芽孢杆菌WY45产β-甘露聚糖酶发酵条件的优化

为获得最佳产酶配方，同时获得高活力的β-甘露聚糖酶，经碳源、氮源、碳氮质量比、初始pH和培养温度5个单因素发酵条件的优化，得到芽孢杆菌WY45发酵产β-甘露聚糖酶的最适发酵培养条件：以4g／L魔芋精粉为碳源，1．33g／L大豆蛋白胨为氮源，碳氮质量比为4／1，初始pH5．5，50℃培养时间96h。此条件下，β-甘露聚糖酶活性最高可达2800U／mL。     

绿色木霉纤维素酶AS3.3032液体发酵的研究

该研究采用绿色木霉AS3.30 32 (Trichodermaviride)液体发酵生产纤维素酶 ,研究了碳源、氮源、培养基起始 pH值、接种量、摇床转速对绿色木酶产酶活力的影响 .结果表明 :①以爆破后的甘蔗渣为碳源时滤纸酶活和 β Case酶活力分别高达 5 .37U/mL和 4.89U/mL ;②不同氮源产酶活力大小顺序为 :NH4 NO3,(NH4 ) 2 HPO4 ,(NH4 ) 2 SO4 ,尿素 ,NH4 Cl,酵母膏 ;③培养基起始 pH为 3 .5 ,摇床转速为 15 0r/min ,培养温度为 2 8℃时 ,产酶活力最高 ;④接种量对产酶活力影响不大 ,以体积分数 φ为 5 %接种量即可     

里氏木霉产α－半乳糖苷酶固体发酵条件的优化

采用单因素及正交试验对里氏木霉Rut C－30固体发酵生产α－半乳糖苷酶的培养基组分（碳源、氮源）及培养条件（ pH值、含水量）进行优化研究,以提高里氏木霉Rut C－30生产α－半乳糖苷酶的效率。结果表明：里氏木霉Rut C－30固体发酵生产α－半乳糖苷酶的最优碳源为玉米芯与甘蔗渣复合碳源;最优氮源为硫酸铵与牛肉膏复合氮源。经正交试验分析各因素对里氏木霉Rut C－30固体发酵生产α－半乳糖苷酶的影响,显著性大小依次为：初始pH值＞初始含水量＞复合氮源配比＞复合碳源配比;固体发酵培养基的最优配方为：玉米芯与甘蔗渣配比4∶1、硫酸铵与牛肉膏配比1∶1、初始含水量1 g∶4 mL（碳源与营养液质量体积比）、初始pH值9．0。在此优化条件下经发酵产酶培养,获得的α－半乳糖苷酶活性为256．497 U／g。     

纳豆激酶液体发酵条件的优化

以纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subitilis natto）为出发菌株，对其液体发酵生产纳豆激酶（Nattokinase，NK）的培养基组成（碳源、氮源、碳氮比和金属离子组成）和培养条件（温度、pH值，发酵时间、接种量和装液量）对产酶量的影响进行了研究。结果表明：液体发酵培养基的最佳碳源为木糖，浓度为1．5％；最佳氮源为大豆蛋白胨，浓度为2．0％；添加无机盐组分为MgSO4 0．05％、CaCl2 0．02％、K2HPO4／KH2PO 40．1％／0．1％。发酵培养的最佳温度为37℃，pH7．0时有利于菌体产酶，最适装液量为100mL／250mL，接种量以2％为最佳，最适种龄为18h；发酵周期为3d。通过优化培养基和发酵条件，产酶量达到1081 U／mL。     

菊粉酶酶源诱变菌株产酶发酵条件的优化

为提高黑曲霉(Aspergillus niger)A24诱变菌株产菊粉酶的活力,采用单因子试验方法对该菌株的最佳产酶条件进行了优化。结果表明:该菌株在以3%菊芋汁为碳源、2%牛肉膏和0.5%(NH4)2HPO4为复合氮源的培养基中,初始pH值6.0,30℃培养72 h的条件下,所得的发酵液中酶活力最高,达到35.21 U/mL,比优化前提高了18%,表明该菌株有一定的应用潜力。     

产κ-卡拉胶酶菌株的筛选及其发酵条件的优化

对K-卡拉胶酶产生菌进行富集培养,以K-卡拉胶为唯一碳源的平板初筛,从多种海藻上分离纯化获得32株具有卡拉胶酶活性的菌株,经摇瓶复筛,从亮管藻上分离的HC4菌株酶活力最高,为50．75U／mL。测定了HC4菌株的16SrRNA基因序列1436bp,在核苷酸序列数据库（NCBI）中进行同源性检索,发现它与Tatrtlana agarivorans的相似性为98％。通过单因子筛选和正交试验,确定该菌株产酶的最佳培养基组成为：碳源K-卡拉胶5g/L;氮源蛋白胨3g／L和NaNO3 1g／L;元机盐NaCl20g／L、K2HPO4·3H2O1g／L、MgSO4·7H2O 0．5g／L和CaCl20．1g／L。最佳培养条件为：摇床转速150r／min,250mL三角瓶中发酵培养基的装液量50mL,接种量4％,发酵培养基起始pH7．5,温度28℃,培养时间28h。经培养基组成及培养条件优化后,HC4菌株的K-卡拉胶酶酶活力提高到602．30U／mL,是优化前的11．87倍。     

产k-卡拉胶酶菌株的筛选及其发酵条件的优化

对K-卡拉胶酶产生菌进行富集培养,以K-卡拉胶为唯一碳源的平板初筛,从多种海藻上分离纯化获得32株具有卡拉胶酶活性的菌株,经摇瓶复筛,从亮管藻上分离的HC4菌株酶活力最高,为50．75U／mL。测定了HC4菌株的16SrRNA基因序列1436bp,在核苷酸序列数据库（NCBI）中进行同源性检索,发现它与Tatrtlana agarivorans的相似性为98％。通过单因子筛选和正交试验,确定该菌株产酶的最佳培养基组成为：碳源K-卡拉胶5g/L;氮源蛋白胨3g／L和NaNO3 1g／L;元机盐NaCl20g／L、K2HPO4·3H2O1g／L、MgSO4·7H2O 0．5g／L和CaCl20．1g／L。最佳培养条件为：摇床转速150r／min,250mL三角瓶中发酵培养基的装液量50mL,接种量4％,发酵培养基起始pH7．5,温度28℃,培养时间28h。经培养基组成及培养条件优化后,HC4菌株的K-卡拉胶酶酶活力提高到602．30U／mL,是优化前的11．87倍。     

重组锰超氧化物歧化酶工程菌摇瓶发酵条件的优化

通过单因素试验对重组锰超氧化物歧化酶（Recombinant Manganese Superoxide Dismutase,rMn—SOD）工程菌的摇瓶发酵的培养基（碳源、氮源、无机盐）和培养条件（接种量、乳糖浓度、时间、温度、摇床转速、pH值等）进行了初步优化．结果表明,工程菌发酵的优化培养基组分（质量分数）为：1．5％蛋白胨、1．5％酵母提取物、1．0％NaCl、0．4％KH2PO4、0．8％K2HPO4、1．5％（体积分数）甘油、0．2％NH,C1和5mmol／LMnCl2．乳糖诱导表达的优化条件为：以5％接种量培养5h后,加入质量分数为0．25％的乳糖进行诱导表达6h．当发酵温度为37℃、摇床转速为180r／min、培养基的初始pH值为7．0时,表达的rMn—SOD的酶活力高．在优化条件下,工程菌的SOD活性达1969．9U／mL,比活力达1081．8U／mg．     

不同碳氮源对复合木质素降解菌木质素降解酶系活力的影响

通过小麦秸秆固态发酵试验,研究了不同的碳、氮源对2株侧耳属白腐真菌Tf1(Pleurotus sajor-caju)和JG1(Pleurotus Cornucopiae Roll)混合发酵产酶活力的影响。结果表明,Lip和MnP是复合木质素降解菌Tf1+JG1主要的木质素降解酶。以淀粉为碳源,麸皮为氮源时总酶活最高,分别为1419.01U/g和1626.64U/g。     

一株可降解纤维素内源真菌的产酶条件优化及酶学性质分析

利用前期从香樟叶片分离出来的1株可降解纤维素的内源真菌(Colletotrichum gloeosporioides)进行液体发酵以分析其纤维素酶的酶活力.采用DNS还原糖法测定菌株液体发酵产生的粗酶液的纤维素酶活力,对发酵条件进行了优化,并对其纤维素酶的酶学性质进行了分析.结果表明,菌龄4d、pH值为4、温度35℃、转速200 r/min、碳源为滤纸、氮源为(NH4)2SO4是最佳产酶发酵条件,最大CMC酶活达到0.263 U/mL,滤纸酶活0.057 U/mL;酶促反应最佳pH值和温度分别为5、55℃;该纤维素酶(CMC酶)酸碱稳定性较好,不耐50℃以上的高温.     

产环糊精葡萄糖基转移酶菌株发酵条件的优化

以一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株为材料,发酵生产环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase).采用单因素试验考察碳源、氮源、培养温度、初始pH等对酶活力影响,在此基础上设计正交试验优化发酵条件.结果表明,优化的发酵条件为以玉米淀粉作碳源、大豆粉作氮源、pH 6.5、30℃发酵培养36 h,菌株所产CGTase的酶活力可达5 046 U/mL.     

产纤维素酶菌株的筛选与鉴定及发酵条件优化研究

从枯树叶及其覆盖的土壤中筛选分离分解纤维素的菌株并进行16S rRNA鉴定,优化其发酵条件。采用CMC-刚果红染色法初筛分解纤维素的菌株,用显微镜观察其形态结构,用16S rRNA序列分析其系统分类地位。单因素试验确定氮源、碳源、pH值和温度对发酵液中羧甲基纤维素酶(CMC)、滤纸酶(FPA)活力的影响。结果表明,分离到1株高效分解纤维素的菌株SKX-1,鉴定SKX-1为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus);最优发酵条件为以蛋白胨为氮源、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为碳源,温度37℃,pH值为7,发酵培养后,CMC酶活力达到173.3 U/mL,FPA酶活力达到210.5 U/mL。该试验为菌株Bacillus cereus SKX-1的利用提供了理论基础。     

丝素-壳聚糖合金膜固定化超氧化物歧化酶的研究

采用富含自由氨基的丝素-壳聚糖合金膜为载体，吸附固定从柞蚕蛹提取分离的超氧化物歧化酶(SOD)，研究并确定了固定化的最佳条件，分别为酶浓度38U／mL、pH6．3、温度4-8℃、时间15h．制得的固定化酶活力为89．1U／g载体，酶的活力回收达到35．9％．     

高效降解纤维素微生物产酶条件优化及复合菌群的构建

以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,从白蚁肠道中分离出具有高效降解纤维素能力的菌株,通过16s rDNA鉴定种属关系,三株菌株命名为2号、4号、5号,2、5号为蜡样芽孢杆菌、4号为链球菌。通过条件优化,确定最佳发酵条件为:CMC-Na为碳源、牛肉膏为氮源、pH值为7、37℃、发酵时间24 h、2%接种量。随机组合不同菌株构建复合菌群,复合菌群产酶能力最强的为4号+5号菌株,酶活达3.67 U/mL。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究

以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。     

用黄色隐球酵母发酵生产辅酶Q10最佳条件的选择

从黄色隐球酵母Cryptococcus luteolus L3302中提取辅酶Q10,经过对氮源、碳源、初始pH、发酵温度等的研究分析,得到最佳的发酵条件。通过最优化试验,确定培养基的碳源为蔗糖和葡萄糖各1．25g／L;氮源为酵母膏和玉米浆,各0．3g／L;pH值6．5,温度28℃,接种量5％,500mL锥形瓶中的装液量为50mL;生长因子以蛋白水解液为优。按此发酵条件上罐发酵,发酵液中菌体生长量为13．4g/L,辅酶Q10的产量为18．2mg／L。     

黑曲霉LH2446产纤维素酶液体发酵条件的研究

采用诱变后的黑曲霉LH2446液体发酵生产纤维素酶。确立了产酶最佳条件：5％稻草粉为碳源，l％的黄豆粉为氮源，培养基起始pH值为pH6．5，250mL三角瓶中装培养基75mL，培养时间为60h，温度为30℃。在最适条件下产纤维素酶的最高产量为23600U／g。     

不同培养基原料及配方对北冬虫夏草液体菌种质量的影响

为探索出北冬虫夏草液体菌种制备的适宜碳源、氮源及配方,以葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉及硝酸钾、硝酸铵、尿素、蛋白胨、酵母膏和牛肉膏等,以及马铃薯、小麦、蚕蛹粉、蛋清、鱼粉和黄豆粉等单一或复合碳源、氮源,组合不同配方及不同碳氮比,以单因子对照方式,比较观察菌种菌丝及其栽培发菌、抗感染及出草情况.结果表明:单一碳源中,葡萄糖最优;复合碳源居中,葡萄糖+淀粉最佳;常见碳源原料中以土豆最优;常见氮源原料中以有机氮源优于无机氮源,蚕蛹粉>蛋清液>鱼粉>黄豆>小麦;最佳C/N为5:1.蚕蛹、蛋清、土豆等常见原料可作为菌种制备的优选原料及配方为马铃薯(去皮)200 g+葡萄糖10g+蚕蛹粉30g(煮汁)+硫酸镁2g+磷酸二氢钾2g+VB1 10mg+水1000mL+PH6.5,马铃薯(去皮)200g+葡萄糖10g+蛋清液30g+硫酸镁2g+磷酸二氢钾2g+VB110mg+水1000mL+pH6.5.     

产碱性蛋白酶菌株Zkud202-4发酵条件的研究

对土壤中分离的一株产耐盐碱性蛋白酶的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)Zkud202-4株的发酵条件进行了研究,通过单因素试验和正交试验,确定了最适产酶培养基组成:pH9.0、基础培养基中加入质量分数1.5%的葡萄糖为碳源、1.5%的蛋白胨为氮源、0.01%的Ca2 为金属离子.最适发酵条件:接种量V(种子培养液)∶V(培养基)=2%、发酵温度36℃、发酵时间45 h.优化后菌株Zkud202-4碱性蛋白酶的酶活力达到383 U/mL.     

松乳菇菌丝深层培养营养因子及发酵条件研究

研究了松乳菇深层培养所需的碳源、氮源、矿质元素和维生素等营养因子，以及发酵的温度和pH值。实验表明：松乳菇在以蔗糖、甘露醇、葡萄糖为碳源的培养基上启动最快，而在以蔗糖、糊精、葡萄糖为碳源的培养基上茵丝的生物量高，分别为342mg／100mL，332mg／100mL，324mg／100mL；氮源以牛肉膏最佳，茵丝生物量为332mg／100mL5矿质盐MgS04和NaCl使松乳菇菌丝启动加快，磷酸二氢钾则使菌丝产量最高；VB1、VB6对菌丝的起始生长有促进作用，烟酸对茵丝的后期生长速度加快；菌丝生长较适宜的温度范围是25-27℃，最适宜的温度是27℃；喜中性的生长环境，pH6—7．5范围内生长较好，最适pH值是7左右。