柑橘不同种属花粉形态观察

【目的】研究和了解柑橘不同种属花粉形态的多样性,为柑橘不同种属品种的鉴定以及分类提供一定的依据。【方法】以枳属、金柑属和柑橘属不同品种的花粉为试材,通过FEI Quanta 200场发射环境扫描电镜观察花粉的赤道面、极面、外壁纹饰等形态特征,并进行比较分析。【结果】孢粉学研究表明,枳属和金柑属材料的花粉粒具有4条孔沟,柑橘属中除柠檬和宜昌橙具有5条孔沟外,其余品种皆为4条孔沟;枳属花粉粒大小(P×E)为(20.40~30.33)μm×(17.91~28.49)μm,网脊宽为0.52~0.58μm,网眼多为不规则多角形,网眼直径大小为0.48~0.74μm,金柑属花粉粒大小(P×E)为(23.81~29.58)μm×(15.73~17.37)μm,网脊宽为0.79~0.93μm,网眼为圆形或近圆形,直径大小为0.66~1.07μm;柑橘属花粉粒大小(P×E)为(20.52~39.14)μm×(14.28~31.93)μm,网脊宽为0.17~1.41μm,网眼直径大小为0.43~1.69μm,多为圆形或近圆形,但宜昌橙区、枸橼区的部分品种网眼为不规则多角形;枳属、金柑属的品种花粉粒的外壁纹饰均为网状纹饰或细网状纹饰,柑橘属中除柚类和部分葡萄柚具有穴状纹饰外,其余品种皆为网状纹饰或细网状纹饰。【结论】孢粉学研究结果表明柑橘不同种属品种的花粉特征具有不同的形态特征,体现了花粉形态具有多样性,花粉形态特征的差异可以为柑橘不同种属品种的鉴定以及系统分类提供一定的依据。从花粉形态的原始性分析推测,莽山野柑和姑婆山野生皱皮柑是目前发现的最原始的柑橘野生种。     

柑橘品种鉴定的SSR标记开发和指纹图谱库构建

【目的】筛选出一套SSR核心引物,用于构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,为柑橘种苗认证、品种登记和植物新品种保护提供技术支撑。【方法】以柑橘属8个主要栽培种类为试材进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出多态性丰富、扩增条带稳定的引物对部分参试品种进行PCR扩增,扩增产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行进一步的引物筛选;筛选得到的引物进行荧光标记,并选用部分柑橘品种进行PCR扩增,扩增产物利用基因分析仪检测,分别计算各引物的PIC值、等位基因数目,选取一套多态性丰富的适合进行荧光毛细管电泳检测的SSR引物组合,进而对所有参试品种进行分析,构建柑橘品种的DNA指纹图谱库,同时利用筛选的SSR标记对参试品种进行鉴定。【结果】初期以柑橘属8个种的代表品种(太田椪柑、沙田柚、沅江酸橙、大红甜橙、邓肯葡萄柚、枸橼、费米耐劳柠檬和墨西哥来檬)为材料,用362对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经4%琼脂糖凝胶电泳检测,初步筛选出80对种间多态性高、扩增稳定的SSR引物;进一步从8个种类里选择不同类型的64个柑橘品种,用上述筛选出的80对SSR引物进行PCR扩增,扩增产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,再筛选出60对品种类型间多态性高、扩增稳定、条带清晰的SSR引物,并分别进行荧光标记;另以168份柑橘品种为材料对上述60对SSR引物进行PCR扩增,经荧光毛细管电泳检测,依据各引物的PIC值、等位基因数目、峰图读取难易程度、扩增稳定性及染色体位置等,最终筛选出21对SSR引物作为指纹图谱库构建的核心引物。为消除不同仪器、不同试验批次等引起的误差,为21对SSR引物各主要等位变异选择相应的参照品种。根据各引物标记的荧光颜色及扩增片段大小进行合理组合,21对SSR引物可分成5组进行多重电泳,共采集500份柑橘品种的DNA指纹。利用SSR标记,有111份品种仅用1对引物即可鉴别,86份品种用2对引物组合即可鉴别,24份品种用3对引物组合即可鉴别,另外279份品种虽无法单独一一鉴别,但可分为87个小组,组内品种无法区分,组间品种易鉴别。【结论】利用筛选出的21对SSR核心引物,构建了包含500份柑橘品种的DNA指纹图谱库,筛选出部分品种的特异标记,可以鉴别221份柑橘品种和87个品种组合,构建了基于毛细管电泳平台的柑橘SSR分子标记品种鉴定体系。     

核桃整形修剪中存在问题与技术建议

正河北省核桃产业自本世纪初以来发展迅猛,目前全省核桃面积已达27万多hm~2,年产量18万t。核桃树管理相对简便,投入成本低,有较高的经济效益,不但山区发展多,一些平原地区也有发展。但由于传统观念等原因,核桃种植者多认为核桃不用精细管理也能结果,重栽植、轻管理的现象普遍存在,许多核桃放     

云南省茶叶产业发展现状与分析

高产、优质、高效、安全、生态已成为茶叶产业化、规模化、现代化的必然选择。通过对云南省茶叶产业的现状进行调查与分析,指出云南省茶叶产业发展的现状以及存在的问题,并提出了进一步推进云南省茶叶标准化、现代化的对策与建议。     

马来西亚早熟柚在扶绥县引种观察

观察了从马来西亚引进的早熟柚在广西扶绥县的表现,介绍了植株生长、物候期、植物学性状、果实品质及适应性与丰产性,根据结果探讨了该品种在广西桂南地区的发展前景。     

茉莉花ISSR-PCR反应体系的建立

以茉莉花为材料,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对茉莉花ISSR扩增结果的影响.结果表明:在20μL的反应体中,Mg2 的用量为1.2～1.6 mmol/L,dNTPs 浓度为0.15 mmol/L,引物的浓度为0.5μmol/L,Taq DNA 聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为40～70 ng,在48～50℃的退火温度下40个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱.     

桂林市沙糖橘叶片的营养元素丰缺状况研究

为了解桂林市沙糖橘产区的叶片营养元素的丰缺状况,并为桂林市沙糖橘的合理施肥提供一定的理论依据,于2017年调查分析了桂林市沙糖橘产区6个县60个果园叶片的氮(N)、磷(P)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、硼(B)、铁(Fe)、锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)的含量状况。结果显示,桂林市沙糖橘叶片中N、P、K、Ca、Mg、B、Fe、Mn、Cu、Zn的平均含量分别为：(29.92±0.36)、(1.23±0.01)、(14.54±0.78)、(32.96±1.03)、(2.67±0.10) g.kg-1和(95.77±4.72)、(50.64±8.57)、(77.42±5.70)、(4.70±0.59)、(15.72±0.95)mg.kg-1.。其中,N和B含量普遍偏多,位于高量和过量水平的果园比例分别为43.33%和78.33%;P、K、Ca、Mg、Cu和Zn的含量普遍存在偏少现象,位于低量和缺乏水平的果园比例分别为38.33%、35.00%、40.00%、43.33%、65.00%和81.67%;Fe和Mn的含量适中的果园比例分别为65%和66.67%,均同时存在偏多或偏少的现象。桂林市沙糖橘产区树体营养元素失衡现象普遍存在,生产上应减少N和B肥的用量,重视补充P、K、Ca、Mg、Cu、Zn肥,合理施用Fe和Mn肥,以确保树体营养均衡,实现沙糖橘的优质丰产。     

一种快速鉴定柑橘黄龙病耐性种质材料的方法

【目的】研发一种快速鉴定柑橘黄龙病耐性种质材料的方法,为加快柑橘黄龙病耐性育种进程和提高育种效率打下基础。【方法】以收集的36份疑似对柑橘黄龙病具有耐性的柑橘种质为材料,采用直接高接于感染黄龙病菌柑橘树上的方法(高接染毒鉴定法),通过田间症状观察结合定量PCR检测对试验材料的耐病性进行鉴定评价。【结果】春季高接供试材料1个月后接芽萌发,3个月后(2018年6月5日)首次在KH-14上出现典型的叶片斑驳型黄化症状,4个月后(2018年7月5日)观察有23份种质材料的叶片出现斑驳型黄化症状,另外11份种质材料未表现症状;6个月后(2018年9月4日)观察发现KH-18、KH-12、KHY-4、KHY-5和KHY-6等5份种质材料的生长虽然较正常,但叶片已出现黄化症状,只有KH-21的枝梢生长良好,无黄梢和斑驳型黄化叶,初步判定为对黄龙病具有耐性的种质材料。对6份种质材料的定性PCR检测结果表明,KH-21为阴性,其他5份材料为阳性;实时荧光定量PCR检测结果,KH-21的平均黄龙病菌含量为1870.0个细胞/μg DNA,对照材料平均黄龙病菌含量为372285.5个细胞/μg DNA,表明KH-21对柑橘黄龙病具有耐性。【结论】高接染毒鉴定法鉴定周期在6个月左右,具有通量大、时间短、效率高、成本低及结果准确等优点,能达到快速鉴定柑橘品种对柑橘黄龙病耐性的目的,可在柑橘黄龙病耐性鉴定中推广使用。     

柑橘叶片多酚提取工艺优化

为开展柑橘种质资源抗病性鉴定和评价提供技术支持,采用Folin-Ciocalte法测定柑橘叶片多酚含量,以柑橘叶片多酚提取含量为指标,利用正交试验法分析乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间对提取工艺的影响。结果表明,柑橘叶片多酚的最佳提取工艺参数为液料比50∶1,乙醇浓度30%,提取温度40℃,提取时间30 min。该工艺成本低、易操作,可用于柑橘叶片多酚的测定。