缢蛏保活过程中乳酸变化的研究

以缢蛏为研究对象,在高温区25℃、常温区18℃、低温区10℃、冰藏区0℃ 4个温度下采用不同贮藏条件下进行饥饿无水保活试验,探讨其在此过程中的乳酸变化.结果表明:采用低温的贮藏方式保活缢蛏,其糖原消耗量少,乳酸含量上升缓慢,营养成分保藏较好.在冰藏区0℃时缢蛏保活时间最长能达到14 d.采用低温充氧方式保活缢蛏时乳酸上升缓慢,糖原消耗量最小,保活效果最好,为实际生产运输提供了理论依据.     

彩虹明樱蛤的低温保活研究

对彩虹明樱蛤Moerella iridescens在不同温度、不同贮藏方式、不同湿度条件下进行低温保活试验，结果表明：彩虹明樱蛤在1－3℃条件下保活效果最好，保活3d后的存活率为92％；放在塑料筐内的彩虹明樱蛤，堆放比平铺效果好；彩虹明樱蛤低温保活受湿度的影响很大，在100％霜对湿度条件下保活效果最好。     

低温无水保活对缢蛏活性氧代谢、糖原及乳酸的影响

为探究无水保活期间双壳贝类活性氧代谢、糖原及乳酸的变化，以缢蛏(Sinonovacula constricta)为试验材料，将缢蛏分别在4 ℃、10 ℃和15 ℃下无水保活，测定其存活率、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、过氧化氢酶(catalase，CAT)活性、还原性谷胱甘肽(glutathione，GSH)含量、丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量、过氧化氢(hydrogen peroxide，H₂O₂)含量、糖原及乳酸含量。结果显示，保活前3 d各组缢蛏均维持90 %以上的存活率；保活7 d后4 ℃组存活率仍可达到84 %，高于10 ℃组的67 %，15 ℃组存活率最低，仅为52 %。在整个无水保活期间，4 ℃组缢蛏SOD活性、CAT活性以及GSH含量均显著高于同时期其他各组(P<0.05)；在保活后期，相较于其他处理组，4 ℃组缢蛏有着显著最低的MDA含量和H₂O₂含量 (P<0.05)；此外，保活1～3 d时10 ℃组缢蛏体内糖原含量下降幅度仅有3.7 %，为各组最低；随着保活时间的延长，各组缢蛏体内的糖原含量持续减少，乳酸含量则不断增加，且同时期4 ℃组缢蛏比其他各组糖原消耗量更少，乳酸积累的速率也更慢。以上结果表明，在缢蛏短途运输(2 d)时，10 ℃和15 ℃能维持缢蛏较高的存活率，是较适宜的保活温度；而4 ℃在保活后期能有效地诱导了缢蛏机体SOD活性、CAT活性和GSH含量的增加，同时抑制MDA和H₂O₂的含量，并减缓糖原的消耗和乳酸积累的速率，具有更好的保活效果，更利于缢蛏的长途运输(7 d)。     

厚壳贻贝低温无水保活技术

[目的]探索厚壳贻贝低温无水保活技术。[方法]以低温驯化后的厚壳贻贝为研究对象,进行了以低温保活技术为主的研究。在不同湿度条件下,对厚壳贻贝在0、4、8℃以及常温条件下的保活效果进行了大量的试验。[结果]成活率为98%时,在-1.5~-0.5℃下可保活9 d,在4和0℃下都可保活7 d,8℃可保活4 d。在生态冰温-1.5~-0.5℃下保活最好;用冰藏0℃的方法最实用。同时,控制湿度对厚壳贻贝保活效果有正面的影响。[结论]低温无水法保活厚壳贻贝技术具有成本较低、无污染等优点。     

海湾扇贝低温无水保活过程中营养成分和生化特性的变化

在4℃条件下,采用充氧保湿处理海湾扇贝Argopecten irradians 无水保活20 d,测定无水保活过程中海湾扇贝的营养成分、糖原、乳酸含量,以及总挥发性盐基氮( TVB-N)、游离脂肪酸( FFA)、硫代巴比妥酸( TBA)和盐可萃取性蛋白氮( EPN)等指标的变化。结果表明：在低温充氧保湿条件下,随保活时间的延长,海湾扇贝的水分、粗蛋白质和粗脂肪含量略微下降,粗灰分含量上升,但均无显著性差异(P>0·05);糖原含量和EPN值呈下降趋势,且在11~20 d的保活过程中均显著降低(P<0·05);乳酸含量呈上升趋势,且在11~20 d的保活过程中显著升高( P<0·05); TVB-N值呈上升趋势,且在15~20 d的保活过程中显著升高( P<0·05),但保活20 d时的TVB-N含量仍低于鲜、冻动物性水产品卫生标准( GB2733—2005)中对海产贝类的TVB-N可接受限0·15 mg/g;FFA、 TBA值均呈上升趋势,但上升趋势平缓,变化幅度小,且无显著性差异(P>0·05)。研究表明,在充氧保湿条件下,低温无水保活20 d的海湾扇贝营养损失和品质风味变化均较小,且保持着良好的鲜活状态。     

温度对黑鲷无水保活工艺的影响

比较了-2,0,2,4,6℃等5种不同无水保活温度下,黑鲷(Sparus macarocephlus)的成活率、O2消耗量、CO2排放量、血清皮质醇及肌糖原的变化趋势。结果表明:在0℃条件下,无水保活36 h后,黑鲷成活率为100%,0℃组在整个无水保活过程中耗氧量最少,CO2释放量上升最缓慢,其皮质醇含量始终接近正常值,因此,0℃为黑鲷最佳无水保活温度。     

低温保活运输对鲟鱼肌肉主要营养成分的影响

为了解低温保活运输过程中对鲟鱼肌肉主要品质的影响,研究了鲟鱼在0℃运输12h和24 h苏醒后肌肉的总蛋白质含量、总脂肪含量、碳水化合物含量、游离氨基酸态氮含量、水分和pH值变化.结果表明:鲟鱼在0℃条件下保活运输12h和24 h恢复常态后,其肌肉中总蛋白质、总脂肪、水分等指标变化很小,而碳水化合物含量呈现下降趋势.0℃条件下的低温保活运输对鲟鱼肌肉主要营养成分影响极小.     

延长鲮鱼和鲤鱼无水保活时间的条件研究

【目的】本研究探索活鱼无水运输方法,旨在降低活鱼运输死亡率,促进生鲜活鱼电商模式销售和水产行业的发展。【方法】本研究采用体重约为1kg的活鲮鱼、活鲤鱼,通过绳索保定或专用包装袋保定,使其不能挣扎活动,各组离水鱼均用密封袋包装并充氧,再分别置于5℃、15℃、25℃条件下,另设一个不保定的常温对照组;观察记录各组鱼在不同温度存活时间长短。【结果】用“弓鱼法”,鲮鱼15℃时保活时间最长,平均值为13h,显著高于其它组。用“弓鱼法”,鲤鱼在5℃和15℃时数值分别为32.9h和36.9h,显著高于其它组。在三个温度条件下,专用包装袋保定进行无水运输的保活时间均超过“弓鱼法”无水运输的保活时间,尤其是在15℃,专用包袋法保活时间显著超过“弓鱼”法。【结论】在无水运输过程中,用“弓鱼法”保定或专用包装袋保定均延长活鱼运输时间,采用本试验自制专用包装袋保活时间更长。鲮鱼无水保活运输的优选温度范围在15℃左右,鲤鱼的优选温度范围为5℃~15℃。     

温度、湿度和氧气对海湾扇贝无水保活的影响

在实验室条件下,研究了温度、湿度和氧气对海湾扇贝Argopecten irradias无水保活的存活率和失重率的影响,进而研究其无水保活关键技术。对体质量为29~33 g的海湾扇贝采用普通、保湿、充氧和充氧保湿4种处理方式,并分别置于-2、0、4、10、15~18、20~25℃下进行无水保活试验。结果表明：海湾扇贝生态冰温区为-2.8~0℃;随着温度的升高,海湾扇贝的存活率逐渐降低;海湾扇贝在-2、0℃条件下保活效果最好,其次是4℃;保湿组比未保湿组、充氧组比未充氧组的存活率均有显著提高( P<0.05);低温条件下,保湿充氧处理的海湾扇贝存活率显著高于保湿组和充氧组(P<0.05),保活效果最好,保活10 d后其存活率依然达95%以上;低温无水条件下,采用保湿充氧处理的海湾扇贝失重率较小。研究表明,温度、湿度和氧气对海湾扇贝无水保活有较大影响,在-2~4℃的低温条件下采用保湿充氧处理方式对海湾扇贝进行无水保活,效果最佳。     

3种虾壳中虾青素提取工艺优化及其抗氧化活性比较

为有效提高虾壳废弃物中虾青素的提取率,以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、南极磷虾(Euphausia superba)及凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为原料,利用有机溶剂浸提法,通过单因素试验比较3种虾壳中虾青素的提取效果,并对南极磷虾虾壳中虾青素提取工艺参数进行正交优化;利用红外光谱比较虾青素标准品与3种虾壳制得的样品,对样品中虾青素进行定性分析;以VC作为对照,探索3种虾壳中虾青素的抗氧化能力。结果表明:罗氏沼虾、南极磷虾及凡纳滨对虾在以二氯甲烷为提取液,提取温度为30℃,提取时间为2 h条件下可得到最大提取率,南极磷虾虾壳中的虾青素的提取率显著高于凡纳滨对虾及罗氏沼虾虾壳中的虾青素。而料液比对三者中虾青素的提取率的影响效果不同,南极磷虾和凡纳滨对虾在1∶30 g/mL料液比条件下的提取率达到最大值分别为234.72μg/g和172.21μg/g,而罗氏沼虾在料液比为1∶20 g/mL条件下最大提取率为88.69μg/g。南极磷虾虾壳中提取虾青素的最佳条件为料液比1∶30 (g∶mL),提取温度30℃,提取时间2.5 h,此条件下虾青素的提取率明显提高,达到245.01μg/g。红外光谱证明实验所得虾青素与虾青素标准品具有极为相似的官能团振动吸收峰。通过抗氧化实验研究发现,3种虾壳中的虾青素均具有较好的抗氧化活性,其中以罗氏沼虾虾壳中虾青素抗氧化活性为最佳。     

溶藻弧菌对罗氏沼虾成活率及5种酶活性的影响

用溶藻弧菌对体重为23.86(±3.95)g的健康罗氏沼虾分别进行浸浴、投喂和注射感染试验,并在注射感染96 h内和20 d后测定虾组织中过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)的活性。结果显示:注射感染对罗氏沼虾的致死作用最明显,其中培养物离心液组罗氏沼虾的成活率最低。感染96h内CAT、T-SOD、GSH-Px和AKP的活性变化较为显著;感染20 d后仅肌肉组织T-SOD和ACP活性各组间存在显著差异。结果表明,培养物离心液的毒性很强;注射感染较适合短时间内取样感染;酶活测定感染浓度应选择106cell/mL;溶藻弧菌对罗氏沼虾免疫相关酶活指标的影响较大,其中CAT、T-SOD、GSH-Px和AKP对病原反应较为敏感。     

大口黑鲈CO2麻醉保活运输工艺研究

试验对大口黑鲈进行CO₂麻醉保活研究,探究了不同CO₂浓度、水温、包装运输方式对大口黑鲈麻醉效果和存活率的影响。结果表明,CO₂浓度为100 mg·L^-1时不能达到完全麻醉的效果,200、300、400和500 mg·L^-1CO₂浓度均能对大口黑鲈进行完全麻醉,其中CO₂浓度为200 mg·L^-1保活时间24 h以上,保活率为100%。水温控制在15~20 ℃时能保证大口黑鲈的麻醉保活运输24 h后的存活率达100%。在3种包装方式中,保温箱充液氧运输方式比打包袋和保温箱增氧泵曝气的保活效果好。综上,在200 mg·L^-1的CO₂浓度、(10±1)mg·L^-1氧气浓度、15~20 ℃水温条件下,对大口黑鲈麻醉30 min后,采用保温箱充液氧运输方式,大口黑鲈保活运输24 h,存活率达100%。     

波纹巴非蛤无水低温保活过程中的生化变化

[目的]以波纹巴非蛤为材料,研究其在低温无水保活过程中的生化变化。[方法]采用低温保活的波纹巴非蛤并置于4℃条件下进行保藏,测定其在此过程中的营养成分、腺苷三磷酸(ATP)及乳酸的变化。[结果]采用此法可使波纹巴非蛤保活5 d,水分、灰分、蛋白质、脂肪的含量略有降低,氨基酸的变化不明显,ATP变化呈先下降再上升,然后再下降的趋势,乳酸变化呈先上升后下降的趋势。[结论]低温无水法是保活波纹巴非蛤的一种良好的方法。     

不同剂量保活剂处理种子的保活效果试验

种子保活剂对于解决种子积压(延长种子寿命)问题,具有重要的应用价值．为了进一步明确湖南农业大学植物病理系研制的保活剂的作用,对水稻、辣椒、茄子、南瓜、丝瓜、苦瓜、西瓜、四季豆、黄豆、玉米等作物种子进行了不同剂量保活剂处理效果试验,结果表明：1)保活剂对试验种子的带菌量和发芽率较清水对照差异显著;2)不同剂量保活剂处理种子发芽率差异不明显,而对种子带菌量影响显著;3)该保活剂处理种子推荐剂量为每千克种子80mL。     

水温和雌雄配比对罗氏沼虾能量代谢的影响

[目的]探索水温和雌雄配比对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)能量代谢和生长的影响,为进一步分析与解决罗氏沼虾生长缓慢的问题提供科学依据.[方法]根据能量收支方程[摄食能(Ce)=生长能(Ge)+排粪能(Fe)+排泄能(Ue)+蜕壳能(Ee)+呼吸能(Re)]及凯式定氮法,分别计算罗氏沼虾各部分的代谢能值,分析4种水温(20、22、26和30℃)及3种雌雄配比(1:1、1:2和1:3)对罗氏沼虾能量代谢和生长的影响.[结果]雌、雄罗氏沼虾的绝对摄食能均随水温上升而升高,其中雌虾在各水温处理组间差异显著(P<0.05,下同),雄虾则表现为非相邻水温处理组间差异显著;雄虾在26℃下的绝对生长能显著高于其他3个水温处理组,雌虾在26℃下的绝对生长能显著高于20和22℃水温处理组;雌、雄罗氏沼虾在20℃下均未蜕壳,在22~30℃下其绝对蜕壳能随水温上升而升高,在30℃时达最大值(雌虾1371±272 J/g,雄虾1035±598 J/g);雌、雄罗氏沼虾的特定生长率在26℃下显著高于其他3个水温处理组;罗氏沼虾的绝对呼吸能表现为高温处理组(26和30℃)高于低温处理组(20和22℃).单性饲养下,性成熟雄虾的绝对摄食能、绝对生长能和特定生长率随数量上升而降低,且每个水槽放养1尾雄虾显著高于每个水槽放养2~3尾雄虾;性成熟雄虾绝对呼吸能则随数量上升而显著升高.不同雌雄配比下,性成熟罗氏沼虾的绝对生长能随雄虾数量上升而显著降低,雌雄配比1:1的特定生长率显著高于雌雄配比1:2和1:3;雌雄配比1:1的绝对排泄能显著低于雌雄配比1:2和1:3,其占摄食能的百分比随雄虾数量上升而上升.[结论]高温更适合罗氏沼虾的生长发育,且以26℃最适宜,在此水温条件下罗氏沼虾新陈代谢更旺盛.在性成熟罗氏沼虾生长过程中,其能量积累可能受打斗、占区和交配等生物学行为影响,且相同密度下雄虾比例增加有可能加剧影响.     

南极磷虾羧甲基壳聚糖对罗氏沼虾的保鲜效果

以自制的南极磷虾羧甲基壳聚糖(CMC)为保鲜剂，将形体接近的罗氏沼虾浸泡于不同质量分数(0.5%、1.0%、1.5%)的CMC中，取出沥干后形成保鲜薄膜，以不浸泡CMC的罗氏沼虾为对照，在(4±1) ℃条件下贮藏7 d，通过挥发性盐基氮(TVB–N)值、pH、硫代巴比妥(TBA)值、菌落总数、K值和感官评分等指标来评价罗氏沼虾在贮藏期间的品质变化，探究南极磷虾CMC对罗氏沼虾的保鲜效果。结果表明：从贮藏1 d开始，同一贮藏时间的CMC处理组的TVB–N值、TBA值、菌落总数和K值均小于对照组的，而感官评分高于对照组的；在贮藏后期(5~7 d)的同一贮藏时间，CMC处理组的pH低于对照组的；在整个贮藏期间，除少数几个时间点外，1.0% CMC处理组的TVB–N值、pH、TBA值、菌落总数、K值均小于0.5%、1.5% CMC处理组的，而感官评分则高于0.5%、1.5% CMC处理组的。综合可得，1.0% CMC对罗氏沼虾的保鲜效果更好，能有效降低罗氏沼虾体内微生物数量和酶活性，抑制虾体内蛋白质分解和脂肪氧化程度，延长罗氏沼虾贮藏期。     

罗氏沼虾TLRs基因表达差异分析

[目的]探究罗氏沼虾Toll样受体(TLRs)基因(MrToll1、MrToll2和MrToll3)在不同组织中及感染溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)后不同时间鳃组织的表达量差异变化,为揭示罗氏沼虾TLRs在应对病害等免疫方面的表现和作用机理提供参考依据.[方法]利用实时荧光定量RT-PCR分别检测MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在罗氏沼虾肌肉、鳃、肝胰腺、心脏、胃、肠、血淋巴、神经节、眼柄等不同组织中的相对表达量,并以同样方法检测罗氏沼虾感染溶藻弧菌后TLRs基因的相对表达量变化情况.[结果]罗氏沼虾MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在各组织中广泛表达,但存在组织表达差异性.MrToll1和MrToll2基因在鳃组织中的相对表达量最高,分别是在肝胰腺中相对表达量的19.26和20.03倍;MrToll3基因在神经节中的相对表达量最高,是在肝胰腺中的10.13倍.感染溶藻弧菌悬液后,罗氏沼虾死亡率随时间的推移不断升高,至注射感染72 h时死亡率达峰值(64%),随后不再出现死亡.感染溶藻弧菌后罗氏沼虾MrToll1基因表达量呈先升高后下降的变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;Mrtoll2基因表达量呈下降—升高—下降—升高的波动变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;MrToll3基因表达量急剧下降,且维持在较低水平.[结论]罗氏沼虾MrToll1基因是鳃组织抵御细菌感染的主要应答基因,MrToll2基因可能参与鳃组织的其他免疫活动,MrToll3基因的调控机制尚未清晰.     

停乳链球菌活菌和死菌对日本沼虾机体SOD活性和MDA含量影响的比较

将健康日本沼虾[(1.40±0.12)g]随机分为3组,注射2针PBS的对照组,第1针注射PBS、第2针注射停乳链球菌活菌的感染组,第1针注射停乳链球菌死菌、第2针注射停乳链球菌活菌的免疫组,2针相隔24 h。第2针注射后6 h、12 h、24 h、5 d和10 d分别采集肝胰腺、肌肉和鳃组织,测定其中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。试验结果显示:感染组活菌注射6、12 h肌肉以及5 d肝胰腺中SOD活性相对于对照组均显著升高(P0.05);免疫组活菌注射6 h后肝胰腺、肌肉和鳃中SOD活性显著高于感染组,而MDA含量显著低于感染组(P0.05);6、12、24 h肌肉、24 h肝胰腺、5 d鳃中SOD活性均为免疫组显著高于感染组(P0.05);12 h的肌肉和5 d的鳃中MDA含量,免疫组显著小于感染组(P0.05)。结果表明,灭活链球菌注射日本沼虾24 h后再注射活菌,6 h后可提高日本沼虾机体免疫活性,降低机体MDA含量。     

保幼激素类似物及17α-羟孕酮对罗氏沼虾的产卵作用

用1％浓度的保幼激素类似物ZR515(JHA-ZR515)分别以40μl／尾、70μl／尾和100μl／尾三个剂量点滴罗氏沼虾均能不同程度提高罗氏沼虾产卵率。其中40μl／尾剂量组产卵率为75％，比对照组高出1倍多，亲虾存活率为100，孵出的蚤状幼体发育正常。单侧去眼柄能提高罗氏沼虾产卵率，但亲虾存活率较低。用17α-羟孕酮以2．2μg／尾注射罗氏沼虾显示抑制产卵效应。     

保幼激素类似物及17α-羟孕酮对罗氏沼虾的产卵作用

用1％浓度的保幼激素类似物ZR515(JHA-ZR515)分别以40μl／尾、70μl／尾和100μl／尾三个剂量点滴罗氏沼虾均能不同程度提高罗氏沼虾产卵率。其中40μl／尾剂量组产卵率为75％，比对照组高出1倍多，亲虾存活率为100，孵出的蚤状幼体发育正常。单侧去眼柄能提高罗氏沼虾产卵率，但亲虾存活率较低。用17α-羟孕酮以2．2μg／尾注射罗氏沼虾显示抑制产卵效应。