产k-卡拉胶酶菌株的筛选及其发酵条件的优化

对K-卡拉胶酶产生菌进行富集培养，以K-卡拉胶为唯一碳源的平板初筛，从多种海藻上分离纯化获得32株具有卡拉胶酶活性的菌株，经摇瓶复筛，从亮管藻上分离的HC4菌株酶活力最高，为50．75U／mL。测定了HC4菌株的16SrRNA基因序列1436bp，在核苷酸序列数据库（NCBI）中进行同源性检索，发现它与Tatrtlana agarivorans的相似性为98％。通过单因子筛选和正交试验，确定该菌株产酶的最佳培养基组成为：碳源K-卡拉胶5g/L；氮源蛋白胨3g／L和NaNO3 1g／L；元机盐NaCl20g／L、K2HPO4·3H2O1g／L、MgSO4·7H2O 0．5g／L和CaCl20．1g／L。最佳培养条件为：摇床转速150r／min，250mL三角瓶中发酵培养基的装液量50mL，接种量4％，发酵培养基起始pH7．5，温度28℃，培养时间28h。经培养基组成及培养条件优化后，HC4菌株的K-卡拉胶酶酶活力提高到602．30U／mL，是优化前的11．87倍。