蚕豆组织培养再生植株的研究

[目的]研究不同外植体、培养基、基因型及放置方式对蚕豆不定芽诱导效果和植株再生的影响。[方法]以蚕豆幼胚、未成熟子叶、成熟子叶、成熟子叶节为材料,通过诱导不定芽→分成单个小植株→诱导生根这一过程检测不同外植体、培养基、基因型、放置方式对不定芽诱导及植株再生的影响。[结果]所试4种外植体中,以成熟子叶节芽诱导频率最高,可达95%;不同外植体所需要的适宜培养基不同;不同基因型对蚕豆子叶节诱导芽效果差异很大;子叶节垂直半埋于培养基比平置于培养基时,其芽诱导效率高,且不定芽在IBA浓度为120mg/L的MS培养基上诱导生根,长成完整小植株。[结论]该研究建立了蚕豆器官发生再生植株的试验程序,为进一步研究提供试验依据。     

向日葵(Helianthus annuus L.)不同外植体组织培养及其再生的研究

【目的】建立向日葵不同外植体离体培养再生体系，为向日葵遗传转化、突变体筛选奠定基础。【方法】以不同基因型向日葵为材料，研究了向日葵不同外植体在不同的培养基中诱导不定芽再生的频率。【结果】向日葵不同基因型外植体在含适宜吲哚-3-乙酸（IAA）、6-苄氨基嘌呤（6-BA）等激素的培养基中均较易形成愈伤组织，但愈伤组织诱导不定芽的能力则较弱；不同基因型向日葵外植体的不定芽诱导率依次为子叶节＞下胚轴＞子叶＞真叶；诱导子叶节不定芽再生的适宜6-BA浓度为1.2～1.8 mg•L-1， 下胚轴为1.8 mg•L-1，子叶为0.6 mg•L-1，真叶却未见到诱导出不定芽；MS + 0.03 mg•L-1 IAA + 1.2～1.5 mg•L-1 6-BA培养基可用于向日葵子叶、子叶节和下胚轴再生体系；不同基因型向日葵诱导不定芽的能力差别较大，其中，基因型PR29再生能力较强。【结论】本研究成功地建立了向日葵不同外植体离体培养再生途径，并获得了再生植株。     

红麻子叶和真叶不定芽直接诱导的研究

为获得红麻不定芽直接诱导的最佳方案，以MS培养基为基础，以其无菌苗子叶和真叶为外植体进行对比研究．结果表明，附加3．0～3．5mg／L TDZ和0．1mg／L NAA可直接诱导子叶和真叶形成不定芽，子叶诱导效果优于真叶，不同基因型来源的材料存在差异；附加0．1mg／L 6-BA和0．01mg／L NAA对不定芽增殖培养后，1／2 MS培养基上附加0．05mg／L NAA可诱导生根而形成植株。     

棉花子叶离体培养与植株再生

以棉花无菌苗子叶为外植体，就激素对其不定芽的分化及植株再生的影响进行了研究。实验结果表明，BA对子叶不定芽的诱导效果最好；TDZ次之，ZT和KT不能诱导子叶形成不定芽，IAA与BA配合使用，叶片不定芽分化频率明显提高；NAA与BA配合使用叶片不定芽分化频率有所下降；2，4－D对子叶不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加1．5mg/L GA3有利于芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的MS或MS＋0．5mg/L NAA培养基上诱导生根，形成完全植株。     

棉花子叶培养条件初步研究

本实验以棉花子叶为外植体,研究不同激素对其不定芽分化及其植株再生的影响。结果表明,BA对子叶不定芽的诱导效果最好,TDZ次子;ZT和KT不能诱导子叶形成不定芽。在分化培养基中添加1.5mg/LGA3有利于芽的伸长。     

利用双目标组织建立高频大豆再生体系的研究

利用双目标组织(即一个外植体同时含有子叶节和初生叶节两个目标组织)进行了大豆高频再生体系建立的研究,以便为高效大豆转基因技术体系的建立提供技术保障。结果表明,不同基因型之间大豆不定芽诱导率不同,在所试的5个大豆品种中,初生叶节不定芽诱导率最高的品种是合丰35,合丰25次之,分别达到50.0%,46.9%;而子叶节不定芽诱导率最高的品种是合丰25,为75.0%;总的不定芽诱导率最高的品种是合丰25,达到121.9%。不同浓度6-BA对丛生芽的诱导率在不同品种间有差异,6-BA浓度为1.5 mg/L时,合丰35的丛生芽诱导率最高,平均每个外植体诱导出6.7个丛生芽。     

西葫芦双单倍体自交一代离体再生研究

以西葫芦DH12-11409双单倍体植株自交后代种子为试材,研究不同激素组合、外植体类型和苗龄对诱导西葫芦不定芽再生以及不定芽生根的影响。结果表明,取5d龄西葫芦双单倍体黄绿色子叶的子叶节为外植体,在MS+30g/L Suc+8g/L Agar+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA培养基上诱导不定芽效果最好,诱导率高达90.0%,分化系数为8.5;生根培养基则以MS培养基中添加0.05或0.1mg/L NAA为宜;5~6片真叶再生植株经驯化移栽成活率高达90.0%,为再生植株驯化移栽的最佳时期。     

南瓜离体培养及植株再生的研究

研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。     

榨菜子叶和带柄子叶再生植株的研究

以榨菜子叶及带柄子叶等为外植体,在添加不同激素的MS培养基上,经不定芽诱导,不定芽伸长,生根等步骤,获得了完整的再生植株.结果表明:4 d苗龄的子叶再生能力最强,带柄子叶的最佳苗龄为5～6 d.子叶和带柄子叶分别在MS BA 2 mg/L NAA 0.4 mg/L AgNO3 5 mg/L和MS BA 2 mg/L NAA 0.2 mg/L AgNO3 5 mg/L的培养基中不定芽分化的效果较好.不同基因型间对子叶外植体的再生影响不大,但对带柄子叶的再生影响较明显.     

影响大豆子叶节丛生芽形成的诱导因子研究

以栽培大豆品种吉林 4 3和东农 4 2的子叶节为外植体 ,研究了无菌苗培养基、基本培养基、6_苄氨基嘌呤 (6BA)和吲哚丁酸 (IBA) 4个因子对丛生芽形成的影响。结果表明 :3种无菌苗培养基在诱导丛生芽率和每个外植体丛生芽数上无显著差异 ,基本培养基MSB诱导丛生芽的效果好于B5,在基本培养基中附加 1 1mg/L或 1 7mg/L的 6_苄氨基嘌呤对诱导子叶节丛生芽有显著的促进作用。子叶节丛生芽诱导率在吉林 4 3和东农 4 2两个基因型间存在差异。     

影响农杆菌介导的黄瓜抗虫基因遗传转化体系的因素研究

对影响农杆菌介导的黄瓜抗虫转基因遗传转化体系的主要因素进行试验研究,结果表明:较大外植体即幼嫩子叶切成2块有利于芽诱导;同时在菌液和共培养基中添加乙酰丁香酮,芽诱导效果优于只在菌液或共培养基中添加乙酰丁香酮;延迟7d再进行筛选可显著提高抗性芽诱导率;不同基因型材料抗性芽分化方式和分化率不同。     

东亚唐棣组织培养体系1）

以东亚唐棣带芽茎段为外植体,研究了不同消毒方法对于无菌体系建立的影响、不同类型的芽对于诱导萌发的影响、不同基本培养基以及激素组合对于增殖与生根的影响。结果表明：较为适合东亚唐棣消毒的方法为75％酒精消毒30 s,0．1％HgCl2消毒8 min,萌发率为16．7％;带有一侧芽的顶芽为较为合适的外植体,萌发率可达87．6％;最适增殖培养基为MS＋6－BA 3．0 mg· L－1＋NAA 0．1 mg· L－1,增殖系数可达4．8;最适生根培养基为1／4MS＋NAA 0．1 mg· L－1。     

不同花生品种幼叶丛生芽诱导研究

为筛选高诱导率的花生品种并建立花生的高频再生体系,比较了22个花生品种在MS和1/2MS培养基中的萌发情况,同时以4d苗龄的花生幼叶为外植体,研究了花生幼叶丛生芽诱导率的品种差异性,以及羧苄青霉素(Carb)和头孢霉素(Cef)对花生丛生芽诱导的影响。结果表明:22个花生品种的种子在1/2MS培养基上萌发率均比在MS培养基上稍高。不同品种花生幼叶丛生芽诱导率差异明显,其中Hz006、Hz001、Hz012和Hz037幼叶外植体的丛生芽诱导率较高,均高于90%,Hz015最低,只有31.8%。添加500mg/L Carb对花生幼叶丛生芽分化无抑制作用,其中,Hz009添加500mg/L Carb后,丛生芽诱导率比不添加抗生素的CK提高13.5个百分点;Cef则对多数花生品种芽诱导率具有抑制作用,其中以Hz010最为明显,其丛生芽诱导率下降48.5个百分点。因此,花生种子预培养的适宜培养基为1/2MS,遗传转化时应选择Hz006、Hz001、Hz012和Hz037等高诱导率的花生品种,农杆菌介导花生转化时选择Carb抑菌比较合适。     

甘薯品种南薯88的组织培养及植株再生研究

[目的]为南薯88的离体筛选及遗传转化奠定基础。[方法]以南薯88的叶片和叶柄为外植体,置于不同激素配比的培养基中,进行组织培养及植株再生,研究不同激素及外植体对南薯88植株再生的影响。[结果]单独使用6-BA、NAA诱导愈伤组织的效果不理想。过高浓度的2,4-D不利于外植体根的形成,也不利于芽的诱导。在MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L培养基中,两种外植体的出愈率均达100%,根分化率均达100%,叶片的芽分化率分别为20%、7%,叶柄的芽分化率均为7%,成功获得再生植株。相同的培养基,不同外植体的愈伤组织生长情况差异不大,器官的分化表现出一定的差异。[结论]南薯88组织培养较适宜的培养基为MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L。南薯88叶片的分化能力大于叶柄。     

小麦未熟胚离体培养的研究——愈伤组织的诱导及再生植株

本文研究了小麦未熟胚培养中的几个关键问题,结果表明:不同品种类型对幼胚离体培养反应差异明显,不仅最终成苗率相差悬殊,从9.8～100％,胚龄大小及胚的放置方向也同样反应出品种间的不同。研究结果还明确了几种主要培养基和培养基中2,4-D浓度的效应。     

楤木属植物组织培养研究综述

阐述了国内外楤木属Aralia植物组织培养研究的现状与进展。外植体、培养基、植物生长调节物质对楤木属植物愈合组织、不定芽和体细胞胚诱导均产生重要影响,叶片、叶柄、嫩茎、顶芽、子叶、花序等均可用作初代培养的外植体,其中叶片和嫩茎是最常用的外植体;培养方式有固体培养和液体培养,其中液体培养通常用于体细胞胚的培养;MS（Murashige and Skoog）是最常用的基本培养基,培养基中植物生长调节剂种类、浓度及其配比是楤木属植物离体培养成功与否的关键因素,其中生长素对愈合组织诱导起到主要作用,脱落酸（ABA）可以有效调控体细胞胚同步化;楤木属植物生根容易,采用常规的炼苗移栽,成活率较高。楤木属植物体细胞胚胎发生调控的分子机制的研究尚处于初步阶段。     

松果菊根外植体植株再生能力的评价

为了评价松果菊Echinacea purpurea L.根外植体的再生能力,将从松果菊无菌小苗得到的根外植体和叶片以及叶柄外植体接种到含有不同种类和浓度的细胞分裂素和生长素的培养基上,诱导不定芽的再生.结果表明,在多数情况下,根外植体的再生能力显著高于叶片,和叶柄类似.0.3 mg/L的苄基腺嘌呤和0.01 mg/L的萘乙酸是诱导根外植体不定芽再生最合适的激素种类和质量浓度组合.根外植体培养的不定芽再生频率为100%,每个根外植体得到再生芽1.75个.当把这些由根再生的不定芽从母体组织切开并转移培养到含有0.01 mg/L萘乙酸的培养基后,很容易生根并成为完整的植株.可见根是组培快繁松果菊理想的外植体材料.     

牛尾菜组织培养中外植体褐变现象控制研究

以幼嫩叶片、顶芽及茎段为外植体,研究不同外植体、消毒时间、抗氧化剂预处理、褐化剂以及不同培养基组合等对外植体褐变控制的效果.结果表明,嫩叶、顶芽及茎段的褐化率均随着0.1%升汞溶液消毒时间的延长而升高,而诱导率和污染率不断降低,最佳外植体为顶芽,消毒时间为10 min,诱导率达70.0%.采用3种抗氧化剂预处理20min,均可抑制顶芽褐化,强弱表现为PVP＞Vc＞Na2S2O3,Vc溶液可以加快侧芽的萌动及生长.3种抗褐化剂对茎段褐化均有不同程度的抑制效果,以0.3%AC抗褐化效果最佳,茎段未发生褐化,侧芽生长最好.在不同激素配比培养基中,随着6-BA和NAA浓度的提高,外植体发生褐化时间呈现提前的趋势,以MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L培养基中的外植体诱导率最高,为63.4%.此外,相对于基本培养基MS、1/2MS,在低无机盐离子浓度WPM基本培养基中,外植体褐化的时间有所推迟,可减缓外植体褐化程度.因此,适宜的外植体、消毒时间、抗氧化剂、抗褐化剂、激素组合配比和基本培养基,可以有效控制牛尾菜的褐化,提高诱导率.