西瓜子叶组织培养中四倍体的产生及鉴定

5个二倍体西瓜品种子叶离体培养过程中,外植体分化频率、增殖系数、畸芽率及四倍体频率随基因型、外植体所处部位、激素浓度不同而存在着较大差异.用不定芽叶尖染色体计数可100%检出四倍体.试管苗快繁中四倍体对营养逆境有较强的适应性.     

野生二倍体草莓叶片离体再生及四倍体诱导

以野生绿色草莓"5-9"试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对叶片再生不定芽效率的影响及适宜的四倍体诱导方法.结果表明,当培养基中TDZ质量浓度为2.0 mg/L、2,4-D质量浓度为0.5 mg/L时,再生频率达96.3%;以附加50、100、150 mg/L秋水仙碱的液体和固体再生培养基处理叶片5 d,各个处理均诱导出四倍体植株,诱变率在15.1%～23.3%之间.诱变获得的四倍体试管苗表现出生长缓慢、叶色浓绿、叶片大、叶形指数变小等典型的四倍体植株特点,与普通二倍体试管苗相比具有明显差异.本研究揭示野生绿色草莓试管苗叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙碱处理是获得四倍体的有效途径.     

新疆雪莲组培苗的染色体观察

[目的]为雪莲的组织培养奠定细胞学基础。[方法]以新疆雪莲无菌苗的根部、下胚轴、真叶及种胚为外植体进行组织培养,观察愈伤组织和不定芽阶段的染色体变异。[结果]4种外植体形成的愈伤组织细胞中有二倍体、少量四倍体、六倍体、非整倍体及其他倍性细胞。以种胚为外植体的愈伤组织中染色体数目异常的频率最高,但愈伤组织不出芽或出芽量极少,且芽形态不正常。以根部、下胚轴和真叶为外植体的愈伤组织出芽比例高,茎尖、根尖细胞染色体大多数为二倍体,少数为嵌合体,嵌合体苗中四倍体细胞比例很小。愈伤组织中存在异常的有丝分裂现象,不定芽中难以发现。[结论]雪莲组织培养中的染色体变异是由激素引起的,非整倍性的愈伤组织细胞分化能力低。     

甘蓝型黄籽油菜子叶离体培养初报

以甘蓝型油菜黄籽双单倍体品系04K91为供试材料,以无菌苗子叶为离体培养外植体,考察了苗龄(7d、10d、13d)与外植体部位及大小(带柄子叶、1/4子叶片、1/8子叶片和子叶柄切段)对芽再生频率的影响。方差分析结果表明,苗龄对芽再生频率有显著影响,外植体对芽再生频率有极显著影响,而苗龄×外植体对芽再生频率影响不显著。多重比较结果表明,以7d苗龄无菌苗的带柄子叶或1/4子叶片为外植体较好,出芽率较高,达90%以上。     

秋水仙素诱导观音莲染色体加倍研究

以观音莲组培苗茎段外植体为诱导材料,研究不同浓度秋水仙素和不同处理时间对其四倍体诱导效率的影响.结果表明,四倍体诱导率因秋水仙素浓度和处理时间不同而不同,120 mg/L秋水仙素处理8 d效果最好,此时诱导率最高,平均每瓶四倍体数量最多;随着秋水仙素处理浓度或者处理时间的增加,外植体成活率、每苗有效不定芽株数均降低.     

豫杂一号泡桐体细胞同源四倍体诱导及其体外植株再生

在含不同质量浓度秋水仙素固液双层培养基上,以叶片为外植体进行了豫杂一号泡桐同源四倍体的诱导,同时建立了其体外植株再生系统。结果表明,秋水仙素质量浓度和处理时间对豫杂一号泡桐同源四倍体诱导率影响显著,外植体预培养时间影响不显著。在含20 mg.L-1秋水仙素MS培养基上处理48 h,未经预培养叶片四倍体诱导率最高达21.2%。同源四倍体幼苗叶片及其单气孔器较二倍体变大,气孔密度变小,叶绿素含量和SOD活性升高,MDA含量和POD活性降低。此外,叶片是同源四倍体豫杂一号泡桐体外植株再生的最佳外植体,MS+0.5 mg.L-1NAA+16 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA分别是其芽诱导和根诱导的最适培养基。     

四倍体金银花组培快繁育苗技术研究

通过以组织培养的方式繁育四倍体金银花种苗。选择外植体,试验选择较易灭菌,且萌发力强的春季当年带顶芽的茎段。通过对外植体的愈伤组织、新生芽、不定根的诱导（采用MS,1/2MS为基本培养基,对生长激素6-BA和NAA浓度进行调节）,得到了适合四倍体金银花进行组织培养的体系。为四倍体金银花进行脱毒快繁,工厂化育苗奠定了理论基础。     

甘蓝型油菜花茎高效再生体系研究

研究了甘蓝型油菜花茎外植体高效诱导不定芽的再生体系,结果表明:以含有2,4-D(0.5￣1.0mg/L)的培养基对外植体进行预培养,以及在分化培养基中加入AgNO3(2￣6mg/L),可显著降低外植体褐化坏死的频率,提高了不定芽的发生频率及其再生能力;6BA(2.5mg/L)与NAA(0.1mg/L)配合使用有利于提高不定芽发生频率;再生的不定芽90%可长根。     

二、四倍体不结球白菜子叶再生能力及其与内源激素的关系

以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜（Brassica campestris ssp．chinensis Makino）的子叶为外植体，正交设计筛选不定芽诱导优化培养基，测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA（吲哚-3-乙酸）和细胞分裂素ZR3（玉米素核苷类）的含量及ZRs／IAA比值大小，探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明：四倍体不定芽再生率变化范围是33．4％-83．3％，2个二倍体材料的最高再生率分别是33．3％和80．3％。四倍体白菜内源激素ZRs和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性，结果表明再生能力与ZRs／IAA比值显著相关，相关系数分别为0．9428和0．8857。     

水稻野生型愈伤组织中耐盐细胞频率的影响因素

利用组织培养技术研究愈伤组织的倍性、品种、外植体对野生型愈伤组织中耐盐细胞频率的影响。发现：（１）单倍体和二倍体愈僵组织的耐盐细胞频率比较接近,四倍体愈伤中耐盐细胞频率一般比单倍体和二倍体愈伤组织的小;（２）不同品种的耐盐细胞频率差异大;（３）二倍体植株幼穗培养产生的二倍体愈伤组织和四倍体植株花药培养产生的二倍体愈伤组织的耐盐细胞频率没有显著的差异。     

秋水仙素离体诱导金线莲多倍体的研究

染色体加倍的试验结果表明,金线莲在秋水仙素浓度为300 mg/L(含有2%DMSO)时,茎节相对于顶芽受到更明显的抑制作用。随着处理时间的延长,秋水仙素对外植体的毒害作用加强,表现为外植体死亡率增多。300 mg/L的秋水仙素处理3～19 d均可导致材料的染色体加倍,处理13 d时,细胞染色体完全加倍率达到最大,为72.7%;细胞学鉴别结果显示金线莲的染色体数40条,加倍后的植株染色体数80条。四倍体的气孔大小明显比二倍体的大,二倍体和混倍体的气孔大小差异不显著。     

东方百合多倍体诱导及种球繁育的研究

在离体培养条件下,比较了不同浓度、不同处理时间的秋水仙素对东方百合的诱变效果。结果表明：0．05％的秋水仙素处理24h的诱变效果最佳,诱变频率高达50％。同时采用不定芽技术对变异株进行稳定,获得了完全多倍体。经秋水仙素诱导的加倍群体与正常二倍体植株比较,多倍体植株叶片变厚,叶色变深,叶片变大,气孔显著增大而单位面积气孔数减少。对变异材料进行细胞学研究后发现,变异植株的染色体数目为2n=4x=48,为四倍体．二倍体为2n=2x=24。另外,还发现少数八倍体植株,其染色体数为2n=8x=96,其气孔面积特别大且生长缓慢。最后对多倍体种球的繁育进行了初步的探索。     

金钱树四倍体的诱导与鉴定

以金钱树块茎为材料,采用秋水仙素溶液处理不定芽生长点,研究秋水仙素浓度和处理时间的诱变效果。结果表明:0.1%的秋水仙素溶液浸泡处理块茎的不定芽48 h效果最好,其诱导率为30%。通过流式细胞仪对金钱树植株DNA相对含量的测定,鉴别出四倍体和嵌合体。四倍体植株与二倍体植株在叶厚、保卫细胞大小、气孔密度等方面存在明显差异,其中气孔的形态及密度可作为鉴别四倍体、嵌合体和二倍体的重要性状。     

同源四倍体大麦的产量性状和蛋白质含量研究

比较了１２个同源四倍体大麦原种与其二倍体亲本在每穗小穗数、每穗实粒数、结实率、千粒重、穗重和蛋白质含量上的差异。结果表明四倍体与二倍体在上述性状上存在着极显著的差异。在每穗小穗数、每穗实粒数、结实率和穗重上，四倍体不如二倍体；而千粒重和蛋白质含量上，四倍体则优于二倍体。四倍体原种间在上述性状上也表现出明显的差异，原种内不同单株在每穗实粒数和结实率上亦有很大在变幅。选择对部分原种的结实率有一定的正效应。     

组织培养中用秋水仙素诱发黄花菜同源四倍体的研究

 在组织培养中用秋水仙素溶液诱发黄花菜同源四倍体的试验结果表明，该方法诱发频率高，能使加倍、选择和快速繁殖同步进行。在此基础上建立了同源四倍体黄花菜体细胞无性系变异的育种程序，并育成了国际上第一个食用黄花菜同源四倍体新品系。通过鉴定，该品系高产、优质、有重要推广价值。另外，对获得的黄花菜同源四倍体与对照二倍体试管苗进行了形态、细胞学及花粉粒等方面的观察比较。     

大豆再生植株的研究

本文以栽培大豆为材料，进行了不同外植体、培养基、基因型及放置方式对不定芽诱导效果和植株再生的研究。结果表明：①所试四种外植体中，以成熟子叶节芽诱导频率最高，可达９６％；②不同外植体所需要的适宜培养基不同；③不同基因型对大豆子叶节诱导芽效果差异很大；④子叶节垂直半埋于培养基比平置于培养基时，其芽诱导效率高。不定芽在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｐｐｍ的培养基上诱导生根，长成完整小植株。     

秋水仙素诱导兰考泡桐四倍体的研究

用不同质量浓度的秋水仙素液体、固体和固液双层介质处理预培养时间不同的兰考泡桐二倍体幼苗叶片,叶柄和茎段后,在不同培养基上进行体外植株再生,得到了兰考泡桐的四倍体植株.结果表明,固液双层介质处理兰考泡桐叶片四倍体诱导率最高可达23.4%.显微镜观察诱变植株根尖染色体数为2n=4x=80,四倍体幼苗较二倍体幼苗叶片大而厚、叶色深,气孔大,生长更为健壮.     

三七试管苗繁殖技术的研究

以三七4种外植体为材料,研究愈伤组织的诱导、植株的分化、壮苗及生根的情况,探讨获得高分化率的试管苗再生途径,结果表明以MS为基本培养基,选用幼嫩花序为外植体,愈伤组织诱导率及试管苗分化率高;在加入2,4—D的诱导培养基暗条件下可直接诱导出胚状体;愈伤组织在光下分化培养也可发生不定芽;通过胚状体发生途径分化成苗率高。成苗过程中,GA_2与MET分别起到促进胚状体成熟与生根作用。1989年初首次获得试管苗,现共获得植株2 214株,为建立三七试管苗工厂生产研究打下基础。     

新铁炮百合多倍体诱导及鉴定*

 以新铁炮百合的试管苗为材料,在离体培养条件下,比较了不同浓度、不同处理时间的秋水仙素的诱变效果,比较了加入2％二甲基亚砜（DMSO）后的秋水仙素后的作用效果。结果表明：浸泡法以005%的秋水仙素和2％DMSO处理36h的诱变效果最佳,变异率达到了86％。混培法以添加005％的秋水仙素和2％DMSO处理10d后效果最佳,变异率达到了54％。DMSO对新铁炮百合的诱导率有促进作用。显微镜观测气孔特征后发现：二倍体与四倍体植株的叶下表皮气孔密度及气孔保卫细胞长、宽均有明显差异。