 :胡杨叶片再生的最适培养基是MS +BA 0 .5mg L +NAA 0 1～ 0 2mg L +腺嘌呤 4 0mg L +水解乳蛋白 5 0 0mg L +白砂糖 2 5g L +琼脂 5g L ,再生频率达 10 0 % ;叶片培养的最佳取材位置是自茎尖展叶始第 1～ 3片叶 ;叶片正面向上或正面向下接种培养 ,对其形成不定芽无显著影响 ;由丛生芽和愈伤组织两个途径得到的无菌苗上的叶片在再生能力方面没有明显差异 .     

新梨七号茎段组织培养再生植株的研究

从植物生长调节物质的不同配比、不同部位诱导不定芽以及炼苗移栽等几个方面对新梨七号离体茎段再生进行研究,获得茎段产生愈伤组织及不定芽再生的适宜培养基,分析以上因素对新梨七号再生体系建立的影响。结果表明,新梨七号的茎段最适宜愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L,愈伤组织诱导率为100%;茎段诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率为95%,增殖倍数为7.29;最适宜不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 2.5mg/L+蔗糖15g/L,生根率为90%;封口炼苗时间14d为最好,移栽时间7月最佳。     

影响梨叶片高频不定梢再生因素的研究

研究了基因型、基本培养基、植物生长物质、叶片接种方法及光、暗培养条件等因素对梨叶片不定梢再生的影响。基因型对叶片不定梢再生影响最大,安久和丰水的再生率最高,可达100%,其次为鸭梨,为80%,黄金梨的再生率最低,仅为27.3%。不同基因型其获得最高不定梢再生率所需附加的植物生长物质不同。TDZ比BA更有利于鸭梨叶片的高频不定梢再生,而BA更有利于西洋梨和砂梨叶片的不定梢再生。暗培养3周后再转光下培养比直接光培养有利于不定梢的再生,叶片接种方法对再生率无明显影响。     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

丽格海棠组织培养外植体再生体系建立关键技术的研究

以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体,最佳培养基配方及接种模式的关键技术。研究表明初代培养基本培养基为MS,激素配比为6-BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L,培养30d可获得较多的不定芽。外植体分化能力的研究表明丽格海棠的不同类型外植体能力大小为:叶>茎>花茎>叶柄;从叶片的不同部位来看,叶中>叶侧>叶边缘;从不同叶龄来看,中等成熟叶>幼叶>完全成熟叶>芽叶。叶片的接种模式:反放比正放好。